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1.
目的 研究乙酸铅染毒人外周血淋巴细胞致氧化应激与DNA氧化损伤情况。
方法 分别用浓度为0 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L和80 μmol/L的乙酸铅染毒人外周血淋巴细胞6 h、12 h、24 h, 应用2', 7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色分析和流式细胞仪检测染毒后细胞内活性氧类(ROS)水平, 高度水溶性四唑盐(WST-1)法检测染毒后细胞内总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性, 酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒检测染毒后细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平, 并对ROS、T-SOD、8-OHdG三指标间的关系进行相关性分析。
结果 乙酸铅染毒6 h后, 各染毒组人外周血淋巴细胞ROS水平均高于对照组, 差异有统计学意义(P < 0.01);20 μmol/L染毒组人外周血淋巴细胞T-SOD和8-OHdG水平与对照组相比, 差异无统计学意义(P>0.05), 而40 μmol/L和80 μmol/L染毒组人外周血淋巴细胞T-SOD和8-OHdG水平均高于对照组, 差异有统计学意义(P < 0.01)。乙酸铅染毒12 h和24 h后, 各染毒组人外周血淋巴细胞ROS、T-SOD和8-OHdG水平均高于对照组, 差异有统计学意义(P < 0.01)。相关性分析显示, 细胞内ROS含量与T-SOD活性呈负相关(r6 h=-0.865、r12 h=-0.890、r24 h=-0.801, P < 0.01), 与8-OHdG含量呈正相关(r6 h=0.840、r12 h=0.829、r24 h=0.866, P < 0.01)。
结论 乙酸铅染毒人外周血淋巴细胞后会诱导细胞ROS生成, 抑制细胞内抗氧化酶SOD活性, 造成人外周血淋巴细胞氧化应激状态增强和DNA氧化性损伤。
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2.
目的比较不同训练方式对大鼠骨骼肌线粒体通透性转换孔(MPTP)及细胞凋亡的影响。方法以大鼠游泳训练和一次性力竭游泳为运动模型,将24只SD大鼠随机分为对照组(C)、游泳训练组(T)和一次性游泳力竭组(E)。T组大鼠进行无负重游泳训练6周,每周6次,1~2周每次训练45min,3~4周每次60min,5~6周为90min,末次训练24h后取股四头肌;E组正常饲养6周后于一次性力竭游泳后即刻取股四头肌。用紫外分光光度仪检测MPTP的开放;RT-PCR检测Bcl-2和Bax mRNA的表达;western blot检测细胞色素c(Cytc)的释放。结果①游泳训练没有导致大鼠骨骼肌MPTP的开放发生显著性变化,Bcl-2mRNA表达明显增强,Bax mRNA的表达及Cytc的释放量显著减少。②一次性力竭游泳导致大鼠骨骼肌MPTP的开放程度显著增大,Bcl-2mRNA表达显著降低,Bax mRNA表达和Cytc释放量显著增加。结论不同训练方式会通过调节骨骼肌线粒体通透性转换孔的开放及凋亡蛋白的释放来调节细胞凋亡。  相似文献   

3.
刘敏  孟显峰  宋扬  杨富国 《中国公共卫生》2014,30(10):1285-1288
目的 探讨植酸(IP6)如何通过线粒体途径诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,为研究IP6的抗肿瘤作用提供理论依据。方法 应用Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞仪Annexin-FITC/PI双染法观察不同浓度IP6作用HepG2细胞后的凋亡情况;流式细胞仪检测IP6作用HepG2细胞后线粒体膜电位(ΔΨm)的变化;RT-PCR法检测HepG2细胞内caspase-3mRNA的表达变化;Western blot法检测IP6作用HepG2细胞后Cyt-c的表达变化。结果 荧光显微镜下可观察到IP6作用后细胞出现明显的凋亡形态;与对照组相比,IP6可升高细胞凋亡率(F=342.15,q=2.9~28.53,P<0.05),且随着浓度增加,凋亡率逐渐升高(P<0.05);IP6可降低线粒体膜电位(F=14802.610,q=101.531~209.237,P<0.05),且随着浓度增加,膜电位逐渐降低(P<0.05);IP6可增加caspase-3 mRNA的表达(F=30.474,q=3.406~9.103,P<0.05),且随着浓度增加,表达逐渐增加(P<0.05);IP6可上调细胞色素C(Cyt-c)的表达(F=87.194,q=5.246~15.218,P<0.05),且随着浓度增加,表达逐渐上调(P<0.05)。结论 IP6可通过降低线粒体膜电位,上调细胞色素C水平,激活caspase-3途径,促进人肝癌HepG2细胞发生凋亡。  相似文献   

4.
维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞凋亡中线粒体的作用   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的探讨在维生素E琥珀酸酯(vitaminEsuccinate,VES)诱导人胃腺癌SGC7901细胞凋亡过程中线粒体的作用。方法SGC7901细胞经5、10、20μgmlVES处理后,用荧光染色法观察线粒体跨膜电位(Δψm)改变,用WesternBlot法检测细胞质中细胞色素c的表达情况和caspase3的表达与激活。结果VES可使线粒体Δψm明显降低,有明显的剂量效应和时间效应关系。胞质中细胞色素c和caspase3表达增加,同时激活caspase3。结论VES可能是通过使线粒体通透性改变并释放细胞色素c,激活下游caspase3,从而诱导SGC7901细胞凋亡。  相似文献   

5.
铅诱发蚕豆根尖细胞的遗传损伤   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的研究醋酸铅对蚕豆根尖细胞的遗传损伤效应。方法对籽粒饱满的蚕豆种子催芽24h后选根长1.0~1.5cm的蚕豆随机分组,用浓度为0.1、1.0、5.0、25.0、50.0mg/L的醋酸铅溶液处理,时间分别为12、24、36h,进行蚕豆根尖细胞微核试验。结果醋酸铅溶液可诱发蚕豆根尖细胞微核率显著升高(P<0.01),浓度超过0.1mg/L还可明显降低蚕豆根尖细胞有丝分裂指数(P<0.05),且高浓度短时间作用和低浓度长时间作用具有等效性。结论醋酸铅呈浓度依赖和时间依赖地显著降低蚕豆根尖细胞的有丝分裂指数,并诱发蚕豆根尖细胞微核率显著升高,利用蚕豆根尖细胞微核技术检测环境铅污染是可能的。  相似文献   

6.
目的:探讨三氯乙烯(TCE)对体外培养的人皮肤角质形成细胞线粒体的损伤作用:方法:不同浓度的TCE作用于体外培养的人皮肤角质形成细胞不同时间后.利用MTT法检测细胞活力改变,并据此计算线粒体酶活力抑制状况;利用试剂盒检测ATP酶活力抑制状况。结果:随着TCE浓度的升高和作用时间的延长,细胞活力、ATP酶活性下降,线粒体酶抑制率升高.当TCE浓度超过0.5mmol/L,作用时间大于8h时,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P〈0.05):结论:TCE可引起体外培养的皮肤KC细胞线粒体发生损伤。  相似文献   

7.
目的探讨乙酸铅经口暴露对雄性大鼠心血管系统炎性指标的影响。方法将40只健康成年SPF级雄性Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照(0 mg/kg)组和90、180、360 mg/kg乙酸铅染毒组,每组10只。采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为10 ml/kg,每天1次,每周连续染毒5 d,持续染毒60 d。测定大鼠血铅、血浆内皮素1(ET-1)、血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及血清和心脏组织匀浆中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;同时,观察大鼠心脏和胸主动脉组织病理学变化。结果与对照组相比,各剂量乙酸铅染毒组大鼠的血铅水平均升高,差异有统计学意义(P0.05);且随着乙酸铅染毒剂量的升高,大鼠的血铅水平呈上升趋势。与对照组相比,360 mg/kg乙酸铅染毒组大鼠血浆ET-1和血清ICAM-1水平均升高,差异有统计学意义(P0.05);且随着乙酸铅染毒剂量的升高,大鼠的血浆ET-1和血清ICAM-1水平均呈上升趋势。与对照组比较,360 mg/kg乙酸铅染毒组大鼠血清中IL-β、IL-8和TNF-α的水平及180 mg/kg乙酸铅染毒组大鼠血清中IL-8和TNF-α水平均升高,差异有统计学意义(P0.05);而各剂量乙酸铅染毒组大鼠血清中IL-6的水平均无明显改变。且随着乙酸铅染毒剂量的升高,大鼠血清中IL-β、IL-6、IL-8和TNF-α的水平均呈上升趋势。与对照组比较,仅360 mg/kg乙酸铅染毒组大鼠心脏组织匀浆中IL-8水平升高,差异有统计学意义(P0.05);而各剂量乙酸铅染毒组大鼠心脏组织匀浆中IL-1β、IL-6、TNF-α的水平均无明显改变。且随着乙酸铅染毒剂量的升高,大鼠血清中IL-8和TNF-α的水平均呈上升趋势,而IL-β、IL-6的水平均呈先上升后下降的趋势。大鼠血清和心脏组织匀浆中IL-8和TNF-α水平均呈正相关(均P0.05),而两者IL-1β和IL-6水平间无统计学相关性(P0.05)。病理学检查可见,180、360 mg/kg乙酸铅染毒组心脏组织出现炎性细胞浸润,360 mg/kg乙酸铅染毒组血管组织外膜出现炎性细胞浸润。结论乙酸铅对大鼠心血管系统具有一定的炎性损伤作用。  相似文献   

8.
陈晖  王磊  翁小东  刘修恒 《职业与健康》2013,(21):2743-2746
目的探讨用大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E建立一种可以用于缺血后处理研究的体外模型,并找到最佳的后处理方案。方法将NRK-52E随机分为4组:对照组(Sham),缺血再灌注(IRI)组,换液缺血后处理(HP)组,加液缺血后处理(HP+)组。通过体外糖氧剥夺3h后模拟缺血再灌注损伤。通过行循环10win再灌注/10win缺血,建立肾缺血后处理的体外模型。流式细胞仪用于检测细胞凋亡。蛋白印迹法检测细胞质内细胞色素C蛋白水平。结果NRK-52E经过细胞缺血再灌注24h后有明显凋亡(P〈0.05)。部分后处理组凋亡明显减轻(P〈0.05),其中以HP+组保护效果最佳。NRK-52经过细胞缺血再灌注24h后细胞质内细胞色素c蛋白的表达都明显升高(P〈0.05),缺血后处理组细胞相应的蛋白表达显著减轻,其中以HP+最为显著。结论成功建立NRK-52E缺血后处理的体外模型,其机制可能与通过抑制凋亡有关。  相似文献   

9.
目的 初步探讨乙酸铅诱导大鼠脑脉络丛Z310细胞的低剂量兴奋作用和高剂量抑制作用。方法 以浓度为0、0.000 2、0.002、0.02、0.2、2、20、200、500μmol/L的乙酸铅分别染毒Z310细胞12和24h,用噻唑蓝(MTT)法和2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐(WST-8)法检测细胞生存情况,并观察各剂量组细胞形态变化。结果 0.02μmol/L乙酸铅染毒24 h,MTT法检测Z310细胞存活率为107.06%,0.2μmol/L染毒组24 h时细胞存活率升高为110.91%;>2μmol/L乙酸铅染毒时,细胞存活率随剂量增加而降低;染毒24 h时,200、500μmol/L乙酸铅组细胞存活率(MTT法)分别下降至79.37%和76.81%(P<0.01);染毒12、24 h时,200、500μmol/L乙酸铅组细胞存活率(WST-8法)分别下降至81.67%和72.36%及56.89%和44.05%(P<0.05)。结论 低剂量乙酸铅可引起Z310细胞兴奋效应;高剂量乙酸铅引起Z310细胞抑制效应;WST-8法检测细胞存活率较MTT法更敏感。  相似文献   

10.
目的探讨神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)和皮层神经元对神经毒物乙酸铅和硫酸铝敏感性的差异,为神经元体外替代方法及实验研究提供一定的数据支持。方法原代培养皮层神经元及培养细胞系SH-SY5Y,乙酸铅和硫酸铝染毒浓度分别为25、50、100、200、400、800、1600、3200μmol/L,作用时间分别为3和24h,测定并计算细胞存活率和半数致死浓度(IC50)值。结果除硫酸铝作用24h外,皮层神经元的IC50值均低于SH-SY5Y;SH-SY5Y对乙酸铅IC50值均高于硫酸铝;皮层神经元对乙酸铅的IC50值低于硫酸铝。结论皮层神经元对乙酸铅和硫酸铝的毒性较SH-SY5Y敏感。若以皮层神经元为靶细胞,则乙酸铅相对敏感,若以SH-SY5Y作为靶细胞,则硫酸铝则更为敏感。  相似文献   

11.
[目的]研究纳米二氧化钛(TiO2)与醋酸铅(PbAc)联合作用于人胚肝细胞(L-02),对细胞内活性氧(ROS)、氧化应激作用及细胞活性的影响。[方法]以1.000mg/LPbAc和10.000、1.000、0.100、0.010、0.001mg/LTi02单独以及1.000mg/LPbAc及前述浓度Ti02混合处理L-02细胞24h,以体积分数为0.1%二甲基亚砜为阴性对照,30gmol/LH2O2为阳性对照。用噻唑蓝法检测细胞毒性,采用流式细胞术检测胞内ROS水平,检测谷胱甘肽(GSH)与超氧化物歧化酶(SOD)以评价细胞内抗氧化物质水平。[结果]与阴性对照、PbAc染毒组及其他浓度TiO。染毒组相比,10.000mg/LTi02染毒组细胞活力明显降低(P〈0.05)。与阴性对照、PbAc染毒组和其他浓度混合物染毒组相比,10.000mg/L混合物染毒组细胞活性明显降低(P〈0.05);1.000、0.100mg/L混合物染毒组细胞活力也明显低于阴性对照组(P〈0.05)。与阴性对照、PbAc染毒组相比,各浓度混合物染毒组细胞ROS水平均明显增加(P〈0.05).与阴性对照相比,1.000至0.010mg/L混合物染毒组细胞GSH水平均明显升高(P〈0.05),0.100、0.010mg/L混合物染毒组细胞SOD活性也明显升高(P〈0.05)。[结论]本研究条件下,低剂量纳米TiO2和PbAc共同作用于L-02,可增加活性氧水平,同时诱导细胞增加GSH和SOD水平以自我保护;随着染毒剂量升高,ROS水平明显增加,抗氧化能力下降,导致细胞活力下降。  相似文献   

12.
常青 《实用预防医学》2010,17(8):1535-1538
目的探讨铅诱导人脐静脉内皮细胞损伤效应及机制。方法用不同浓度的铅染毒人脐静脉内皮细胞,观察细胞形态和活性,通过检测细胞上清液丙二醛(MDA)、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、一氧化氮(NO)的含量和一氧化氮合酶(NOS)的活性等指标,观察铅对人脐静脉内皮细胞损伤的量-效关系(终浓度分别为1、2、4、8mg/L的铅处理细胞24h)和时-效关系(终浓度为4mg/L的铅分别于处理0、3、6、12、24、48h后观察检测指标)。实验分为正常对照组(加入与处理组等体积的D-Hank’s液,铅浓度为0mg/L)、铅处理组(加终浓度分别为1、2、4、8mg/L的铅)、铅VitC组(铅终浓度为4mg/L,VitC终浓度为100mg/L)和阳性对照组(加终浓度为500μg/L的过氧化氢)。结果 2~8mg/L的铅能显著改变细胞形态、降低细胞活性;能显著性诱导内皮细胞MDA升高。2~8mg/L的铅还能显著性诱导内皮细胞NO含量降低,具有显著的时间依赖性,各处理组间两两比较差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。4mg/L铅处理时细胞ADMA含量最高,且分别在处理后24h到达最高峰。结论 2~8mg/L铅能显著诱导人脐静脉内皮细胞损伤;ADMA在铅诱导人脐静脉内皮细胞损伤中有着重要作用。  相似文献   

13.
目的:醋酸乌利司他(ulipristal acetate,UPA)是一种孕激素受体调节剂,目前作为紧急避孕药物广泛应用于临床。本研究探索在体外UPA对人精子参数与功能的影响。方法:选择15例精液参数正常的标本,液化后以G-IVF调节精子浓度为2×106/mL。每例标本再分为6份,每份0.5 mL,共6组(n=15)。密度梯度离心后,其中4组分别在含0.04、0.4、4、40 μmol/L UPA的培养液中孵育1 h;另2组为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)对照组。检测各组精子活力、存活率、形态、DNA完整性、顶体反应、精子超活化、精子内游离钙离子浓度。结果:不同浓度的UPA体外处理精子,精子存活率、活力、形态与对照组(空白+DMSO)比较差异无统计学意义(P>0.05)。UPA浓度达到0.4 μmol/L时处理精子,精子损伤的比例和彗尾长度显著增加,精子超活化的比例降低(P<0.01);顶体反应被抑制,精子内钙离子浓度也显著降低(P<0.01)。结论:UPA在体外可抑制精子的顶体反应和超活化,降低精子内钙离子浓度,可能与UPA致精子损伤有关。  相似文献   

14.
[目的]比较纳米二氧化钛(nano-TiO2)和常规TiO2对细胞的毒性及DNA损伤有无差异。[方法]体外培养人肺腺癌细胞(A549细胞),采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)和单细胞凝胶电泳技术(彗星实验)比较25、50、100、200μg/mL质量浓度(以下简称“浓度”)的nano-TiO2(5-10nm)和常规TiO2的细胞毒性与DNA损伤作用。[结果]nano-TiO2对A549细胞的毒性与常规TiO2的变化趋势相近,nano-TiO2毒性大于常规TiO2,200gg/mL浓度时作用12h以上两者细胞存活率的差异有统计学意义(P〈0.05)。与对照组相比,nano-TiO2各剂量组尾DNA含量、Olive尾距、彗星尾长均明显增加(P〈0.05);常规TiO2在受试剂量下尾DNA含量、Olive尾距、彗星尾长与对照组比较均无明显增加。[结论]nano-TiO2对A549细胞的毒性高于常规TiO2,且nano-TiO2可诱导DNA损伤,而常规TiO2未观察到DNA损伤作用。表明nano-TiO2与常规TiO2在毒性大小和毒作用性质均有差异。  相似文献   

15.
外源性超氧化物歧化酶对醋酸铅免疫毒性的影响   总被引:3,自引:1,他引:3       下载免费PDF全文
目的探讨外源性超氧化物歧化酶(SOD)对醋酸铅免疫毒性的拮抗作用。方法采用免疫毒理学方法观察外源性SOD对醋酸铅免疫毒性的影响。结果醋酸铅染毒的昆明种小鼠血中碳粒廓清率、SRBC致敏小鼠迟发型过敏反应(DTH)、DNCB所致的迟发型皮肤过敏反应(DCH)、血清溶血素(Hc50)和免疫脏器系数均明显低于对照组,预先给于SOD后再给同剂量醋酸铅的小鼠除Hc50外上述各指标均有不同程度提高,免疫器官脂质过氧化物(LPO)含量,醋酸铅组明显高于对照组,而SOD-醋酸铅组LPO含量比醋酸铅组明显降低(P<0.01)。结论外源性SOD能拮抗醋酸铅所致的免疫毒性和脂质过氧化作用。  相似文献   

16.
五氯酚钠对鲤鱼肾细胞DNA损伤的体内和体外研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 研究五氯酚钠对鲤鱼肾细胞DNA的损伤效应.方法 选择健康鲤鱼,体内染毒实验:分别设3个五氯酚钠(Na-PCP)染毒组(14.4、28.8、144.0μg/L)和1个对照组(蒸馏水),每组3尾鲤鱼,染毒72 h.体外染毒实验:收集健康鲤鱼肾细胞悬液,分别设3个Na-PCP染毒组(14.4、28.8、144.0μg/L)和1个对照组(蒸馏水),染毒1.5 h.体内、外实验结束后,均采用单细胞凝胶电泳试验检测细胞DNA损伤程度,指标包括Olive尾距、彗尾长、尾距、彗尾DNA含量.结果 体内染毒结果显示,14.4、28.8、144.0μg/L组Olive尾距、彗尾长、尾距、彗尾DNA含量均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).体外染毒结果显示,除28.8 μg/L组外,14.4、144.0 μg/L组Olive尾距、彗尾长、尾距、彗尾DNA含量均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01).体内染毒的0、14.4μg/L组Olive尾距小于体外染毒,差异均有统计学意义(P<0.05);而体内染毒的28.8、144.0 μg/L组Olive尾距大于体外染毒,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 五氯酚钠能够诱导鲤鱼肾细胞DNA损伤.  相似文献   

17.
环境铅污染对妇女生育功能危害的调查   总被引:21,自引:0,他引:21  
为了探讨环境铅污染对妇女生育功能的影响,在铅污染区(P镇)和无铅污染区(C镇)选择991中孕妇作回顾性调查(年龄、职业、饮食燃料类型、吸烟史、妊娠周数、妊娠结局和新生儿体重等),并对部分孕妇作了血铅、红细胞锌的卟啉和红细胞精氨酶的含量的测定。结果P镇孕妇的B-Pb、Zpp和Arg值明显高于C镇孕妇,P镇的胎儿民活率,成活和出生体重及其妊娠周数等,明显低于C镇,而P镇的异常妊娠率,尤其是自然流产率,  相似文献   

18.
锰是一种重要的环境和工业污染物,职业工人长期接触锰,可出现类似帕金森病的临床表现。锰的毒性机制现在还不太清楚,研究表明其很可能与线粒体的结构和功能异常有关,然而关于锰对线粒体功能影响的报道较少,本文将近年来探讨锰致脑线粒体损伤机制的研究综述如下。  相似文献   

19.
氯化镉诱导293细胞凋亡的实验研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的 采用体外细胞培养方法观察CdCl2在不同时间、剂量作用下,诱导293细胞凋亡关系。方法 实验中选择0,12.50,25.0,50.0μmol/L共4种浓度CdCl2在体外与293细胞共育不同时间后(12h24h,48h),采用台盼蓝拒染法测定细胞存活率,观察293细胞转化,用DNA凝胶电泳及ELISA方法检测细胞凋亡。结果 12.5,25.00,50.00μmol/LCdCl2可诱导细胞亡;不同浓度CdCl2可引起细胞存活率下降,与CdCl2时间、剂量有关。结论 CdCl2在体外可诱导293细胞凋亡,与CdCl2的作用时间、作用浓度有关。  相似文献   

20.
目的研究氨基酚类化合物对人外周血淋巴细胞及小鼠脾脏细胞DNA的损伤效应。方法选用人淋巴细胞及小鼠脾脏细胞进行研究。暴露时间为1h。应用单细胞凝胶电泳技术,计算细胞损伤率及专用单位。结果3种氨基酚类化合物均能引起两种细胞不同程度的DNA损伤,高剂量组与阴性对照组相比,差异均有显著性(P<0.05),其中对氨基酚的毒性高于邻氨基酚和间氨基酚,其损伤的程度随剂量的增加而增加。结论与小鼠脾脏细胞相比,人外周血淋巴细胞的敏感性较强,更能直接反映氨基酚类化合物对人群的遗传毒性。  相似文献   

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