双酚A对植入后大鼠、小鼠胚胎致畸性的体外实验研究

为揭示双酚A(BPA)的发育毒性及其可能的作用机制 ,采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 5日龄BalB C小鼠胚胎和 9 5日龄大鼠胚胎分别与含BPA的大鼠即刻离心血清共培养 48h(BPA终浓度为 0、40、60、80、10 0mg L) ,观察双酚A对小鼠和大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果显示 ,随着BPA剂量的增加胚胎在体外的生长发育受影响越严重 ,呈现出明显的剂量 -效应及剂量 -反应关系。≥ 60mg L的BPA可诱发小鼠及大鼠胚胎的卵黄囊生长和血管分化不良、生长迟缓及形态分化异常 ,严重者出现体位异常、神经系统、鳃弓发育异常及小眼、小肢芽等畸形。提示在较高剂量下 ,BPA对体外培养的大鼠和小鼠胚胎具有一定的毒性作用 ,其中对卵黄囊胎盘的结构和功能的影响可能是其致畸作用的机制之一     

壬基酚对体外培养大鼠胚胎发育的毒性研究

目的 研究4-壬基酚(4-NP)在体外条件下对大鼠胚胎生长发育的影响，探讨其胚胎毒性作用机制。方法 采用植入后全胚胎培养模型，将9.5d Wistar大鼠胚胎与含4-NP的大鼠即刻离心血清共培养48h(4-NP终浓度为0，6.25，12.5，25，50，100mg/L)，观察4-NP对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响，并用光镜、电镜检测胚胎和卵黄囊的组织结构。结果 4-NP在25mg/L以上可诱发卵黄囊生长和血管分化不良、胚胎生长迟缓及器官形态分化异常，严重者出现神经系统、心脏、腮弓发育异常及小肢芽、体位异常等畸形；100mg/L的4-NP对体外培养胚胎主要呈致死效应。光镜可见实验组胚胎多个器官组织出现病理改变，光镜和电镜下可见卵黄囊3层结构受损，以上结果均呈明显的剂量-反应关系。结论 4-NP对体外培养的大鼠胚胎具有-定的胚胎毒性。其胚胎毒性机制可能与4-NP对卵黄囊胎盘的结构和功能的破坏及其直接的细胞毒性有关。     

Al（NO3）3对大鼠胚胎的发育毒性研究

应用体外全胚胎培养方法,以Al(NO3)3为受试物,培养基中Al3+浓度为0.6～9.0μg/ml,直接染毒旋转培养的大鼠胚胎48h,观察Al(NO3)3对大鼠胚胎生长发育和形态分化的影响,以探讨铝的胚胎发育毒性及其机理。结果发现,随着铝剂量增加,胚胎生长发育和器官分化的各项指标均呈现下降趋势,有一定的剂量-效应关系。其中,胚胎卵黄囊、神经管及心脏分化发育等对铝的作用较为敏感,相关指标在Al3+浓度为1.2μg/ml时比对照组显著降低(P<0.05)。≥3.0μg/ml时,除下颌外各项指标均明显降低(P<0.05或P<0.01),同时胚胎畸形发生率明显升高,畸形以神经管闭合不全、体屈异常多见。表明Al(NO3)3可导致胚胎发育迟缓和神经系统等器官发育畸形。     

硫酸铟生殖毒性的研究

采用常规致畸实验方法,给予妊娠大鼠432.80 mg/kg、135.25 mg/kg、43.28 mg/kg（1/5-1/50 LD50）硫酸铟经口灌胃染毒,以探讨硫酸铟的致畸效应以及其对雌性大鼠的生殖毒性作用。结果染毒组孕鼠孕末增重明显降低,吸收胎数均显著高于对照组,存活胎仔仅见个别有卷尾、波状肋、少肋等,未见到腭裂、脑外露、器官缺失等典型畸变;各染毒组成形胎仔的生长发育与对照组比较差异无统计学意义。提示硫酸铟具有明显早期胚胎毒性作用,可导致早期胚胎大量死亡并形成吸收胎。其致畸作用及对成形胎仔的生长发育影响并不明显。     

烹调油烟冷凝物对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 观察烹调油烟冷凝物(Cooking Oil Fume Condensates，COFC)的体外发育毒性并探讨其可能的毒性作用机制。方法采用体外全胚胎培养模型，将植入后8．5d龄昆明种小鼠胚胎在大鼠即刻离心血清培养基中培养48h(COFC染毒浓度分别为0、20、40、80、160、320mg／L)，观察COFC对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果COFC在≥80ms／L以上剂量时能抑制胚胎生长发育和形态分化，诱发卵黄囊生长和血管分化不良，发育异常率增高；高浓度组能诱发多种畸形，主要为神经系统，心脏、肢芽等器官系统畸形。结论体外实验条件下，COFC对小鼠胚胎具有一定的胚胎毒性和致畸性。     

双酚A对小鼠早期胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 揭示双酚A的发育毒性及其毒作用机制。方法 采用植入后全胚胎培养模型，将8．5日龄BalB/C小鼠胚胎与含双酚A的大鼠即刻离心血清共培养48h(双酚A终浓度为0，40．0，60．0，80.0,100.0mg/L），观察双酚A对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果 随着双酚A剂量的增加，胚胎在体外的生长发育受影响越严重，呈现出明显的剂量－反应关系。≥60mg/L的双酚A可诱发卵黄囊（VYS）生长和究化不良，生长迟缓及形态分化异常，严重者出现体位异常及各种畸形，如心脏发育迟缓，心包积液等。结论 在较高剂量下，双酚A对体外培养的小鼠胚胎具有一定的毒性作用，其中对卵黄囊胎盘的结构和功能的影响可能是其发育毒作用的重要基础之一。     

邻苯二甲酸二-(2-乙基己基)酯对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

为探讨邻苯二甲酸 二 2 乙基己基酯 (Di 2 ethylhexylphthalate ,DEHP)对体外培养小鼠胚胎的发育毒性 ,采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8.5天龄Balb c小鼠胚胎移入含DEHP即刻离心血清培养 48h ,DEHP终浓度为 0、12 .5、2 5、5 0、10 0和 2 0 0mg L ,观察DEHP对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果显示DEHP对体外培养小鼠胚胎生长发育毒性的最大无作用剂量为 12 .5mg L ,≥ 2 5mg L的DEHP可诱发胚胎生长迟缓及组织器官形态分化异常 ,出现心脏、神经系统、腮弓发育异常及小肢芽、体位异常等畸形 ;10 0mg L的DEHP对体外培养胚胎偶尔呈致死效应 ;2 0 0mg L时各组织器官形态分化均出现了异常 ,但未发现死胎。上述改变具有明显的剂量 -效应及剂量 -反应关系。提示DEHP对体外培养的小鼠胚胎具有胚胎毒性 ,并以致畸效应为主     

Al(NO_3)_3对大鼠胚胎的发育毒性研究

应用体外全胚胎培养方法 ,以Al(NO3) 3为受试物 ,培养基中Al3+ 浓度为 0 6～ 9 0 μg ml,直接染毒旋转培养的大鼠胚胎 48h ,观察Al(NO3) 3对大鼠胚胎生长发育和形态分化的影响 ,以探讨铝的胚胎发育毒性及其机理。结果发现 ,随着铝剂量增加 ,胚胎生长发育和器官分化的各项指标均呈现下降趋势 ,有一定的剂量 效应关系。其中 ,胚胎卵黄囊、神经管及心脏分化发育等对铝的作用较为敏感 ,相关指标在Al3+ 浓度为1 2 μg ml时比对照组显著降低 (P <0 0 5 )。≥ 3 0 μg ml时 ,除下颌外各项指标均明显降低 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,同时胚胎畸形发生率明显升高 ,畸形以神经管闭合不全、体屈异常多见。表明Al(NO3) 3可导致胚胎发育迟缓和神经系统等器官发育畸形。     

氯化甲基汞对体外培养胚胎的发育毒性实验研究

用体外全胚胎培养模型并结合电镜技术探讨了氯化甲基汞对大鼠胚胎的发育毒性。结果表明：氯化甲基汞的体外最小致畸剂量为０．２μｇ／ｍｌ，除ＶＹＳ直径和ＶＹＳ血管形成２项指标外，其它各指标值均明显低于对照组（Ｐ＜０．０５）。随着染毒剂量增加，氯化甲基汞对体外培养胚胎的发育毒性作用明显增强，呈剂量－反应关系，浓度达１．６μｇ／ｍｌ时全部胚胎均死亡。氯化甲基汞在＜０．８μｇ／ｍｌ时并不影响ＶＹＳ胎盘的生长发育，表现在ＶＹＳ直径、ＶＹＳ血管形成和电镜观察ＶＹＳ的超微结构均与对照组无显著性差异，说明氯化甲基汞能迅速透过胎盘，直接攻击胚胎细胞。提示氯化甲基汞的直接细胞毒作用，可能是其体外致畸作用、胚胎毒性作用的一个重要机制。     

AlCl3致胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 探讨铝的发育毒性及机理。方法 孕9.5d SD大鼠胚胎于体外培养系统中给予不同剂量（以Al3+计,0.6、0.9、1.2、3.0、6.0和9.0μg/ml）的 AlCl3,培养48h后,对胚胎进行Bgown’s形态评分,测量卵黄囊直径、胚胎体长及头长、胚胎干重。结果 随着铝剂量的增加,反映胚胎生长发育和器官分化的各项指标呈现出下降趋势,有一定的剂量-效应关系（r=-0.890～-0.973,P<0.001）。其中,卵黄囊及血管网发育分化、心脏发育及体翻转在Al3+剂量为1.2μg/ml时与对照组比较下降有显著性（P<0.05）。Al3+浓度大于或等于3.0μg/ml,胚胎发育及形态分化显著受到抑制（P<0.05或P<0.01）,同时胚胎畸形发生率明显升高（P<0.05）,主要表现为神经管闭合不全、脑发育不良和体翻转不全。结论AlCl3有一定的胚胎毒性和致畸性。     

采用微团培养技术探讨双酚A的体外发育毒性

采用微团培养观察了不同浓度的双酚A(0～ 5 0mg L)对体外培养的Wistar大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响 ,旨在了解双酚A的体外发育毒性特点及其可能的作用机制。结果显示 :双酚A对体外培养的Wistar大鼠胚胎肢芽细胞的增殖和分化均有抑制作用 ,表现为染毒组肢芽细胞集落形成数量减少 ,细胞毒性试验吸光度值下降 ,并呈现出明显的剂量 反应关系。双酚A对肢芽细胞的 5 0 %增殖抑制浓度 (IP50 )和5 0 %分化抑制浓度 (ID50 )分别为 38 74mg L和 2 7 93mg L ,IP50 ID50 =1 39。按照Renault等人推荐的体外致畸分类标准 ,双酚A属于阳性致畸物 ,对肢芽细胞的分化和增殖有特异性抑制作用     

人参皂甙Rb1和Rg1对体外培养大鼠胚胎生长发育的影响

目的探讨人参皂甙Rb1和Rg1对体外培养大鼠胚胎的发育毒性。方法采用植入后全胚胎培养模型,将9.5d龄的SD大鼠胚胎在含有不同浓度人参皂甙Rb1和Rg1的大鼠即刻离心血清中旋转培养48h(Rb1终浓度分别为0、5、15、30、40、50mg/L;Rg1终浓度分别为0、10、30、50mg/L),观察人参皂甙Rb1和Rg1对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果随着人参皂甙Rb1和Rg1浓度的增加,胚胎生长发育指标得分和胚胎总形态学得分均降低,人参皂甙Rb1浓度≥30mg/L时,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05),胚胎体位、心脏和视觉系统得分亦显著减低;当浓度达到50mg/L时,前后肢芽开始受到影响;Rg1浓度≥10mg/L时,胚胎生长发育指标得分与对照组相比,差异有显著性(P<0.05);当浓度≥30mg/L时,前后肢芽得分显著降低(P<0.05);浓度达到50mg/L时,体位、心脏和体节受到影响。结论人参皂甙Rb1和Rg1在较高浓度时对体外培养的大鼠胚胎有一定的毒性作用。     

稳恒磁场对大鼠胚胎肢芽细胞发育毒性的研究

目的 研究稳恒磁场对肢芽细胞增殖和分化的强度效应关系。方法 利用大鼠胚胎肢芽细胞进行原代培养,观察培养物经不同强度的稳恒磁场,对细胞增殖和分化的影响。有效期利用图像分析细胞形态的变化。结果 各组磁场强度能明显抑制肢芽细胞增殖和分化,集落形成率明显减少,并显示强度效应关系。拟合细胞分化和增殖抑制曲线,计算得大鼠半数分化抑制强度（ICD50）为35mT,半数存活抑制强度（IVD50）为48mT。结论 抑制细胞分化、增殖可能是稳恒磁场强度致发育危害的结果。     

人参皂甙Rb1对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的　探讨人参皂甙Rb1对体外培养小鼠胚胎的发育毒性及其毒作用机制。方法　采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 .5日龄的ICR小鼠胚胎在含有不同浓度人参皂甙Rb1的大鼠即刻离心血清中旋转培养 4 8小时 (Rb1终浓度分别为 0、5、15、30、4 0、5 0 μg ml) ,观察人参皂甙Rb1对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果　随着人参皂甙Rb1浓度的增加 ,反映胚胎生长发育的指标得分和总形态学得分均降低 ;浓度≥ 15 μg ml时 ,卵黄囊生长受抑制 ,血管分化不良 ;浓度较高时 ,可诱发胚胎畸形 ,包括脑部发育异常、体位未翻转、心包腔扩大等 ,严重者可见腹凸。结论　在较高浓度时 ,人参皂甙Rb1对体外培养的小鼠胚胎有一定的毒性作用 ,其中对卵黄囊胎盘结构和功能的影响可能是其发育毒作用的机制之一。     

Human endometrial cell coculture reduces the endocrine disruptor toxicity on mouse embryo development

ABSTRACT: Backgrounds Previous studies suggested that endocrine disruptors (ED) are toxic on preimplantation embryos and inhibit development of embryos in vitro culture. However, information about the toxicity of endocrine disruptors on preimplantation development of embryo in human reproductive environment is lacking. METHODS: Bisphenol A (BPA) and Aroclor 1254 (polychlorinated biphenyls) were used as endocrine disruptors in this study. Mouse 2-cell embryos were cultured in medium alone or vehicle or co-cultured with human endometrial epithelial layers in increasing ED concentrations. RESULTS: At 72 hours the percentage of normal blastocyst were decreased by ED in a dose-dependent manner while the co-culture system significantly enhanced the rate and reduced the toxicity of endocrine disruptors on the embryonic development in vitro. CONCLUSIONS: In conclusion, although EDs have the toxic effect on embryo development, the co-culture with human endometrial cell reduced the preimplantation embryo from it thereby making human reproductive environment protective to preimplantation embryo from the toxicity of endocrine disruptors. Key words: Bisphenol A, Aroclor 1254, Mouse embryo, human endometrial cells, Endocrine disruptors.     

氟、砷联合发育毒性的体外实验研究

用全胚胎培养模型探讨了氟、砷联合染毒对体外培养４８ｈ大鼠胚胎的发育毒性。结果显示，不同浓度氟与砷的联合作用类型属协同作用（Ｐ＝０．０００１）。除２．５ｍｇ／Ｌ氟＋０．５ｍｇ／Ｌ砷组外，其它各联合组的反映胚胎生长发育的指标（颅臀长、头长、体节数和胚胎干重）与对照组比较，均具有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。从氟砷联合胚胎毒性结果来看，二者相互增毒作用亦相当明显。例如３．０ｍｇ／Ｌ砷所致胚胎死亡率是１１．１％，但加２．５，１０和２０ｍｇ／Ｌ氟后，死胎率远大于二者单独作用之和，分别为３３．３％、４４．４％和１００％     

甲酰四氢叶酸拮抗乙醇发育毒性的体外小鼠胚胎实验研究

目的探讨甲酰四氢叶酸对乙醇发育毒性的干预作用。方法采用植入后全胚胎培养技术，将GD8．5的ICR小鼠胚胎用乙醇（4．0g／L）染毒，然后用不同浓度甲酰四氢叶酸（10^-5mol／L、10^-4mol／L、10^-3mol／L）干预。培养48h后对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化进行评分。结果随甲酰四氢叶酸干预浓度的增高，反映胚胎生长发育的指标得分与阳性对照组相比，均有不同程度的提高。其中，10^-5mol／L甲酰四氢叶酸干预后，后脑、中脑、前脑、听觉、视觉、嗅觉系统形态分化方面有明显提高，与阳性对照组相比，差异有显著性（P〈0．05）。10^-4mol／L甲酰四氢叶酸对胚胎颅臀长、头长明显增长，10^-3mol／L对体节数明显增加，与阳性对照组相比，差异均有显著性（P．〈0．05）。结论甲酰四氢叶酸可能有拈抗乙醇发育毒性的作用。     

维生素B_(12)对体外乙醇诱发小鼠胚胎畸变的影响

目的探讨维生素B12(VB12)对乙醇发育毒性的干预作用。方法采用植入后全胚胎培养技术(WEC),将GD8.5的ICR小鼠胚胎用4.0g/L乙醇处理,同时用不同浓度VB12(10-6、10-5和10-4mol/L)干预。在大鼠即刻离心血清中旋转培养48h后对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化进行评分。结果应用不同浓度VB12干预后,反映胚胎生长发育和组织器官形态分化的指标得分与阳性对照组相比,均有不同程度的提高。其中,10-5mol/LVB12干预组对胚胎生长发育干预得分总和最高,颅臀长、头长、体节数与阳性对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。10-4mol/LVB12干预组对胚胎组织器官形态分化干预得分总和最高,除尿囊、心脏、上颌突、下颌突指标外,其他与阳性对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。结论VB12有拮抗乙醇发育毒性的作用。     

The 1986 McCollum award lecture. Fuel-mediated teratogenesis during early organogenesis: the effects of increased concentrations of glucose, ketones, or somatomedin inhibitor during rat embryo culture

Whole rat embryos were explanted at head-fold, late pre-somite stage (day 9.5 of gestation) and cultured in rat sera varyingly supplemented with glucose (3, 6, 9, or 12 mg/mL), D,L sodium beta-hydroxybutyrate (2, 4, 8, or 16 mM), or both (6 mg/mL D-glucose plus 8 mM beta-hydroxybutyrate). During 48 h culture, increasing glucose alone or beta-hydroxybutyrate alone effected growth retardation and faulty neural and extraneural organogenesis in dose-dependent fashion. Synergistic dysmorphogenic effects occurred when minimally teratogenic concentrations of glucose and beta-hydroxybutyrate were combined. Sera from diabetic animals containing somatomedin inhibitor bioactivity were also able to produce growth retardation and major developmental lesions in presence of amounts of glucose and ketones which of themselves were not teratogenic. Thus, aberrant fuels and fuel-related products can impair growth and organogenesis in early post-implantation embryo. Such fuel-mediated teratogenesis may be multifactorial and include possibilities for synergistic and additive interactions.