植物生长调节剂对多花黄精芽体外发生过程中性状的影响

目的 研究不同植物生长调节剂组合对多花黄精芽体外发生过程中每块外植体上的平均芽数、叶片发生频率、根的自然发生率及生根外植体上的平均根数、根茎发生率等性状的影响；探索通过组织培养快速繁殖该植物的最佳途径。方法 多花黄精的不定芽切块在MS BA1．0mg／L 2，4-D0．5mg／L的培养基上可被诱导产生颗粒状愈伤组织，将该愈伤组织继代于不同植物生长调节剂组合的MS培养基上，2个月后观察并统计不同植物生长调节剂组合对各性状的影响。结果 TDZ1．5mg／L 2，4-D1．0mg／L对芽增值最有利，平均每块外植体上可长出8．6个芽；BAl．0～2．0mg／L NAA1．0～2．0mg／L促进叶片形成，95％以上的外植体长出形态正常的叶片；在BA2．0mg／L NAA1．0mg／L，的培养基上，根的自然发生率最高，达到51．9％，但不及单独生长素如NAA、IAA、TBA或2，4-D等以0．5～1．0mg／L，对根的诱导作用，后者可使90％以上的再生芽生根，且根生长繁茂；BA2．0mg／L 2，4-D1．0～2．0mg/L组合最适合根茎生长，直径大于0．5cm的根状茎超过100％。结论 多花黄精的体外快速繁殖可通过如下途径实现：TDZ1．5mg/L 2，4-D1．0mg/L诱导不定芽扩增，BA1．0～2．0mg／L NAA1．0～2．0mg/L诱导健康叶片的发育，1／2MS NAA，IAA，TBA或2，4-D0．5～1．0mg/L诱导再生芽生根；BA2．0mg/L 2，4-D1．0～2．0mg/L用于以繁殖药用器官为目的的根茎的生长。     

乌头离体培养和快速繁殖

目的建立乌头的快繁体系。方法利用组织培养的方法,设置18种、9种和12种不同激素处理组合的培养基分别诱导乌头不同外植体愈伤组织、诱导愈伤组织丛生芽的分化、诱导再生苗的生根。结果适合乌头茎尖和茎段愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA4.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合愈伤组织增殖与丛生芽诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.5mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L和MS NAA0.1mg/L 6-BA2.0mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L。适合诱导生根的培养基为:MS IBA1mg/L AC3.0g/L。结论以乌头茎尖、叶片、茎段及带或不带腋芽的茎段作为外植体进行离体培养,可以实现乌头种苗的工厂化快速繁殖。     

丽江山慈姑的组织培养及育种技术研究

目的 建立药用植物丽江山慈姑的组织培养和快速繁殖体系。方法 对丽江山慈姑的球茎、地上茎、叶片及根尖等不同部位进行丛生芽及原球茎的诱导，筛选适合生根的培养基配方。结果 通过研究，筛选出了丽江山慈姑原球茎的诱导、增殖及生根培养基配方，建立了丽江山慈姑的快速繁殖体系，实现了大规模的组培生产。结论 在MS培养基上，丽江山慈姑球茎和地上茎诱导丛生芽效果较好，MSF 6—BA 2mg/L NAA0．5mg/L的激素配比既能使丽江山慈姑快速增殖，又能诱导出原球茎，适合大规模生产，在1／2MS IBA0．5mg/L NAA0．2mg/L的培养基上，丽江山慈姑原球茎生根效果较好。     

铁棒锤快速繁殖体系的建立

目的 建立铁棒锤高效快速繁殖体系。方法 以铁棒锤越冬芽为外植体,用不同的培养基、激素和附加物组合培养。结果 培养基MS＋2, 4-D 2.0 mg/L＋NAA 0.4 mg/L＋活性炭（AC）1.5 g/L＋聚乙烯吡咯烷酮（PVP）1 g/L有利愈伤组织的形成;培养基MS＋6-BA 2.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋AC 1.5 g/L＋PVP 1 g/L有利于成芽;培养基MS＋6-BA 3.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋2, 4-D 0.1 mg/L＋AC 1.5 g/L＋PVP 1 g/L有利芽增殖;培养基1/2 MS＋NAA 0.2 mg/L＋AC 1.5 g/L＋PVP 1.0 g/L有利于根的生成。结论 以种子发芽苗为外植体进行离体培养,可以实现铁棒锤种苗的工业化快速繁殖。     

裕丹参愈伤组织诱导、继代及植株再生的研究

目的 建立裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生体系.方法 比较不同的外植体基本培养基及植物生长调节剂对裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生的影响.结果 MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.2～2 mg/L有利于叶柄和叶片愈伤组织的诱导,其出愈率均为100%,但叶柄出愈量更大;MS 6-BA 2 mg/L有利于叶片芽的分化,其分化率达55.6%,并有直接成芽现象;B5 6-BA 1 mg/L 2,4-D 1 mg/L是愈伤组织继代培养的最佳培养基.结论 愈伤组织诱导的最佳外植体为叶柄,最佳培养基为MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.2～2 mg/L;诱导芽分化的最佳外植体为叶片,最佳培养基为MS 6-BA 2 mg/L;愈伤组织继代培养的最佳培养基为B5 6-BA 1 mg/L 2,4-D 1 mg/L.     

栝楼组织培养中植株再生的研究

栝楼的叶柄切段、子叶和叶片小切块在不同培养基上培养，诱导愈伤组织和不定根均较易，却不易分化不定芽。而栝楼的完整小叶和大的叶片切段及不定根尖在MS＋e－BA5mg／L培养基上均可诱导产生不定芽，不定芽经继代培养可大量繁殖。不定根尖芽在MS＋NAA0．5mg／L＋6－BA0．5mg／L培养基上壮苗培养可产生小苗，在MS＋NAA0～1mg／L培养基上可再生出完整植株，经移栽培养植株易萎蔫，成活率不高。本文还讨论了叶片的取材大小和切割方式与不定芽分化的关系。     

一点红组织培养获得再生植株的研究

目的 对一点红进行组织培养研究,探讨在短时间内快速繁殖一点红种苗的方法。方法 以一点红带有腋芽的茎段为外植体,用MS＋BA1．5mg／L＋NAA0．1mg／L培养基。结果 经30d诱导培养,可得丛生芽4～5个;小芽苗转入1／2MS＋NAA1mg/L培养基上诱导生根,20d后可长成具有3～4条根系的再生植株。结论 此途径为人工栽培一点红提供优质种苗。     

苦皮藤组织培养与植株再生

目的 研究药用植物苦皮藤组织培养技术，为工厂化育苗及工业化获取苦皮藤次生代谢产物提供行之有效的途径。方法以苦皮藤子叶和胚轴为外植体，采用MS培养基，附加不同的植物激素进行实验。结果MS 2，4-D2mg／L培养基适合愈伤组织诱导；MS 6-BA2mg／L NAA0．2mg／L培养基适合芽的分化,MS 6-BA1mg／L NAA0．2mg／L培养基适合芽的增殖；将芽转至MS MET0．7mg／L IBA0．5mg／L培养基暗培养10d后，转入1／2MS培养基光下培养形成根;试管苗移栽成活率为85％。结论通过诱导愈伤组织途径可以达到快速繁殖的目的;较高浓度的2，4-D对苦皮藤愈伤组织的诱导有利；6-BA对愈伤组织的生长有明显促进作用;多效唑、暗培养对根的分化是必需的。     

芫荽腋芽再生植株和快速繁殖的研究

研究了影响腋芽再生植株与快速繁殖的不同激素组合。结果表明合适配比的激数组合对愈伤组织诱导、芽的分化和快繁均有增效作用，有效诱导其愈伤组织、芽分化、生根和快繁的培养基依次为：0．7mg／L（下略）6－BA＋0．1KT＋1．5NAA＋MS；0．15NAA＋6－BA、KT与ZT各0．5＋MSB（由MS的无机成分与B5的有机成分组成）；0．2NAA＋1／2MS和0．66－BA＋0．2NAA＋MS。建立了芫荽无性系快繁系统。     

黄芩茎段直接诱导丛生芽

黄芩带节茎段培养在MS＋6－BA1mg／L＋NAA0．2mg／L的培养基上，先诱导形成愈伤组织，然后出现许多绿色小芽。进一步移至MS培养基上产生大量的丛生芽。丛生芽培养干1／2MS＋IBA0．5mg／L培养基上可诱导生根，形成完整植株。     

姜茎尖的离体培养与试管苗快繁

目的 探索姜茎尖组织培养及其试管苗快速繁殖的适宜条件。方法 剥取不大于1mm的姜茎尖生长点为外植体，以MS为基本培养基，附加不同种类和浓度的植物生长物质进行培养。结果 小于0．3mm的姜茎尖可进行良好的分化与生长；在各类激素中，以BA对姜芽分化最为有效，培养基MS BA 1．0mg／L NAA 0．2～0．4mg／L最有利于芽的分化和生长；在生根培养基中添加适量的BA不仅不影响不定根的形成，且能增加成苗数，对不定根的分化和成苗最适的培养基为1／2 MS NAA 0．1mg／L BA 0．15mg／L。结论 试验为姜的茎尖离体培养提供了有效途径。     

药用植物粉花绣线菊的组织培养的建立与快速繁殖研究

目的 建立了粉花绣线菊Spiraea japonicaL.f.愈伤培养系统和快速繁殖方法。方法 通过用SM、6,7-V、B5等3种不同的培养基对粉花绣线菊植株的茎尖、嫩叶、叶柄等不同部位进行愈伤组织诱导和成苗诱导。结果 通过本研究,建立了愈伤培养系统,实现了快速繁殖,结论 MS培养基诱导愈伤效果最好。在MS 2,4-D2.0mg/L KT0.3mg/L培养基中,幼叶、茎尖、叶柄等外植体均能诱导出愈伤组织,其中以茎尖外植体诱导的效果最好;茎尖外植体在MS 2mg/LBA 0.1mg/LNAA能长出丛生苗,将丛生苗转入培养基1/2MS 0.25mg/LBA 0.5mg/LNAA可生根成小苗。     

珍稀濒危药材铁皮石斛组培快繁关键技术研究

目的研究珍稀濒危药材铁皮石斛组织培养快速繁殖技术。方法以铁皮石斛茎段为试材,比较植物激素浓度配比、人工光源、炼苗驯化方法等对铁皮石斛组培快繁的影响,摸索出一套可进行组培快繁工厂化生产的技术体系,优选出铁皮石斛组培快繁的最适条件。结果 (1)组培各阶段最佳培养基:原球茎诱导:MS+BA 2.5 mg/L+IBA0.2 mg/L;原球茎分化:MS+BA1.5 mg/L+NAA1.2 mg/L+5%香蕉汁;壮苗生根:MS+NAA 0.15 mg/L+5%香蕉汁、MS+NAA 0.20 mg/L+7.5%香蕉汁、MS+NAA 0.25 mg/L+10%香蕉汁(分阶段补加);(2)人工光源:组培特定光谱节能灯;(3)炼苗方法:水培驯化炼苗。结论通过上述技术的应用,缩短了种苗组培育苗周期,解决了从组培苗到大量栽培的技术,该方法简便易用,且降低了生产成本。     

药用植物青叶胆的组织培养

目的针对青叶胆野生资源受到严重破坏的情况,系统地探讨了通过组织培养为手段进行人工繁殖的方法。方法以幼茎和老叶为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比,改变培养方式。结果在所有实验方案中,对叶片来说,较适宜诱导愈伤组织的激素组合是Zt0.5mg/L NAA0.1mg/L IBA0.1mg/L或BA0.5mg/L 2,4-D0.1mg/L IBA0.1mg/L,对幼茎来说,较适宜的诱导愈伤组织的激素组合则是BA0.02mg/L Kt0.04mg/L IBA0.05mg/L;对于芽的增殖,较适宜的激素组合是BA2.0mg/L NAA0.5mg/L或BA2.0mg/L IBA0.1mg/L;而根的诱导则在MS Kt0.01mg/L IBA0.5mg/L NAA1.0mg/L培养基上进行。结论采用组织培养方式可进行青叶胆的快速繁殖,为确保这一珍稀药用植物资源的保护和可持续利用提供有效途径。     

獐牙菜的组织培养

目的 针对獐牙菜野生资源受到严重破坏的情况,系统地探讨了通过组织培养为手段进行人工繁殖的方法。方法 将种子接种于诱导培养基上,待其长成小苗后分别取其不带芽茎段、叶和带芽茎段作为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比,改变培养方式。结果 在所有的实验方案中,不带芽茎段是理想的外植体材料。较适宜的初代培养基为MS+BA 0.5 mg/L+蔗糖3.0%,增殖培养基为MS+BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖3.0%,而根的诱导则是在1/2MS+NAA 0.5 mg/L+1.5%蔗糖的培养基上进行。结论 采用组织培养方式可进行獐牙菜的快速繁殖,为确保这一珍稀药用植物资源的保护和可持续利用提供有效途径。     

波棱瓜愈伤组织诱导及植株再生研究

目的 研究波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的条件,探讨波棱瓜快速繁殖新途径,为波棱瓜组织培养与离体植株再生奠定基础。方法 以波棱瓜幼嫩茎段和叶片为材料,比较不同外植体、基本培养基及植物生长调节剂对波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果 幼嫩茎段作为外植体时,其出愈率较叶片高,愈伤量大;MS基本培养基能够产生明显的愈伤组织,出愈率较高;幼嫩茎段愈伤组织诱导适宜的培养基为MS＋6-BA 2 mg/L＋NAA 0.5 mg/L,出愈率达93.3%。愈伤组织的最佳分化培养基为MS＋6-BA 2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋KT 3.0 mg/L,分化率达87.2%。生根培养的适宜培养基为1/2 MS＋NAA 1.0 mg/L,生根率达95%。结论 波棱瓜幼嫩茎段在适宜的培养基中可通过愈伤组织途径分化不定芽,且极易生根,能够得到正常生长发育的再生植株。     

铁皮石斛组培快繁技术研究

目的 通过研究铁皮石斛种子萌发、小苗增殖和生根的适宜培养基,建立一套铁皮石斛组织培养的快速繁殖体系.方法 以铁皮石斛种子为外植体,研究激素（6-benzylaminopurine和1-naphthleetic acid）不同质量浓度配比、天然添加物（马铃薯汁和香蕉汁）对铁皮石斛种子萌发、小苗增殖和壮苗生根的影响.结果 铁皮石斛种子萌发最适培养基为1/2MS ＋0.2 mg/L NAA＋ 100 g/L马铃薯汁＋25 g/L蔗糖汁,小苗增殖最适培养基为1/2MS ＋0.2 mg/L NAA＋ 100 g/L马铃薯汁（或香蕉汁）＋25g/L蔗糖汁＋0.5g/L活性炭,壮苗与生根最适培养基为1/2MS＋ 0.2 mg/L NAA＋ 100 g/L香蕉汁＋25 g/L蔗糖汁＋0.5g/L活性炭.结论 建立了一套铁皮石斛组培快繁体系,可用于大规模生产铁皮石斛组培苗.     

北柴胡愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖条件研究

目的研究北柴胡叶片、茎段和花芽愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖的条件,探讨快速繁殖的新途径。方法选择优良的北柴胡类型,在附加不同种类、不同质量浓度和不同配比外源植物激素的MS培养基中,进行不同外植体愈伤组织的诱导和分化培养以及愈伤组织再生植株的繁殖和生根培养。结果附加2,4-D 1.0 mg/L、KT0.5 mg/L和6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合于叶片、茎和花芽愈伤组织的诱导,其中以花芽愈伤组织的诱导效果最好;在附加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.03 mg/L和CM 15%、CH500 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高;附加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.05 mg/L和CH 250 mg/L的MS培养基为芽苗增殖的适宜培养基;附加NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基是生根的适宜培养基。结论北柴胡的茎段和花芽外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

In vitro callus induction and plantlet regeneration of Achyranthes aspera L., a high value medicinal plant

Objective

To study callus induction from different explants (internode, leaf, root) and in vitro plantlets propagation from medicinally important plant Achyranthes aspera L.

Methods

Sterilized explants were prepared by using 0.1% HgCl₂ and 0.5% Bavistin and callus was obtained when cultured onto Murashige Skoog''s (MS) medium by using different concentrations and combination of 2,4-D, NAA, BAP, IAA, IBA with 3% sucrose and 0.8% agar. Induced callus was immediately transferred to MS medium containing at different concentrations of phytohormones for shootlets and rootlets induction respectively.

Results

Sterilization treatment of 0.1% HgCl₂ for 2-3 min and Bavistin 0.5% for 10-12 min showed the highest percentage of asepsis and survival rate. Maximum induction of callus was obtained from a combination of 2.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L NAA from leaf. Highest shootlets number (4.83±0.17) and length (3.8±0.16) cm were observed on full strength MS medium when fortified with BAP 4.0 mg/L and KIN 0.5 mg/L. Concerted efforts of BAP 2.0 mg/L and NAA 0.5 mg/L on full strength MS medium showed highest leaf number (6.77±0.94). In vitro raised shoots were allowed to root on different strengths of MS medium fortified with IAA and IBA at different concentrations. Experimentally, 3.0 mg/L IBA was enabled to induce maximum rootlets number (10.0±9.82) on full strength MS medium. Afterwards, regenerated shoots with well developed roots were successfully subjected to hardening process and were acclimatized. The survived plantlets showed 66.67% survival frequency without any morphological abnormality.

Conclusions

The results demonstrated that different explants were good source of callus induction, morphology analysis as well as indirect plantlets regeneration.