共刺激分子OX40在急性脑梗死患者外周血调节性T细胞上的表达及其临床意义

目的探讨急性脑梗死患者外周血调节性T细胞(Treg)上共刺激分子OX40的表达情况及其临床意义。方法选择苏州大学附属第一医院神经内科自2019年4月至l2月收治的75例首次发病的急性脑梗死患者纳入病例组,选择同期招募的年龄、性别与病例组相匹配的36例健康志愿者纳入对照组。采用免疫荧光标记和流式细胞技术检测2组受试者肘静脉血中CD4+CD25+CD127^low Treg细胞上OX40的表达,并分析病例组的OX40^+Treg细胞比例与其美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、缺血半暗带体积、核心梗死灶体积、梗死灶体积的相关性,同时比较病例组的OX40^+Treg细胞比例在血管内治疗或静脉溶栓前后的变化。结果与对照组比较,病例组的外周血Treg细胞比例明显降低,OX40^+Treg细胞比例明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。病例组的外周血OX40^+Treg细胞比例与其NIHSS评分呈正相关关系(rs=0.271,P=0.018),与其缺血半暗带体积、核心梗死灶体积、梗死灶体积亦均呈正相关关系(rs=0.435,P=0.000;rs=0.343,P=0.003;rs=0.245,P=0.034)。病例组中血管内治疗患者的术后第7天外周血OX40^+Treg细胞比例较术前明显降低,静脉溶栓患者的术后第3、7天外周血OX40^+Treg细胞比例较术前明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论OX40在急性脑梗死患者外周血Treg细胞上异常表达,并与神经功能缺损、影像学表现及再灌注治疗密切相关。     

miR-124在血管性痴呆患者血清中表达差异及其意义

目的 探讨miR-124在血管性痴呆患者血清中表达差异及其意义。方法 选取2018年1月至2019年5月我院收治的血管性痴呆患者68例（观察组）,再选择体检结果显示为健康者50例（对照组）。治疗前,对患者的一般资料进行对比并对观察组和对照组的miR-124相对表达水平进行检测;治疗3个月后,对治疗前与治疗后miR-124相对表达水平进行对比,并根据治疗结果分为良好组与不良组,比较两组的miR-124相对表达水平。结果 治疗前miR-124的相对表达水平观察组高于对照组（P<0.005）。治疗后3个月后,观察组的miR-124的相对表达水平较治疗前低,差异有统计学意义（P<0.015）。良好组和不良组在年龄、性别、体重上,差异无统计学意义（P>0.05）;而在高血压、高血脂及miR-124上,差异有统计学意义（P<0.05）。ROC曲线分析发现,在预测血管性痴呆患者治疗后预后时,高血脂的AUC曲线下面积为0.742;高血压的AUC曲线下面积为0.705;血清miR-124相对表达水平的AUC曲线下面积为0.821。以最大约登指数计算得出最大AUC面积相应参数截止值,高血脂为5.220（敏感度=60.00%,特异性=85.70%）;高血压为1.965（敏感度=75.00%,特异性=69.00%）;血清miR-124相对表达水平为4.225（敏感度=80.00%,特异性=78.60%）。结论 miR-124表达水平有可能作为血管性痴呆患者预后不良的一个指标。     

血管性痴呆时ERPs的研究

本文报告血管性痴呆48例的ERP_s检测结果。其中多发性脑梗塞35例,皮层下动脉硬化性脑病13例。ERP_s中N_1、P_2、N_2、P_3波峰的潜伏期延长(P<0.001),P_2、P_3波峰的振幅降低。对ERP_s的检测方法、各波峰的神经生理心理学意义及实用价值作了讨论。     

糖酵解对辅助性T细胞17与调节性T细胞平衡的影响

辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg)在分化与功能上相互拮抗。Th17/Treg失衡与自身免疫性疾病的发病相关,对糖酵解途经的调节可影响Th17/Treg平衡,进而控制自身免疫性疾病的发展。该文就Th17/Treg细胞的糖酵解特点,以及主要的代谢传感器对Th17/Treg平衡的影响作一综述,旨在揭示Th17/Treg失衡的代谢机制,并为其失衡介导的自身免疫疾病的治疗寻找新的靶点。     

血管性痴呆小鼠海马细胞外信号调节激酶表达的变化

目的:观察血管性痴呆(VD)小鼠海马中细胞外信号调节激酶(ERK1、p-ERK)的表达特征,探讨其在VD发病中的作用机制。方法:采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型,设立假手术组作为对照。术后第29、30天,经跳台试验和水迷宫试验对各组小鼠进行行为学成绩测试,用免疫组化方法观察各组小鼠海马CA1区ERK1及海马CA3区p-ERK的表达变化。结果:VD模型小鼠学习、记忆成绩较假手术组显著下降(P<0.05)。模型组小鼠海马CA1区ERK1的表达及海马CA3区p-ERK的表达较假手术组减少,均有显著性差异(P<0.05)。结论:海马神经元内ERK的表达减少可能参与了血管性痴呆的发病机制,因此应用能促进ERK表达的药物可能成为治疗VD的有效方法之一。     

重症肌无力患者外周血Th17和调节性T细胞分析

目的 观察重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者Th17细胞和调节性T细胞的水平,并研究甲强龙冲击治疗对其影响.方法 应用四色流式细胞仪检测66例MG患者及35名健康对照者外周血Th17细胞和CD4+CD25highT细胞百分率;分析其中18例患者外周血Th17细胞与美国MG协会(MGFA)评分相关性;观察8例MG患者甲强龙冲击治疗2周后上述细胞的变化.结果 MG患者与健康对照者外周血Th17细胞百分率分别为2.61%±0.28%与0.94%±0.12%(Z=4.059,P=0.0001);甲强龙治疗前后8例MG患者Th17细胞百分率分别为4.72%±1.21%与1.81%±0.69%,差异有统计学意义(Z=1.995,P=0.0460);患者外周血Th17细胞水平与MGFA评分呈正相关(r=0.5359,P=0.0219).结论 MG患者外周血中Th17细胞升高,甲强龙冲击治疗可降低其水平,这可能是改善MG患者病情的有效机制.     

急性脑梗死患者外周血调节性T细胞及炎性因子表达水平与临床预后的相关性研究

目的 探讨急性脑梗死(ACI)患者外周血调节性T细胞(Treg)及炎性因子表达水平与临床预后的相关性.方法 收集首发ACI患者175例(ACI组)进行前瞻性分析,同期选取46例健康体检者作为对照组.ACI组于入院后第2天采集新鲜外周血标本,对照组于体检时采集.采用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+CD127(low...     

血红素加氧酶1在间充质干细胞上调哮喘患者外周血调节性T细胞中的作用

背景：上调CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞是目前治疗哮喘的新靶点。骨髓间充质干细胞在体外可上调正常人外周血的调节性T细胞,但机制尚未明确。 目的：观察血红素加氧酶1对间充质干细胞上调哮喘患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞的影响。 方法：分别加入0,15,30,45,60 μmol/L氯化高铁血红素和0,5,10,15,20 μmol/L锌-原卟啉对骨髓间充质干细胞进行预处理,荧光定量PCR检测各组间充质干细胞中血红素加氧酶1 mRNA的表达量。密度梯度离心法分离哮喘急性发作期患者和健康对照者的外周血单个核细胞,分别与经氯化高铁血红素预处理、经锌-原卟啉预处理、不经预处理的间充质干细胞共孵育,加入植物血凝素反应72 h,流式细胞仪检测各组CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞占CD4+T细胞的比例。 结果与结论：人骨髓间充质干细胞中有血红素加氧酶1表达,其表达在体外可被诱导和抑制。间充质干细胞中血红素加氧酶1 mRNA的表达量随氯化高铁血红素浓度增加而增加(P < 0.05),随锌-原卟啉浓度增加而减少(P < 0.05),具有剂量依赖性。间充质干细胞在体外可提高哮喘患者和健康对照者CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞的水平(P < 0.01),诱导间充质干细胞中血红素加氧酶1的表达可使共孵育后CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞水平提高(P < 0.01),抑制间充质干细胞中血红素加氧酶1的表达可使共孵育后CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞的水平降低(P < 0.01),但仍高于对照组(P < 0.01)。提示骨髓间充质干细胞部分通过血红素加氧酶1上调哮喘患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞。     

调节性T细胞及其免疫抑制机制

调节性T细胞是T细胞的一个重要亚型,对维持机体免疫动态平衡具有重要作用。调节性T细胞有两种类型:天然发生的调节性T细胞和诱导产生的调节性T细胞,前者在胸腺中发育;后者由外周幼稚CD4+T细胞衍生而来。调节性T细胞可利用多种机制抑制免疫应答,这些抑制机制可概括为4种基本的"作用模式":通过抑制性细胞因子发挥抑制作用,通过细胞溶解发挥抑制作用,通过代谢阻断发挥抑制作用,通过调节树突状细胞的成熟或功能发挥抑制作用。文中将天然调节性T细胞和诱导的调节性T细胞的发育以及调节性T细胞的免疫抑制机制做一综述,并简略介绍调节性T细胞在缺血性脑血管病中的作用。     

脐血单个核细胞治疗血管性痴呆的影像分析

目的 用SCT和MRI评价脐血单个核细胞治疗老年期血管性痴呆(VD)的疗效.方法 对18例多份人脐血单个核细胞静脉移植治疗VD患者细胞移植前后的SCT和MRI影像资料与临床资料进行对照分析.结果 脐血单个核细胞静脉移植治疗老年期VD的影像改变包括:脑梗死、脱髓鞘恢复差别有显著性(P＜0.05),脑萎缩恢复差别无显著性(P＞0.05).结论 脐血单个核细胞静脉移植治疗老年期VD能缓解大面积脑梗死、脱髓鞘情况,从而提高生活质量,脑萎缩不能缓解,但能延缓病情发展.     

重症肌无力胸腺基质淋巴细胞生成素表达与CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞表型的研究

目的探索重症肌无力患者胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达水平与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)表型的相关性。方法 MG组(16例经胸腺切除的MG患者)及对照组(23例先天性心脏病心脏手术后患者)取外周血单个核细胞,经CD4+CD25+抗体表面染色后加入破膜剂孵育,以Foxp3+抗体行胞内染色,以流式细胞技术检测CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T细胞比率;同时取两组患者对应的切除胸腺组织,以免疫组织化学法检测TSLP表达水平,并进行两组间比较;以Logistic回归分析方法分析TSLP阳性表达的Hassall小体计数与Treg细胞之间的相关性。结果CD4+CD25+/CD4+T细胞比率MG组〔(6.24±0.62)%〕与对照组〔(6.56±0.65)%〕无统计学差异(P>0.05),MG组CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T细胞比率〔(3.82±0.49)%〕较对照组〔(5.73±0.56)%〕明显降低(P<0.01);与对照组比较,MG组患者胸腺TSLP阳性面积大,染色深,且TSLP阳性的Hassall小体数目(6.81±2.17)明显低于对照组(18.87±3.06)(P<0.01)。MG组TSLP阳性表达的Hassall小体计数与Treg细胞表达量之间呈线性相关(R2=0.158,F=13.42,P<0.01)。结论 MG患者TSLP表达不足与胸腺Treg细胞发育过程中CD4+CD25+Foxp3+表型的表达缺陷呈正相关。     

重症肌无力患者Foxp3~+CD4~+CD25~+调节性T细胞与AChRAb、Titin-Ab的相关研究

目的探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者Foxp3~+CD4~+CD25~+调节性T细胞(Foxp3~+CD4~+CD25~+Treg)与乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)及连接素抗体(Titin-Ab)之间的关系,进一步揭示MG的发病机制。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测22例MG患者以及20名健康对照者血清AChRAb和Titin-Ab水平;采用流式细胞术(FCM)检测两组外周血中CD4~+CD25~+Treg的比例及其表达Foxp3的比例。结果 MG患者外周血CD4~+CD25~+Treg比例[(2.9±0.52)%]与健康对照组[(3.12±0.51)%]比较无统计学差异(P0.05);CD4~+CD25~+Treg细胞Foxp3表达比例为(37.24±9.57)%,低于健康对照组[(58.60±4.91)%](P0.01)。MG组CD4~+CD25~+Treg表达Foxp3比例与AChRAb、Titin-Ab水平[分别为(0.232±0.060)和(0.170±0.035)pg/mL]均呈负相关(r=-0.449,P0.05;r=-0.691,P0.01)。结论 Foxp3~+CD4~+CD25~+Treg细胞数目减少导致机体免疫功能缺陷是MG发病的重要环节。     

Glucocorticoids increase CD4CD25 cell percentage and Foxp3 expression in patients with multiple sclerosis

Objectives – To determine whether percentages of CD4⁺CD25^high T cells (a group of regulatory T cells, Treg) differ in patients with multiple sclerosis (MS) in relapse vs remission after glucocorticoid treatment and whether treatment for relapses changes Treg population and the expression of Foxp3, a key Treg‐associated molecule. Materials and methods – Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were obtained from 20 patients with MS during relapse, just before and 2 days after starting steroid treatment (i.v. methylprednisolone 1 g/day for 3 days) and then 6 weeks after treatment. CD4⁺CD25^hi cells were analysed by using flow cytometry. Cytokines were measured by using an ELISA and Foxp3, CD3 and CD25 expression by using quantitative real‐time PCR. Results – The percentage of CD4⁺CD25^hi cells, plasma IL‐10 and Foxp3/CD3 ratio increased 48 h after methylprednisolone initiation and returned to baseline values by 6 weeks post‐treatment. Conclusions – Results suggest that glucocorticoids increase Treg cell functional molecules and percentages. This may be a mechanism whereby steroids expedite recovery from MS relapses.     

帕金森病大鼠CD4+CD25highFoxP3+调节性T细胞的变化

目的 研究帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠外周血中调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的改变,并探讨其与脑内免疫炎症反应的相关性.方法 SD大鼠随机分为对照组、假手术组、PD 4周组、PD 2周组.PD 4周组和2周组定向注射6-羟多巴建立PD大鼠模型,假手术组注射PBS缓冲液,PD 2周组于术后第2 周,其他组于术后第4 周时,应用免疫荧光染色法观察各组大鼠黑质处酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经元、离子钙接头蛋白分子-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1,iba-1)和胶原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acid protein,GFAP)阳性细胞数量及形态的改变,并通过流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测其外周血中CD4+CD25highFoxP3+ Treg 占T 淋巴细胞比例的变化.结果 PD4 周组TH 阳性神经元偏侧毁损率(91.33%±8.53%)较对照组和假手术组增加(P<0.01),且较PD2周组(64.56%±17.94%)毁损更为严重(P<0.05).PD4周组iba-1阳性细胞增加率(82.60%±11.52%)和GFAP阳性细胞增加率(86.62%±6.80%)较对照组及假手术组均增加(P<0.01),但PD 4 周组较2 周组iba-1 阳性细胞增加率(104.89%±13.39%)和GFAP 阳性细胞增加率(117.92%±15.34%)均减少(P<0.05).FCM示PD4周组大鼠外周血中CD4+CD25highFoxP3+ Treg占T淋巴细胞的比例(0.64%±0.08%)较对照组、假手术组及PD2周组均降低(P<0.01).另外,外周血T淋巴细胞中Treg比例变化与TH 阳性神经元毁损率(r=-0.59,P<0.01)、iba-1 阳性细胞增加率(r=-0.87,P<0.01)和GFAP 阳性细胞增加率(r=-0.89,P<0.01)均呈负相关.结论 PD大鼠外周血中Treg比例减少且可能与脑内免疫炎症反应相关.     

CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3与多发性硬化的关联

调节性T细胞(regulatoryT cell.Treg)是一类具有免疫调节功能的T细胞哑群,它们在维持外周免疫耐受、预防自身免疫性疾病的发牛过程中起着重要作用.     

Immunotherapy of rat glioma without accumulation of CD4~+CD25~+FOXP3~+ regulatory T cells

Immunotherapy may be used for the treatment of glioblastoma multiforme;however,the induced immune response is inadequate when either T cells or dendritic cells are used alone.In this study,we established a novel vaccine procedure in rats,using dendritic cells pulsed with C6 tumor cell lysates in combination with adoptive transfer of T lymphocytes from syngenic donors.On day 21 after tumor inoculation,all the rats were sacrificed,the brains were harvested for calculation of glioma volume,cytolytic T lymphocyte responses were measured by cytotoxic assay,and the frequency of regulatory T lymphocytes(CD4+CD25+FOXP3+) in the peripheral blood was investigated by flow cytometric analysis.The survival rate of rats bearing C6 glioma was observed.Results showed that the co-immunization strategy had significant anti-tumor potential against the pre-established C6 glioma,and induced a strong cytolytic T lymphocyte response in rats.The frequency of peripheral blood CD4+CD25+FOXP3+ regulatory T lymphocytes was significantly decreased following the combination therapy,and the rats survived for a longer period.Experimental findings indicate that the combined immunotherapy of glioma cell lysate-pulsed dendritic cell vaccination following adoptive transfer of T cells can effectively inhibit the growth of gliomas in rats,boost anti-tumor immunity and produce a sustained immune response while avoiding the accumulation of CD4+CD25+FOXP3+ regulatory T lymphocytes.     

肾移植患者外周血中的CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞

背景：越来越多的实验在分析免疫耐受标志,以期能够更好地辅助患者进行移植后免疫抑制治疗。 目的：分析肾移植后患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞在肾移植免疫耐受中的作用。 方法：采集62例肾移植后患者(急性排斥反应组22例,移植稳定组40例)及20例健康对照者的外周抗凝血,经免疫染色,应用流式细胞仪分析CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞所占CD4+ T细胞百分含量,同时采用ELISA方法检测患者血清中白细胞介素2和白细胞介素10的质量浓度。 结果与结论：移植稳定组中CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞所占CD4+ T细胞百分含量显著高于健康对照组和急性反应排斥组(P < 0.01);CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞百分含量与白细胞介素2呈显著负相关(P < 0.05),与白细胞介素10呈显著正相关(P < 0.01)。提示CD4+ CD25+ CD127low/-调节性T细胞在肾移植后免疫耐受的机制中发挥了一定作用。     

EAE大鼠胸腺CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞的动态变化及α-硫辛酸的干预作用

目的探讨实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠不同病程中胸腺CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞变化情况及α-硫辛酸对EAE大鼠胸腺的干预作用。方法取不同时期对照组、自然病程EAE组及α-硫辛酸EAE组大鼠的胸腺组织做流式细胞学,动态检测CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的变化情况。结果 EAE组大鼠急性期、复发期CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞较同时期对照组明显减少(P<0.05),缓解期有所上升;α-硫辛酸组与同期EAE组相比CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞无明显变化;半年期三组大鼠胸腺CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞都明显下降,各组间无统计学差异。结论 CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞参与了EAE的发病,与病程的发展密切相关;α-硫辛酸对EAE大鼠的干预作用并非通过CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞发挥其治疗作用;随着年龄的增长,胸腺不再是机体的主要免疫器官。     

糖皮质激素对多发性硬化患者外周血淋巴细胞CD80和CD4+CD25+T细胞表达的影响

目的探讨糖皮质激素(GC)对多发性硬化(MS)患者外周血淋巴细胞CD80和CD4+CD25+T细胞表达的影响。方法利用流式细胞仪检测21例MS急性期患者GC治疗前后外周血淋巴细胞CD80和CD4+CD25+T细胞阳性率,并与正常对照组比较;比较MS患者治疗前后扩展功能障碍状况量表(EDSS)评分的变化。结果MS患者急性期外周血淋巴细胞CD80的阳性率[(5.031±1.782)%]较正常对照组[(6.436±2.035)%]明显下降(P<0.05),经GC治疗后CD80的阳性率[(6.467±1.882)%]明显增高(P<0.01);CD4+CD25+T细胞阳性率治疗前后与正常对照组间差异均无统计学意义;治疗后EDSS评分[(3.64±1.79)分]较治疗前[(4.26±1.68)分]明显下降(P<0.01)。结论GC可上调MS患者淋巴细胞CD80的表达,抑制细胞免疫,促进MS病情缓解。