^11G—MET PET在脑肿瘤中的应用

^11G-NET（^11G-蛋氨酸）是目前用于肿瘤PET最多的氨基酸类显像剂之一，它能反映体内氨基酸的转运、肿瘤氨基酸的代谢及蛋白质的合成。^11G-MET PET能用于脑肿瘤的诊断、区分肿瘤复发及放射性坏死，早期评价治疗效果，尤其对肿瘤周边组织及低度恶性肿瘤的诊断要优于^18F-FDG PET、CT和MRI。     

Gd标记抗人大肠癌单克隆抗体CL—3对裸鼠肿瘤模型MRI诊断的？…

目的 （１）探索磁共振成像（ＭＲＩ）造影剂标记单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的条件；（２）观察肿瘤特异性ＭＲＩ造影剂Ｇｄ－ＤＴＰＡ－ＭｃＡｂ对肿瘤组织的增强效果。     

生长分化因子11对高糖环境中人甲状腺乳头状癌K1细胞凋亡的影响

 目的 探讨生长分化因子11(growth differentiation factor 11,GDF1)对高糖环境中人甲状腺乳头状癌K1细胞凋亡的影响。方法 将人甲状腺乳头状癌K1细胞分为3组:对照组(Vehicle)、高糖组(HG)和GDF11组(HG+GDF11;GDF11)。各组细胞培养3 d后,流式细胞术检测细胞凋亡率,western blot检测凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2的蛋白水平,实时荧光定量逆转录PCR检测核转录因子E2相关因子(nuclear factor erythroid2-related factor 2,Nrf2)的转录表达,活性氧(ROS)试剂盒检测细胞内的ROS水平。结果 与对照组相比,高糖环境中K1细胞的凋亡率降低,Bcl-2/Bax蛋白表达比升高,Nrf2基因表达上调,细胞内ROS水平下降;而GDF11干预显著提高高糖环境中K1细胞的凋亡率,降低Bcl-2/Bax蛋白表达比,下调Nrf2基因转录表达,并提高细胞内的ROS水平。结论 GDF11可能通过提高高糖环境中K1细胞内的氧化应激反应促进细胞凋亡。     

U-74389G对大鼠脑创伤后细胞凋亡及bcl-2表达的影响

目的探讨脂质过氧化反应与脑损伤后细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系。方法在大鼠液压颅脑损伤模型中,观察其运动神经功能;脑创伤后细胞凋亡的形态和生化特征;伤后bcl-2基因表达情况;比较伤前给予U-74389G对上述指标的影响。结果治疗组的颅脑伤大鼠伤后行走功能、平衡功能障碍程度明显低于未治疗组（P<0.01）。治疗组大鼠不同脑区各个时间点凋亡细胞数均显著减少,DNA电泳未见凋亡带谱。Bcl-2免疫反应阳性细胞主要位于伤侧大脑半球皮质、皮层下白质、海马及齿状回的神经细胞。表达Bcl-2蛋白的神经细胞很少见到凋亡或坏死的形态特征。Bcl-2早期改变出现在伤后6h,比细胞凋亡出现早。注射U-74389G能阻止bcl-2蛋白下调。结论U-74389G能阻止大鼠液压脑损伤后bcl-2基因表达下调,抑制脑创伤所致细胞凋亡,具有明显的神经保护作用。     

储存磷光质屏放射自显影在测定兔血浆中^125I—重组人尿激酶原浓度的应用

目的　探讨储存磷光质屏放射自显影结合聚丙烯酰胺凝胶电泳测定兔血中12 5I 重组人尿激酶原 (12 5I rhpro UK)浓度的方法。方法　将含12 5I rhpro UK样品的聚丙烯酰胺凝胶贴于储存磷光质屏上曝光 ,根据储存磷光质屏上检出的吸收度值计算12 5I rhpro UK浓度。结果与结论　该方法特异性、线性及线性范围、灵敏度、重现性、回收率均可达到蛋白多肽药物药代动力学研究的要求。并测定了 0 .8mg·kg-1静脉给药时 (12 5I rhpro UK/rhpro UK =1∶9混合 ) ,兔血浆12 5I rhpro UK浓度 -时间曲线     

烧伤早期肺细胞间粘附分子—1的变化及意义

检测了肺组织及支气管肺泡灌洗液（BALF）中的髓过氧化酶（MPO）含量，免疫组化及原位杂交法检测了肺组织ICAM-1蛋白及其mRNA的表达，流式细胞术检测外周血PMN的CD11b/CD18表达，以了解ICAM-1在烧伤早期PMN肺内聚集过程中的作用。结果显示伤后2、6、12、24h烧伤组动物肺组织及BALF中MPO含量显著高于对照组，肺组织ICAM-1及其mRNA均表达增多，外周血PMN表面CD11b/CD18表达增多，提示烧伤早期肺内PMN的聚集很可能与烧伤早期肺血管内皮表达ICAM-1及表达CD11b/CD18增多有关。     

人CD40分子基因的克隆及其在COS—7细胞中的表达

目的：克隆编码人ＣＤ４０分子基因的全长ｃＤＮＡ,在ＣＯＳ－７细胞中获得高表达。方法：提取人Ｂ淋巴细胞看Ｄａｕｄｉ总ＲＮＡ,以ＲＴ－ＰＣＲ技术克隆了编码人ＣＤ４０基因全长ｃＤＮＡ,序列测定证实其正确性。将测序正确的ＣＤ４０基因克隆入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１构建重组表达载体。采用脂质体转染试剂脂染胺（Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ）杂ＣＯＳ－７细胞,用流式细胞仪,免疫细胞化学和免疫荧光法检测ＣＤ４０基     

小鼠脾细胞核蛋白提取及核因子—kB活性的检测

应用高盐溶液提取法,高速离心分离纯化创伤小鼠脾细胞核蛋白,其核提取物经蛋白电泳分析,可见清晰蛋白条带。凝胶滞留法检测NF－kB的DNA结合活性灵敏可靠。该方法的建立,为研究基因转录调控的表达奠定了基础。     

γ射线照射对两种组织修复细胞的直接效应与W11-a12的作用

目的 探讨电离辐射是否对成纤维细胞和血管内皮细胞的增殖游走功能具有直接抑制作用及其抑制程度,以及W11－a12的促愈使用。方法 采用培养的单层3T3细胞（小鼠胚胎FBs株）和培养的单层ECV304细胞（人脐静脉内皮细胞株）划痕伤口模型进行离体照射,观察痕隙闭合速度。结果 在6Gy照射后培养的单层3T3细胞与单层L－ECV304细胞划痕“伤口”闭合明显延缓。单层3T3细胞在伤后10h对照组伤口完全闭合,而照射组仅闭合77％;照射组单层ECV304细胞在伤后12h仅为对照组的83．6％。W11-a12用药组对单层3T3细胞与ECV304细胞“划痕”伤口的闭合均有促进作用。结论 放射损伤对成纤维细胞与血管内皮细胞的增殖游走有直接抑制作用,这是伤口难愈的重要原因之一。促进伤口细胞游走和增殖是W11－a12作用的一个重要途径。     

西妥昔单抗联合照射对结直肠癌CL187细胞的抑制作用及机制探讨

目的 研究西妥昔单抗(C225)联合外照射对结直肠癌CL187细胞生物学效应的影响,并探讨相关分子机制。方法 结直肠癌CL187细胞分单纯照射组和C225处理的联合照射组,受6 MV X 射线照射0、4和8 Gy后24和48 h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测吸光度(A)值,比较两组细胞死亡率的差异。利用克隆形成实验比较两组细胞增殖能力的差异。采用流式细胞仪,检测细胞周期和细胞凋亡。蛋白免疫印迹法分析两组细胞DNA-PKcs、Ku70和Ku80蛋白表达量的变化。结果 联合照射组较单纯照射组死亡细胞比例增加(t=-6.14、-6.53,P<0.05),细胞克隆形成能力下降。C225增强了射线对细胞的杀伤作用,放射增敏比SER为1.38。联合照射组G₀/G₁期细胞阻滞增加(t=-4.64, P<0.05),细胞凋亡比例增加(t=-9.16, P<0.05),DNA修复相关蛋白DNA-PKcs、Ku70和Ku80蛋白表达量减少。结论 西妥昔单抗增强照射对结直肠癌CL187细胞的杀伤作用,可能是通过影响细胞周期、细胞凋亡和DNA损伤修复基因实现的。     

rhIL-11对正常IEC-6细胞的增殖及细胞周期的影响

目的通过研究重组人白介素11(rhIL-11)对正常IEC-6细胞增殖、细胞周期及其IL-11受体表达的影响,探讨IL-11对小肠上皮细胞的调控作用以及相关机制。方法利用MTT法检测rhIL-11对正常IEC-6细胞增殖的影响,通过流式细胞仪检测细胞周期的变化,并采用Westem blot方法检测IEG-6细胞表面IL-11受体α链的表达情况。结果rhIL-11可引起正常IEC-6细胞发生增殖抑制和明显的G／G1期阻滞,并诱导细胞表面IL-11受体α链表达增加。结论rhIL-11可能通过与IEG-6细胞表面特异性受体结合,从而启动胞浆内信号转导通路,引起细胞效应。     

绞股蓝皂甙诱导人口腔鳞癌颈淋巴结转移癌细胞凋亡的研究

 目的 探讨绞股蓝皂甙诱导人口腔鳞癌颈淋巴结转移癌GNM细胞凋亡的发生机制.方法 采用活细胞观察、超微结构观察、流式细胞仪及DNA琼脂糖凝胶电泳进行观察和检测.结果 50μg/ml的绞股蓝皂甙作用于GNM细胞后,细胞出现典型的核染色质凝集、核固缩、破裂;用FCM检测到G1峰前出现亚二倍体核型峰,DNA琼脂糖凝胶电泳带呈现DNA断裂损伤.结论 绞股蓝皂甙可诱导人口腔鳞癌颈淋巴结转移癌细胞发生凋亡.诱导细胞凋亡可能是其抑癌机理之一.     

不同LET12C6+照射人肝癌细胞SMMC-7721的存活曲线

目的 研究不同传能线密度(LET)的重离子^12C^6 对体外培养的人肝癌细胞SMMC7721存活的影响，以研究人肝癌细胞对不同LET重离子的辐射敏感性。方法 用克隆形成法研究细胞的存活情况。结果 70keV／μm的细胞存活率为10％(Ds=0.1)和1％(Ds=0.01)时的吸收剂量分别为2．94Gy和5．88Gy；30keV／μm的Ds=0.1和Ds=0.01分别为4．00Gy和8．00Gy。结论 70keV／μm比30keV／μm对人肝癌细胞SMMC—7721有更大的细胞杀死效应。     

CpG ODN107增强人脑胶质瘤细胞放射敏感性的研究

目的：探讨CpG ODN 107增加人脑胶质瘤细胞CHG-5放射敏感性的作用及可能机制.方法： 用不同浓度CpG ODN 107处理CHG-5细胞,然后经β射线照射,MTT法检测细胞的增殖情况,体外培养集落形成率与细胞划痕法观察细胞的集落形成和迁移能力,ELISA法检测细胞TNF-α的分泌水平.结果：CpG ODN 107抑制CHG-5细胞的增殖,并呈量效关系.CpG ODN 107（10 μg/ml）联合β射线照射,抑制CHG-5细胞的增殖作用最强.CpG ODN 107（10 μg/ml）同样能抑制CHG-5细胞增殖和迁移,并且增加了TNF-α的分泌,在联合β射线照射后作用更加显著.结论： CpG ODN 107对CHG-5有明显的放射增敏作用,其机制可能与CpG ODN 107增强肿瘤细胞TNF-α的分泌有关.     

干细胞因子对红白血病细胞系TF-1凋亡的抑制作用

目的 :探讨干细胞因子 (stemcellfactor ,SCF)阻止红白血病细胞系TF 1进入凋亡程序的作用。方法 :进行3H TdR掺入实验、细胞存活实验、细胞基因组DNA电泳分析和流式细胞术分析。结果 :发现TF 1细胞对SCF的反应存在量 半高效关系 ,在SCF存在时细胞存活率明显提高 ,TF 1细胞系在SCF饥饿 2 4h时出现DNA梯型条带 ;流式细胞术检测显示 ,在SCF饥饿 36h后 ,在G1峰前出现凋亡特有的AP峰。结论 :SCF有阻滞或抑制红白血病细胞系TF 1凋亡的作用。     

庚型肝炎病毒(HGV RNA)基因的定量检测

目的 :建立庚型肝炎病毒基因 (HGVRNA)的定量检测方法。方法 :采用荧光转换原理 ,应用特异荧光物质标记的引物进行逆转录PCR(RT_PCR) ,检测 4 1例临床血清标本的HGVRNA。结果 :与巢式定性PCR结果比较 ,两者具有相关显著性。以定量实验为标准定性实验的阳性漏检率为 3.33% ,阴性漏检率为 18.1% ,两者相对符合率为 92 .6 8%。结论 :定量检测HGVRNA在定性的基础上提供了量的结果 ,而且具有特异性强、结果稳定、操作简便等特点     

洛铂对鼻咽癌细胞CNE2体外放射增敏作用的研究

目的 研究洛铂联合外照射对人鼻咽癌细胞系CNE2的杀伤和放射增敏作用及其机制。方法 以对数生长期的人鼻咽癌细胞系CNE2为研究对象,MTT法检测单纯洛铂和洛铂联合照射对CNE2细胞的增殖抑制作用;克隆形成试验分析洛铂对CNE2细胞的放射增敏作用;流式细胞仪检测单纯洛铂组和洛铂联合照射组细胞凋亡及细胞周期分布;蛋白免疫印迹检测Bcl-2、 Bax和Caspase-3蛋白表达。结果 洛铂对CNE2有增殖抑制作用,且细胞毒性呈剂量依赖性,IC₅₀为1.610 μmol/L,洛铂联合照射⁶⁰Co γ射线4 Gy对CNE2细胞IC₅₀为0.077 μmol/L。洛铂联合照射组放射增敏比大于3。24 h内随洛铂浓度增加,鼻咽癌细胞进入G₂/M期比例增多。而洛铂联合照射将鼻咽癌细胞更多地阻滞于G₂/M期,当洛铂浓度增大到6 μmol/L,洛铂联合照射组主要将细胞阻滞于S期。洛铂5 μmol/L作用24 h可引起15.6%的细胞凋亡,4 Gy照射可引起11.3%细胞凋亡,洛铂联合照射组可引起61.8%的细胞凋亡。蛋白免疫印迹结果显示,洛铂联合照射组抑制凋亡蛋白Bcl-2表达水平下降,促进凋亡诱导蛋白Bax以及活化的Caspase-3表达水平升高。结论 洛铂对人鼻咽癌CNE2细胞有放射增敏作用,作用机制可能与抑制Bcl-2表达,促进Bax表达,激活Bcl-2（Bax）-Caspase信号通路有关。     

活性炭纳米粒子对人胃癌BGC-823细胞作用的体外实验研究

目的：探讨活性炭纳米粒子（activated carbon nanoparticles,ACNP）对人胃癌BGC-823细胞的作用。方法：将ACNP以不同浓度和时间作用于BGC-823细胞,通过MTT试验观察ACNP对细胞增殖的抑制作用;测定培养上清液乳酸脱氢酶（LDH）活性,判断细胞损伤状况;用甲基绿-派洛宁染色法及透射电镜观察细胞凋亡形态;用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期。结果：ACNP能明显抑制BGC-823细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性,作用24,48,72h后的半数抑制浓度（IC50）分别是1．57,1．18,0．87g／L。低浓度ACNP（0．1,0．2g／L）作用24h后,LDH漏出量与对照组相比没有显著差异。0．1g／L的ACNP作用24h后,细胞出现凋亡特征的形态学改变。0．1,0．2g／L的ACNP作用24h后,细胞凋亡率分别为（5．01±1．16）％、（8．21±1．63）％,与对照组（2．48±0．58）％比较均有显著性差异;ACNP作用组的S期细胞所占比例明显增高。结论：ACNP抑制BGC-823细胞的增殖,可使细胞阻滞于S期。诱导细胞凋亡。     

紫外线对角质形成细胞的细胞因子分泌的影响

目的　观察紫外线 (ultraviolet,U V)对体外培养的角质形成细胞株 (Ha Ca T细胞 )细胞因子分泌的影响。方法　 UV照射佛泊脂和脂多糖 (PMA/L PS)刺激的 Ha Ca T细胞 ,用 EL ISA法检测细胞培养上清液中细胞因子 IL - 1α、IL - 2、IL - 6和 IL - 8的含量。结果　正常 Ha Ca T细胞有 IL - 1α、IL - 2、IL -6和 IL - 8的自发性分泌。 PMA和 L PS刺激 Ha Ca T细胞 ,其 IL - 1α分泌量下降 (P<0 .0 5 ) ,IL - 6和 IL - 8分泌量明显增加 (P<0 .0 1)。正常 Ha Ca T细胞经 U V照射 ,IL - 1α、IL - 2、IL - 6的分泌无明显变化 (P>0 .0 5 ) ,IL - 8分泌量升高 (P<0 .0 5 )。 PMA和 L PS刺激的 Ha Ca T细胞经 UV照射 ,其 IL - 1α、IL - 6和 IL -8的分泌量明显增加 (P<0 .0 1)。结论　 U V对不同状态下 Ha Ca T细胞的作用是不同的