用单克隆抗体来研究T细胞受体结构及激活途径(文献综述)

近一两年的研究表明T细胞可通过两种途径激活,一是抗原特异性激活,一是非特异性的激活。对这两种激活途径的阐明主要借助于单克隆抗体对克隆化T细胞有关受体结构的研究,而且T细胞抗原受体结构的阐明也受助于对比受体编码基因的观察。一、对T细胞抗原特异性受体结构的研究过去十多年在此领域研究进展甚少,有人认为T细胞抗原特异性受体是完全不同于免疫球蛋白的一种新结构,也有人认为此受体为免疫球蛋白样络构IgT。近年来由于研制出抗抗原特异性T细胞克隆型的单克隆抗体(Clonotypic McAb),这种抗体仅能与对某一抗原发生特异性反应的一个T细胞克隆结合。这种结合可阻断该T细胞克隆的     

~(60)Coγ射线全身照射对小鼠脑β肾上腺素能受体的影响

~（６０）Ｃｏγ射线全身照射对小鼠脑β肾上腺素能受体的影响强永刚，王家鑫受体是存在于生物体细胞的一种特殊蛋白质，电离辐射对细胞生物体及其亚单位结构的研究已较多，但辐射对细胞受体的影响研究甚少．受体的放射配基结合分析。利用准确的标记配基作为探针与制得的?..     

低强度激光的细胞信息生物学研究

目的 :揭示低强度激光的细胞机制。材料与方法 :在理论上 ,利用量子力学与信息生物学方法总结了低强度激光细胞效应的大量实验数据和理论模型。在实验上 ,利用鲁米诺增强的化学发光技术来表征中性粒细胞呼吸爆发强弱程度 ,研究了低强度半导体激光 (6 5 0ｎｍ)对离体牛中性粒细胞呼吸爆发的影响及其量效关系。结果 :细胞膜受体可以介导低强度激光对细胞的信息调节作用。作为蛋白质 ,细胞膜受体不能对可见光产生共振吸收。然而 ,细胞膜受体对可见光的非共振吸收 ,可以被处于相干状态的大量细胞膜受体协同放大。研究表明 ,全同独立受体体系可以…     

人胚肺成纤维细胞中M受体的生化药理学特性

本文报告了人胚肺成纤维细胞(CCL137)中M受体的生化药理学特性.用放射配基结合实验证实了细胞中含有可饱和、高亲和力以及立体结构特异性的M受体.细胞膜上的M受体与腺苷酸环化酶呈负性偶联.用药理学和生物化学方法证实细胞中的M受体为M_2亚型.亲和标记后行电泳分析证实受体的分子量为72kDa.以上工作表明GCL137细胞中存在丰富的功能均一的M_2受体,其数量明显高于其它来源的人的培养细胞系,并同时含有糖皮质激素受体,是研究M_2受体及研究不同受体系统之间相互调控作用的良好细胞模型.     

供体抗原特异性Treg细胞体外分选与鉴定

目的 构建大鼠肾移植受体源性CD4＋CD25＋Treg细胞体外分选、鉴定及供体抗原特异性诱导体系.方法 大鼠同种异体肾移植受体脾细胞同供肾组织体外混合培养以诱导供体抗原特异性表型 分选受体CD4＋CD25＋T细胞,鉴定CD4＋CD25＋ Treg细胞纯度 等量诱导后的Treg细胞加入供、受体大鼠脾细胞混合体系（测定组1）和第三系大鼠同受体大鼠脾细胞混合体系（测定组2）.以受体大鼠脾细胞悬液为阴性对照组,以供、受体大鼠脾细胞混合体系为阳性对照组,检测各组吸光度OD值,观察Treg细胞对两个测定组的抑制效率（IR）.结果 CD4＋CD25＋细胞的得率为4.13%,分离纯度为73.34%,CD4＋CD25＋ Treg细胞纯度为91.37%.测定组1、2的IR分别为85.4%及21.9% ,两者间有显著性差异（P〈0.05）.结论 体外分选获得高纯度受体源性Treg细胞,并成功诱导获得供体抗原的特异性表型,可满足细胞功能学及在体实验研究.     

1-磷酸鞘氨醇促进大鼠血管平滑肌细胞迁移的实验研究

目的探讨1-磷酸鞘氨醇（sphingosine 1-phosphate,S1P）对大鼠血管平滑肌细胞（rat vascular smooth mus-cle cells,rVSMc）迁移的作用机制,为肿瘤血管新生和心血管疾病发生机制的研究提供新的思路。方法体外分离培养、鉴定rVSMc细胞,建立低氧培养箱和氯化钴诱导的细胞低氧模型,应用RT-PCR方法对rVSMc细胞的S1P受体表达水平进行检测,运用微孔隔离室穿越方法研究S1P对rVSMc细胞迁移的作用,并用S1P受体阻断剂加以证实。结果与结论rVSMc细胞表达SPK1和S1P受体rS1P1、rS1P2和rS1P3,低氧状态下rVSMc细胞SPK1的表达和活性均高于对照,S1P主要通过与rS1P2受体结合促进rVSMc细胞的迁移。     

肺纤维化相关的细胞间通讯网络研究

目的 建立肺纤维化相关的细胞间通讯网络,并探究细胞间通讯网络在肺纤维化中的作用.方法 基于公开的肺纤维化单细胞测序数据和配体-受体相互作用数据库,并基于自助抽样的新算法建立肺纤维化相关的细胞间相互作用网络;使用Circos和Cytoscape软件对细胞间通讯网络进行可视化,并进一步分析其对细胞功能通路的影响.结果 首先,建立了肺纤维化相关的肌成纤维细胞、成纤维细胞、脂成纤维细胞、间充质祖细胞、间皮细胞、内皮细胞和高表达Pdgfrb的间充质细胞之间的通讯网络模型.然后,筛选出各种细胞类群中与肺纤维化显著相关的配体-受体关系对,并重点研究了几个与肺纤维化有关的配体或受体.最后,分析了与细胞间通讯网络相关的细胞功能通路.结论 该研究基于单细胞转录组测序数据利用自助抽样算法,建立了肺纤维化相关的细胞间通讯网络,并初步揭示了与肺纤维化相关的显著高表达的配体、受体及其影响的功能通路.     

G蛋白偶联受体与辐射关系的研究进展

G蛋白偶联受体(GPCR)是一类细胞表面受体大家族,通过G蛋白介导其细胞作用,在介导细胞间信号转导的过程中起着十分重要的作用。研究发现,G蛋白和GPCR与辐射损伤关系密切,这些研究为充分认识辐射损伤机制及提高防治水平提供了新的观点。     

rhIL-11对正常IEC-6细胞的增殖及细胞周期的影响

目的通过研究重组人白介素11(rhIL-11)对正常IEC-6细胞增殖、细胞周期及其IL-11受体表达的影响,探讨IL-11对小肠上皮细胞的调控作用以及相关机制。方法利用MTT法检测rhIL-11对正常IEC-6细胞增殖的影响,通过流式细胞仪检测细胞周期的变化,并采用Westem blot方法检测IEG-6细胞表面IL-11受体α链的表达情况。结果rhIL-11可引起正常IEC-6细胞发生增殖抑制和明显的G／G1期阻滞,并诱导细胞表面IL-11受体α链表达增加。结论rhIL-11可能通过与IEG-6细胞表面特异性受体结合,从而启动胞浆内信号转导通路,引起细胞效应。     

胍丁胺-I1咪唑啉受体对μ-阿片受体脱敏和下调的影响

目的:观察胍丁胺通过激活I1咪唑啉受体对阿片预处理引起的μ-阿片受体脱敏和下调的影响.方法:以CHO-μ和CHO-μ/IRAS (imidazoline receptor antisera-selected protein,咪唑啉受体抗血清选择性蛋白)细胞作为研究对象,用[35S]GTPγS和3H-二丙诺啡(diprenorphine)结合实验方法,确定胍丁胺-I1咪唑啉受体作用系统对μ-阿片受体脱敏和下调的影响.结果:在正常CHO-μ和CHO-μ/IRAS细胞中,μ-阿片受体的表达量和对配体的亲和力无显著差异;两细胞中μ-阿片受体对激动剂刺激的反应一致.阿片受体激动剂DAMGO[(D-Ala2,N-Me-Phe4,Gly5-ol)-脑啡肽(enkephalin),10 μmol/L]处理CHO-μ/IRAS细胞30 min μ-阿片受体出现脱敏,而胍丁胺(10 nmol/L～100 μmol/L)不影响μ-阿片受体脱敏过程.DAMGO(1 μmol/L)处理两细胞12 h后可出现μ-阿片受体的下调,胍丁胺(1～100 nmol/L)浓度依赖性地抑制CHO-μ/IRAS细胞中μ-阿片受体的下调,而相同浓度胍丁胺在CHO-μ细胞中无此作用.胍丁胺这一作用能被I1咪唑啉受体阻断剂依法克生(efaroxan,Efa)所阻断.结论:胍丁胺通过激活I1咪唑啉受体可抑制DAMGO长期处理所致的μ-阿片受体下调,此作用可能与胍丁胺抑制阿片依赖有关.     

肝硬化大鼠Kupffer细胞血小板活化因子合成水平及其受体表达

目的研究肝硬化时Kupffer细胞血小板活化因子（PAF）生成水平及其受体表达的变化及意义。方法建立CCl4诱导的肝硬化模型,分离、培养Kupffer细胞,快速^3H—PAF液闪检测Kupffer细胞及其培养上清液内PAF水平,免疫组织化学染色检测PAF在Kupffer细胞内的分布情况,受体饱和结合实验和RT-PCR分析Kupffer细胞PAF结合能力及PAF受体mRNA表达水平。结果肝硬化大鼠Kupffer细胞合成与释放PAF明显增加,分别为对照组的1．48倍（P〈0．01）和2倍（P〈0．01）。免疫组化显示Kupffer细胞胞浆内PAF呈阳性表达。肝硬化大鼠的Kupffer细胞PAF结合能力Bmax明显升高（P〈0．01）,而受体亲和力Kd与对照组比较无明显变化。RT-PCR显示PAF受体mRNA表达明显增加（P〈0．05）。结论Kupffer细胞是肝硬化时PAF生成的一个重要来源,通过增加PAF合成和释放并上调PAF受体表达,Kupffer细胞参与肝硬化门脉高压的形成。     

X射线全身照射对小鼠腹腔巨噬细胞CD14和TLR4表达的影响

CD14是LPS/LBP复合物的受体,以LPS-LBP-CD14三联体形式介导LPS诱导细胞活化.TLR4是Toll样受体中发现较早的一个受体,是LPS信号跨入细胞所必需的跨膜受体[1].CD14和TLR4作为巨噬细胞膜上的跨膜受体将细胞外信号传到细胞内,通过一系列蛋白质级联反应激活转录因子NF-κB和Jun/Fos,释放IL-1和IL-6等细胞因子而发生炎性反应.本研究探讨X射线全身照射对小鼠腹腔巨噬细胞CD14和TLR4表达的影响,为临床应用X射线进行抗炎、抗肿瘤治疗提供理论和实验依据.     

模拟失重对人自然杀伤细胞毒活性的影响

目的 研究模拟失重状态下人NK细胞的细胞毒活性并对其活性变化的机制进行初步的探讨.方法 采用高均一性的人NK细胞作为模型,以回转细胞培养模拟失重状态.人NK细胞经历48 h和72 h的模拟失重后,测定其杀伤率,并在mRNA水平检测NK细胞穿孔素基因、激活性受体基因以及抑制性受体基因的表达水平.结果 模拟失重48 h和72 h的人NK细胞,其杀伤率比对照组分别下降了16%(P＜0.05)和26%(P＜0.05).通过对模拟失重72 h NK细胞mRNA的定量分析,发现激活性受体NKG2D基因表达下调,抑制性受体NKG2A基因表达上调,而穿孔素基因表达没有显著性变化.经历72 h模拟失重的人NK细胞,回到正常条件下培养6 d后,其细胞毒活性才恢复至正常水平.结论 模拟失重可以导致人NK细胞杀伤活性的下降,其原因可能与NKG2A及NKG2D受体表达的变化有关.     

低密度脂蛋白受体相关蛋白 1:一种多重黏附调节因子调节肿瘤细胞的侵袭

低密度脂蛋白受体相关蛋白 1（low density lipoprotein receptor related protein 1,LRP 1）是一类结构、功能与低密度脂蛋白受体相似的内吞型受体,可以介导多种细胞外基质中的分子内吞及代谢的过程。由于通过LRP 1介导的内吞可以减少细胞外基质中蛋白酶的积累,因此一度被认为是抑制肿瘤细胞侵袭的一种关键受体分子。但是随着对肿瘤微环境的研究深入,研究人员发现LRP 1可以促进肿瘤细胞的黏附,从而促进肿瘤的侵袭。本文就LRP 1在肿瘤细胞的侵袭过程中的功能及相关机制作一综述。     

血啉甲醚630 nm LED光动力疗法对VEGF及其受体表达的影响

目的:探索血啉甲醚630 nm LED光动力疗法对VEGF及其受体表达的影响。方法:以人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)为研究对象,以不同浓度的血啉甲醚孵育细胞后,采用波长630 nm的LED光源进行照射,观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞增殖率,RT-PCR法检测VEGF及其受体的mRNA表达,并对各组数据进行统计学差异分析。结果:光动力疗法治疗后各实验组细胞数量减少,细胞增殖率显著低于对照组,VEGF-A及其受体mRNA的表达下调。结论:血啉甲醚630 nm光动力疗法可抑制HUVEC细胞增殖,并在转录水平抑制VEGF及其受体mRNA的表达;在一定范围内,随着光敏剂的浓度提高,抑制作用越显著。     

低密度脂蛋白受体相关蛋白-1:一种多重黏附调节因子调节肿瘤细胞的侵袭

低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(low-density lipoprotein receptor-related protein-1,LRP-1)是一类结构、功能与低密度脂蛋白受体相似的内吞型受体,可以介导多种细胞外基质中的分子内吞及代谢的过程。由于通过LRP-1介导的内吞可以减少细胞外基质中蛋白酶的积累,因此一度被认为是抑制肿瘤细胞侵袭的一种关键受体分子。但是随着对肿瘤微环境的研究深入,研究人员发现LRP-1可以促进肿瘤细胞的黏附,从而促进肿瘤的侵袭。本文就LRP-1在肿瘤细胞的侵袭过程中的功能及相关机制作一综述。     

丙型肝炎受体研究动态

CD81分子（TAPA）属于4次跨膜超家族成员,近年来发现CD81分子和HCV-E2糖蛋白的结合与丙型肝炎病毒感染宿主细胞有关,被认为是HCV的细胞膜受体,LDLr（低密度脂蛋白受体分子）是一种细胞膜表面糖蛋白,目前也发现它可结合HCV或HCV-LDL,且结合力相对较强,也被认为是HCV的细胞膜受体,人们对HCV感染靶细胞所涉及的这两个受体分子进行广泛研究。本文将就丙型肝炎受体研究作相关综述。     

丙型肝炎受体研究动态

CD81分子（TAPA）属于4次跨膜超家族成员,近年来发现CD81分子和HCV-E2糖蛋白的结合与丙型肝炎病毒感染宿主细胞有关,被认为是HCV的细胞膜受体,LDLr（低密度脂蛋白受体分子）是一种细胞膜表面糖蛋白,目前也发现它可结合HCV或HCV-LDL,且结合力相对较强,也被认为是HCV的细胞膜受体,人们对HCV感染靶细胞所涉及的这两个受体分子进行广泛研究。本文将就丙型肝炎受体研究作相关综述。     

σ受体及σ受体显像

近年研究发现 ,σ受体是一类非阿片、非多巴胺受体 ,其结构、生理与生化功能和药理学作用尚不十分清楚。许多肿瘤如恶性黑色素瘤、乳癌、前列腺癌、非小细胞肺癌、结肠癌、肾癌以及来自神经组织的肿瘤均含有高密度的 σ受体。因此 ,研制具有高亲和性、高选择性的 σ受体配体已成为分子核医学的热点之一。这不仅可以对 σ受体的生化和生理功能以及药理作用进行研究 ,也可作为 σ受体阳性肿瘤的显像剂甚至治疗剂。     

G-CSF受体和EPO受体胞内区蛋白在酵母细胞中的转录激活功能的比较研究

目的 探索应用酵母双杂交系统筛选造血因子受体胞内区结合蛋白的可行性。方法 利用RT-PCR从小鼠NFS-60和BET-2细胞中扩增G-CSF受体和EPO受体胞内区全长序列,并连接至酵母表达载体pGBKT7,转化酵母菌株AH109,提取蛋白进行Western blotting分析,进一步用β-半乳糖苷酶方法检测蛋白转录激活活性。结果 Western blotting结果显示,G-CSF受体和EPO受体在酵母细胞中均可以正常表达。β-半乳糖苷酶检测结果发现,G-CSF受体在酵母细胞中不呈现转录激活功能,然而EPO受体则出现转录激活功能。结论 应用酵母双杂交系统筛选造血因子受体胞内区结合蛋白可适用G-CSF受体研究,但不适用EPO受体,该筛选蛋白的方法并非适用于所有的造血因子受体。