诱骗受体-3和Caveolin-1在肝癌中的表达及临床意义

目的:研究诱骗受体-3(decoy receptor3,DcR3)和Caveolin-1在原发性肝细胞癌(以下简称为肝癌)组织中的表达情况,初步探讨两者与肝癌生物学行为之间的关系。方法:用免疫组化检测40例肝癌组织及其癌旁组织中DcR3及Caveolin-1蛋白的表达,观察两者与肝癌生物学行为的关系。结果:肝癌组织中DcR3和Caveolin-1的阳性表达率分别为77.5%和70.0%,明显高于癌旁组织(17.5%、37.5%)。有HBsAg阳性及肿瘤直径大于5cm的肝癌组织中DcR3阳性表达率分别高于HBsAg阴性及肿瘤直径小于5cm者,差异有统计学意义(P<0.05)。Caveolin-1在肝癌高、中分化组的表达率明显低于低分化组(P<0.01)。结论:DcR3及Caveolin-1蛋白的表达与肝癌的生物学行为密切相关,并在肝癌组织发生发展过程中起着不同的重要作用。     

组织芯片技术在研究肿瘤组织中抗原表达的应用

目的：研究多种肿瘤组织芯片、肿瘤进展组织芯片以及肿瘤预后相关组织芯片中多种抗原的表达,明确组织芯片技术在肿瘤研究中的应用。方法：运用组织芯片技术和免疫组织化学法检测多种肿瘤组织中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的表达、肺癌进展组织中P53的表达及肺鳞癌组织中P16的表达。结果：手工制作的组织芯片阵列排列整齐,仅有1个组织缺失（1／625—0．16％）,3个组织有折叠（3／625=0．48％）,其余组织形态均好;ER、PR在乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、肺癌、食管癌、胃癌等多种肿瘤中均有强弱不等的表达;P53在肺癌及不典型增生组织中阳性表达率（70％,40％）明显高于在正常支气管黏膜中的表达（0％）（P〈0．05）;P16蛋白在肺鳞癌中失表达率为57．9％,其中有转移组（8／13—61．5％）高于无转移组（7／17—41．2％）（P〈0．05）。结论：组织芯片技术能快速、高效地对大量肿瘤组织样本进行各种检测分析,低消耗、可比性强,手工制作简单又经济,可以广泛地应用于肿瘤病理研究的各个方面;应用组织芯片技术,检测到ER,PR在多种肿瘤中均有表达,提示两者与多种肿瘤的发生有关;证明了P53基因的突变是肺癌发生的早期事件,参与了肺癌的发生与发展;P16基因在肺鳞癌中有一定的失表达率,而且与肿瘤预后相关因素中是否转移有一定相关性。     

非小细胞肺癌患者病理组织中血管内皮生长因子、fms样酪氨酸激酶-1与P53基因表达的关系

目的 探讨非小细胞肺癌患者病理组织中血管内皮生长因子（VEGF）与fms样酪氨酸激酶-1（Fit-1）和P53表达的关系。方法 应用Envision免疫组织化学方法检测60例非小细胞肺癌组织石蜡标本中VEGF和Fit-1的表达与P53基因的关系。结果 非小细胞肺癌病理组织中P53与VEGF、Flt-1表达呈显著正相关（P〈0．01，P〈0．05）。结论 VEGF和其高亲和力受体Flt-1结合，可促进非小细胞肺癌内血管生成，加快肿瘤细胞生长，而P53基因功能丧失，不仅允许肿瘤细胞不受控制地生长，同时通过调控非小细胞肺癌组织中VEGF及其受体Flt-1的表达为肿瘤转移提供合适的微环境。     

siRNA介导入结肠癌细胞诱骗受体3基因表达抑制的研究

目的：研究siRNA对结肠癌细胞株SW480DcR3基因表达的影响。方法：化学合成靶向DcR3基因的4组siRNA．用脂质体转染试剂转染结肠癌细胞株SW480,应用噻唑兰（MTT）法检测siRNA对细胞生长的作用,RT—PCR和Westem blot方法检测DcR3基因mRNA水平和蛋白表达量的变化。结果：与对照组相比,MTT试验结果显示各组siRNA对细胞增殖均有明显的抑制效应．但此抑制效应随时间延长而减弱。Western blot结果显示DcR3蛋白表达量明显降低。RT-PCR显示．转染后细胞内DcR3mRNA的表达量与空白对照组相比降低至24％。结论：DcR3siRNA通过特异、高效地沉默结肠癌细胞DcR3mRNA的表达,发挥抑制结肠癌细胞生长的作用。     

癌基因C—erbB2在食管癌及癌旁组织的表达研究

C-erbB_2又称neu基因，是1985年确认的V-erbB_2相关的原癌基因，编码一个185KD的糖蛋白，与表皮生长因子受体（EGFR）十分近似，通过基因扩增和蛋白产物的过度表达而与人类肿瘤发生有关。P185neu在乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、胃癌及肺癌等［1］肿瘤中均有不同程度的过度表达，对这些肿瘤的诊断，治疗和预后均具有意义。为探讨食管癌及癌旁组织中C-erbB_2的表达及其临床意义，我们应用免疫组织化学SABC方法观察了C—erbB_2的表达情况，现报告如下。1材料与方法1．1材料：取我院1990～1993年间经手术证实的63例食管癌标本作为研究对象…     

细胞周期调控基因细胞周期素D1和P16与肺癌的生物学特性

背景：细胞周期索D1和P16通过调节周期素依赖性激酶4的活性而实现促进细胞增殖和抑制细胞分裂的作用。人类多种肿瘤中都存在不等的细胞周期素D1基因扩增或过表达，并伴随P16基因的高频率失活。目的：探讨细胞周期素D1基因的扩增和P16基因的缺失与肺癌的关系。设计：病理标本对照实验。单位：解放军第八一医院生化科。对象：肺癌标本40例均来源于1998-06／1999-06解放军第八一医院手术的肺癌患者。患者均知情同意，分别在肿瘤区及正常肺组织区取材。方法：采用多重聚合酶链反应方法，以提取的基因组DNA为模板，在同一反应管中同时扩增细胞周期素D1基因和P16基因。取10μ/L聚合酶链反应产物，在15g／L琼脂糖凝胶上电泳分析。主要观察指标：①肺癌患者病理组织中细胞周期素D1和P16的基因扩增结果。②细胞周期素D1和P16与肺癌生物学特性的关系。结果：①细胞周期素D1和P16扩增结果：肺癌细胞周期素D1扩增的阳性率为55％（22／40），P16阳性率为65％（26／40）。（爹细胞周期素D1和P16与肺癌生物学特性的关系：两者扩增的阳性率与淋巴结转移和临床病理分期密切相关，随转移的发生和病程的发展，细胞周期素D1扩增阳性率升高而P16阳性率下降。结论：细胞周期素D1的扩增和P16的缺失与肺癌细胞的高增殖活性密切相关。检测两种基因的变化，可有助于判断肺癌的转移、恶性度及评估预后。     

siRNA介导人结肠癌细胞诱骗受体3基因表达抑制的研究

目的:研究siRNA对结肠癌细胞株SW480 DcR3基因表达的影响.方法:化学合成靶向DcR3基因的4组siRNA,用脂质体转染试剂转染结肠癌细胞株SW480,应用噻唑兰(MTT)法检测siRNA对细胞生长的作用,RT-PcR和Western blot方法检测DcR3基因mRNA水平和蛋白表达量的变化.结果:与对照组相比,MTT试验结果显示各组siRNA对细胞增殖均有明显的抑制效应,但此抑制效应随时间延长而减弱.Western blot结果显示DcR3蛋白表达量明显降低.RT-PCR显示,转染后细胞内DcR3 mRNA的表达量与空白对照组相比降低至24%.结论:DcR3 siRNA通过特异、高效地沉默结肠癌细胞DcR3 mRNA的表达,发挥抑制结肠癌细胞生长的作用.     

食管鳞癌中诱骗受体3与基质金属蛋白酶-2蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨诱骗受体3（decoy receptor3,DcR3）和基质金属蛋白-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学方法检测76例食管鳞状细胞癌组织及30例癌旁正常组织中DcR3和MMP-2的表达情况。结果：食管鳞状细胞癌组织中DcR3蛋白、MMP-2蛋白阳性率分别为67.1%和51.3%,明显高于癌旁正常组织（分别为26.7%和16.7%）（P〈0.01）;两者在食管鳞状细胞癌组织表达具有正相关（r=0.271,P〈0.05）。DcR3、MMP-2和DcR3/MMP-2在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达与癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移均显著相关（P〈0.05）。结论：高度表达的DcR3、MMP-2可能有助于食管鳞癌的发生、发展及早期侵袭转移,联合检测DcR3、MMP-2表达有可能作为反映食管鳞癌进展和预后的分子生物学指标。     

肺癌中FHIT基因缺失和p53蛋白表达的研究

目的：探讨肺癌组织中FHIT（fragile histidine triadgene）基因缺失和p53蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法：采用逆转录-巢式聚合酶链反应方法及免疫组织化学ABC法分别检测42例肺癌组织中FHIT基因缺失和p53蛋白表达。结果；肺癌组织中FHIT基因缺失和p53蛋白表达阳性率分别为66．7％（28／42）和76．2％（32／42）．FHIT基因缺失肺癌的p53蛋白阳性率明显高于FHIT基因正常表达的肺癌（P〈0．01）。FHIT基因缺失与肺癌的淋巴结转移有关，p53蛋白表达与临床分期、淋巴结转移密切相关。结论：FHIT基因缺失和p53蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关，二者相互促进．呈明显正相关。     

非小细胞肺癌中CDK4I／P^16的表达及其临床意义

目的：探讨Ｐ＾１６基因产物在人非小细胞肺癌中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化法检测８３例人非小细胞肺癌组织中Ｐ＾１６基因产物的表达，并以２０例正常肺组织作对照。结果：肺癌中Ｐ＾１６表达水平（６５．９３％）明显低于正常肺组织（８８．３４％）（Ｐ〈０．０１）。Ｐ＾１６表达水平降低的程度与肺癌细胞分化程度，原发肿瘤大小和肺部转移有密切关系（Ｐ〈０．０１或Ｐ〈０．０５），在人非小是与肺癌病期、组织学     

四种TRAIL受体在隐球菌性脑膜炎中的表达及临床意义

目的 研究建立实时荧光定量(RFQ)-PCR法测定四种TRAIL受体DcR1,DcR2,DR4,DR5 mRNA含量的方法 ,探讨其在隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中表达的检测价值,并分析隐球菌性脑膜炎患者免疫指标与四种TRAIL受体的相关性.方法 设计特异性的引物和探针,以人基因GAPDH为内参照,用实时定量PCR的方法 检测35例健康人和35例隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL受体mRNA的表达水平,采用全自动特定蛋白分析仪检测IgG,IgA,IgM,C3,C4.结果 与健康人比较,隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL受体DcR1 mRNA的表达显著升高(P<0.01),受体DcR2,DR4,DR5 mRNA的变化无统计学意义.隐球菌性脑膜炎患者血清中的C3和IgG显著下降(P<0.01),且与DcR1的变化成负相关,结论 隐球菌性脑膜炎患者TRAIL受体DcR1 mRNA的表达明显升高,提示TRAIL受体DcR1可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程,这为有效治疗隐球菌性脑膜炎提供了新的线索.     

FHIT基因与肿瘤的研究进展

1996年Ohta等利用外显子捕捉法在人类染色体3P14．2处确定了1个新的基因。该基因编码的蛋白质与具有组氨酸三联体结构的HIT（histidinetriad）蛋白高度同源，又因为该基因跨越脆性位点，故命名为脆性组氨酸三联体（FHIT）。近年来大量研究表明，FHIT基因在人类许多恶性肿瘤组织以及多种恶性肿瘤细胞系中存在异常。FHIT转录产物异常及FHIT蛋白表达缺失或减少已在多种原发肿瘤及肿瘤细胞株中得到证实，尤其在和环境致癌因素密切相关的肿瘤，如胃癌、肺癌、食管癌、宫颈癌、肝癌等病变早期即可有FHIT基因异常。     

周围型肺癌的螺旋CT征象及病理特征与MMP-2表达的相关性研究

研究MMP-2（基质蛋白酶-2）在肿瘤浸润和转移过程中的表达,并探讨其与周围型肺癌螺旋CT征象及病理学的关系。方法：收集周围型肺癌57例的螺旋CT影像学表现及病理、MMP-2免疫组织化学资料。结果：57例周围型肺癌中,MMP-2阳性表达35例,阳性率为61.40%,MMP-2的表达与病理类型无关（P〉0.05）,与病理分级显著相关（P〈0.05）。MMP-2在肿瘤直径〉3 cm的表达强度高于肿瘤直径≤3 cm者。与肺癌CT征象中深分叶征、棘突征、纵隔淋巴结转移相关（P〈0.05）,与毛刺征、胸膜凹陷征没有相关性（P〉0.05）。周围型肺癌的强化程度与MMP-2表达有一定的相关性（P〈0.05）。结论：MMP-2的异常表达与周围型肺癌的病理分级相关,提示MMP-2在肿瘤浸润和转移中起着重要促进作用;MMP-2异常表达与螺旋CT征象中肿瘤直径的大小、深分叶征、棘突征、纵隔淋巴结转移相关,是其形成的分子生物学基础。MMP-2的表达与螺旋CT征象相关,可以在蛋白表达上判断周围型肺癌的侵袭、转移和预后。     

原发性甲状腺肿瘤中C-myc和垂体肿瘤转化基因-1的表达与临床意义

目的：研究原癌蛋白C-myc、垂体肿瘤转化基因-1（pituitary tumor-transforming gene 1,PTTG-1）在原发性甲状腺肿瘤中的表达及其与病变的关系.方法：应用免疫组化方法检测85例原发性甲状腺肿瘤（腺癌42例,腺瘤43例）标本中C-myc、PTTG-1的表达.结果：C-myc及PTTG-1在甲状腺癌表达均高于腺瘤（P＜0.01）.C-myc及PTTG-1蛋白表达与腺癌转移（P＜0.05及P＜0.05）、预后指数（P ＜0.05及P＜0.01）具有相关性.C-myc蛋白表达水平与PTTG-1呈显著正相关（r=0.602 8,P＜0.01）.结论：检测C-myc及PTTG-1水平对于鉴别原发性甲状腺肿瘤良恶性具有重要参考意义,其表达水平可能是判断甲状腺癌预后的观测指标.     

CXCR4／SDF-1在肺癌中的表达研究

目的探讨肺癌患者外周血、胸水以及肿瘤组织中骨髓基质细胞衍化生长因子（SDF-1）及其趋化性细胞受体因子4（CXCR4）的表达及其临床意义。方法以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测41例肺癌患者及12名正常人的外周血和／或胸水中的SDF-1表达，以免疫组化的方法检测肺癌组织中CXCR4的表达。结果41例肺癌患者外周血SDF-1表达高于正常对照组（P〈0．01），且晚期肺癌患者的表达高于早期患者，恶性度高的表达高于恶性度低的。但在胸水中SDF-1的表达没有差异。肺癌组织中CXCR4的表达强度与肿瘤的分化密切相关。结论肺癌外周血清SDF-1和肿瘤组织CXCR4的高表达与肺癌密切相关，且其高表达可能与肺癌的恶性程度和转移有关。     

生长抑素受体在乳腺癌组织中表达及其临床意义

目的 研究生长抑索受体（SSTR）在原发性浸润性乳腺癌组织中的表达情况。以及与临床病理因素的关系。方法 应用免疫组化法（IHC）检测82例原发性乳腺浸润性导管癌组织中SSTR的表达，分析其与临床病理因索的关系。结果 原发性乳腺浸润性导管癌组织中SSTR阳性表达率为74．4％（61／82）。SSTR阳性表达强度与年龄（P〉0.05）、肿瘤大小（P〉0.05）无关，不同肿瘤病理分期（P〈0．001）、分化程度（P〈0．05）的肿瘤组织中SSTR表达强度有显著性差异。结论 原发性乳腺浸润性导管癌组织中SSTR阳性表达率为74．4％，因此，对大多数疑为乳腺癌的患者可应用生长抑索受体显像技术（SRS）进行筛选。     

甲状腺肿瘤原位细胞凋亡检测与PPARγ表达的研究

目的：研究原位细胞凋亡指数（apoptosis index，AI）及核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor γ，PPARγ）在原发性甲状腺肿瘤中的表达及其与病变的关系。方法：对87例原发性甲状腺肿瘤组织（乳头状腺癌38例，滤泡性腺癌21例，未分化癌5例，腺瘤23例）分别应用原位细胞凋亡检测（TuNEL）试剂盒测定AI及应用免疫组化方法检测PPARγ表达情况。结果：AI及PPARγ,蛋白在各甲状腺肿瘤组织均有表达，AI在腺癌表达高于腺瘤（P〈0．01），PPARγ在滤泡性腺癌及腺瘤表达显著高于乳头状腺癌及未分化癌（P〈0．01）；AI及PPARγ有正相关性（r=0．554，P〈0．01）。结论：AI及PPARγ的表达与甲状腺肿瘤显著相关，检测AI及PPARγ水平对于鉴别原发性甲状腺滤泡癌具有重要参考意义。     

高能X线照射对肺癌转移相关基因的影响

目的探讨高能X线照射对肺癌转移相关基因的影响。方法建立Lewis肺癌模型，将荷Lewis肺癌的C57BL／6雄性小鼠35只随机分为照射组（n=18）和对照组（n=17），照射组接受30Gy的X线肿瘤局部照射，对照组不接受照射，2周后采用免疫组化法检测瘤组织中E-钙黏素（E—Cad）蛋白和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白的表达。结果与对照组比较，照射组MMP-9蛋白表达水平显著降低，E—Cad蛋白表达水平显著升高，差异均有显著性（t=9．53、20．68，P〈0．01）。结论X线照射可能通过抑制肿瘤组织内MMP-9蛋白表达和促进E—Cad蛋白表达阻止肿瘤细胞的侵袭和转移。     

DcR3基因和VEGF水平与结直肠癌临床病理的相关性

目的探讨DcR3基因和血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠癌组织中的表达及意义。方法对61例结直肠癌组织和10例正常结直肠组织(对照组)采用免疫组化方法进行DcR3和VEGF的检测。结果 61例结直肠癌中37例DcR3(+);48例VEGF(+)。正常肠组织(-),两者的阳性表达与淋巴结转移、DUCK分期有关。结论DcR3和VEGF二者联合检测可以为临床诊治结直肠癌提供理论依据。     

肺癌组织中血管内皮生长因子受体的表达及其与转移和预后的关系

背景：血管内皮生长因子受体对许多实体瘤的血管生成和预后起着重要作用，但血管内皮生长因子受体与肺癌预后的关系研究报道较少。目的：探讨肺癌中血管内皮生长因子受体Flt1和KDR的表达及其与转移及预后的关系。设计：以病理标本为研究对象单一佯本研究。单位：一所大学的病理学教研室。材料：随机选取青岛大学医学院附属医院胸外科1985—01／1990—12经手术切除的75个肺癌标本。2002—09/11月间在青岛大学医学院病理学教研室进行实验。方法：应用免疫组织化学PowerVisionTM—9000（PV—9000）法，测定75个肺癌标本中Flt1和KDR的表达。主要观察指标：肺癌巾血管内皮生长因子受体Flt1和KDR的表达及其与年龄、性别、病理类型、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移和预后的关系。肿瘤细胞、纤维母细胞中Flt1和KDR表达的关系。结果：肺癌组织中Flt1和KDR的表达较为广泛，主要位于肿瘤细胞胞浆及胞膜上．纤维母细胞和血管内皮细胞胞浆中亦有表达。Flt1和KDR在肿瘤细胞中的阳性率均显著高于在问质纤维母细胞中的表达(x^2=6．07，5．88，P&;lt;0.05)。肿瘤细胞及纤维母细胞中该两种受体的阳性率在不同年龄、不同性别及不同病理类型、不同病理分级之间差异均无显著性意义(P&;gt;0．O5）。肿瘤细胞中Flt1和KDR的阳性表达率在3组不同大小的肿瘤间差异均有显著性意义(x^2=10．35，7．29，P&;lt;0．05)，而纤维母细胞中差异均无显著性意义(x^2=2．86，2.56，P&;gt;0．05)；肿瘤细胞及纤维母细胞中Flt1和KDR的阳性率在淋巴结有、无转移2组间的差异均有显著性意义(x^2=4.72～9.32，P&;lt;0．05)，在3组不同术后生存时间患者间差异亦均有显著性意义(x^2=8.81—19.19，P&;lt;0.05)；肿瘤细胞中Flt1和KDR的表达呈极显著性正相关(r=0．44，P&;lt;0．01)。结论：Flt1和KDR在肿瘤细胞中的表达均显著高于间质纤维母细胞，提示肺癌的生长主要依赖自分泌机制；肿瘤细胞中该两种受体的表达与淋巴结转移、术后生存时间有关，并具有协同效应．提示联合检测Flt1和KDR的表达，可能对肺癌转移及预后的评估更存参考价值。