绿原酸对光老化ESF-1细胞ERK信号通路的调控研究

目的 探讨绿原酸对光老化人皮肤成纤维细胞ESF-1光损伤的保护作用,及其对细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路的影响。方法 用20 J/cm²的长波紫外线（UVA）照射ESF-1细胞制备光老化模型,以不同浓度绿原酸处理光老化细胞,检测细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、丙二醛（MDA）量,RT-PCR法检测细胞中ERK1、ERK2、基质金属蛋白酶1（MMP-1）及基质金属蛋白酶抑制因子1（TIMP-1） mRNA的表达量,Western blotting法检测p-ERK1/2蛋白的表达,酶联免疫法检测细胞上清液中MMP-1、TIMP-1的量。结果 UVA照射ESF-1细胞后,SOD活性、GSH-Px活性、TIMP-1 mRNA的表达量、TIMP-1的量明显降低,MDA水平、ERK1、ERK2、MMP-1 mRNA的表达量、p-ERK1/2、MMP-1水平明显升高（P＜0.01）;10.0、1.0 μmol/L绿原酸能够显著改善光老化ESF-1细胞的损伤（P＜0.05、0.01）。结论 绿原酸调控光老化ESF-1细胞ERK信号通路,从而减轻UVA对ESF-1细胞的损伤。     

UVB诱导HaCaT分泌细胞因子对HSF的影响及桃叶珊瑚苷的保护作用

目的:探讨紫外线B波(UVB)诱导HaCaT分泌细胞因子通过旁分泌机制对HSF的影响及桃叶珊瑚苷的保护作用。方法:将桃叶珊瑚苷作用于正常及光老化HaCaT细胞,ELISA试剂盒检测IL-6、TNF-α含量,并将各组培养液分别作用于HSF细胞,RT-PCR、Western-Blot检测HSF细胞中MMP-1、MMP-3的mRNA及蛋白表达。结果:桃叶珊瑚苷对正常HaCaT细胞分泌IL-6和TNF-α没有显著影响,而对光老化HaCaT分泌IL-6和TNF-α具有显著的抑制作用(P0.01),光老化HaCaT培养液使HSF中MMP-1、MMP-3的mRNA和蛋白表达量升高,桃叶珊瑚苷处理组能够明显改善这种作用(P0.01)。结论:桃叶珊瑚苷通过减少炎症细胞因子IL-6、TNF-α分泌来拮抗UV对角质形成细胞的损伤,又可通过抑制旁分泌机制,保护成纤维细胞,抑制MMP-1、MMP-3的过表达,预防光老化。     

绞股蓝总皂苷对光老化HSF细胞MMP-3、TIMP-2mRNA及蛋白表达影响的实验研究

目的:观察绞股蓝总皂苷(gypenosides,GPs)含药血清对光老化人皮肤成纤维细胞株(HSF)MMP-3和TIMP-2 mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用长波紫外线(UVA)照射方法建立老化HSF细胞模型,并给予含不同浓度GPs大鼠血清进行干预,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western-blot)法,分别对各组细胞MMP-3与TIMP-2 mRNA和蛋白表达进行检测。结果:与空白对照组比较,UV模型组细胞内MMP-3基因和蛋白表达显著增加,同时TIMP-2基因和蛋白表达显著减少。与UV模型组比较,低、中、高剂量含药血清组细胞内MMP-3基因和蛋白表达显著下降,TIMP-2基因和蛋白表达显著上升。结论:GPs通过抑制HSF细胞MMP-3表达,同时促进TIMP-2表达,恢复MMP-3与TIMP-2表达平衡状态,抑制基质金属蛋白酶对细胞外基质(胶原蛋白、蛋白多糖)的降解,为GPs抗皮肤光老化作用机制之一。     

山慈菇-蜂房药对抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭转移的机理研究

目的 研究山慈菇-蜂房药对对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响及其作用机制。方法 噻唑蓝（MTT）法检测山慈菇-蜂房药对大鼠含药 血清对细胞活力的影响,Transwell小室法测定其侵袭力,实时荧光定量PCR（RT-PCR）法检测细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）基 因的表达。结果 山慈菇-蜂房药对组MDA-MB-231细胞体外生长杀伤率为35.86 %;能明显抑制MDA-MB-231 细胞的侵袭能力（P＜ 0.01）,其抑制率为34.8 %;MMP-9 mRNA明 显降低,TIMP-1 mRNA明显升高,MMP-9 mRNA/ TIMP-1 mRNA值显著降低（P＜ 0.05,P＜ 0.01）。结论 山慈菇-蜂房药对能够抑制MDA-MB-231 细胞侵袭能力,其机制可能与 下调MMP-9mRNA表达,上调TIMP-1mRNA的表达,降低MMP-9 mRNA/ TIMP-1 mRNA比值有关。     

通肾络1号对高糖状态下大鼠肾系膜细胞金属蛋白酶2及其抑制物2mRNA影响的研究

目的:探讨通肾络1号对在高糖刺激下大鼠肾系膜细胞MMP-2、TIMP-2mRNA转录水平及其对细胞培养上清产物FN、ColⅣ的影响。方法:大鼠肾小球系膜细胞在高糖、高糖 ET-1、高糖 ANGⅡ培养下,给予通肾络1号、缬沙坦刺激后,运用荧光定量PCR方法及ELISA方法检测MMP-2、TIMP-2mRNA转录水平及细胞培养上清产物FN、ColⅣ的含量。结果:通肾络1号能提高高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞MMP-2mRNA转录水平(P<0.05),降低TIMP-2mRNA水平(P<0.05),以及提高MMP2/TIMP2(P<0.05)比值,降低细胞上清FN(P<0.05)、ColⅣ含量(P<0.05)。结论:通肾络1号降低细胞上清FN、ColⅣ含量是通过提高高糖刺激下系膜细胞MMP-2mRNA转录水平,降低TIMP-2mRNA水平,达到提高MMP2/TIMP2比值实现的。     

紫草素对胶原诱导关节炎MMP-1和TIMP-1表达影响的研究

目的:研究紫草素对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)MMP-1、TIMP-1表达的影响。方法:紫草素及对照药物口服给药CIA小鼠,连用30天,用酶联免疫吸附测定试剂盒测定CIA小鼠血清中的MMP-1、TIMP-1;用逆转录聚合酶链反应测定CIA小鼠髌骨及邻近滑膜组织的MMP-1、TIMP-1表达水平。结果:与模型组(775.9 102.12)相比,紫草素组(255.9 103.7)降低了CIA小鼠血清中MMP-1水平(P<0.001),紫草素组(135.3 9.1)与模型组(106.3 7.07)相比,升高了TIMP-1水平(P<0.05),髌骨及邻近滑膜组织的MMP-1mRNA水平与对照组相比显著被抑制(P<0.05);TIMP-1mRNA水平与对照组相比明显升高(P<0.05)。结论:紫草素可能通过抑制MMP-1,提高TIMP-1发挥对CIA小鼠的治疗作用。     

"冠心1号"对动脉粥样硬化大鼠MMP-9、TMP-1的影响

目的:观察具有益气养阴、活血通阳作用的中药冠心1号对动脉粥样硬化(As)大鼠血脂、AngⅡ、MMP-9、TIMP-1基因表达及蛋白表达的影响.方法:通过高脂饮食建立大鼠AS模型,72只大鼠随机分单纯高脂饮食组、高脂饮食加舒降之组、高脂饮食加冠心1号组喂养57 d.观察血脂、AngⅡ,并应用RT-PCR测定MMP-9和MMP抑制剂-1(TIMP-1)的mRNA表达,免疫组化法测定MMPO和TIMP-1蛋白表达.结果:冠心1号组和舒降之组治疗后血脂、Ang Ⅱ、MMP-9mRNA及蛋白表达均优于模型组(P<0.05或P<0.01).结论:血脂、AngⅡ、MMP-9mRNA及蛋白表达可能与AS斑块不稳定性有关.     

苦瓜提纯液对糖尿病肾病大鼠肾脏MMP-9、TIMP-1 mRNA表达的影响

目的探讨苦瓜对糖尿病肾病大鼠细胞外基质及基质金属蛋白酶9（MMP-9）、组织抑制剂1（TIMP-1）基因表达的影响。方法将60例Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组、苦瓜组及洛汀新组，采用链脲佐菌素一次性腹腔内注射法诱导糖尿病模型，造模1、5周测定各组24h尿蛋白、肾功能及血糖，5周后取各组肾组织用RT—PCR技术检测MMP-9、TIMP-1的基因表达。结果模型组较对照组肾小球MMP-9、TIMP-1 mRNA表达增加，反映肾功能的各项生化指标水平升高。苦瓜组、洛汀新组较模型组MMP-9、TIMP-1 mRNA表达减少，肾功能有所改善。结论苦瓜对糖尿病大鼠肾结构功能具有保护作用，除降低血糖外，调节肾小球MMP-9、TIMP-1表达从而减轻肾小球细胞外基质沉积也可能是其作用途径之一。     

动脉粥样硬化患者基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1基因表达与痰浊证素的相关性研究

目的分析动脉粥样硬化(AS)患者基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的基因表达水平与痰浊证素的相关性,探讨MMP-9、TIMP-1基因表达水平作为AS患者中医"痰浊证素"客观指标的可行性。方法将AS患者分为痰浊证素组30例,非痰浊证素组48例,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术进行MMP-9和TIMP-1mRNA表达水平的定量检测。结果痰浊证素组MMP-9和TIMP-1基因表达水平均明显高于非痰浊证素组,差异具有统计学意义。结论 MMP-9及TIMP-1基因表达可作为中医痰浊证素的客观指标。     

黄芪建中汤对胃黏膜损伤模型大鼠MMP-2及TIMP-1表达的影响

目的:观察黄芪建中汤对胃黏膜损伤模型大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法:将健康SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、黄芪建中汤组、生胃酮组,每组10只。采用改良Okabe法复制动物模型。胃黏膜MMP-2、TIMP-1表达水平检测采用免疫组织化学法。结果:模型组MMP-2表达较假手术组显著升高(P<0.01),各治疗组MMP-2表达水平显著低于模型组(P<0.01);模型组TIMP-1表达较假手术组显著降低(P<0.05,P<0.01),各治疗组TIMP-1表达水平显著高于模型组(P<0.01);黄芪建中汤组较生胃酮组MMP-2表达水平显著降低(P<0.01),TIMP-1表达水平显著升高(P<0.01)。结论:黄芪建中汤通过调控MMP-2、TIMP-1的表达水平,修复胃黏膜损伤。     

八棱丝瓜蛋白1的体外抗HIV-1活性

目的：研究八棱丝瓜蛋白1的抗HIV-1活性。方法：通过实验株HIV-1ⅢB诱导合胞体形成抑制实验、HIV-1ⅢB和临床分离株HIV-1KM018急性感染细胞以及HIV-1ⅢB慢性感染细胞的p24抗原表达抑制实验检测八棱丝瓜蛋白1的抗HIV-1活性。结果：八棱丝瓜蛋白1抑制HIV-1ⅢB诱导C8166细胞形成合胞体的EC50为0．025μmol·L^-1，治疗指数为76。八棱丝瓜蛋白1抑制HIV-1ⅢB感染C8166和HIV-1KM018感染PBMC的p24抗原表达的EC50分别为0．033和0．207μmol·L^-1。八棱丝瓜蛋白1不抑制HIV-1ⅢB在慢性感染H9细胞中的复制。结论：首次发现八棱丝瓜蛋白1是一种具有抗HIV-1活性的核糖体失活蛋白。     

有机阴离子转运多肽1B1的研究进展

 目的介绍有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)的研究进展。方法查阅国外有关文献,并对其进行分析、归纳和总结。结果OATP1B1存在遗传多态性,且不同等位基因所表达的OATP1B1的转运能力具有显著性差异,进而会对多种药物的药动学及药效学产生影响;OATP1B1还与药物不良反应及药物相互作用有关。结论基于OATP1B1对药物体内过程的重要作用,关注OATP1B1遗传多态性对药动学、药效学的影响,及其与不良反应及药物相互作用的关系具有一定临床意义。     

甲型H1N1流感的应对措施

目的：探讨甲型H1N1流感的应对措施。方法：对符合诊断标准的57例甲型H1N1流感患者分别从医院、病区、患者3个角度给予制定岗位责任制、成立发热门诊、成立隔离病区、合理公布病区、医务人员自身防护、病区消毒处理、健康宣教、饮食指导等应对措施。结果：57例患者经治疗全部痊愈,痊愈率达100.00%。住院天数最短为5天,最长为11天,平均6.8天;病毒转阴天数最短为3天,最长7天,平均5.3天。结论：从医院、病区、患者3个角度给予甲型H1N1流感有针对性的应对措施有助于患者康复。     

1-羟基茚-2-甲酸的合成△

目的：Knoevenagel反应合成1-羟基茚-2-甲酸。方法：以邻苯二甲醛和丙二酸为原料，以三乙胺或哌啶为催化剂，进行合成反应。结果：合成反应产物经1H—NMR和13C-NMR波谱测定，确定其化学结构为1-羟基茚-2-甲酸。结论：以邻苯二甲醛和丙二酸为原料，以三乙胺或哌啶为催化剂，反应产物是1-羟基茚-2-甲酸。     

除湿化瘀方对高尿酸血症内皮素-1及血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

目的:通过临床观察除湿化瘀方对高尿酸血症患者血尿酸、内皮素-1(ET-1)及血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响,探讨除湿化瘀方的作用机制。方法:本研究选择60例高尿酸血症患者,采用随机对照的原则分为中药治疗组和西药对照组,分别予除湿化瘀方和别嘌呤醇片,8周为1个疗程。观察治疗前后血尿酸(sUA)、内皮素-1(ET-1)及血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)。结果:两组sUA、ET-1及PAI-1较治疗前明显降低(P<0.01),且治疗后两组sUA、ET-1及PAI-1水平无明显差异(P>0.05)。结论:除湿化瘀方可降低sUA、ET-1及PAI-1水平。     

HPLC-ELSD法测定通迪胶囊中三七皂苷R_1和人参皂苷Rg_1、Rb_1的含量

目的:采用HPLC-ELSD法测定通迪胶囊中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Rb1的含量。方法:色谱柱DiamonsilC18(150mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-水,梯度洗脱0～5min,乙腈20%～25%;5～20min,乙腈25%～45%;流速:1.0mL.min-1;柱温:25℃;漂移管温度:70℃;载气流速2.0L.min-1。结果:三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Rb1进样量分别在0.3～1.5μg(r=0.9997),1.5～7.5μg(r=0.9998)和1.5～7.5μg(r=0.9999)范围内呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为101.8%、102.1%、103.6%;RSD分别为1.6%、2.1%、1.8%。结论:HPLC-ELSO法结果准确,便于操作,可用于通迪胶囊的质量控制。     

新疆克孜勒苏自治州甲型H1N1流感中医药防治特色浅谈

新疆克孜勒苏自治州地处中国最西部,是一个偏远落后地区。2009年全球暴发甲型H1N1流感,本州也有421例报告病例。甲型H1N1流感在本州暴发过程中,结合本地特点应用中医药防治,取得了良好效果。     

电针对OLETF大鼠sICAM-1、sVCAM-1及PAI-1表达的影响

目的:探讨电针对自发性胰岛素抵抗模型大鼠血浆中细胞间黏附分子(s ICAM-1)及血管间黏附分子(s VCAM-1)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的影响。方法:以8只雄性LETO大鼠(Long-Evans Tokushima rats)作为空白组,将16只雄性OLETF大鼠(Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty rats)随机分为两组,即电针组及模型组,每组8只。空白组及模型组进行正常饲养,不给予其他处理。电针组针刺双侧内关、三阴交、足三里及肾俞,并予双侧足三里及三阴交加电。1次/d,每次20 min,持续4周。治疗结束后,禁食12 h,次晨眼眶静脉窦采血。检测各组大鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、s ICAM-1及s VCAM-1、PAI-1。HE染色观察主动脉病理变化。结果:模型组的FPG、FINS、HOMA-IR、C-P及s ICAM-1、s VCAM-1、PAI-1水平相比空白组显著升高(P0.01)。电针组的FPG、FINS和HOMA-IR与空白组相比,差异无统计学意义(P0.05)。电针组的FPG、FINS、C-P及s ICAM-1、s VCAM-1及PAI-1水平较模型组显著降低(P0.01)。HOMA-IR与大鼠血浆s ICAM-1、s VCAM-1及PAI-1均成正相关关系。光镜显示,电针干预能总体病理损伤有不同程度的改善。结论:电针能改善胰岛素抵抗水平,控制血浆中过高的s ICAM-1、s VCAM-1及PAI-1水平,对糖尿病血管并发症的防治有良性作用。     

Pharmacokinetic study of ginsenosides Rb1 and Rg1 in rat by ELISA using anti-ginsenosides Rb1 and Rg1 monoclonal antibodies

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) systems using anti-ginsenoside Rb1 (G-Rb1) and Rg1 (G-Rg1) monoclonal antibodies (MAbs) were established for pharmacokinetic investigations of G-Rb1 and G-Rg1 in rat serum. The systems not only allowed sensitive detection of G-Rb1 at the level as low as 20 ng/ml and of G-Rg1 at 300 ng/ml, but showed strong capacity for detecting the two agents in a broad concentration range (20 to 400 ng/ml for G-Rb1 and 0.3 to 10 microg/ml for G-Rg1, respectively). In this respect, these assay systems are superior to other methods using thin-layer chromatography (TLC) or high-performance liquid chromatography (HPLC). In addition, another advantage of these immunoassays is the comparably low quantities of specimen required; as little as 5 microl of serum suffices the need for determination of ginsenosides. We report in this article the application of this immunoassay in pharmacokinetic study of G-Rb1.     

款冬润肺膏镇咳祛痰作用的实验研究

目的:研究观察款冬润肺膏镇咳祛痰的作用。方法:镇咳试验采用氨水致咳法,祛痰试验采用小鼠酚红排泌法。结果:款冬润肺膏可明显抑制氨水所致小鼠咳嗽反应,对小鼠气管痰液分泌具有明显的促进作用。结论:款冬润肺膏具有一定的止咳、化痰作用。