DNA甲基化与糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病是糖尿病常见的并发症之一,其具体的发病机制目前并不完全清楚。近年来有研究表明,表观遗传学修饰可能在糖尿病肾病的发生、发展中起着十分重要的作用。表观遗传学修饰包括了DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA、基因组记忆、基因沉默等,其中研究较多的则是DNA甲基化。本文就DNA甲基化与糖尿病肾病之间的最新研究进展做一综述,以期为糖尿病肾病的临床诊治提供新的理论依据。     

Wnt2基因启动子DNA甲基化在子痫前期发病机制中的作用

目的 检测胎盘组织中Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度,探讨Wnt2基因与子痫前期发病的关系。方法 收集产科病房经剖宫产分娩的早发型重度子痫前期患者30例作为早发型重度子痫前期组(ZPE),晚发型重度子痫前期患者30例作为晚发型重度子痫前期组(WPE),同期住院经剖宫产分娩的正常晚期妊娠妇女30例作为对照组(NC)。采用甲基化特异性PCR技术检测三组胎盘组织中Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度。结果 与NC组相比,ZPE组及WPE组Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度均显著升高(P<0.05);ZPE组及WPE组差异无统计学意义。结论 正常晚期妊娠妇女、早发型及晚发型重度子痫前期患者的胎盘组织中,均存在Wnt2基因启动子区的DNA不完全甲基化。与正常晚期妊娠妇女相比,早发型重度子痫前期及晚发型重度子痫前期患者胎盘组织中Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度均明显增加。     

PGC-1α基因与2型糖尿病

过氧化物增殖激活受体协同激活子(PGC-1α、PGC-1或PPARGC1)是近年来发现的一种转录协同激活子，在多种糖尿病研究模型及部分人种中可见其异常表达。因此，成为探讨糖尿病的发生及药物治疗的新热点。     

2型糖尿病患者PBMC组蛋白甲基化研究

目的 该研究探讨了2型糖尿病(T2DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)组蛋白修饰情况.方法 收集12例T2DM患者及12例健康对照者的PBMC,采用H3K4/H3K9甲基化检测试剂盒提取组蛋白和检测H3K4/H3K9甲基化水平.实时荧光定量PCK法检测T2DM患者的PBMC组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶基因的mRNA表达水平.结果 与健康对照组比较,T2DM患者的PBMC组蛋白H3K4甲基化水平升高.实时定量PCR结果 显示T2DM患者组PBMC的SET1、SUV39H1、SUV39H2、KDM3A、KDM5B和LSD1基因表达分别是健康对照组的3.06、0.46、0.48、0.43、3.07和0.35倍.结论 2型糖尿痛患者外周血PBMC组蛋白甲基化呈现异常.     

维生素D受体基因启动子DNA甲基化与2型糖尿病合并骨质疏松症的关系

目的 探讨维生素D受体(Vitamin D receptor,VDR)基因启动子DNA甲基化水平与2型糖尿病(Type 2 diabetes,T2DM)合并骨质疏松症(Osteoporosis,OP)的相关性。方法 选择2021年1月至2022年1月在保定市第一中心医院就诊的93例T2DM合并OP患者作为观察组,选择同期与观察组性别分布及年龄相匹配的100例T2DM未发生OP患者作为对照组。测定空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG)、血钙、血磷和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、糖化血红蛋白(Glycosylated hemoglobin,HbA1c)、抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)及骨钙素(Bonegla protein,BGP)水平。分离两组患者外周血单个核细胞,测定VDR基因启动子区19个CpG位点的甲基化水平及VDR基因m RNA的相对表达量。结果 与对照组患者相比,观察组患者的血钙水平降低,TRAP水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),F...     

DNA和组蛋白表观遗传修饰在2型糖尿病发病中作用的研究进展

糖尿病是由遗传和环境因素相互作用而引起的代谢性疾病。表观遗传修饰被证实与糖尿病发病有关。表观遗传修饰包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA等。表观遗传通过DNA甲基化、组蛋白乙酰化和甲基化修饰等方式影响生命活动,其变化会影响糖尿病的发生发展。环境因素可以通过影响DNA甲基化及组蛋白修饰明显增加2型糖尿病的患病风险。DNA甲基化异常通过影响炎症反应和干扰胰岛的分泌从而导致糖尿病。组蛋白的翻译后修饰主要分为组蛋白的甲基化和乙酰化,通过作用于炎症反应、胰岛β细胞发育和胰岛素表达,从而影响糖尿病的发生发展。本文作者对2型糖尿病中可能的表观遗传学DNA甲基化和组蛋白修饰机制进行综述。     

MODY2基因在早发家族性2型糖尿病发病中的作用

目的:检测年轻的成人起病型糖尿病2型(MODY2)在中国家族性早发2型糖尿病中的患病率,探讨在MODY2基因中是否存在更常见的其他DNA变异,从而影响中国家族性早发2型糖尿病的遗传易感性.方法: 收集100个早发2型糖尿病家系,用PCR扩增先证者MODY2基因的所有外显子和外显子/内含子拼接区,将PCR产物测序.根据所发现的单核苷酸多态性(SNPs),通过同源引物延伸质谱分析(hME)法对非糖尿病对照人群进行基因分型.结果:在MODY2基因中发现3个DNA变异,外显子4的145密码子ccc→ccg为脯氨酸同义突变(pro145pro),外显子7的233密码子gcc→gcg为丙氨酸同义突变(ala233ala),内含子9的IVS9 8C>T.这三个变异等位基因频率分别为0.5%,0.5%,36%.对内含子IVS9 8C>T多态性的病例对照研究发现,等位基因T在糖尿病组频率显著低于非糖尿病对照组(36% vs 47%,P<0.05),而C等位基因频率高于对照组(64% vs 53%,P<0.05).结论:我们的研究提示MODY2在中国早发家族性2型糖尿病中患病率小于1%,MODY2 基因内含子9(IVS9 8C>T)多态性或附近的基因可能与早发2型糖尿病相关.     

2型糖尿病患者KCNJ11启动子区甲基化与胰岛β细胞功能的相关性研究

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者KCNJ11启动子区甲基化与基因转录表达、胰岛素抵抗指数(Homa-IR)、胰岛β细胞功能指数(Homa-β)等指标的关系.方法 选取2014年4月至2015年4月在东莞市第三人民医院内分泌科初治的T2DM患者15例,根据糖化血红蛋白(HbA1c)水平,将HbA1c≤9%的患者纳入A组(n=5),HbA1c>9%者纳入B组(n=10);选择15例健康者纳入对照组.用亚硫酸盐法测定KCNJ11基因启动子5'端300 bp中的46个CpG位点DNA甲基化水平,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定KCNJ11基因转录表达,并对KCNJ11启动子区甲基化与Homa-IR、Homa-β的关系进行相关性分析.结果 对照组受检者的CpG+62、CpG+66、CpG+351甲基化比率分别为(58±24)%、(46±17)%、(96±8)%,A组分别为(60±19)%、(42±18)%、(99±7)%,B组分别为(60±18)%、(41±20)%、(98±4)%,三组比较差异无统计学意义(P>0.05);T2DM组与对照组mRNA表达分别为(1.27±0.56)、(0.95±0.49),差异无统计学意义(P>0.05);B组患者的CpG+66与Homa-IR呈负相关(r=-0.696,P<0.05),CpG+62与CpG+66甲基化总和则与Homa-β呈负相关(r=-0.664,P<0.05).结论 2型糖尿病患者KCNJ11启动子区甲基化可能与胰岛β细胞分泌胰岛素的功能相关,并参与2型糖尿病的发病.     

RASAL2基因高甲基化与宫颈鳞癌患者放化疗敏感性的研究

目的 探讨RASAL2基因甲基化水平与宫颈鳞癌患者放化疗敏感性的关系。方法 收集2017年9月至2019年9月在西安交通大学第一附属医院接受同步放化疗(CCRT)治疗60例宫颈鳞癌患者肿瘤组织标本和10例正常宫颈组织。患者依据临床应答情况进行分类,其中完全缓解(CR)患者归为敏感组,部分缓解(PR)、疾病稳定(SD)和疾病进展(PD)患者归为耐受组。基于定量PCR和Western blot分别检测RASAL2基因启动子区甲基化状态和蛋白表达水平,并分析RASAL2基因甲基化和表达水平与患者临床数据的关联性。结果 与正常组织比较,宫颈癌组织RASAL2基因甲基化水平明显升高(0.317±0.029 vs. 0.174±0.078,P=0.020),耐受组高于敏感组(0.400±0.040 vs. 0.244±0.036,P=0.003)。敏感组(0.184±0.014)和耐受组(0.131±0.010)RASAL2基因表达水平均低于正常组(0.307±0.048),差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌组织RASAL2基因表达水平与RASAL2甲基化程度呈负相关(r=-0.665...     

磺酰脲受体1基因与2型糖尿病

在胰腺 β细胞膜上表达的磺酰脲受体 1(SUR1)是胰岛 β细胞ATP敏感钾通道 (KATP)的功能亚单位。SUR1作为调节亚基和ATP/ADP感受器与内向性整流K+通道Kir6 .2共同组成胰腺KATP通道 ,编码二者的基因被定位于人染色体11p15 .1上 ,两者相隔 4 .5kb。KATP是通过将糖代谢释放的信号与细胞膜的去极化和胰岛素的出胞作用相互连接而在葡萄糖诱导的胰岛素分泌中起关键作用。由于糖代谢产生ATP或由磺脲类药物的作用导致KATP的关闭提高了细胞内的K+的浓度并导致了 β细胞膜的去极化 ,导致电压依从性Ca2 +通道的打开 ,Ca2 +的内流及胞内C…     

2型糖尿病基因诊断的研究进展

2型糖尿病是一种典型的代谢性疾病,遗传因素是其主要的发病原因,传统的诊断方法很容易造成漏诊、误诊而耽误最佳治疗时机。基因诊断是利用分子遗传学技术在DNA或RNA水平上对某一基因突变进行分析从而对某些疾病进行诊断的一种方法,其具有直接诊断性、早期诊断性、高特异性、高灵敏性等优点,弥补了传统诊断的不足之处而被广泛应用。因此,从基因角度对糖尿病进行诊治,显得格外必要和有意义。     

GCKR基因多态性与2型糖尿病

2型糖尿病(T2DM)是多基因遗传变异和环境等多重因素共同作用的结果。葡萄糖激酶调节蛋白(GCKR)被认为是T2DM重要的易患基因之一。其两个单核苷酸多态性(rs780094和rs1260326)基因遗传位点与血糖水平、胰岛素分泌、三酰甘油水平及T2DM的发病有显著相关性。GCKR基因多态性可能通过降低胰岛素的分泌、降低血糖和增加三酰甘油水平,从而降低T2DM的易患性。     

2型糖尿病患者载脂蛋白E基因多态性的研究

目的：探讨中国人2型糖尿病患者载脂蛋白E（apoE)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法：采用聚合酶链反应－限制性酶切片段长度多态性法，分别对74例2型糖尿病患者及191例血脂、血糖正常且无糖尿病史者的apoE基因型、空腹血脂及载脂蛋白AI、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ及E进行全面分析。结果：2型糖尿病患者的血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC），低密度脂蛋白胆固醇（LDLC），非高密度脂蛋白胆固醇（nHDLC),载脂蛋白B100、CⅡ、CⅢ、E水平及TG／HDLC比值较对照组显著升高（P＜0．01）；血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLC），apoE/apoCⅢ比值显著降低（P＜0．05）。2型糖尿病组与对照组apoE基因频率分布无显著性差异（P＞0．05）。携带ε2等位基因组血清TG／HDLC比值较E3／3基因型显著降低；而携带ε4等位基因组血清apoAⅡ水平较E3／3基因型及携带ε2等位基因组显著升高（P＜0．001）。结论：2型糖尿病患者apoE基因多态性与血TG／HDLC及apoAⅡ有一定关联。     

亚甲基四氢叶酸还原酶C677T基因多态性与2型糖尿病关系的病例对照研究

目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T多态性与2型糖尿病（T2DM）的关系。方法 选取226例T2DM患者（病例组）和194例健康对照个体（对照组）,检测两组同型半胱氨酸水平,采用PCR-芯片杂交技术检测亚甲基四氢叶酸还原酶C677T多态位点基因型,计算等位基因频率并统计分析。结果 2组MTHFR基因C677T位点基因型和等位基因频率比较,差异均无统计学意义（P > 0.05）,MTHFR基因TT型同型半胱氨酸水平显著高于CC型及CT型。结论 MTHFR基因C677T多态性影响同型半胱氨酸水平,但与T2DM的发病无明显的相关性。     

2型糖尿病中医湿热困脾证的基因表达研究

[目的]从分子水平探讨2型糖尿病湿热困脾证的中医证候实质.[方法]抽取2型糖尿病气阴两虚证患者静脉血,检测血糖,血脂及电解质,分离血液中的白细胞,提取总RNA,化学发光方法检测基因芯片,用ScanAlyze软件采集图像,GEArray Ana-lyzer软件分析数据.对部分差异表达基因进行RT-PCR和Western-blotting方法验证.[结果]2型糖尿病湿热困脾证患者血糖,血脂,电解质与健康人有显著差异,基因芯片检测发现和健康人差异表达基因共38条,其中上调的基因有24条,下调的基因有14条.并发现湿热困脾证的特异性基因.通过RT-PCR和Western-blotting方法反向验证IRS-2和FOXC2基因,证实2型糖尿病湿热困脾证患者和健康人白细胞中存在IRS-2和FOXC2存在差异表达.[结论]应用基因芯片筛选2型糖尿病湿热困脾证的差异表达基因,为2型糖尿病辨证论治提供新思路.     

2型糖尿病并发骨质疏松症的相关因素

骨质疏松症是糖尿病的并发症之一,近年来其发病率有逐年升高的趋势,而糖尿病也增加了骨质疏松的治疗难度。糖尿病并发骨质疏松症的机制较复杂。影响糖尿病并发骨质疏松的因素有很多,包括晚期糖基化终末产物、胰岛素水平、胰岛素样生长因子、血糖代谢异常等,降糖药物也影响骨质疏松的发生,其中胰岛素、二甲双胍等是保护因素,而噻唑烷二酮类促敏剂是风险因素。深入研究影响骨质疏松发生的因素可指导疾病的治疗和预防,提高患者的生活质量。     

2型糖尿病常见治疗药物与骨折风险关系的研究进展

2型糖尿病(T2DM)是一种常见的慢性疾病,病程长的患者多伴有神经病变、视网膜病变、肾脏病变、心血管病变等并发症。T2DM导致骨折风险升高的机制尚未明确,可能是一系列因素(包括跌倒的风险增加、局部骨量减少以及骨质受损)综合作用的结果。另外,治疗糖尿病的药物也有可能增加骨折风险,深入研究糖尿病药物对骨代谢的作用机制有助于指导T2DM患者的临床用药。     

AHSG基因SNPs与2型糖尿病相关性研究

目的 研究AHSG基因SNPs在重庆地区T2DM患者和正常健康对照中的基因型频率、等位基因频率、单体型频率以及分布特征,以及AHSG等位基因、基因型及单体型与T2DM的相关性.方法 (1)采用等位基因特异PCR(Allele-specific PCR,AS-PCR)技术检测T2DM患者及对照组AHSG基因2个位点的SNP.(2)应用聚类分析方法分析基因多态性特征.结果 1、SNPrs1071592(C/A)(1)rsi071592基因型频率分布:T2DM组与对照组分别为C/C基因型为0.7167/0.6225,C/A基因型为0.1667/0.2000,A/A基因型为0.1166/0.1375.两组间等位基因型分布频率无显著差异(P值为0.1763 8).(2)rs1 071 592(C/A)等位基因频率:rs1 071 592的优势等位基因是C,其在T2DM组与对照组分别为0.8000/0.7225;A等位基因在两组中分别为0.2000/0.2375,P值为0.0237,分布差异显著.2、SNPrs2248690(A/T)(1)rs2248690基因型频率分布:T2DM组与对照组分别为:A/A基因型为0.7000/0.6825,A/T基因型为0.1583/0.1500,T/T基因型为0.141 7/0.1625.两组间等位基因型分布频率无差异(P值为0.21351).(2)rs1071592(C/A)等位基因频率:rs1071592的优势等位基因是A,其在T2DM组与对照组分别为0.78/0.76;T等位基因在两组中分别为0.22/0.24,P值为0.08,分布无显著差异.3、患者组和正常对照组单体型频率的分布SNPrs1071 592与SNPrs2248690的等位基因可构成四种单体型,其中CA型在中国汉族中最常见.T2DM患者及对照组分别为0.6250/0.5625,CT型为0.175/0.175,AA型为0.158/0.200,最少的是AT,只有0.0420/0.0625.其中AA单体型和AT单体型的分布具有统计学差异(P值分别为0.016及0.013).结论 重庆地区T2DM患者和正常人AHSG基因2个位点SNP基因型频率、等位基因频率及单体型频率的分布特征为认识T2DM患者提供了信息;rs1071592等位基因A与T2DM有较强的相关性,携带AA及AT单体型人群罹患2型糖尿病的风险可能较正常人群高.