染料木黄酮对油酸诱导脂肪变HepG2细胞PPARα表达和糖脂水平的影响北大核心CSCD

目的研究染料木黄酮（genistein,Gen）对油酸（oleic acid,OA）诱导脂肪变HepG2细胞的过氧化物酶体增殖物激活受体α（peroxisome proliferators—activatedreceptor α,PPARα）蛋白表达和糖、脂代谢水平的影响。方法将HepG2细胞在合有0～50gmol／L的Gen,0．5mmol／L的OA的培养基内,且设置对照组,培养24h后收集细胞,分别采用蛋白质印迹法（Western blotting）、酶法、选择性沉淀法测定PPARα、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）的含量;收集培养基上清液,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定葡萄糖消耗量。结果浓度为10～50μmol／L的Gen可以减轻HepG2细胞脂肪变的程度,总体上呈现剂量效应关系。Gen各组与模型组比较,高浓度的Gen（50,mol？L）可有效提高OA诱导脂肪变HepG2细胞内PPARα和HDL—C含量,降低TC和葡萄糖消耗量,但低浓度的Gen（10-30μmol／L）对细胞内TC和HDL—C作用不明显。结论高浓度Gen能改善OA诱导的脂肪变HepG2细胞内的糖脂代谢情况,并可能与PPARα表达有关。     

染料木黄酮对脂肪变HepG2细胞甘油三酯水平和Lipin 1表达的影响

目的 研究染料木黄酮(genistein,Gen)对油酸(oleic acid,OA)诱导的脂肪变HepG2细胞胞核内Lipin1水平以及培养基和胞浆内甘油三酯水平的影响.方法 在HepG2细胞中分别或联合加入0～640μmol/L的Gen,0～2.0 mmol/L的OA干预,用MTT法测定细胞活性,以确定适宜的OA建模和Gen的干预浓度.之后,采用OA建立HepG2细胞脂肪变模型,用Gen干预24h,收集培养基上清和细胞分别测定甘油三酯水平,Western blot检测胞核Lipin1的表达.结果0.5 mmol/L OA为造模最佳干预浓度,可同时提高培养基和细胞中甘油三酯的含量,10～50 μmol/L的Gen可以减轻HepG2细胞脂肪变的状态,并且呈现剂量效应关系(P＜0.05),同时,胞核内Lipin1水平增加(P＜0.05).结论 Gen能抑制OA诱导的HepG2细胞脂肪变,并可能与Lipin1的核转移有关.     

蚕蛹油多不饱和脂肪酸和α-亚麻酸对HepG2细胞胆固醇代谢的影响

目的探讨蚕蛹油多不饱和脂肪酸(SPO PUFAs)和α-亚麻酸(ALA)对油酸(OA)诱导的脂变HepG2细胞胆固醇代谢的影响及其机制。方法采用油酸诱导法建立脂肪变性肝细胞模型,分别用SPO PUFAs和ALA进行处理,油红O染色观察细胞内脂滴累积情况,酶法检测细胞内总胆固醇(TC)含量,ELISA检测细胞培养液中胆汁酸(TBA)含量,定量PCR检测LXRα、PPARγ以及ABCG1 mRNA表达。结果 0.5mmol/L油酸诱导HepG2细胞24h后,细胞内可见大量红色脂滴,细胞内胆固醇含量升高,SPO PUFAs和ALA干预后,细胞内的脂滴明显下降,细胞内胆固醇含量显著降低,细胞培养液中的胆汁酸显著升高,且呈剂量依赖性,高剂量组效果最明显。SPO PUFAs和ALA还能上调LXRα、PPARγ以及ABCG1 mRNA的表达。结论 SPO PUFAs和ALA能抑制HepG2脂滴积累,降低脂变HepG2细胞胆固醇含量,促进胆汁酸的转化,其机制可能与其通过PPAR/LXR-ABCG1细胞信号途径,促进细胞内胆固醇向胆汁酸转化并排出有关。     

邻苯二甲酸单乙基己基酯对HepG2细胞胆固醇代谢影响

目的 探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对肝细胞胆固醇代谢的影响,为了解MEHP的肝脏毒性作用机制提供依据.方法 分别以不同浓度MEHP、1mmol/L油酸(OA)及完全培养基(阴性对照组)处理HepG2细胞24和48 h;用CHOD-PAP-POD法测定HepG2细胞内和培养上清中总胆固醇(TC)和游离胆固醇(F...     

树豆酮酸A对HepG2细胞体外糖代谢影响

目的探讨树豆酮酸A对HepG2细胞糖代谢影响及机制。方法体外培养HepG2细胞,实验设10-3、10-4、10-5、10-6mol/L树豆酮酸A组,作用24 h,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测HepG2细胞葡萄糖消耗量,ELISA法检测糖代谢相关酶己糖激酶(HK)和丙酮酸脱氢酶(PDH)活性。结果 10~(-3)、10~(-4)、10~(-5)mol/L树豆酮酸A组HepG2细胞葡萄糖消耗量分别为(8.650±0.319)、(8.231±0.182)、(8.136±0.402)mmol/L,明显高于对照组[(6.521±0.056)mmol/L],差异有统计学意义(P0.05);10~(-3)、10~(-4)mol/L树豆酮酸A组HepG2细胞内HK含量分别为(882.91±30.72)、(718.25±20.67)pg/m L,明显高于对照组[(616.65±17.24)pg/m L];10-3mol/L树豆酮酸A组HepG2细胞内PDH含量为(1 526.69±66.74)pg/m L,明显高于对照组[(1 204.73±55.72)pg/m L],差异有统计学意义(P0.05)。结论树豆酮酸A在体外可促进HepG2细胞对葡萄糖的摄取,具有降糖活性,其作用机制可能与增强糖代谢相关酶己糖激酶和丙酮酸脱氢酶活性有关。     

氯原酸对高胰岛素与高油酸状态下HepG2细胞葡萄糖利用的影响

目的探讨氯原酸(CGA)对胰岛素抵抗(IR)及高脂状态下糖代谢的调节作用。方法通过培养HepG2细胞,分别在正常、高胰岛素诱导肝细胞胰岛素抵抗以及油酸(OA)诱导脂肪变性状态下,给予不同剂量的CGA(10、20、40、80mg/L)共培养24h后,观察细胞形态学变化,用葡萄糖氧化酶法检测细胞的葡萄糖消耗量。结果在正常环境中,与对照组比较,CGA可显著增加细胞葡萄糖消耗量,且在10～40mg/L剂量范围内呈量效关系(P<0.05)。在胰岛素抵抗状态下,葡萄糖消耗量下降了39.5%(P<0.05);给予CGA后,细胞耗糖量较IR组增加了60.5%～93.5%(P<0.05),其中20mg/LCGA的作用最强。在脂肪变性状态下,葡萄糖消耗量下降了26.2%(P<0.05);给予CGA后,耗糖量较OA组增加了27.3%～63.5%(P<0.05),其中20mg/L组作用最强。结论CGA对高胰岛素和高脂诱导的糖代谢紊乱具有改善作用。     

饱和脂肪酸与单不饱和脂肪酸对HepG2细胞自噬和凋亡的影响

目的比较饱和脂肪酸棕榈酸(palmitic acid,PA)和单不饱和脂肪酸油酸(oleic acid,OA)对HepG2细胞凋亡和自噬的影响。方法 PA和OA处理HepG2细胞,CCK-8检测脂肪酸的细胞毒性,caspase-3活性测定检测脂肪酸对细胞凋亡的影响,油红O染色检测细胞内脂质沉积,酶法检测细胞内甘油三酯的含量,Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和凋亡相关蛋白caspase-3的表达,实时荧光定量PCR检测相关基因表达。结果 PA和OA都均同时诱导HepG2细胞凋亡与自噬,但PA的影响明显强于OA;PA诱导HepG2细胞自噬相关基因LC3B和VPS38表达、促进脂肪酸β-氧化的PPARα基因mRNA水平升高,但对细胞内脂肪沉积没有明显作用;而OA则导致HepG2细胞内甘油三酯的水平明显增加,但对上述基因表达没有明显影响。结论饱和脂肪酸PA和不饱和脂肪酸OA均能引起HepG2细胞凋亡和自噬,但PA的作用强于OA。     

锌对L6细胞葡萄糖消耗量和蛋白激酶B/糖原合酶激酶3β表达的影响（英文）

目的以L6细胞为研究对象,观察锌对正常L6细胞及棕榈酸诱导的胰岛素抵抗L6细胞葡萄糖消耗量及胰岛素信号通路关键分子蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)/糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase,GSK3β)表达的影响。方法培养L6成肌细胞,分化后用0.4 mmol/L棕榈酸作用24h造胰岛素抵抗细胞模型,用100 nmol/L胰岛素和不同浓度的锌(0,10,20,50,100μmol/L)作用3h,葡萄糖氧化酶法测定基础状态和胰岛素刺激状态下细胞对葡萄糖的摄取量;用100 nmol/L胰岛素和不同浓度的锌(0,10,20,50μmol/L)作用15 min,Western blot法检测磷酸化AKT及磷酸化GSK3β表达水平。结果 10⁵0μmo/L的锌能明显提高正常L6细胞葡萄糖的消耗量和AKT/GSK3β的磷酸化表达,锌与胰岛素共刺激能显著激活AKT/GSK3β;而对于胰岛素抵抗L6细胞,1050μmo/L的锌能明显提高正常L6细胞葡萄糖的消耗量和AKT/GSK3β的磷酸化表达,锌与胰岛素共刺激能显著激活AKT/GSK3β;而对于胰岛素抵抗L6细胞,10⁵0μmo/L锌单独作用可明显提高其葡萄糖消耗量和GSK3β的磷酸化,1050μmo/L锌单独作用可明显提高其葡萄糖消耗量和GSK3β的磷酸化,10⁵0μmo/L锌与胰岛素共刺激能激活AKT的磷酸化表达。结论1050μmo/L锌与胰岛素共刺激能激活AKT的磷酸化表达。结论10⁵0μmol/L的锌可提高L6细胞的葡萄糖消耗量,这种作用可能与其增强AKT和GSK3β磷酸化水平有关。     

金雀异黄素对DDT类农药诱导乳腺癌细胞增殖效应的抑制作用

目的 探讨金雀异黄素( genistein,Gen)与DDT类有机氯农药(o,p’-DDT,p,p’-DDT和p,p’-DDE)联合作用对乳腺癌(MCF-7)细胞增殖效应的抑制作用.方法 取处于对数生长期的MCF-7细胞,分别加入含100 μmol/Gen 和0.1 μmol/L o,p’-DDT、0.1μmol/Lp,p’-DDT、10 μmol/Lp,p’-DDE单独作用组以及100 μmol/L Gen +0.1 μmol/Lo,p’-DDT、100 μmol/L Gen +0.1 μmol/Lp,p’-DDT、100 μmol/L Gen+10 μmol/LP,p’-DDE的培养基,并设溶剂对照(0.1％无水乙醇)组和雌激素对照(10-3 μmol/L雌二醇)组.培养48 h后,采用噻唑蓝(MTT)实验检测MCF-7细胞的增殖情况.结果 与溶剂对照相比,100 μmol/L的Gen作用组MCF-7细胞的增殖率下降,0.1 μmo/L的o,p’-DDT作用组MCF-7细胞的增殖率升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与相应DDT类农药单独组相比,Gen+o,p’-DDT、Gen+p,p’-DDT联合作用组MCF-7细胞的增殖率明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Gen能够抑制DDT类农药诱导的MCF-7细胞增殖效应.     

C5aR拮抗剂在油酸诱导的小胶质细胞炎性改变中的作用

目的观察油酸(oleic acid,OA)及C5a受体(C5aR)拮抗剂(PMX53)干预后小胶质细胞的炎性改变,探讨C5a-C5aR在油酸诱导的小胶质细胞炎症中的作用。方法取新生1 d龄小鼠,分离脑组织,原代培养小胶质细胞并进行分离纯化及鉴定。纯化小胶质细胞随机分成5组,分别为正常对照组、OA 100μmol/L处理组、OA 100μmol/L+PMX53 100 nmol/L处理组、OA 200μmol/L处理组、OA 200μmol/L+PMX53 100 nmol/L处理组。应用Western印迹、ELISA法检测不同浓度OA及OA+PMX53干预后小胶质细胞Iba-1、C5aR蛋白及TNF-α表达变化。结果成功培养小胶质细胞,且纯度≥99%。不同浓度OA干预后,Iba-1、C5aR蛋白表达及TNF-α浓度较对照组明显升高(P<0.01);OA+PMX53干预组较OA组Iba-1及TNF-α浓度有所下降(P<0.01);OA+PMx53干预组较OA组C5aR蛋白表达有所下降(OA100 vs.OA100+PMX53,P<0.05,OA200 vs.OA200+PMX53,P<0.01)。200μmol/L OA干预组较100μmol/L OA干预组Iba-1、C5aR蛋白表达及TNF-α浓度高(P<0.01)。结论应用C5aR拮抗剂可以抑制油酸诱导的小胶质细胞的炎症反应,提示C5a-C5aR参与了油酸诱发的炎症反应,推测C5aR拮抗剂在神经系统炎性损伤中具有神经保护作用。     

染料木黄酮对脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症因子、腺苷酸激活蛋白激酶磷酸化的影响

目的研究染料木黄酮(genistein,Gen)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症因子产生和腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)磷酸化的影响。方法体外培养RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞,加入1、5、10、50、100 mol/L的Gen共同培养,MTT法检测其对细胞活性的影响。将RAW264.7细胞随机分为4组:空白对照组不加任何药物,模型组加入终浓度为1 g/ml的LPS进行刺激,Gen高、低剂量组分别加入终浓度为10、5 mol/L的Gen预处理1h后,再加入终浓度为1 g/ml的LPS刺激,24h后收取细胞上清用酶联免疫(ELISA)方法检测TNF-α、IL-6含量,Westernblot检测AMPKα蛋白及其磷酸化的表达水平。结果 100 mol/L的Gen对体外培养RAW264.7细胞的增殖有影响,而其他浓度则无。LPS处理的RAW 264.7细胞与对照组比较,TNF-α、IL-6生成显著增多(P<0.01)、AMPKα磷酸化水平显著降低(P<0.01),而AMPKα总蛋白表达水平无差异(P>0.05)。Gen干预可减少LPS诱导的TNF-α、IL-6生成,上调AMPKα磷酸化水平的表达,与LPS组相比,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Gen能抑制LPS诱导巨噬细胞的炎症反应,减少TNF-α、IL-6生成,这可能与Gen促进AMPKα磷酸化,从而激活AMPKα有关。     

PPAR-γ激动剂Troglitazone对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞mPGEs蛋白表达的影响

目的　研究PPAR -γ激动剂Troglitazone对高浓度葡萄糖作用的大鼠肾小球系膜细胞mPGEs蛋白表达水平的影响。方法　用高浓度葡萄糖和不同浓度Troglitazone作用大鼠肾小球系膜细胞 ,ELISA法检测上清液中mPGEs浓度。结果　 5 %葡萄糖可使体外培养的大鼠系膜细胞mPGEs蛋白表达水平明显增高 ( P <0 0 5 ) ;10～ 2 0nmol/L的Troglitazone可明显抑制 5 %葡萄糖诱导的大鼠系膜细胞mPGEs蛋白表达水平的增高 (P <0 0 5 )。结论　高浓度葡萄糖可诱导体外培养的大鼠系膜细胞mPGEs蛋白表达水平明显增高 ,PPAR -γ激动剂Troglitazone可明显抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞mPGEs蛋白表达水平的增高     

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对HepG2细胞脂质代谢的影响

[目的]观察邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)及其代谢产物邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(MEHP)对人肝癌细胞株HepG2细胞脂肪代谢的影响,及其致肝损伤的作用机制。[方法]分别用不同浓度的DEHP(31.25、62.5、125、250、500、1 000μmol/L)、MEHP(3.125、6.25、12.5、25、50、100、250μmol/L)、完全培养基(阴性对照)、0.1%(体积分数)二甲基亚砜(溶剂对照)处理HepG2细胞24 h、48 h和72 h,采用MTT试剂盒检测细胞活力。不同浓度的DEHP(10.0、250.0μmol/L)、MEHP(4.0、100.0μmol/L)、完全培养基(阴性对照)、0.1%(体积分数)二甲基亚砜(溶剂对照)、0.5 mmol/L油酸(阳性对照)处理HepG2细胞48h,油红O染色法观察HepG2细胞脂肪累积。不同浓度的DEHP(2.0、10.0、50.0、250.0μmol/L)、MEHP(0.8、4.0、20.0、100.0μmol/L)、完全培养基(阴性对照)、0.5 mmol/L油酸、0.5μg/m L布雷德菌素A处理HepG2细胞24 h和48 h,Western blot法检测细胞内固醇元件调节蛋白(SREBP-1c)、肉毒碱棕榈酰基转移酶(CPT1A)、丙二酰辅酶A脱羧酶(MLYCD)和脂肪组织三酰甘油水解酶(ATGL)的蛋白表达。[结果]与阴性对照组相比,250.0~1 000.0μmol/L DEHP及50.0~250.0μmol/L MEHP染毒组HepG2细胞存活率降低,差异具有统计学意义(P0.05)。染毒48 h后,10.0、250.0μmol/L DEHP染毒组与4.0、100.0μmol/L MEHP染毒组HepG2细胞内可见红色脂滴,且伴有脂滴融合现象。与阴性质对照组相比,250.0μmol/L DEHP或100.0μmol/L MEHP染毒HepG2细胞24 h,50.0~250.0μmol/L DEHP或4.0~100.0μmol/L MEHP染毒HepG2细胞48 h,使CPT1A表达降低,差异具有统计学意义(P0.05);10.0~250.0μmol/L DEHP或4.0~100.0μmol/L MEHP染毒HepG2细胞48 h使MLYCD表达降低,差异具有统计学意义(P0.05);250.0μmol/L DEHP与20.0~100.0μmol/L MEHP染毒HepG2细胞24 h,10.0~250.0μmol/L DEHP与0.8~100.0μmol/L MEHP染毒HepG2细胞48h,可使ATGL表达降低,差异具有统计学意义(P0.05)。[结论]DEHP及MEHP染毒可引起HepG2细胞发生脂肪堆积,其过程可能与脂肪酸β-氧化受阻及三酰甘油水解受到抑制有关。     

人肝细胞系L02胰岛素抵抗细胞模型的建立及鉴定

[目的]采用高浓度胰岛素体外诱导培养法建立人肝细胞IR模型,为研究IR的发生发展机制及筛选改善IR的药物提供一种简便可靠的IR细胞模型。[方法]以人肝细胞系L02为研究对象,在含5×10-7 mol/L人胰岛素的培养液培养16 h,未用高浓度胰岛素培养者为对照组。之后两组分别加入0、1、10、50、100、200 ng/ml人胰岛素。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)法检测培养液中残存葡萄糖含量。[结果]在各浓度的胰岛素刺激下,高胰岛素诱导组培养液中残存葡萄糖含量均显著高于对照细胞(P﹤0.01)。[结论]用含5×10-7 mol/L胰岛素的培养液培养16 h的L02细胞产生胰岛素抵抗,作为IR肝细胞模型可广泛用于胰岛素抵抗的研究。     

球松素对C3H10T1/2细胞成脂分化的抑制作用研究

目的探讨山核桃叶提取物球松素对小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化的影响。方法 MTS法检测不同浓度球松素处理的细胞成活率以界定适宜的浓度范围;油红O染色法结合异丙醇萃取法定性和定量分析球松素对细胞成脂分化的影响;GPO-PAP酶法检测球松素处理后细胞中甘油三酯含量的变化;荧光定量PCR和Western blot分别检测成脂分化中C/EBPα、PPARγ、FABP4 mRNA和相关蛋白的表达水平。结果 30μmol/L、50μmol/L球松素对细胞成脂分化有明显的抑制作用,且能显著减少甘油三酯堆积;10μmol/L、30μmol/L、50μmol/L球松素能明显抑制PPARγ、C/EBPαmRNA表达;5μmol/L、10μmol/L、30μmol/L、50μmol/L球松素能明显降低FABP4 mRNA表达;50μmol/L球松素能明显降低PPARγ、C/EBPα和FABP4蛋白表达。结论山核桃叶提取物球松素对C3H10T1/2细胞成脂分化具有抑制作用,可能与调控PPAR信号通路和相关基因表达有关。     

不同类型脂肪酸对HepG2细胞胰岛素抵抗的作用及Toll样受体4表达的影响

目的观察不同类型脂肪酸对HepG2细胞胰岛素抵抗的作用及探讨可能的作用机制。方法 250μmol/L的棕榈酸(PA)、花生四烯酸(AA)以及二十碳五烯酸(EPA)分别与HepG2细胞共同培养24 h,葡萄糖氧化酶法测定细胞上清液中葡萄糖含量,酶联免疫吸附法测定炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,以及实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达。结果 PA组培养液中葡萄糖含量显著高于空白对照组(P<0.05),EPA组可增加葡萄糖消耗量,与PA组及AA组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。各脂肪酸干预组细胞上清液中炎性因子IL-6和TNF-α含量均增加,EPA组增加量最低,PA组和AA组上清液中IL-6含量与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。各脂肪酸干预组与空白组比较TLR4 mRNA表达量均增加(P均<0.05),EPA组增加量最低。结论高浓度PA降低了HepG2细胞对胰岛素的敏感性,能够引起胰岛素抵抗,AA具有降低胰岛素敏感性的趋势,而EPA则具有增加胰岛素敏感性的趋势,TLR4信号转导通路及其启动的炎症反应可能是其重要的作用机制。     

高糖膳食与PGC-1α基因多肽性相互作用对血脂比值的影响

目的探讨过氧化物酶增殖物活化受体辅激活因子-lα基因(PGC-lα)Gly482Ser多态性对健康青年血脂比值的影响及在高糖低脂(HC/LF)膳食诱导的血脂比值变化中的作用。方法 56名(22.89±1.80岁)健康青年志愿者,给予7d平衡膳食和6dHC/LF膳食,分别于d1、d8及d14清晨取空腹静脉血,测定血脂水平,计算甘油三酯/高密度脂蛋白-胆固醇(TG/HDL-C)、log(TG/HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)/HDL-C值、总胆固醇(TC)/HDL-C。提取基因组DNA,聚合酶链反应-限制性酶切法分别分析PGC-1αGly482Ser位点多态性。分析不同基因型受试者间血脂比值差异。结果无论是整体水平还是男女分组后,TG/HDL-C、log(TG/HDL-C)、LDL-C/HDL-C以及TC/HDL-C基础值、HC/LF膳食前和HC/LF膳食后在GG基因型受试者和A等位基因携带者之间均没有统计学差异。与HC/LF膳食前相比,在男性,HC/LF膳食后GG基因型受试者TC/HDL-C显著降低,A等位基因携带者除TC/HDL-C显著降低外,LDL-C/HDL-C也显著降低。在女性,HC/LF膳食后GG基因型受试者TC/HDL-C显著降低,A等位基因携带者除TC/HDL-C显著降低外,LDL-C/HDL-C也显著降低,TG/HDL-C、log(TG/HDL-C)却显著升高。结论 PGC-lαGly482SerA等位基因与HC/LF膳食后LDL-C/HDL-C降低有关,与女性TG/HDL-C、log(TG/HDL-C)升高相关联,具有明显的性别差异。     

α-亚麻酸植物甾醇酯调控Nrf2/GPX4信号通路抑制HepG2细胞铁死亡

目的 探讨α-亚麻酸植物甾醇酯（PS-ALA）对油酸与铁死亡诱导剂（OA/erastin）联合诱导的HepG2细胞铁死亡的改善作用，并基于Nrf2/GPX4信号通路进一步探索其潜在分子机制。方法 采用1mmol的OA和10μmol的erastin联合诱导HepG2细胞发生铁死亡，同时给予ALA、PS和PS-ALA干预。油红O染色观察HepG2细胞脂肪变性程度；Hoechst/PI双染评价铁死亡发生；蛋白免疫印迹检测铁死亡相关蛋白Nrf2、GPX4、HO-1、NQO1及ptgs2的表达水平；荧光探针检测细胞内ROS与脂质过氧化物水平。结果 与Control组相比，OA/erastin组细胞内有大量脂质沉积，ROS和脂质过氧化物显著增多，发生明显铁死亡。PS-ALA干预显著减轻OA/erastin诱导的HepG2细胞脂质沉积、减少细胞ROS与脂质过氧化物产生，抑制铁死亡。进一步的分子机制研究表明PS-ALA显著上调HepG2细胞Nrf2及其靶基因GPX4、HO-1与NQO1的蛋白表达水平。结论 PS-ALA能有效抑制OA/erastin诱导的HepG2细胞铁死亡，其分子机制可能与上调Nrf...     

锌对胰岛素抵抗靶细胞活力和葡萄糖消耗量影响

目的探讨锌对胰岛素抵抗靶细胞活力和葡萄糖消耗量的影响。方法建成Hep G2细胞、3T3-L1细胞和L6成肌细胞胰岛素抵抗模型后,用10-7mol/L胰岛素和不同浓度锌(0、20、50、100、200、400μmol/L)孵育细胞,通过MTT法和葡萄糖氧化酶法测定基础状态和胰岛素刺激状态下3种胰岛素抵抗细胞葡萄糖的消耗量。结果不同剂量的锌孵育3种细胞3 h后,200、400μmol/L的锌可明显抑制各组细胞的活力(P<0.05);50~100μmol/L的锌干预3 h能在不同程度上提高Hep G2、3T3-L1正常细胞和胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗量,但其作用效果明显低于胰岛素;其中100μmol/L的锌与胰岛素共同作用的效果分别优于胰岛素或锌单独作用的效果(P<0.05);对于L6肌细胞,20、50和100μmol/L锌均能明显提高基础状态下正常细胞和胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗量(P<0.05);仅有20μmol/L锌和胰岛素共同作用的效果优于胰岛素或锌单独作用的效果(P<0.05)。结论不同浓度的锌可以在一定程度上提高3种胰岛素抵抗的靶细胞葡萄糖摄取量,且不同的细胞具有不同的适宜作用剂量。     

血清尿酸和血脂检测在冠心病中的临床意义

目的 探讨血清尿酸(SUA )、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测结果与冠心病相关关系及其临床意义.方法 选取确诊冠心病病例153例为冠心病组,健康体检病例150例为健康对照组,测定两组SUA和血脂,并进行分析.结果 与健康对照组比较,冠心病组的SUA (498.4±73.4)μmol/L、血清TC (6.2±2.3 )mmol/L,TG (3.3±1.0 )mmol/L,LDL-C水平显著增高(4.2±1.6) mmol/L (P<0.05),HDL-C水平显著降低(1.1±0.5)mmol/L(P<0.05 ).结论 冠心病的发病与高SUA、高TC,高TG、高LDL-C及低HDL-C相关,联合检测SUA、血脂对冠心病病情监测具有一定价值.