单克隆抗体在ELISA法检测B型肉毒毒素中的应用

于ELISA—双夹心法系统中采用B型肉毒毒素单克隆抗体作为包被抗体,可检出B型肉毒类毒素4—31ng/ml,与A型交叉最低浓度为4—8μg/ml,特异性比值为250—1,000;可检出B型肉毒毒素16ng/ml(4LD_(50)/ml) A型大于32μg/ml(大于301LD_(50)/ml),特异性比值大于2,000;检出污染食物标本中的B型肉毒毒素最低浓度为0.67—7.8LD_(50)/ml,与A型间未见交叉现象。其敏感度接近RPHA,特异性明显优于RPHA。     

人工污染标本及肉毒中毒标本的检测

应用酶标SPA—ELISA夹心法对7种18份食物标本作了肉毒毒素的检测。其定性试验的结果与反向被动血凝试验、小鼠试验及污染所用菌型完全相符。对A型肉毒毒素的最低检出量,除1份标本外,均高于Notermans等的报道(50～100 LD50/ml);而对B型肉毒毒素的最低检出量则明显低子Kozaki等的报道(400LD/ml)。应用亲和层析交叉吸收法纯化的A、B型肉毒抗毒素分别作为包被抗体,消除了A、B型间的交叉现象,提高了试验的特异性。本法在快速及稳定性上也较良好。     

反向间接血凝检测肉毒毒素和含毒食物标本的研究

以亲和层析交叉吸收纯化A、B型肉毒抗体致敏红细胞,用RPHA检则了肉毒毒素标本20份(阴性标本5份),其中10份完全消除了交叉反应,另外5份标本的交叉反应显著减少。分型结果与动物(小鼠)实验完全相同。     

炔戊菊脂及其二氯衍生物毒性、诱变性与结构的关系

炔戊菊脂及其二氯衍生物为拟除虫菊酯类杀虫剂,两者化学结构相似。毒性试验两者皆有神经系统症状,如肌颤、抽搐及惊跳反应增强等。炔戊菊脂小鼠吸入4小时LC_(50)>20.00mg/l,经口LD_(50)5280～7940mg/kg,二氯衍生物2小时LC_(50)6.37mg/-l,LD_(50)68.1mg/kg。诱变性检测微核试验两者皆为阴性。Ames 试验炔戊菊脂在高剂量时TA_(100)/-S_g为阳性,而二氯衍生物则为阴性。本文表明炔戊菊脂类的毒性症状、LD_(50)、诱变性皆与化学结构有密切关系,如菊酸中的二甲基被二氯取代后则毒性升高,Ames 试验可能为阴性。     

中药乌头去毒指数的测定

采用萃取法分离-离子对萃取-比色法和异羟肟酸反应-三氯化铁显色-比色法分别测定了乌头中毒性生物碱乌头碱类(A)和酯型生物碱的含量。根据以上测得结果求得了苯甲酰乌头原碱类(B)的含量,进而求得去毒指数(DI,DI=B/(A B))。采用上下法和醋酸诱导扭体法分别测定乌头对小鼠的LD_(50)和半数镇痛效量(AD_(50)),进而求得了治疗指数(TI,TI=LD_(50)/AD_(50))。DI生品为3.83%,炮制品为51.9～70.3%;TI分别为3.2,4.0～7.6。结果表明DI可用来评估乌头的有效性和毒性。     

免疫斑点法检测粪便潜血的实验研究

作者利用抗Hb-HRP建立免疫斑点法(Dot-ELISA)粪便潜血试验,检测了46例正常人和35例大肠癌患者的粪便标本,并与RPHA粪潜血试验相对照.结果发现,Dot-ELISA检测人Hb的灵敏度为1μg/ml,而50μg/ml的羊、鸡、鸭、免、鼠Hb用本法检测均为阴性.46份正常人粪便标本的阳性率为6.5%(3/46);35份大肠癌患者粪标本的阳性率为88.6%(31/35).与RPHA法对比表明,Dot-ELISA用于检测粪潜血以筛检大肠癌,与RPHA法同样具有较好的敏感性和特异性.     

丝瓜络的药理作用初探

小鼠腹腔注射丝瓜络的 LD_(50)为137.40±16.71g/kg,静脉注射 LD_(50)为8.9g/kg。丝瓜络能显著降低角叉莱胶所致的大鼠足跖肿胀程度,明显抑制大鼠棉球肉芽肿的形成。对化学、热、电刺激所致的疼痛有显著抑制作用,纳络酮拮抗试验,对丝瓜络的镇痛作用无明显影响。     

柠檬桉叶挥发油的抑瘤作用及毒性试验

本文研究了柠檬桉叶挥发油的抑瘤作用及毒性,发现本品对小鼠EC的抑瘤率为67.5～98.9％;S_(180)为36.2～62.8％;大鼠W_(256)为32.7～61.4％。放射自显影实验证明本品能明显抑制EC腹水癌细胞的DNA合成。急性毒性试验:口服LD_(50)=1.49ml/kg(按原油计,下同);静注LD_(50)=0.19ml/kg。亚急性毒性试验表明,除发现本品对口腔、咽喉粘膜有刺激反应外,其余项目,如血液、肝、肾功能、EKG、及心、肺、肝、肾、脾、胃、输尿管、胆囊、胰等脏器病检中,均未见明显异常。     

临床新药介绍

一、药理试验及临床验证本品对6种DNA病毒及10种RHA病毒有效,毒性小,小鼠口服LD_(50)为2000mg/kg,腹腔注射LD_(50)为1200～1300mg/kg。大鼠口服,LD_(50)为5300mg/kg。     

评估化学品急性毒性的一种简便方法

本文提出了一种对化学品进行经口和经皮急性毒性评价的新方法。其特点是动物使用量少,每个剂量组、每种性别仅需3只大鼠或小鼠。首先以2000mg/kg的剂量投药,仔细观察体征,以得到相应的中毒体征发生率与死亡率。如果没有动物死亡,则停止试验,如果有动物死亡,再分别以200mg/kg和20mg/kg的剂量进行试验。从而得出LD_(50)值的范围(LD_(50)>20mg/kg;LD_(50)在20～200mg/kg之间等)。对多种化学品试验的结果表明,这种方法得到的LD_(50)与文献中报道的值非常一致,且两个不同实验室进行同一试验的结果差别极小。另外,作者用经典方法测定LD_(50)试验得到的数据显示,LD_(50)大约为MNLD(最大无死亡剂量)的2～2.5倍,即如果以     

诺毕速灭松乳剂对蟑螂的药效报告

本文通过实验室和现场对诺毕速灭松乳剂杀灭蟑螂的效果观察表明,该制剂对美洲大蠊LD_(50)为26.0～45.8μg/虫;对德国小蠊LD_(50)为3.95～5.15μg/虫。现场滞留喷洒在按1∶10稀释后,每平方米喷药40～63.4ml,7天蟑螂密度降低为80～90％     

不同稀释浓度A型肉毒毒素治疗偏侧面肌痉挛的对照研究

目的观察不同稀释浓度A型肉毒毒素(BTX-A)治疗偏侧面肌痉挛(HFS)的疗效。方法 235例HFS患者随机分为A组(115例)和B组(120例),分别采用50 U/ml和25 U/ml稀释度BTX-A注射治疗。观察两组的BTX-A用量、治疗效果、疗效持续时间及不良反应发生率。结果 A组BTX-A用量为(26.20±3.91)U,B组BTX-A用量为(24.88±3.32)U,两组BTX-A用量间差异有统计学意义(<0.05)。两组患者治疗效果和疗效持续时间比较差异均无统计学意义(>0.05)。A组发生不良反应41例,(35.65%),B组26例(21.67%),差异有统计学意义(<0.05)。结论使用25U/ml稀释度BTX-A注射治疗HFS与使用50 U/ml稀释度的疗效相似,但可显著减少BTX-A用量和不良反应发生率。     

不同稀释度A型肉毒毒素治疗偏侧面肌痉挛的疗效观察

目的 观察不同稀释度A型肉毒毒素(BTX-A)治疗偏侧面肌痉挛(HFS)的疗效.方法 65例HFS患者随机分为A组(33例)和B组(32例),分别采用25 U/ml和50 U/ml稀释度BTX-A注射治疗.观察两组的BTX-A用量、治疗效果、疗效持续时间及不良反应发生率.结果 A组注射点数为(12±2)点、BTX-A用量为(25±7) U,B组注射点数为(10±1)点、BTX-A用量为(42±9) U,两组注射点数和BTX-A用量间差异均有统计学意义(P＜0.05).两组患者治疗效果和疗效持续时间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).A组共有7例发生不良反应,不良反应发生率为21.21%;B组共有13例发生不良反应,不良反应发生率为40.62%,两组不良反应发生率间差异有统计学意义(χ2=3.47,P＜0.05).结论 使用25 U/ml稀释度BTX-A注射治疗HFS与使用50 U/ml稀释度的疗效相似,但可显著减少BTX-A用量和不良反应发生率.     

登革病毒感染蚊虫后几个器官敏感性的比较

以浓度为4×10~8TCID_(50)/ml和4×10～5TCID_(50)/ml的病毒液经口感染,4×10~8TCID_(50)/ml和4×10~2TCID_(50)/ml病毒液经胸接种白纹伊蚊(Aedes albopictus)。结果表明1、脑和神经节感染率相同,2、神经系统对病毒敏感性较涎腺高。     

Vero细胞和鸡胚细胞对HSV敏感性的比较研究及其意义

HSV有HSV-1和HSV-2两型,Vero细胞和鸡胚细胞对HSV-1和HSV-2的敏感性不同,前者对HSV-1的敏感性较HSV-2高,而后者则相反;HSV-1在Vero细胞上的感染滴度比在鸡胚细胞上至少高4.0TCID_(50)/0.05ml,而HSV-2则平均低1.84TCID_(50)/0.05ml。这种敏感性和感染滴度的差异,可作为HSV分型的生物学指标,具有实用意义。     

探讨标本与固相抗体反应时间对ELISA法检测HBsAg结果的影响

目的:分析待测标本与固相抗体的反应时间是否对试验结果造成影响。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法。选择乙型肝炎表面抗原(HBsAg)浓度>30 ng/ml的血清标本100例,HBsAg浓度为0.5～30 ng/ml(不包括0.5 ng/ml)的血清标本50例,分别作0 min、30 min、60 min对比试验。结果:通过对比试验,放置0 min与30 min差异有统计学意义(P<0.05),放置0 min与60 min差异有统计学意义(P<0.05),放置30 min与60 min差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在保证试验结果的前提下,待测标本与固相抗体反应的时间至少为30 min以上。     

人7型腺病毒的分离与鉴定

目的对哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本进行检测、分离鉴定和分型。方法应用直接免疫荧光法对标本进行初步筛检,将筛检得到的腺病毒阳性标本接种到A549细胞进行病毒培养,并用空斑法进行纯化。采用PCR技术扩增腺病毒五邻体、六邻体基因,将扩增的PCR产物进行基因测序,并将测序结果BLAST比对,初步判断其型别。结果从采集的标本中分离到1株人腺病毒毒株。 BLAST比对五邻体、六邻体测序结果,表明该毒株与人7型腺病毒五邻体、六邻体的同源性为100％,初步判定该毒株为人7型腺病毒。结论从哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸道感染患者的痰或咽拭子标本中分离到1株人7型腺病毒。     

黑发液毒理学研究

作者在小白鼠、豚鼠、家兔动物身上实验黑发液:急性、亚急性皮肤刺激试验、亚急性毒性实验、LD_(50)测定、过敏性实验和对家兔毛细血管通透性实验,证明LD_(50)为470.8mL/kg±39.4ml,无皮肤刺激性、无毒性、不致敏,有增强血管通透性作用,经皮肤可吸收且具有明显促进毛发生长作用.     

PCR-RFLP与多引物对PCR乙肝病毒基因分型方法的比较

目的　PCR RFLP与多引物对PCR的乙肝病毒基因分型方法学比较。方法　自行设计利用限制性内切酶MboⅠ、BsTNⅠ、BsmAⅠ、HpaⅡ酶切S基因片段鉴定HBV基因型 (A～F)的PCR RFLP方法。分别利用该方法和多引物对PCR对贵州地区 14 9份HBsAg、HBVDNA阳性血清进行病毒基因分型。结果　 14 9份乙肝患者血清中PCR -RFLP方法成功分型 12 8份 (85 .91% ) ,多引物对PCR方法成功分型 10 8份 (72 .4 8% )。两种方法均能成功分型的标本 10 7份 ,其中B型 5 2份 ,C型 5 5份 ;两种方法分型结果完全一致。结论　本PCR RFLP基因分型方法与多引物对PCR方法的分型结果一致 ,但PCR RFLP方法的成功率及敏感度较高 ,图谱简单易读 ,适用于大样本筛检及临床应用     

过氯酸钠抑制法直接测定血清LD_1活性

本介绍以过氯酸钠为抑制剂,金氏法直接测定血清LD_1活性的方法。本法批内CV3.95％、批间CV5.29％,与琼脂糖电泳分离法比较r=0.9689。测定50例健康成人和12例AMI患者血清LD_1活性,结果分别为1.31±0.34,5.01±1.63Umols~(-1)/L。二者有显著性差异(P<0.001)。