糖基化修饰促进内含肽剪接的凝血因子Ⅷ的分泌和活性

目的 观察糖基化修饰对内含肽剪接的B区缺失型凝血因子Ⅷ(BDD-FⅧ)分泌的影响.方法 将含有6个潜在的天冬酰胺糖基化位点(N6)的FⅧ的B区226个氨基酸引入BDD-FⅧ重链,用双载体转融合内含肽的此重链和轻链基因(N6HCIntN和IntCLC)至培养的293细胞,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Coatest发色法分别检测基因共转染细胞分泌至培养上清的剪接BDD-FⅧ蛋白量和凝血生物活性.结果 共转染N6HCIntN和IntCLC基因细胞上清中BDD-FⅧ蛋白浓度为(123±18)ng/ml,凝血活性为(0.94±0.11)U/ml,明显高于共转染内含肽融合的无糖基化修饰重链(HCIntN)和IntCLC基因细胞上清的BDD-FⅧ蛋白浓度[(86±12)ng/ml]和凝血活性[(0.65±0.07)U/ml,均P＜0.05].分别转染N6HCIntN和IntCLC基因细胞混合培养后的上清中亦检测到剪接的BDD-FⅧ蛋白和凝血活性[(18±6)ng/ml,(0.15±0.05)U/ml].结论 糖基化修饰可促进内含肽剪接的BDD-FⅧ的分泌并表现出不依赖细胞机制的蛋白质剪接功能.     

慢病毒介导APP695基因RNAi对体外培养的APP695转基因小鼠皮质神经元β淀粉样蛋白分泌的影响

目的 探讨慢病毒介导RNA干扰(RNAi)抑制APP695基因表达对体外培养的APP695转基因小鼠皮质神经元细胞分泌β淀粉样蛋白(Aβ)的影响.方法 构建靶向APP695基因的短发夹状RNA(shRNA)慢病毒表达质粒(pFU-GW-iRNA),进行酶切和测序鉴定.慢病毒表达质粒与包装质粒(pHelper 1.0和Helper 2.0)共转染293T细胞,获得病毒浓缩液并测定滴度.使用APP695-shRNA慢病毒载体感染体外培养的APP695转基因小鼠皮质神经元,设定为慢病毒介导阳性干扰(APP695-RNAi)组,另设阴性对照病毒感染(NC)组、未经病毒感染(CON)组.采用实时荧光定量PCR检测APP695基因mRNA的表达,Western印迹检测APP695蛋白的表达,采用Elisa检测Aβ40和Aβ42的生成.结果 PCR扩增和测序结果证实,APP695 shRNA核苷酸链序列插入正确,包装慢病毒产生病毒悬液的滴度为5×108 TU/ml.使用慢病毒载体感染体外培养的APP695转基因小鼠皮质神经元,实时荧光定量PCR检测APP695-RNAi组APP695基因mRNA的抑制率为76.70%,与NC组和CON组相比差异有统计学意义(P＜0.001).Western印迹结果显示蛋白水平表达下降与定量PCR一致.Elisa检测干扰72 h后APP695-RNAi组、NC组、CON组Aβ40的分泌分别为(184±15)ng/L、(647±30)ng/L、(656±40)ng/L.APP695-RNAi组与NC组和CON比较差异均有统计学意义(均为P＜0.001);APP695-RNAi组、NC组、CON组Aβ42的分泌分别为(19.2±1.9)ng/L、(67.6±6.0)ng/L、(68.6±7.0)ng/L.APP695-RNAi组与NC组和CON比较差异均有统计学意义(均为P＜0.001).结论 慢病毒载体介导的APP695基因RNA干扰可以有效抑制痴呆小鼠皮质神经元细胞Aβ40和Aβ42的分泌.     

胎儿肝、脾、肾中凝血因子Ⅷ:C与vWF的研究

凝血因子Ⅷ(FⅧ)由vWF和FⅧ:C组成。FⅧ:C的合成部位至今尚未确认。本文检测了16～22周胎龄胎儿肝、脾、肾及肾小球组织中Ⅷ:C活性及vWF:Ag含量后,发现肾中Ⅷ:C活性较高(1.679±1.588 U/ml),尤其是肾小球中高达46.313±40.651U/ml,脾中次之(0.372±0.462 U/ml),肝中最低(0.021±0.029U/ml)。将3种组织细胞培养后,发现仍以肾中Ⅷ:C活性最高。由此提示,肾可能是Ⅷ:C的合成部位。同时检测三器官中vWF:Ag,发现含量极微。这些组织中Ⅷ:C与vWF的关系有待研究。     

IL-1β对人分泌中期子宫内膜细胞分泌MMP-9及TIMP-3蛋白的影响

目的初步研究白介素-1β(IL-1β)对离体培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其特异性组织抑制物-3(TIMP-3)的影响。方法原代培养人分泌中期子宫内膜细胞,利用粘附式细胞仪570型,采用间接免疫荧光法检测IL-1β对内膜细胞分泌MMP-9和TIMP-3的影响。结果(1)MMP-9:空白对照组为1491.38±68.95,50U/ml组为1592.40±47.57,100U/ml组为1702.63±75.31,500U/ml组为1994.49±52.98,1000U/ml组为2347.58±45.87。随着IL-1β的浓度增加,原代培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌MMP-9表达量呈浓度依赖性显著升高(P<0.05);(2)TIMP-3:空白对照组为1643.31±61.29,50U/ml组为1597.27±49.07,100U/ml组为1443.93±81.23,500U/ml组为1343.28±54.80,1000U/ml组为1157.85±47.95。随着IL-1β的浓度增加,原代培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌TIMP-3表达量呈浓度依赖性显著下降(P<0.05)。结论IL-1β通过促进MMP-9分泌,抑制TIMP-3分泌,使细胞外基质降解,有利于绒毛滋养层细胞侵入。     

马兜铃酸作用下大鼠肾小管上皮细胞尾加压素Ⅱ含量的变化

目的研究马兜铃酸(AA)作用下大鼠肾小管上皮细胞尾加压素Ⅱ(UⅡ)含量的变化。方法采用机械分离和酶消化法获取大鼠肾小管上皮细胞并进行培养、鉴定;用RT-PCR和Western blot法分别测定不同浓度(0ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml)AA作用下大鼠肾小管上皮细胞中Ⅶ基因和蛋白表达情况。结果培养的细胞经Cytokeratin-18免疫细胞化学染色确定为肾小管上皮细胞。AA以剂量依赖的方式促进肾小管上皮细胞UIImRNA和蛋白表达,5ng/ml AA作用下肾小管上皮细胞UⅡ mRNA表达即显著增强(P<0.01),其蛋白表达在10ng/ml AA作用下明显增强(P<0.05)。结论AA作用下大鼠肾小管上皮细胞UⅡ含量明显增加,推测UⅡ在AA所致大鼠肾小管上皮细胞损伤中可能有一定作用。     

突触融合蛋白1A和突触小体相关蛋白-25在逆转α细胞高糖毒性中的作用

目的 探讨逆转高糖毒性对α细胞胰高糖素分泌和合成的影响以及可能的机制.方法 在小鼠转基因胰高糖素瘤细胞株(TCl-6)细胞(α细胞株)分别给予5.5 mmol/L(低糖组)和25 mmol/L(高糖组)葡萄糖的培养基培养10 d,25 mmol/L葡萄糖培养5 d/5.5mmol/L葡萄糖培养5d(高糖/低糖组)以及5.5 mmol/L葡萄糖培养5 d/25 mmol/L葡萄糖培养5 d(低糖/高糖组),检测各组细胞胰高糖素分泌及其mRNA的表达别;Western印迹检测持续高糖以及恢复血糖正常后TCl-6细胞突触融合蛋白1A蛋白和突触小体相关蛋白-25(SNAP-25)的表达水平.结果 (1)高糖/低糖组TCl-6细胞胰高糖素比高糖组分泌下降29%[(2.68 ±0.21)ng/mg比(3.74.2.99)ng/mg,P相似文献   

应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建登革病毒特异性全长人源抗体库

目的应用哺乳动物细胞表面抗体展示技术构建登革病毒特异性全长人源抗体库。方法采集登革确诊患者恢复期外周血,分离外周血淋巴细胞并提取其总RNA,用RT-PCR扩增全长Kappa轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因,构建抗体轻链基因库和抗体重链基因库;将抗体基因库转染CHO细胞、用流式细胞仪分析抗体在CHO细胞表面的表达。结果以1.2μg总RNA为模板,用6套引物扩增全长Kappa轻链和重链可变区基因,插入表达载体,轻链基因库容量为1.45×104,重链基因库容量为1.8×105;随机挑选的10个轻链克隆和10个重链克隆,经过测序鉴定,轻链有8个含有正确的阅读框架,编码8个不同的氨基酸序列,重链有7个含有正确的阅读框架,编码7个不同的氨基酸序列。流式细胞仪分析含有正确阅读框架的单克隆和抗体基因库,均检测到全长抗体在CHO细胞表面的表达,抗体库中可表达的抗体多样性达到109。结论以1.2μg总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,成功构建可表达库容量达到109的登革病毒特异性全长人抗体基因库。     

测试包涵素的蛋白分泌和细胞生长动能

包涵素~1包裹的细胞膜与真核细胞~2的蛋白运输各种过程密切相关,然而一直还不能直接测试包涵素的功能.文中提出的资料~3证明酿酒酵母在细胞生长和蛋白分泌方面都不需要包涵素.抗酵母包涵素重链的抗血清已被用来从λgt11~4中一群~5酵母DNA中分离出一种分子的重链基因(CHCl)纯系。通过用一种破裂形式的培养生长的纯系DNA以替代单个染色体CHCl的基因而得到缺少包涵素的突变酵母.含有一种无功能CHCl等位基因的细胞不产生免疫反应性多肽重链.,而从变异细胞制成的泡囊缺少包涵素的重链和轻链。虽然缺少色涵素的细胞比正常细胞生长慢2至3倍,但几乎以正常速度分泌转化酶.所以通过分泌途径运偷蛋白不必须配合有包涵素外衣的泡囊的形成.     

肝硬化患者血浆胰岛素样生长因子结合蛋白1、3的变化及其意义

目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)1、3在肝硬化患者中的变化及其意义。方法收集33例肝硬化患者和6名健康人的外周静脉血,采用双抗体夹心ELISA法检测血浆中IGFBP1、3和TGF-β1的水平;同时采用鲎试验三肽基质显色法测定血浆内毒素的水平;采用全自动生化分析仪常规方法测定肝脏生化指标。结果肝硬化患者血浆IGF-BP1、TGF-β1和内毒素水平与健康人相比明显增高[肝硬化患者与健康人分别为(10985.37±8374.01)ng/mlvs(3360.63±829.13)ng/ml,P<0.05;(11.87±9.90)ng/mlvs(3.30±1.08)ng/ml,P<0.05;(0.69±0.35)Eu/mlvs(0.06±0.01)Eu/ml,P<0.05];而血浆IGFBP3的水平则明显降低[(440.20±421.19)ng/mlvs(3287.97±1158.02)ng/ml,P<0.001]。血浆IGFBP3与TGF-β1呈负相关(r=-0.468,P<0.01);血浆IGFBP3与内毒素的水平也呈负相关(r=-0.355,P<0.05)。肝硬化患者血清ALT的水平明显增高[(39.30±20.46)U/Lvs(18.25±6.39)U/L,P<0.05],而血清AST、GLDH的水平与健康人比较差异无统计学意义[(47.14±30.22)U/Lvs(19.33±8.50)U/L,P>0.05;(8.62±9.29)U/Lvs(5.30±1.00)U/L,P>0.05]。结论IGFBP1、3在肝硬化的发生发展中可能起重要作用。肝硬化患者血浆IGFBP3水平的降低可能与TGF-β1、内毒素水平增高有关。     

白介素-1β对原代培养海马神经元毒性的研究

目的 探讨IL-β对体外培养的海马神经元活性及合成和分泌脑源性神经营养因子(BDNF)的影响.方法 采用SD新生鼠进行海马神经元原代培养.培养7d的细胞以细胞免疫化学法枪测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,计算阳性细胞率.实验分IL-β为0ng/ml的正常组和IL-β为5 ng/ml、10ng/ml、20ng/ml 3个实验组,进行海马神经元无血清培养48 h.采用甲基噻唑基四唑(MTT)试验检测细胞活性,ELISA法检测培养上清BDNF的含量.结果 NSE细胞免疫化学鉴定显示阳性细胞达到90%以上;IL-1β降低体外培养的海马神经元活性,各剂量组按浓度在590nm波长处检测OD值为(0.5585±0.2407; 0.4295±0.1401; 0.4191±0.1050),与正常组(0.9462±0.2972)比较,差异具有显著性(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.01 ANOVA);IL-1β降低体外培养的海马神经元合成和分泌BDNF水平,各剂量组显著BDNF含量分别是[(8.65±0.71)pg/ml,(8.90±0.35)pg/ml,(7.90±0.35)pg/ml],与正常组(12.40±1.77)pg/ml比较差异具有显著性(均P<0.05 ANOVA).结论 IL-1β可导致体外培养海马原代神经元的损伤,其机制可能与海马神经元合成和分泌BDNF的减少有关.     

钙拮抗剂对体外培养中大鼠胰岛细胞胰岛素分泌的影响

维拉帕米、硝苯啶及硫氮(艹卓)酮人体治疗血浓度(25～100ng/ml)与培养7.5天新生大鼠胰岛细胞单层培养物保温3小时,各药浓度25ng/ml 不抑制胰岛素分泌,50及100ng/ml 明显抑制胰岛素分泌。3药(100ng/ml)抑制胰岛素分泌程度及可逆程度差别无统计学意义。     

内脏脂肪素促进内皮细胞合成单核细胞趋化蛋白1和白介素6的实验研究

目的 探讨内脏脂肪素是否能调节内皮细胞单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和白介素6(IL-6)生成以及胰岛素受体(IR)的介导作用.方法 不同剂量和不同干预时间的内脏脂肪素刺激3～5代脐静脉内皮细胞(HUVEC);然后在内脏脂肪素(100 ng/m1)刺激基础上加入IR酪氨酸激酶抑制剂预处理HUVEC,24 h后测定MCP-1和IL-6蛋白和基因表达.酶联免疫吸附法和实时定量聚合酶链反应检测MCP-1和IL-6蛋白和mRNA表达.结果 内脏脂肪素剂量和时间依赖性促进HUVEC合成MCP-1[剂量效应:对照组:(62±10) pg/ml、100 ng/ml:(273±65) pg/ml、500 ng/ml:(1630±103) pg/ml;时间效应:对照组:(37±27) pg/ml、12 h:(184±56) pg/ml、48 h:(328±80) pg/ml]和IL-6[剂量效应:对照组:(31.8±1.7) pg/ml、100 ng/ml:(42.5±5.7) Pg/ml、500 ng/ml:(154.7±10.2) pg/ml;时间效应:对照组:(15.7±3.4) pg/ml、12 h:(35.4±4.7) pg/ml、48 h:(77.6±11.8) pg/ml].IR酩氨酸激酶抑制剂抑制内脏脂肪素诱导的MCP和IL-6蛋白和基因表达.结论 内脏脂肪索能诱导HUVEC合成和分泌MCP-1、IL-6,其作用通过IR信号通路介导.     

CEA微型抗体载体的构建及在大肠杆菌中的高效表达

目的"制备适合放免显像的抗癌胚抗原微型抗体. 方法"在已获得的抗癌胚抗原重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因的基础上将重链可变区(VH)与轻链可变区(VL)基因直接连接制成微型抗体基因,并在大肠杆菌进行表达. 结果"大肠杆菌高效表达了微型抗体C端6×His的融合蛋白,表达量达菌体总蛋白的15%,SDS-PAGE和Western印迹显示表达物分子量为26kd与基因编码蛋白的理论推算值相符,RIA表明表达物与CEA特异性结合.结论"大肠杆菌表达是制备抗癌胚抗原微型抗体的有效途径.     

人外周血单个核细胞在尼古丁作用下白细胞介素-1β的分泌

目的吸烟是增加慢性牙周炎发病率的危险因素,本试验研究体外培养正常人和重度牙周炎患者外周血单个核细胞(PBMC)在尼古丁作用下的白细胞介素-1β(IL-1β)分泌情况。方法采集20例重度牙周炎患者和20例健康志愿者的PBMC,体外培养并与尼古丁(浓度分别为5,25,50,100和200 ng/ml)作用,分别在培养1,2,3,4,5 d后收集上清液,用ELISA法检测上清液中IL-1β的水平。结果5 ng/ml尼古丁对PBMC分泌IL-1β几乎没有影响,与对照组比较差异无显著性(P>0.05),随着尼古丁浓度增加,IL-1β分泌明显增加(P<0.001),并呈浓度时间依赖关系,但当尼古丁浓度超过100 ng/ml,PBMC分泌IL-1β的水平随浓度的增加而下降,与50 ng/ml时比较,差异有显著性(P<0.01)。牙周炎患者PBMC培养3 d后,IL-1β含量为(31.2±7.8)pg/ml,与对照组(23.6±8.1)pg/ml比较差异有显著性(P<0.01);50 ng/ml尼古丁时,牙周炎患者IL-1β为(197.9±26.5)pg/ml,明显高于对照组(117.4±16.8)pg/ml,差异有显著性(P<0.001)。结论尼古丁可致PBMC分泌IL-1β增加,在一定浓度范围内呈时间剂量依赖关系,但高浓度却抑制其分泌;重度牙周炎对尼古丁的刺激更加敏感,提示IL-1β的变化可能是吸烟影响牙周病的机制之一。     

匹维溴胺对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠组织AQP3表达影响

目的 观察匹维溴胺对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠血清以及结肠组织血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)含量、结肠组织水通道蛋白3(aquaporin 3, AQP3)表达的影响,探讨其治疗D-IBS的作用机制.方法 采用慢性应激与束缚相结合方法建立D-IBS大鼠模型.采用ELISA法检测VIP含量;采用Real time-PCR法和SABC免疫组化法检测AQP3的表达.结果 在血清和结肠组织中VIP的含量,与对照组[(3.092±0.613)ng/ml,(3.811±0.275)ng/ml]比较,模型组[(10.460±1.666)ng/ml,(4.495±0.341) ng/ml]与匹维溴胺组[(5.639±1.163)ng/ml,(4.063±0.534)ng/ml]均升高(P＜0.05),尤以模型组升高的更为明显(P＜0.01);两组AQP3的表达均下调(P＜0.01),尤以模型组AQP3蛋白表达下调显著.结论 匹维溴胺治疗D-IBS的作用机制之一,可能与抑制结肠组织中VIP分泌和上调AQP3表达有关.     

系统性红斑狼疮儿童特异性全长抗体基因库的构建与分析

目的构建系统性红斑狼疮(SLE)儿童个体特异性哺乳动物细胞表面展示的全长人抗体基因库。方法采集SLE确诊患儿外周血,分离外周血淋巴细胞,提取外周血淋巴细胞总RNA,用RT-PCR扩增全长Kappa轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因、构建抗体轻链基因库和抗体重链基因库,将抗体基因库转染293T细胞,流式细胞仪分析抗体在293T细胞表面的表达。结果以0.8μg总RNA为模板,用6套引物成功扩增全长Kappa轻链和重链可变区基因,插入表达载体,构建获得的重链基因库容量为9.4×104,轻链基因库容量为8.4×104。随机挑选的10个重链克隆有8个含有正确的阅读框架,编码8个不同的氨基酸序列,10个轻链克隆7个含有正确的阅读框架,编码7个不同的氨基酸序列。流式细胞仪分析挑选的单克隆和抗体基因库,均检测到全长抗体在293T细胞表面的表达,理论上抗体库中可表达的抗体多样性可以达到109。结论以0.8μg总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,成功构建SLE儿童特异性全长人抗体基因库,并在293T细胞表面成功展示SLE儿童个体抗体库中的全长抗体,为进一步研究SLE儿童自身抗体的特点及自身抗体在SLE发病机制中的作用及临床应用打下良好基础。     

CEA微型抗体载体的构建及在大肠杆菌中的高效表达

目的制备适合放免显像的抗癌胚抗原微型抗体。　方法在已获得的抗癌胚抗原重链可变区 (VH)及轻链可变区 (VL)基因的基础上将重链可变区 (VH)与轻链可变区 (VL)基因直接连接制成微型抗体基因 ,并在大肠杆菌进行表达。　结果大肠杆菌高效表达了微型抗体C端 6×His的融合蛋白 ,表达量达菌体总蛋白的 15 % ,SDS -PAGE和Western印迹显示表达物分子量为 2 6kd与基因编码蛋白的理论推算值相符 ,RIA表明表达物与CEA特异性结合。结论大肠杆菌表达是制备抗癌胚抗原微型抗体的有效途径     

庚型肝炎病毒转基因小鼠的特性研究

庚型肝炎病毒 (HGV)是一种新发现的与肝炎相关的病毒 ,作者已克隆了 HGV的全长基因 ,并制备了含有庚型肝炎病毒 (HGV)全长基因的转因基小鼠。作者以本室构建的 HGV转基因小鼠为材料 ,取转基因小鼠的各种组织进行 RT- PCR、免疫组织化学、Westernblotting等实验 ,分析 HGV基因在转基因小鼠体内的复制、表达及前体蛋白的剪切。并以外周血单核细胞(PBMC)及血清 RNA阳性的转基因小鼠血清接种Molt- 4细胞 ,鉴定细胞及上清中的 HGV RNA以及HGV病毒颗粒 ,研究 HGV的传染性。结果发现 HGV的正、负链 RNA以及蛋白产物可以在多个组…     

血管内皮生长因子促进少突胶质前体细胞增殖及其机制的初步研究

目的观察不同浓度血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对少突胶质前体细胞(oli-godendrocyte precursor cells,OPCs)增殖的影响,探索VEGF促进OPCs体外增殖与Notch信号通道上相关蛋白的关系。方法分离纯化培养OPCs,MTT法检测不同浓度VEGF(50、100、200 ng/ml)促进OPCs增殖的作用以及加入Notch通路γ-分泌酶抑制剂DAPT(VEGF 100 ng/ml+DAPT50μmol/ml)后OPCs增殖变化情况,RT-PCR、Western blot技术检测VEGF处理OPCs后Notch信号通道上Notch-1、Hes-1的基因表达和蛋白表达情况。结果 50、100、200 ng/ml VEGF处理组的细胞增殖率分别为(107±2)%、(124±2)%、(142±7)%,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);VEGF+DAPT处理组的增殖率下降至(103±4)%(P<0.05)。RT-PCR及Western blot分析显示VEGF处理OPCs后,Notch-1、Hes-1蛋白在基因水平和蛋白水平表达均增加(P<0.05),γ-分泌酶抑制剂DAPT能抑制其表达(P<0.05)。结论 VEGF对OPCs具有促进增殖的作用,其促增殖作用与Nocth信号通路相关蛋白有关。     

联合检测CEA、CA199在消化系统恶性肿瘤中的意义

目的探讨联合检测CEA、CA199应用在消化系统恶性肿瘤患者中的临床意义和应用价值。方法将我院健康体检人群作为对照组,经病理证实为消化系统恶性肿瘤患者106作为观察组,均进行CEA和CA199检测,观察检测方法对恶性肿瘤的诊断价值。结果对照组CEA(2.14±1.43)ng/ml,CA199(6.93±2.56)U/ml;胃癌患者CEA(32.65±16.13)ng/ml,CA199(92.26±21.81)U/ml;胆囊及胆管癌CEA(16.76±3.98)ng/ml,CA199(522.97±56.84)U/ml;胰腺癌CEA(32.87±8.76)ng/ml,CA199(165.65±37.68)U/ml;结肠癌CEA(52.15±14.41)ng/ml,CA199(102.87±27.68)U/ml,经统计学分析差异有统计学意义(P0.05)。联合检测患者特异度为71.6%,高于单一检测方式。结论联合检测CEA、CA199能够提高消化道肿瘤诊断敏感性和准确性,是早期实验室诊断消化系统恶性肿瘤的有效方法。