维甲酸对小鼠牙胚冠部形态发生的影响

目的探讨维甲酸对早期牙胚形态发生的影响。方法利用体外鼠磨牙牙胚器官培养模型，观察不同剂量维甲酸对１４天胎龄的小鼠下颌第一磨牙牙胚形态发育的影响。结果培养６天后，在不含维甲酸的培养基中牙胚形成明显的牙乳头尖；当培养基中维甲酸的浓度为１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ时，牙胚冠部仍形成明显的牙乳头尖；当培养基中维甲酸的浓度为１×１０－６ｍｏｌ／Ｌ时，牙胚冠部无牙乳头尖形成。结论牙胚冠部形态发生与维甲酸剂量有密切关系，过量的维甲酸可抑制牙胚冠部牙乳头尖的形成。     

FGF2对体外培养牙胚冠部形态的调控作用

目的：观察FGF2对体外培养的小鼠第一磨牙牙胚冠部形态分化发育的影响。方法：取18d胎龄的鼠胎下颌第一磨牙牙胚，置于含外源性FGF2的半固态培养基表面，组织学观察FGF2对体外培养的牙胚发育的影响。结果：经10μg/ml FGF2作用的磨牙胚培养9d后形成高耸的牙乳头尖，牙胚体积增大，牙尖及邻近部位牙乳头细胞分化为柱状或高柱状的成牙本质细胞，排列整齐，并有基质开始沉积，细胞分化程度、数量均高于对照组。结论：FGF2具有诱导牙胚组织细胞分化的功能。     

维甲酸体外诱导鼠磨牙牙胚骨涎蛋白基因表达的研究

目的 :观察维甲酸 (RA)对小鼠磨牙牙胚BSPmRNA表达的影响 ,探讨RA在牙胚早期发育中的作用。方法 :将 16d胎龄的鼠胎下颌第一磨牙牙胚置于含外源性RA(5× 10 -8mol/L)的RPMI16 40半固态培养基表面 ,分别培养 4、5、6d。培养结束后提取总RNA ,经RT -PCR扩增 30循环后 ,采用Southern印迹法检测BSPmRNA在牙胚组织中的表达。结果 :体外培养 4d后 ,实验组 (含外源性RA )和对照组 (不含外源性RA)的牙胚组织中BSPmRNA的表达均为阴性。培养 5d后 ,实验组的牙胚开始表达BSPmRNA ,对照组的牙胚仍为阴性。培养 6d后 ,实验组牙胚BSPmRNA的表达明显增强 ,对照组的牙胚也开始表达BSPmRNA ,但表达强度明显低于实验组的牙胚。结论 :RA具有诱导牙胚组织细胞分化的功能     

维甲酸诱导鼠磨牙牙胚midkine基因表达的研究

探讨ＲＡ与ｍｉｄｋｉｎｅ（ＭＫ）基因表达在牙胚发育过程中的相互关系。方法：将１６ｄ胎龄的鼠胎下颌第一磨牙牙胚分别置于含不同浓度的外源性ＲＡ（分别５＊１０＾－８,５＊１０＾－７和５＊１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）的ＲＰＭＩ１６４０半固态培养基表面。培养ｄ后分别提取总ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增２５个循环,采用Ｓｏｕｔｈｅｒｍ印迹法检测ＭＫｍＲＮＡ在牙胚组织中的表达变化。结果体外培养ｄ后,对照组牙胚ＭＫｍＲＡＮ     

尼古丁对体外培养鼠磨牙牙胚发育的影响

目的:探讨尼古丁对体外鼠磨牙牙胚发育的影响.方法:采用RPMI-1640半固态培养基,在培养基中加入不同浓度的尼古丁,将15d胎龄的胎鼠的下颌第一磨牙牙胚分别置于各浓度组RPMI-1640半固态培养基表面培养4、8d,每48h更换培养基一次.结果:实验组与对照组相比较,主要表现在实验组发育中的牙胚体积缩小,成牙本质样细胞的分化程度不足、数量和速度均低于对照组,前期牙本质样基质形成减少或不能形成,并且呈时间、浓度依赖性.结论:尼古丁对体外培养胎鼠牙胚的形态、细胞的增殖和分化有抑制作用.     

牙胚发生的位置和形态调控

牙胚早期发生中,涉及上皮—间充质间复杂而有序的交互性信号调控,此间蕴含着发育位置性信息和形态性信息。牙板上皮性信号分子诱导特定分化模式的外胚间充质细胞聚集,并建立基因时空表达码,保证一定形态的牙胚严格地发生于上下颌弓的特定位置上。     

牙胚发生的位置和形态调控

牙胚早期发生中，涉及上皮一间充质间复杂而有序的交互性信号调控，此间蕴含着发育位置性信息和形态性信息。牙板上皮性信号分子诱导特定分化模式的外胚间充质细胞聚集。并建立基因时空表达码，保证一定形态的牙胚严格地发生于上下颌弓的特定位置上。     

转化生长因子β1 mRNA在鼠磨牙形态发生过程中表达的研究

目的 探讨转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）mRNA在鼠磨牙形态发生过程中的表达及其意义。方法 制备鼠磨牙各发育阶段标本,用原位杂交法分析TGF-β1mRNA在牙胚中的表达与分布。结果 TGF-β1 mRNA在鼠磨牙形态发生过程中以时间和空间上特异的模式来表达。TGF-β1 mRNA在成釉细胞层和牙乳头细胞中很丰富,TGF-β1在成牙本质细胞和成釉细胞层的表达随这些细胞的分化程度而增高。结论 TGF-β1在牙形成过程中通过旁分泌和自分泌机制发挥重要作用。     

乙酰基亚硝基脲对体外培养小鼠牙胚的作用研究

目的:观察化学致畸、致癌物乙酰基亚硝基脲(ethylnitrosourea,ENU)对体外培养牙胚发育、分化的影响.方法:通过体外牙胚器官培养模型观察培养液中不同浓度的ENU对17天胎龄的小鼠下颌第一磨牙牙胚形态发育的影响.结果:牙胚培养6天后,在含10%小牛血清的BGJb培养液中,牙胚的内釉上皮细胞分化为成釉细胞并分泌牙釉质基质,而其下方的牙乳头细胞分化为成牙本质细胞并分泌前期牙本质.当BGJb培养液中含0.025%ENU时,牙胚成釉器的星网层发生液化、囊性变.当BGJb培养液中含0.05%ENU时,牙胚发育受到抑制,其完整性被破坏,部分细胞溶解坏死.结论:一定量的ENU可使发育中的牙胚发生囊肿样变,过量的ENU对发育中的牙胚产生毒性作用.     

半固态培养基法培养鼠磨牙牙胚的实验观察

目的：观察体外培养的鼠磨牙牙胚发育过程的组织学变化。方法：用１６ｄ胎龄的昆明小鼠下颌第一磨牙牙胚置于ＲＰＭＩ－１６４０半固态培养基上培养,常规组织学观察。结果：体外培养的牙胚可由帽状期进入钟状其,出现成牙本质细胞和成釉细胞的分化及前期牙本质的形成。结论：半固态培养基法培养牙胚可保持其发育过程。     

小鼠牙胚发育无血清体外培养模型的建立

目的：建立小鼠牙胚发育无血清体外培养模型。方法：胎龄17d的Balb/c胎鼠上颌第一磨牙牙胚，BGJb无血清半固态培养基中恒温培养4、6、8－16d。终止培养后常规制备石蜡切片，HE及von Kossa染色。结果：初始培养时牙胚处于帽状晚期，成翻器分为三层，紧邻基底膜的牙乳头细胞列不规则，核多为圆形。体外培养4－6d后，牙胚在体外进一步生长。培养6d后，牙尖处成牙本质细胞分化为高柱状，并在局部分泌基质。体外培养8d，牙胚进入钟状晚期，有基质带形成。培养16d后，牙冠已基本形成，根方出现上皮隔。von Kossa染色结果显示：培养10d后，牙胚基质带出现阳性着色。结论：建立了小鼠磨牙发育无血清体外培养模型，该 模型在体外真实地再现了成牙本质细胞、成釉细胞的分化和基质分泌、矿化等生理过程，是一种良好的生物模型。     

尼古丁对牙胚、牙乳头间充质细胞BMP分泌影响的体外研究

目的 :探讨尼古丁对体外鼠磨牙牙胚及牙乳头间充质细胞BMP分泌的影响。方法 :分别采用器官和细胞培养的方法体外培养牙胚和牙乳头细胞 ,在培养基和培养液中加入不同浓度的尼古丁 ,将 15d胎龄的胎鼠的下颌第一磨牙牙胚置于对照组和实验组RPMI - 16 4 0半固态培养基表面培养 4d ,人牙乳头细胞置于各组培养液中培养 3d ,之后分别制作常规组织切片和细胞爬片 ,免疫组化染色。结果 :实验组与对照组相比较 ,对照组牙胚和牙乳头细胞BMP阳性染色强于实验组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论 :尼古丁对体外培养胎鼠牙胚和人牙乳头细胞BMP的分泌存在抑制作用。     

Effects of actinomycin D on developing hamster molar tooth germs in vitro

The aim of this study was to evaluate the toxic effects of actinomycin D on the developing hamster tooth germ in organ culture. Hamster tooth germs during early secretory amelogenesis were exposed in vitro for 24 h to 10⁻⁹ M-5 × 10⁻⁵ M actinomycin D. Actinomycin D dose-dependently ( 10⁻⁷ M) decreased the tooth germ dry weight but mineralization was affected only by doses 10⁻⁵ M. However, the uptakes of TCA-insoluble 32P and [3H]thymidine were significantly reduced dose-dependently from 10⁻⁸ M actinomycin D, indicating that the drug inhibits the synthesis of phosphate-containing macfomolecules as well as DNA synthesis. Histologically, 10⁻⁸ M actinomycin D was the lowest dose which was not toxic to any cell type in the developing tooth germ. At 10⁻⁷ M actinomycin D, the most sensitive cells were the proliferating preodontoblasts followed by pre-ameloblasts; the mature secretory ameloblasts and odontoblasts appeared unaffected. Higher doses resulted in increased cytotoxicity to the secretory cells and, eventually, total degeneration of most cells. The data suggest that children treated for cancer during tooth development using anti-chemotherapy cocktails containing actinomycin D (serum levels >10⁻⁷ M) may develop defects later on in the mature dentition as a direct consequence of the toxicity of the drug to the tooth organ.     

骨形态发生蛋白受体2在维甲酸诱导腭裂小鼠胚胎腭突中的表达

目的 探讨全反式维甲酸（atRA）对小鼠胚胎腭突中骨形态发生蛋白受体 2（BMPR2）表达的影响。方法 通过 atRA灌胃的方法建立 atRA诱导的小鼠腭裂模型,取妊娠 15 d（GD15）和 17 d的（ GD17）的胚胎腭部进行苏木精-伊红染色,并用免疫组织化学及逆转录聚合酶链式反应技术检测 BMPR2在胚胎腭部的表达。结果 atRA诱导小鼠形成体积较小的畸形腭突和明显的中缝腭裂畸形。 BMPR2在GD15和GD17正常胚胎腭部有高水平的阳性表达,但在腭裂胚胎腭部的表达水平明显减弱。正常胚胎腭部 Bmpr2 mRNA在GD15和GD17的表达水平均明显高于腭裂胚胎（ P<0.05）。结论 atRA可导致小鼠胚胎腭突发育不良形成腭裂,并显著下调 BMPR2表达水平,从而影响腭部发育的正常分子调控过程。     

Effects of essential fatty acid deficiency on rat molar pulp cells

In rats fed an essential fatty acid deficient (EFAD) diet, either during pregnancy (DN) or for 4 wk postnatally (ND), the cell density in the central part of the pulp increased about two- and threefold, respectively, of that in rats who had received a conventional diet containing sunflower oil. Cells were especially numerous around capillaries. The cell density was also increased twofold in the subodontoblastic layer in the outer part of the pulp, cells being smaller in ND compared with DN. In contrast, the- odonloblasts were reduced in height, and the Hohl cells formed a thin layer in EFAD rats. This emphasizes some aspects of pulp specificity which reacted differently from odontoblasts. We suggest that the function of killer cells which normally destroy cells at the periphery of the pulp may be impaired by the diet, leading to cell accumulation.