以放疗的前列腺癌患者淋巴细胞微核率评价生物照射剂量(英文)

目的　进一步验证微核率作为测量生物照射剂量的可行性。方法　 8例未经放疗 (xRT)和化疗的前列腺癌 ,经标准分区骨盆xRT治疗方案 ,收集前列腺癌患者xRT前和xRT中外周血 ,测定阻滞胞质分裂的外周血淋巴细胞 (PBL)微核率。检测项目包括 :(1)检查微核率和估计的等效全身吸收剂量之间的关系 ;(2 )评价xRT前PBL微核率的辐射剂量效应关系的个体差异。结果　 (1)患者PBL微核率随估算的全身吸收射线量 [y =1.46 + 9.2D (R2 =0 .7,P =0 .0 72 ) ]增加而呈线性增加 ;微核呈广泛分布 ;每10 0 0个双核PBL微核率相应增加的比例分别高于基线水平 0 .9～ 8.2倍 (中位数 4.1)。 (2 )xRT前 ,微核率也随体外照射剂量增加而增加 ,每 1照射剂量下 ,大多数患者微核率呈高度离散分布。 3例因xRT引起的早期副反应患者中 ,2例的PBL微核率明显高于无xRT引起副反应者。结论　PBL微核率可用来测定体外生物照射剂量。因xRT前PBL微核率与体外辐射剂量效应关系存在着显著的个体差异 ,开始应用xRT前可用PBL微核率判定患者个体固有的放射敏感性。     

放疗后癌症患者淋巴细胞微核持续存在的意义(英文)

目的　验证以周围血淋巴细胞 (PBL)的微核率作为定量的生物照射剂量指标对监测体内照射性损害的实用性。方法　应用细胞因子阻滞的微核法测定人体部分放疗患者 (13例 )PBL中的微核率 ,以照射剂量测定法的数据表示不同范围的照射次数、肿瘤累积剂量、总积分剂量和等值总体吸收剂量。结果　这些患者的PBL中微核率随等值总体吸收剂量增加而增加 ,呈线性分布 ,并明显偏离普哇松分布 ;PBL的微核率随随访时间增加而普遍下降 ,下降率呈线性分布并与等值总体吸收剂量相关 (r =0 .7,p=0 .0 0 7) ,微核率的降低在不同个体有很大差异 ;9例患者在初次放疗后至少 4 8个月 ,PBL微核率高于相应的放疗前的水平 ,表明放疗诱导残留的细胞遗传学损害持续存在。结论　人类微核率为评价体内放射剂量提供一个可靠的生物学剂量指标 ;放疗结束后 ,升高的PBL微核率持续存在是放射诱导畸变细胞部分残留的一种反映     

体外高温对放疗前和放疗中肿瘤患者辐射诱导淋巴细胞微核产生的影响(英文)

目的　研究体外高温 (HT)和137铯对胞质分裂阻滞的外周血淋巴细胞 (PBL)微核 (MN)产生的影响。方法　收集 6例分区放疗 (xRT)前和放疗中的肿瘤患者外周血 ,全血培养在 43.5℃下处理6 0min后 ,以137铯射线照射 ;对照为同患者的外周血。暴露于射线后在 37℃孵育 6 0min ,以PHA刺激淋巴细胞 ,培养 44h时应用细胞松驰素B ,72h时收集淋巴细胞 ,吉姆萨染色测定MN率。结果　高温 (4 3.5℃ )能使未照射淋巴细胞的MN率 (M±SE)明显提高 ,从 15 .6± 2 .8(37℃ )提高到 39.7± 10 .9。患者xRT前或xRT中 ,当淋巴细胞用高温 (4 3 .5℃ )处理联用体外照射时 ,MN率用线性方程Y =C +αD评价。结论　胞质分裂阻滞的淋巴细胞MN率测量结果表明 ,单纯 43 .5℃高温可诱导DNA损伤 ,并提高射线诱导的细胞遗传学损伤 ,且应用HT可损害接受放疗肿瘤患者的T细胞功能。     

人参减少 γ射线照射的淋巴细胞微核量(英文)

目的　评价中国人参对减少辐射诱导的人周围血 G0 期淋巴细胞 (PBL)微核量的作用。方法　采用细胞因子阻滞的微核法检测健康志愿者的血标本。体外 1 37Cs照射之前 ,每份血标本的单个核细胞培养以不同浓度 (0～ 2 0 0 0μg· m l- 1 )的人参根水提取物孵育 2 4 h。结果　 (1)在 0 Gy时 ,每 10 0 0个双核 (BN )细胞的微核量是 11.3± 2 .7,人参水提取物≥ 5 0 0μg· ml- 1 时微核量下降 ,但微核量和人参水提取物的浓度之间的差异是显著的。 (2 )单独射线照射显著增加微核量 ,当暴露于 1Gy的照射时 ,随着培养介质中人参水提取物浓度的增加 ,微核量呈显著的线性降低 (R2 =0 .0 5 ,P =0 .0 0 2 ) ;对暴露于 1Gy辐射诱导的微核量 ,人参水提取物浓度在 15 0 0μg· m l- 1 时减少 4 6 .6 % ,浓度在 2 0 0 0μg·m l- 1时减少 5 7.6 % ;对暴露于 2 Gy辐射诱导的微核量的减少呈更强的线性相关 (R2 =0 .7,P=0 .0 0 0 1) ;(3)微核数据分析的结果呈现出与 Poisson模型相关的过度离散趋势。结果表明 :(1)人参水提取物浓度达 2 0 0 0 μg· ml- 1时 ,对 PBL 细胞毒作用无明显影响 ;(2 )人参水提取物浓度在 5 0 0 μg· ml- 1和 2 0 0 0 μg· ml- 1之间时 ,对抗 1 37Cs照射诱导的 MN发挥保护作用。结论　人参可作为一     

~(60)Coγ射线照射离体人血诱发淋巴细胞微核率与剂量之间的关系

在以淋巴细胞微核测定法作为辐射生物剂量计的研究中,由于各实验室采用的实验条件不尽相同,有关的微核测定结果有一定的差异。为了提高各实验室微核测定结果的可比性,本文根据以往的研究结果,除了选择合适的培养时间外,还对淋巴细胞的增殖水平加以适当的限定;在此基础上,探讨了~(60)Coγ射线照射离体人血诱发淋巴细胞微核率与剂量之间的关系。结果表明,在0～4Gy~(60)Coγ射线剂量范围内,淋巴细胞微核率Y(%)与剂量D(Gy)之间呈良好的二次曲线关系:Y=2.22D+0.76D~2。     

双灵固本散对肿瘤患者放疗、化疗后外周血淋巴细胞及免疫功能损伤的防护作用

目的观察双灵固本散对肿瘤患者放疗、化疗后外周血淋巴细胞及其免疫功能损伤的防护作用。方法60例肿瘤患者分成4组:放疗组,放疗辅加服用双灵固本散治疗组(双灵放疗组),单纯化疗组,化疗辅加双灵固本散治疗组(双灵化疗组)。采用CB法测定外周血双核淋巴细胞微核率(MNR)、T淋巴细胞转化率(TLTR)及IgG、IgA、IgM的变化。结果放疗组和化疗组MNR(‰)显著性升高,而TLTR(%)和IgG、IgA、IgM均显著性降低。双灵放疗组和双灵化疗组MNR(‰)、TLTR(%)和IgG、IgA、IgM均无显著性变化。放疗对照组、化疗对照组放、化疗后外周血MNR(‰)与TLTR(%)呈负相关关系。结论双灵固本散明显减轻肿瘤患者放疗、化疗后T淋巴细胞核DNA及其免疫功能损伤。     

潜伏膜蛋白(LMP-1)源短肽对周围血单个核细胞增殖的影响

目的　探讨LMP 1来源的LALLFWL短肽对人外周血单个核细胞的免疫抑制作用。方法　利用MTT比色法进行检测体外培养人外周血单个核细胞在此短肽作用下的转化情况。结果　LALLFWL短肽对人外周血单个核细胞转化有明显抑制作用 ,测定组与对照组有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,并呈剂量依赖关系。结论　LMP 1来源的LALLFWL短肽具有抑制人外周血单个核细胞转化的作用 ,能抑制机体的细胞免疫功能。     

低剂量辐射对环磷酰胺所致小鼠DNA及遗传物质损伤的影响(英文)

目的 研究低剂量γ射线预照射对大剂量环磷酰胺化疗所致外周血淋巴细胞DNA及遗传物质损伤的影响.方法 昆明种雄性小鼠55只,随机分为空白对照组、荷瘤对照组(假照组)、荷瘤低剂量照射组(LDR组)、荷瘤环磷酰胺化疗组(CTX组)和荷瘤低剂量照射联合化疗组(LDR CTX组).小鼠常规饲养7 d后于左腹股沟皮下各接种S180肉瘤细胞(空白对照组除外),接种后第8、11天LDR组和LDR CTX组小鼠给予75 mGy γ射线全身照射,照射30 h后分别给予CTX组和LDR CTX组小鼠腹腔注射环磷酰胺3.0 mg,第13天处死所有小鼠,分别取血,采用单细胞凝胶电泳法检测外周血淋巴细胞DNA损伤情况;采用骨髓嗜多染红细胞微核率(MNF)检测遗传物质损伤情况.结果 环磷酰胺化疗后DNA损伤程度较空白对照及假照组均显著增加;环磷酰胺化疗前给予75 mGy γ射线照射则可显著降低大剂量环磷酰胺化疗所致的DNA损伤.大剂量环磷酰胺化疗后小鼠骨髓MNF较空白对照组及单纯荷瘤组有显著增加(t=3.63～5.46,P＜0.05);环磷酰胺化疗前给予75 mGy γ射线照射则可降低环磷酰胺所致微核率的增加,但差别无统计学意义(P＞0.05).结论 大剂量环磷酰胺化疗可引起外周血淋巴细胞DNA损伤;化疗前给予75 mGy γ射线照射对DNA损伤可能产生一定的保护作用.环磷酰胺有强大的致突变作用,可导致骨髓MNF显著增加, 75 mGy γ射线预照射对大剂量环磷酰胺化疗的遗传学毒性未表现出明显的保护作用.     

槲皮素对前列腺癌细胞的放疗增敏性研究

目的观察槲皮素对人前列腺癌细胞株PC-3的体外放射增敏作用,并探讨其可能机制。方法应用细胞克隆形成法研究槲皮素对PC-3细胞的毒性和放射增敏作用,westen-blot法检测survivin蛋白的表达。结果槲皮素对PC-3细胞有一定的毒性,随着药物浓度增加而增加,用0.3mg/ml的槲皮素作用于PC-3细胞3、6、12、24小时后,各组均可见放射增敏效应,相应的放射增敏比SERDo分别为1.22、1.58、1.76、1.85。单独药物组和单独照射组对survivin蛋白的表达的影响不明显,药物加照射组明显可以抑制survivin蛋白的表达,与对照组比较,有统计学意义(P<0.05)。结论槲皮素对PC-3细胞的毒性呈剂量依赖性,放射增敏作用明显,随药物作用时间延长而增强。其机制可能与抑制survivin蛋白表达有关。     

RNA干扰IgG表达对人前列腺癌细胞株PC3放射敏感性的影响

目的探讨RNA干扰沉默IgG 表达对人前列腺癌PC3 细胞株放射敏感性的影响。方法将IgG FC 段受体RNA质粒
（FCGR1AshRNA）和阴性对照质粒（NCshRNA）转染人前列腺癌PC3细胞,Q-PCR和Western-blot检测IgG表达。以60Co γ射线
0、2、4、6、8、10 Gy分别照射空白对照组、NCshRNA组、FCGR1AshRNA组细胞;照射48 h后,MTS法检测细胞增殖状态;照射
12、24、48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡率。重点探讨6Gy射线照射后不同时间的敏感性、增值率、抑制率与凋亡率。结果质
粒转染前列腺癌PC3细胞后,FCGR1AshRNA与NCshRNA组和空白对照组相比,IgG表达水平明显下降,细胞增殖受抑制（P<
0.05）。不同放射剂量下48 h后及6Gy射线照射后的不同时间段,FCGR1AshRNA组的增值率减低,凋亡率升高（P<0.05）。结
论RNA干扰抑制IgG表达能提高PC3细胞对放射线的敏感性,IgG基因可能是联合放疗治疗前列腺癌的理想靶点。
     

直肠癌自发性细胞凋亡指数、ATM蛋白表达和放射敏感性的关系

目的探讨直肠癌自发性细胞凋亡指数(SAI)、ATM蛋白表达水平和放射敏感性的关系。方法对56例直肠癌活检标本分别采用TUNEL和免疫组化法检测SAI和ATM蛋白表达,对放疗后手术切除标本进行放射敏感性测定,观察其与SAI,ATM蛋白表达的关系。结果放疗前直肠癌组织均能检测到细胞凋亡,平均SAI(1.01±0.25)%;SAI与ATM蛋白阳性表达率呈负相关(r=-0.75,P<0.05);高凋亡指数组(SAI>1.01%)放射敏感性明显高于低凋亡指数组(SAI<1.01%)(P<0.05);ATM蛋白阳性表达率与放射敏感性呈负相关。当SAI>1.01%,ATM(-)时,放疗敏感性明显增高。结论SAI和ATM与直肠癌放射敏感性密切相关,是直肠癌放射敏感性的两个重要预测因素。     

garcinol对宫颈癌Hela细胞放射敏感性影响的研究

目的研究多聚异戊二烯基苯甲酮（garcinol）对宫颈癌Hela细胞株放射敏感性的影响。方法不同浓度garcinol作用于人宫颈癌Hela细胞12、24、48h,CCK-8法检测garcinol对Hela细胞增殖活性的影响,并计算出24h时的20％和50％的药物抑制浓度（IC20和IC50）值;克隆形成实验检测20Ixmol／Lgarcinol对Hela细胞放射敏感性的影响;反转录PCR法和Westernblot法检测Hela细胞内环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）在mRNA水平和蛋白表达水平的变化。结果garcinol抑制宫颈癌Hela细胞的生长,并且有明显的时间-剂量依赖性;通过单击多靶模型计算放射生物学参数,经20μmol／Lgarcinol处理24h的Hela细胞,与单纯照射组相比,放射敏感性增加（t=6．69,P〈0．05）,放射增敏比（SER）为1．26;经20μmol／Lgarcinol处理24h的Hela细胞,COX-2的蛋白表达水平下降（P〈0．05）,而COX-2mRNA水平无明显变化（P〉0．05）。结论garcinol可以增加宫颈癌Hela细胞的放射敏感性,这可能与其降低Hela细胞中COX-2的蛋白表达水平有关。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变与放射敏感性的相关性

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与非小细胞肺癌(NSCLC)放射敏感性的相关性及可能机制.方法 选取EGFR基因突变的NSCLC细胞株PC-9、H1975和EGFR野生型NSCLC细胞株A549.克隆成型实验检测放射敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测凋亡蛋白和修复蛋白表达.结果 PC-9、H1975细胞放射敏感性明显高于A549细胞,4Gy照射下克隆存活率分别为10.0％、5.5％和44.3％;4 Gy照射后48 h PC-9和H1975细胞凋亡率显著高于A549细胞,分别为18.300％、17.533％和11.733％.A549细胞发生G0/G1期阻滞显著高于PC-9、H1975细胞,4Gy照射后48 h G0/G1期细胞分别为74.480％、70.293％和57.016％.A549细胞在4Gy照射后促凋亡蛋白Bax表达缺失,凋亡蛋白Caspase-3、抗凋亡蛋白Bcl-2、修复蛋白DNA-PKcs在24 h仍有表达.而PC-9、H1975细胞在4Gy照射后Bax、Caspase-3表达增多,Bcl-2不表达,DNA-PKcs表达减少.结论 EGFR 19外显子缺失突变细胞PC-9和21外显子点突变细胞H1975,相对EGFR野生型细胞A549对放射线敏感,其机制与细胞周期G0/G1期阻滞、Bax表达增多、DNA-PKcs、Bcl-2表达降低有关.     

选择性环氧化酶-2抑制剂联合放疗对人前列腺癌裸鼠移植瘤作用的实验研究

目的研究选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布（celecoxib）对前列腺癌的抗肿瘤作用和放疗增敏效应,并探讨其协同抑制作用的机制。方法使用前列腺癌PC-3细胞构建人前列腺癌裸鼠移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为对照组、celecoxib组、放疗组和celecoxib联合放疗组4组,每组6只。观察移植瘤的肿瘤生长延缓时间（TGD）和增敏系数（EF）;放射免疫法（ELISA法）测定前列腺素E2（PGE2）的含量,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR法）检测移植瘤组织中COX-2mRNA的表达,并观察荷瘤鼠各重要脏器组织的病理学改变。结果对照组和celecoxib组中移植瘤最大径从8.0mm生长至12.0mm所需的时间分别为（6.18±0.72）d和（7.87±0.76）d,而放疗组和celecoxib联合放疗组分别为（9.16±0.89）d和（12.62±1.28）d,组间差异有统计学意义（P〈0.05）,EF为1.59;对照组与其余3组间的PGE：含量差异均有统计学意义（P〈0．05）,而放疗组与celecoxib联合放疗组间PGE2含量差异无统计学意义（P〉0．05）;celecoxib引起的生长延缓与PGE：含量的下降呈正相关（r=0．807）;4组移植瘤组织中COX一2mRNA表达水平差异均无统计学意义（P〉0．05）;各组荷瘤鼠重要脏器未发现明显毒性病理学改变。结论Celecoxib联合放疗治疗人前列腺癌裸鼠皮下移植瘤具有抗肿瘤作用和放射增敏效应,可发挥协同抑制作用,在一定范围内是安全有效的,这为今后的前列腺癌的研究和临床治疗提供了一定的思路。     

XRCC1、APE1单核苷酸多态性与食管癌放疗敏感性的相关性

目的 探讨XRCC1、APE1基因单核苷酸多态性与食管癌放疗敏感性的关系. 方法 接受单独放射治疗的初治食管鳞状细胞癌患者入选本研究.PCR-RFLP法检测外周血XRCC1、APE1基因单核苷酸多态性,并分析其与放疗敏感性之间的关系. 结果 150例食管鳞癌患者经根治性三维适形放疗,总有效率为83.3％.XRCC1 Arg/Arg、Arg/Gln和Gln/Gln基因型携带者放射治疗有效率分别为59.4％,88.4％和90.7％,差异有统计学意义.携带Gln/Gln基因型患者放疗有效率是携带Arg/Arg基因的6.967倍.携带APE1 Asp/Glu基因型患者放疗有效率(87.6％)高于携带Asp/Asp基因者(75.5％),但差异无统计学意义.携带APE1 194Asp/Glu又携带XRCC1399 Gln/Gln基因型者,放疗有效率达67.8％,明显高于其他基因型.结论 XRCC1 Arg399Gln单核苷酸多态性与食管癌放射治疗敏感性有关;APE1 Asp148Glu基因多态性与XRCC1对放疗敏感性可能有协同作用.     

Silencing of osteopontin promotes the radiosensitivity of breast cancer cells by reducing the expression of hypoxia inducible factor 1 and vascular endothelial growth factor

Background  Osteopontin (OPN) is a secreted phosphoglycoprotein (SSP) that is overexpressed in a variety of tumors and was regarded as a molecular marker of tumors. In this study, we intended to demonstrate the role of OPN in human breast cancer cell line MDA-MB-231.

Methods  Recombinant plasmid expressing small interfering RNA (siRNA) specific to OPN mRNA was transfected into MDA-MB-231 cells to generate the stable transfected cell line MDA-MB-343, and the empty plasmid tansfected cells (MDA-MB-neg) or wildtype MDA-MB-231 cells were used as control cells respectively. Expression of OPN, hypoxia inducible factor-1 (HIF-1) and vascular endothelial growth factor (VEGF) proteins was analyzed by Western blotting analysis. The radiosensitivity of cells was determined by detecting cell apoptosis, cell proliferation and cell senescence.

Results  HIF-1 and VEGF proteins in MDA-MB-343 cells were significantly downregulated upon the efficient knockdown of OPN expression under either hypoxia or normoxia environment. Moreover, expression of OPN protein was upregualted upon hypoxic culture. Stable OPN-silencing also decreased cell invasion, increased cell apoptosis and cell senescence, as well as reduced clonogenic survival, resulting in increase radiation tolerance.

Conclusions  Suppression of OPN gene expression can enhance radiosensitivity and affect cell apoptosis in breast cancer cells. OPN seems to be an attractive target for the improvement of radiotherapy.

     

前列腺癌高剂量大分割放射治疗研究进展

前列腺癌是常见的男性恶性肿瘤之一,在我国,其发病率和死亡率呈逐年上升趋势。随着精确放疗技术的飞速发展,外照射放疗已成为局限期前列腺癌的根治性手段之一。由于前列腺癌特殊的组织学特点,大分割放疗越来越多地应用于临床。本文就前列腺癌大分割剂量根治性放疗的研究进展做一综述。