模拟失重对流体剪切应力致大鼠颅骨成骨细胞PGE2分泌的影响

目的：为探讨失重环境对骨骼细胞的力学信号转导功能的影响,细胞这种功能的变化在失重性骨质稀少中的作用,以及空间飞行锻炼效果不良与之的关系。观察了模拟失重对流体剪切应力致大鼠成骨细胞PGE2分泌的影响。方法：传统代培养的大鼠乳鼠颅骨成骨细胞分为两组,一组在地面重力环境下剪切应力作用1h,检测细胞分泌前列腺素E2的变化。结果在1G重力环境下培养的成骨细胞中,在一定的时间范围内（5－60min),细胞PGE2的分泌反应随剪切应力作用时间的延长而显著增强（P＜0．01）;而在一定的剪切应力范围内（0．5－1．5Pa),细胞PGE2的分泌反应与应力水平无明显关系,即应性下降,即0．5Pa应力上无PGE2的分泌反应（P＜0．01）,1．5Pa应力作用下PGE2的分泌延缓并且分泌水平下降（P＜0．01）。结论：成骨细胞对流体剪切应反应在模拟失重环境下有下调性改变／     

不同重力环境对流体剪切应力致成骨细胞前列腺素E2分泌的影响

目的观察不同重力环境对流体剪切应力致成骨细胞前列腺素E2(PGE2)分泌的变化,探讨重力变化对成骨细胞力学信号转导功能的影响.方法传代培养的大鼠乳鼠颅骨成骨细胞分别在1G、3G及模拟失重环境中培养.60h后,将成骨细胞置于流体槽中给予0.5Pa或1.5Pa的流体剪切应力作用1h,检测细胞分泌PGE2的变化.结果在1G重力环境下培养的成骨细胞中,在一定的时间范围内(5～60min),细胞PGE2的分泌反应随剪切应力作用时间的延长而显著增强(P＜0.01);而在一定的剪切应力范围内(0.5～1.5Pa),细胞PGE2的分泌反应与应力水平无明显关系,即不随剪切应力的大小而改变(P＞0.05).与之相比,模拟失重环境下培养的成骨细胞对剪切应力的反应有显著性下降(P＜0.01),0.5Pa应力作用下无PGE2的分泌反应,1.5Pa应力作用下虽有PGE2的分泌,但分泌延缓且水平下降(P＜0.01).3G重力环境下,细胞对剪切应力的反应特性与1G重力组细胞的表现相比,差异无显著性意义(P＞0.05).结论模拟失重可以导致大鼠成骨细胞力学信号转导功能的下降;3G重力环境对成骨细胞的力学信号转导功能无显著影响.     

模拟失重对流体剪切应力致大鼠颅骨成骨细胞PGE_2 分泌的影响(英文)

目的为探讨失重环境对骨骼细胞的力学信号转导功能的影响 ,细胞这种功能的变化在失重性骨质稀少中的作用 ,以及空间飞行锻炼效果不良与之的关系。观察了模拟失重对流体剪切应力致大鼠成骨细胞PGE2 分泌的影响。方法传代培养的大鼠乳鼠颅骨成骨细胞分为两组 ,一组在地面重力环境下培养 ,另一组则置于回转器中培养 60h。然后 ,将成骨细胞置于流体槽中给予 0 .5Pa或 1 .5Pa的流体剪切应力作用 1h ,检测细胞分泌前列腺素E2 的变化。结果在 1G重力环境下培养的成骨细胞中 ,在一定的时间范围内 ( 560min) ,细胞PGE2 的分泌反应随剪切应力作用时间的延长而显著增强 (P <0 .0 1 ) ;而在一定的剪切应力范围内 ( 0 .51 .5Pa) ,细胞PGE2 的分泌反应与应力水平无明显关系 ,即不随剪切应力的大小而改变 (P >0 .0 5)。与之相比 ,模拟失重环境下培养的成骨细胞对剪切应力的反应性下降 ,即 0 .5Pa应力作用下无PGE2 的分泌反应 (P <0 .0 1 ) ,1 .5Pa应力作用下PGE2 的分泌延缓并且分泌水平下降 (P <0 .0 1 )。结论成骨细胞对流体剪切应力的反应性在模拟失重环境下有下调性改变     

不同重力环境对流体剪切应力致成骨细胞前列腺素E_2分泌的影响

目的　观察不同重力环境对流体剪切应力致成骨细胞前列腺素 E2 (PGE2 )分泌的变化 ,探讨重力变化对成骨细胞力学信号转导功能的影响。　方法　传代培养的大鼠乳鼠颅骨成骨细胞分别在 1G、3G及模拟失重环境中培养。6 0 h后 ,将成骨细胞置于流体槽中给予 0 .5 Pa或 1.5 Pa的流体剪切应力作用 1h,检测细胞分泌 PGE2 的变化。　结果　在 1G重力环境下培养的成骨细胞中 ,在一定的时间范围内 (5～ 6 0 m in) ,细胞 PGE2 的分泌反应随剪切应力作用时间的延长而显著增强 (P<0 .0 1) ;而在一定的剪切应力范围内 (0 .5～ 1.5 Pa) ,细胞 PGE2 的分泌反应与应力水平无明显关系 ,即不随剪切应力的大小而改变 (P>0 .0 5 )。与之相比 ,模拟失重环境下培养的成骨细胞对剪切应力的反应有显著性下降 (P<0 .0 1) ,0 .5 Pa应力作用下无 PGE2 的分泌反应 ,1.5 Pa应力作用下虽有 PGE2 的分泌 ,但分泌延缓且水平下降 (P<0 .0 1)。3G重力环境下 ,细胞对剪切应力的反应特性与 1G重力组细胞的表现相比 ,差异无显著性意义 (P>0 .0 5 )。　结论　模拟失重可以导致大鼠成骨细胞力学信号转导功能的下降 ;3G重力环境对成骨细胞的力学信号转导功能无显著影响     

不同重力环境对流体剪切应力诱导成骨细胞环氧合酶-2蛋白表达的影响

目的　探讨重力变化对成骨细胞力学信号转导功能的影响及前列腺素 E2 (PGE2 )分泌变化的机制。　方法　分离培养大鼠乳鼠颅骨成骨细胞 ,在不同重力 (1G重力 ,3G超重 ,模拟失重 )环境培养 6 0 h后进入剪切应力流室系统中进行刺激实验。流体剪切应力 (FSS)分别为 0 .5 Pa和 1.5 Pa,作用时间分别为 30 m in和 6 0 m in。其后进行免疫组化染色和图像分析。　结果　环氧合酶 - 2 (COX- 2 )主要分布在成骨细胞核膜上。在 1G和 3 G组 ,相同时间不同水平 FSS作用诱导的 COX- 2蛋白表达无显著差异 ,不同时间 FSS诱发COX- 2蛋白表达水平显…     

模拟失重对流体剪切应力诱导MG-63细胞ERK2激活的影响

目的 研究成骨细胞力学信号转导功能中酪氨酸磷酸结合结构域适应蛋白(Shc)和细胞外信号调节蛋白激酶(ERK2)的关系,并观察模拟失重条件下流体剪切应力(FSS)诱导ERK2活性的变化,以期从信号转导水平探讨模拟失重对成骨细胞力学信号转导功能的影响.方法 将负性缺失突变体质粒Shc-SH2和活性ERK质粒Myc-ERK2共同转染入MG-63细胞中,同时将真核表达载体pcDNA3和Myc-ERK2也共同转染入MG-63细胞中作为转染平行对照组,对转染细胞进行1.5 Pa流体剪切应力处理15 min.利用回转器模拟失重60 h,对转染细胞进行1.5 Pa FSS处理15 min.结果 在转染平行对照组中,FSS组中的Myc-ERK2的活性显著升高;在Shc-SH2转染组中,Myc-ERK2的活性与转染平行对照组相比显著降低(P＜0.05),在FSS组中未见Myc-ERK2活性的变化.转染了真核表达载体pcDNA3和Myc-ERK2的细胞在模拟失重条件培养及FSS作用15 min后,Myc-ERK2的活性升高,但与未进行模拟失重的对照组相比,Myc-ERK2的活性显著降低(P＜0.05).结论 在力学信号转导通路中,Shc可以介导力学信号以激活ERK2.模拟失重对细胞的力学信号转导功能具有不良影响.     

模拟失重对成骨细胞细胞周期影响的实验研究

目的失重条件下骨质脱钙的机理,从目前飞行及地面实验结果看,倾向于认为骨形成受到抑制是其主要原因,特别是成骨细胞数目的减少和活性的降低。本实验旨在探讨成骨细胞增殖及细胞周期的变化,以进一步阐明空间骨丢失的机理。方法利用回转器模拟失重,观察成骨细胞增殖周期受模拟失重的影响以及三花接骨散对抗这种影响的效果。结果模拟失重作用２４ｈ后,成骨细胞增殖即已明显受到抑制;模拟失重作用下,Ｇ１期细胞显著增多,Ｓ与Ｇ２＋Ｍ期细胞显著减少;模拟失重作用１２ｈ后,经１２ｈ以上正常生长,细胞周期可恢复至对照水平;三花接骨散促进Ｇ１期细胞减少,Ｓ与Ｇ２＋Ｍ期细胞增多,具有对抗失重效应的功能。结论成骨细胞在失重环境中,Ｇ１期向Ｓ期的转化过程受到抑制,从而导致Ｇ１期细胞增多,Ｓ期与Ｍ期细胞减少,使成骨细胞的增殖受到抑制。同时细胞周期具有一定的恢复能力;而三花接骨散具有对抗失重效应,促进成成细胞Ｇ１期向Ｓ期的转化过程,促进成骨细胞增殖的功效。     

流体剪切应力对模拟失重条件下MG-63成骨样细胞Cbfα1表达的影响

目的 观察模拟失重条件下培养的人骨肉瘤MG-63成骨样细胞受流体剪切应力(FSS)作用后核心结合因子α1(Cbfα1)表达的改变,初步探讨失重情况下骨质减少的可能机制.方法 MG-63成骨样细胞传代于25 mI培养瓶中,培养24 h后细胞被随机分为模拟失重组和1 G组(每组又下设立FSS作用组和无FSS作用组).48 h后,将细胞置于流室系统中进行刺激实验.FSS强度设为0.5 Pa,作用时间分别为15、30和60 min.其后提取细胞总RNA,进行反转录PCR,检测细胞内Cbfα1 mRNA的表达,并计算与内参照GAPDH mRNA的比值.同时提取细胞总蛋白,Western Blotting检测Cbfα1蛋白的表达.结果 和无FSS作用组相比,FSS作用组的Cbfα1的表达在30 min和60 min均显著增强,且在一定的时间范围内(15～60 min)Cbfα1的表达水平随着作用时间的延长而增加.和1 G组相比,模拟失重组的Cbfα1表达水平降低,在30 min、60 min时有显著的统计学意义.结论 FSS可以促进MG-63成骨样细胞内Cbfα1的表达,模拟失重可显著抑制FSS对MG-63成骨样细胞内Cbfα1表达的诱导作用.     

模拟失重和辐照对鼠心肌细胞和成骨细胞的影响

为观察观察失重和辐射对细胞和功能的影响，用回转器模拟失重，＾６０Ｃｏ－γ射线辐照体外培养的心肌和成骨细胞 。     

红松球果提取物对模拟失重诱导成骨细胞功能下降的防护作用

目的从天然产物中寻找到对模拟失重诱导成骨细胞功能下降具有防护作用的提取物,为治疗失重性骨丢失提供潜在药物。方法从120多种天然产物中筛选出11种进行研究,筛选出对成骨细胞增殖活性具有较强效果的天然产物;在模拟失重下,将筛选出的天然产物作用于成骨细胞,并通过其对成骨细胞功能的影响评价其在防护骨丢失上的作用。结果红松球果提取物(extract of pine cone polyphenol,EPCP)显示出最强的成骨细胞增殖活性。模拟失重下,不同剂量的松树球果提取物对成骨细胞周期、细胞凋亡和碱性磷酸酶活性分别显示出了不同的防护作用。其中高剂量组可以显著提高模拟失重下成骨细胞碱性磷酸酶的活性,促进细胞周期运转并且抑制细胞凋亡。结论通过对天然产物促成骨细胞增殖活性进行筛选,所获得的EPCP对失重诱导的成骨细胞功能下降具有良好的防护作用。     

模拟失重引起的大鼠基底动脉收缩反应性增强

目的为了阐明模拟失重是否引起头部的动脉血管,如基底动脉的收缩反应性增强。方法 中悬吊大鼠模型模拟失重影响。利用离体基底动脉血管环制备测定其对几种血管收缩剂反应性的变化。结果 悬吊４ｗｋ组大鼠的基底动脉血管环对ＫＣｌ「（１０－１００）ｍｍｏｌｌ」、精氨酸加压素「（１０＾－１５－－１０＾－７）ｍｏｌ／Ｌ或５－羟色胺「（１０＾－１２－－１０＾－４）ｍｏｌ／Ｌ」的等长收缩反应较同步对照组均显著升高。两组大     

缺氧预处理对模拟失重大鼠比目鱼肌萎缩的预防

目的了解缺氧预处理对失重状态下发生的骨骼肌萎缩是否有预防作用。方法采用大鼠尾部悬吊法建立模拟失重动物模型，将雌性SD大鼠按体重配对原则随机分为对照组（CON）、尾部悬吊组（SUS）及缺氧预处理＋尾部悬吊（HCP＋SUS）组。首先，对HCP＋SUS组进行1周的缺氧预处理。处理完成后，将SUS及HCP＋SUS组大鼠尾部悬吊2周。试验结束处死3组大鼠，取双后肢比目鱼肌，分别称重。将部分比目鱼肌制成匀浆，取上清液用于超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的检测。结果尾部悬吊2周后，SUS组大鼠双后肢比目鱼肌湿重明显低于CON及HCP＋SUS组（P〈0．01）。与SUS组相比，HCP＋SUS组比目鱼肌SOD活性明显升高（P〈0．05），MDA水平明显降低（P〈0．05）。结论缺氧预处理可提高大鼠骨骼肌的抗氧化能力，对失重状态下发生的骨骼肌萎缩有预防作用。     

模拟失重和超重刺激对体外培养成骨瘤细胞分裂、增殖影响的研究

为探讨模拟失重对体外培养成骨瘤细胞分裂、增殖的影响，用回转器以３０ｒ／ｍｉｎ水平回转模拟失重效应，对照组采用静置培养，另设一超重组（以１６４ｒ／ｍｉｎ绕竖直轴旋转，达到离心力为３Ｇ），观察到人成骨瘤细胞形态改变，并测定三组细胞生长曲线。发现与正常生长的静置培养组比较，模拟失重组细胞胞体变圆，细胞密度增加不明显，在回转的第三天后反呈下降趋势；而超重组细胞分裂旺盛、增殖迅速，并堆叠生长，很快出现大量生长斑。结果证实成骨瘤细胞的分裂增殖过程对重力敏感，提示失重条件下成骨细胞活性下降可能与失重导致细胞内、外微环境的改变有关。     

模拟失重条件下高浓度氧对大鼠肺脏的影响

本实验目的是观察模拟失重与高浓度氧暴露１２－３６ｈ对大鼠肺脏的影响。研究两者的复合效应。实验共用Ｗｉｓｔａｒ大鼠６０只，分为５个组。尾悬吊作为模拟失重的动物模型。     

尾悬吊模拟失重对大鼠肺脏的影响

为观察模拟失重对大鼠肺脏的影响，实验选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，采用尾悬吊模拟失重模型。实验大鼠３６只被分为三组；对照组、悬吊５．５天组及悬吊６．５天组。实验观察了悬吊５．５天和６．５天大鼠肺脏的形态学变化，测定了肺泡灌洗液中棕榈酸磷酸酰胆硷的含量及其表面张力，以及血清中血管紧张素转化酶的活性等。     

模拟失重及力负荷对大鼠胫骨骨液流的影响

目的 采用体内分子示踪方法观察尾吊大鼠胫骨骨陷窝小管液流改变及施加力负荷后的变化。方法 36只SD雄性大鼠分3组：自由活动组，悬吊组，悬吊 力负荷组。实验第21天，每组选4只大鼠尾静脉注射辣根过氧化物酶(HRP)溶液，3h后断头处死大鼠，取胫骨冰冻切片，染色后观察HRP反应产物在骨组织的分布情况。结果 悬吊组大鼠骨陷窝染色反应物沉积量明显少于自由对照组；力负荷组大鼠骨陷窝反应物沉积量明显多于悬吊组。结论 模拟失重条件下，大鼠骨陷窝小管液体流动受到了一定程度的抑制，短时间一定强度的力负荷刺激，可促进其液体流动，增加骨对模拟失重效应的对抗性。