细菌培养快速药敏与鉴定试验探讨

目的：探讨用快速方法进行细菌鉴定与药敏试验。方法：1．快速法：对Bact／ALERT 3D培养仪显示阳性的标本进行涂片、染色、细菌计数，调整菌液浓度后，用ATB鉴定仪配套试条，直接进行鉴定与药敏试验。2．标准法。结果：对63例阳性标本用快速法与标准法进行鉴定与药敏试验进行比较。葡萄球菌，肠杆菌科细菌，非发酵菌(以铜绿假单胞菌为主)菌属符合率为95％以上，菌种符合率89％至95％以上，所有药敏试验结果符合率在95％-97．2％。结论：葡萄球菌，肠杆菌科细菌，非发酵菌快速法与标准法的鉴定、药敏试验符合率高，效果满意。     

临床检出细菌的耐药现状分析

目的：对我院2000年各科室送检标本细菌的检出及对抗生素耐药进行分析，为临床抗感染治疗提供参考依据。方法：细菌鉴定及药敏试验采用全自动细菌生化分析仪（VITEK-Ams）。结果：全年分离病原菌1 193株，其中革兰阳性菌440株，革兰阴性菌753株；革兰阳性菌中金黄色葡萄球菌占51.6%、肠球菌占13.9%，金黄色葡萄球菌中包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）122株，占金黄色葡萄球菌的54%；革兰阴性菌中构成比最大的前3种病原菌为铜绿假单胞菌（24%）、肺炎克雷伯菌（16%）和大肠埃希菌（12%）；大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱酶（ESBLs），产酶率分别为43%和39%。结论：我院主要感染病原菌为革兰阴性杆菌，而金黄色葡萄球菌为主要的革兰阳性病原菌；我院主要致病菌的构成与国内大医院基本相同，多重耐药菌占很大的比例。     

MTT法在细菌活性检测及药敏试验中的应用

目的探讨四甲基偶氮唑盐（MTY）法在细菌活性检测和药敏试验中的应用价值。方法分别采用MTT法和微量肉汤稀释法检测鲍曼不动杆菌活性以及鲍曼不动杆菌对丁胺卡拉霉素和头孢他啶的敏感性,对两种方法的操作过程和结果进行比较。用统计软件SPSS16．0对检测结果进行分析。结果随着细菌浓度增加,微量肉汤稀释法和MTT法检测的活菌或死菌的吸光度值均增加,但用微量肉汤稀释法检测的同一浓度的活菌和死菌的吸光度值之间差别不大,t检验结果显示差异无统计学意义（P〉0．05）;而与用MTT法检测的同一浓度死菌吸光度值相比,MTT法检测的活菌吸光度值明显增加,t检验结果显示差异均有统计学意义（P〈0．05）;用微量肉汤稀释法和MTT法检测的鲍曼不动杆菌对丁胺卡拉霉素和头孢他啶的敏感性均与临床药敏结果一致。结论同微量肉汤稀释法一样,MTT法可以用于检测细菌活性和药敏试验。     

广州地区菌血症常见病原菌及耐药性调查

目的：探讨菌血症常见病原菌及其耐药性。方法：收集广州地区12所医院菌血症患者分离的565株病原菌，按NCCLS标准进行药敏试验。结果：主要病原菌有大肠埃希菌、葡萄球菌、克雷伯菌属和铜绿假单胞菌等，金黄色葡萄球菌(SA)和凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）中耐甲氧西林SA(MRSA)和耐甲氧西林CNS(MRCNS)分别为37.4%和81.0%，大肠埃希菌和克雷伯菌属产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的发生率是37.3%和37.9%，肠杆菌属对第三代头孢菌素的耐药率较高。结论：在临床使用抗菌药物治疗时，应重视细菌耐药性的问题，及时掌握细菌对抗攻药物耐药的最新动态。     

拉萨市区不同深度土壤细菌学调查

本文报告了拉萨市区０￣１ｃｍ、１５ｃｍ、３０ｃｍ深土壤中需氧菌和厌氧菌总数及与创伤感染有关的主要菌种。在０￣１ｃｍ深土壤中需氧菌总数最高，与１５ｃｍ和３０ｃｍ深有非常显著差异（Ｐ〈０．０１），１５ｃｍ深土壤厌氧菌总数最高，与０￣１ｃｍ和３０ｃｍ深有显著差异（Ｐ〈０．０５）。与创伤感染有关的细菌主要有大肠杆菌、绿脓杆菌，产气英膜梭菌等条件致病菌。     

肠杆菌科产ESBLs细菌的临床分布和耐药分析

目的探讨临床常见标本中肠杆菌科感染菌中的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的分布和耐药情况。方法对湖南省人民医院2008—2010年中肠杆菌科检出的病原菌应用法国生物梅里埃ATB Expression分析仪鉴定,CLSI推荐的双纸片确认ESBLs菌株和进行药敏检测。结果在肠杆菌科4330株细菌中共检出2445株产ESBLs菌,检出率占病原菌57．3％,以痰、尿液、分泌物、脓液等标本检出率为高,不同标本类型检出差异有统计学意义（P〈0．05）;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌菌属组在不同标本类型中产ESBLs组间比较差异有统计学意义（P均〈0．01）,产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌菌属组中检出差异无统计学意义（P均〉0．05）。各临床病区产ESBLs菌分析：儿科、肾内科、肝胆科、泌尿外科感染的产ESBLs菌均占感染菌56．1％以上,不同病区间产ESBLs检出差异有统计学意义（P〈0．05）;对4种病原菌中产ESBLs中病区比较：大肠埃希菌属组、肺炎克雷伯菌属组中差异有统计学意义（P均〈0．01）;产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌菌属组中检出差异无统计学意义（P均〉0．05）。分析20种抗菌药物对4330株细菌中产ESBLs表明：ESBLs阴性菌株已有相当部分耐药,产ESBLs菌株对绝大部分抗菌药耐药,氨苄西林、哌拉西林、头孢类几近完全无效,对阿米卡星部分耐药,唯一可选的只有亚胺培南对产ESBLs菌敏感。结论产ESBLs菌是肠杆菌科感染菌中主要致病菌,且广泛耐药,在使用抗菌药物治疗前必须加强耐药监测、严格合理选择用药。     

临床细菌耐药分析及耐药酶的检测

目的监测本地区2000-2006年临床细菌的构成分布及耐药性,并检测其是否产耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRS)、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。方法MicroSCANAUTOSCAN4半自动鉴定药敏仪对送检标本进行菌种鉴定和药敏试验,琼脂筛选法检测MRS、MRCNS,K-B纸片扩散法检测ESBLs,比较产酶株与非产酶株对抗菌药物的活性。结果8448份临床标本检出各种细菌2436株,检出率为28.84%,种类以革兰阴性杆菌为主,占45.26%,最常检出的细菌依次为大肠埃希菌、CNS(-)葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、肠球菌属、金黄色葡萄球菌,MRS、MRCNS、ESBLs检出率高,耐药性强,耐药谱广。结论临床分离菌以条件致病菌为主,耐药株分离高,建议临床医生根据药敏试验合理用药,以减少耐药菌株产生。     

西藏地区三种不同海拔高度土壤细菌学调查

于１９９２年夏秋季节对西藏地区４５００ｍ以下三种海拔高度１５ｃｍ深土壤进行了需氧、厌氧菌总数及种类调查。结果表明，需氧菌总数平均１１．１×１０５～３０．１×１０５个／ｇ之间；厌氧总数平均７．９１×１０３～８．５４×１０３个／ｇ之间。经ｔ检验和χ２检验，三种海拔高度之间需氧、厌氧菌总数相差不显著（Ｐ＞０．０５）；除臭鼻克雷伯菌相差显著（Ｐ＜０．０５）外，其它需氧、厌氧菌种类与海拔高度无关；三种海拔高度之间需氧菌、厌氧菌种类总的阳性检出率相差都不显著（Ｐ＞０．０５）。结果表明，４５００ｍ内海拔高度对土壤中的细菌生长繁殖没有影响。     

老年患者下呼吸道感染病原菌变迁及耐药状况分析

目的 了解某院老年患者下呼吸道感染病原菌的变迁及耐药状况，为临床诊断与治疗提供依据。方法 采用WHONET-4软件统计分析2001--2003年门诊和住院患者中年龄〉60岁患者的痰培养及药敏结果。结果 大肠埃希菌、葡萄球菌属、肺炎链球菌导致的下呼吸道感染日益增多（P〈0．05）。葡萄球菌属对苯唑西林，链球菌属对青霉素类，肠杆菌科对第三代头孢菌素，假单胞菌属对哌拉西林等经验治疗中常用药物的敏感率呈逐年下降趋势；产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株、耐青霉素的肺炎链球菌（PRP）及耐甲氧西林的葡萄球菌（MRS）等特殊耐药菌在老年患者下呼吸道感染相应菌种中已分别占26．61％，18．52％，23．03％。结论 老年患者下呼吸道感染病原菌不断变迁，耐药性增强；监测细菌耐药性并定期报告，对选择正确的治疗策略，促进患者康复具有重要意义。     

细菌性尿路感染病原菌构成及其耐药性研究

目的：研究细菌性尿路感染病原菌构成及其耐药性。方法：搜集2011年8月—2013年8月我院接收的细菌性尿路感染198例患者，对其病原菌构成及其耐药性进行总结性分析。结果：大肠埃希菌构成比高于其他病原菌，差异显著，有统计学意义（P<0.05）。氨苄青霉素的耐药菌较多，耐药率较高，有统计学意义（P<0.05）。其次为氧呱嗪青霉素、环丙沙星、头孢唑林钠、头孢他啶等。结论：细菌性尿路感染病原菌以大肠埃希菌为主。氨苄青霉素耐药率较高。必须加强对细菌培养及药敏试验的重视，合理应用抗生素。     

2007年细菌耐药监测结果分析

目的总结和分析某医院2007年细菌耐药监测资料。方法采用API系统鉴定细菌到种,以纸片扩散法进行药敏试验（按照美国临床实验室标准化研究所2007年标准）,药敏结果以WHONET5.4软件进行统计分析。结果全年共分离3 107株细菌,革兰阴性菌占60.93％,革兰阳性菌占27.78％,真菌占11.30％。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌分别占金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的60.58％和77.35%。屎肠球菌的分离数和耐药率均高于粪肠球菌（P<0.05）,氨基糖苷类高度耐药肠球菌的产生率为59.44%。大肠埃希菌和克雷伯菌属超广谱β 内酰胺酶产生率分别为59.50％和55.98%。63.97%的铜绿假单胞菌来源于痰标本,不同科室痰标本中分离的铜绿假单胞菌耐药率从高到低依次为重症监护室（21.05%）、神经外科（15.99%）、呼吸急救儿科（7.09%）、呼吸内科（6.07%）。结论定期总结医院细菌耐药监测结果,发现细菌呈多重耐药趋势,对规范医生合理使用抗菌药物具有重大意义。     

73株志贺菌属细菌对11种抗生素的耐药性分析

目的研究志贺菌属细菌的耐药状况及其特点。方法采用改良Kirby-Bauer纸片法对临床分离的73株志贺菌属细菌进行11种抗生素的药敏试验,并对其耐药特点进行分析。结果志贺菌属细菌对除庆大霉素以外的传统抗生素四环素、链霉素、氯霉素、磺胺甲基异恶唑、氨苄西林的耐药率较高,在68.5%～86.3%之间;对头抱类性抗生素头孢噻吩的耐药率为34.2%;对不同喹诺酮类药物的耐药率在36.9%～79.5%之间,差异有显著性(P值均小于0.05);志贺菌属细菌的多重耐药率为79.5%,存在地区及菌型分布差异(P<0.05)。结论志贺菌属细菌对多种抗生素表现耐药,但存在地区和菌型差异,特别是对庆大霉素耐药率较低,可增加其临床应用;使用喹诺酮类药物治疗菌痢时,应做多种喹诺酮类药物药敏试验。     

葡萄球菌属的分离鉴定与耐药性监测

目的探讨临床感染标本葡萄球菌属的分布特点及其耐药状况。方法对医院细菌室2001年1月-2004年12月,分离菌鉴定为葡萄球菌属的病原学和药敏试验结果进行回顾性分析。结果4年共分离病原菌1446株,其中葡萄球菌属11种297株（20.5%）,金黄色葡萄球菌（40.7%）、表皮葡萄球菌（29.6%）、溶血葡萄球菌（8.0%）、腐生葡萄球菌腐生亚种（4.7%）、人葡萄球菌（4.3%）居前5位;121株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）占82株（67.8%）;176株凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）占112株（63.6%）;MRSA、MRCNS除对利福平、氯霉素耐药率较低外（〈38.0%）,对所选其他抗菌药物耐药率较高（〉55.0%）,且表现多重耐药;而甲氧西林敏感葡萄球菌（MSS）除对青霉素G、大环内酯类、复方新诺明耐药率较高外（〉40.0%）,对所选其他抗菌药物则表现出良好抗菌活性,未发现耐万古霉素葡萄球菌。结论加强临床感染标本葡萄球菌属的分离鉴定尤其加强MRS检测,依据药敏试验合理使用抗菌药物非常重要。     

对肠杆菌属等产AmpC酶的检测及耐药分析

目的：检测荣成市临床标本中肠杆菌属。枸橼酸杆菌、大肠埃希菌、克雷伯菌、沙雷菌产AmpC酶的现状，并同时进行药敏实验。方法：采用头孢西丁三维试验方法检测AmpC酶及K—B法检测药敏。结果：330株细菌中产AmpC酶13株，分别属于不同的菌属，药敏结果显示产AmpC酶菌株对头孢三代的耐药情况很严重达到53.8％--100％，而对IPMl00％敏感。结论：细菌产AmpC酶应引起临床医生的关注，合理使用抗生素，必要时应首选亚胺培南进行抗感染治疗或根据实际药敏结果选择抗生素。     

裸磁珠对高菌量细菌吸附性能的初步研究

目的：研究不同实验条件下自制裸磁珠对细菌吸附效率，优化吸附条件，为后续裸磁珠的应用研究奠定基础。方法：考察不同的磁珠用量、菌量、孵育温度、孵育时间下磁珠对细菌吸附效率，比较磁珠的保存方法对其吸附率的影响。用磁珠吸附定量细菌后计数残留菌数，计算其吸附率。结果：磁珠用量与吸附率近似正相关，吸附容量与原始菌最存在对数线性相关。温度影响吸附效率。孵育时间40min后吸附率无明显差异，达到平衡。此外，干式和湿式保存的磁珠，对试验细菌的吸附率无明显差异。结论：自制裸磁珠以50mg（干式）37℃孵育40min对高菌量试验菌（〉10^6cfu／ml）有较高的吸附效率（〉80％），可望用于样品中细菌的分离富集。     

青岛地区葡萄球菌属临床分布及耐药性监测

目的了解青岛地区临床分离的葡萄球菌属细菌特点及耐药状况，为临床用药提供依据。方法收集青岛地区4所医院临床分离的1286株葡萄球菌属，采用ATBExpression自动细菌鉴定系统对菌种进行鉴定，用K-B法进行药敏试验和克林霉素诱导试验，并结合临床资料进行分析。结果共分离出葡萄球菌属1286株，其中金黄色葡萄球菌580株（45．1％），居第1位；表皮葡萄球菌382株（29．7％），位居第2；其他如溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、沃氏葡萄球菌等均占有一定比例；1286株葡萄球菌属中共检出耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）954株，占74．2％；384株红霉素耐药而克林霉素敏感的葡萄球菌中，D试验阳性181株，占47．1％；MSS对青霉素和红霉素的耐药率较高，分别为81．3％～81．9％和45．1％～52．3％；MRS对万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因和利福平等敏感性高，对其余多种抗菌药物耐药。结论临床分离菌中的葡萄球菌属日益增多，对抗菌药物的耐药率增高，应重视MRs的检测和药敏试验，临床医师应根据药敏结果合理有效地选用抗菌药物。     

5岁以下儿童肺炎病原菌构成变化与耐药性变化临床监测分析

目的 了解近5年5岁以下儿童肺炎细菌构成变化与耐药性变化.方法 多平板多条件进行细菌培养,BioMerieux VITEK 2型全自动微生物仪进行普通菌种鉴定(ID卡)和药敏试验(AST卡),采用形态学与生物特征进行流感嗜血杆菌鉴定,WHONET5.3软件进行统计分析.结果 5年检出细菌1 206株,革兰阴性菌占比高于革兰阳性菌4.2个百分点.肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌及溶血葡萄球菌为主要病原菌种,构成比分别为20.6％、16.3％、14.9％、9.5％、8.6％,4年间构成比变化分别为降3.3％、降2.0％、降1.2％、升1.0％、升0.1％.79个药敏试验组合中,42个(53.2％)在发生耐药率变化,29个(36.7％)为耐药率增高,7个增幅在40％以上.结论 近5年5岁以下儿童肺炎病原菌种构成比例小幅变化,主要菌种对常用抗菌药的耐药率在不断变化中,耐药总水平呈增高趋势.     

麻疹继发细菌性肺炎病原菌培养和药敏试验结果分析

目的探讨麻疹继发细菌性肺炎的病原菌构成及药敏试验结果。方法采用回顾性研究法,对2007年4月至2008年12月,在本院确诊的105例麻疹继发细菌性肺炎患儿下呼吸道合格痰标本,进行细菌培养并分析。根据药敏试验前的临床用药及疗效,结合痰培养结果,将其分为药敏组（n=80）和耐药组（n=25）（本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准）。结果①感染类型：革兰阴性菌感染为92例（87．60％）,其中前3位为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、副流感嗜血杆菌。革兰阳性菌感染为8例（7．62％）,其中肺炎链球菌为6例,金黄色葡萄球菌及溶血性链球菌各为1例。真菌感染为5例（4．76％）。②药敏试验结果：对革兰阴性菌,亚胺培南敏感率为100．00％。氨基糖苷类、喹诺酮类及氧哌嗪/舒巴坦钠亦有较高药敏率。对革兰阳性菌,利福平药敏率为100．00％,万古霉素、氧氟沙星为87．50％。对真菌,氟康唑、两性霉素B药敏率为100．00％。③疗效及转归：药敏组治疗无效为19例,根据药敏试验结果调整治疗方案后,其中17例（89．40％）治愈,2例未愈。耐药组治疗无效为25例,根据药敏试验结果调整治疗方案3d后,其中21例（84．00％）病情恢复,2例并发气胸死亡,2例未愈出院。结论麻疹继发细菌性肺炎的病原菌多为条件致病菌,部分与院内感染有关,故早诊断、早隔离、早明确病原菌及根据药敏试验结果合理选择抗菌药物,可降低细菌耐药性。     

84种沙雷菌对20种抗生素的耐药性分析

目的 研究沙雷菌属的分布情况以及沙雷菌属对抗菌药物的体外敏感性,为临床合理用药提供参考.方法 对笔者所在医院2008年1～12月临床分离的84株沙雷菌的菌种分布和抗菌药物药敏情况进行统计分析.细菌鉴定和药敏采用黑马生物鉴定加药敏板进行,数据分析采用WHONT 5.0版软件.结果 沙雷菌属对第一、二代头孢菌素的耐药率〉90%,对第三、四代头孢菌素的耐药率在30%左右,未发现对碳青霉烯类抗生素耐药的菌株,对氨基糖苷类抗生素的耐药率因抗生素的种类不同而异.结论 沙雷菌属对第一、二代头孢菌素有很高的耐药率,对第三、四代头孢菌素和氨基糖苷类抗生素也表现出不同程度的耐药,临床医生应重视其引起的感染.     

泌尿系统感染细菌病原学临床监测分析

目的了解近4年泌尿系统感染(UTI)细菌构成比与耐药性变化。方法采用多平板不同条件接种UTI患者尿标本进行细菌培养,采用BioMerieux VITEK2型全自动微生物仪与ID卡进行菌种鉴定,采用双纸片表型确证扩散法进行产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌检测,采用Kirby-Bauer琼脂扩散法进行抗菌药物敏感试验,采用WHONET5.3软件进行数据统计分析。结果检出细菌768株,分布为G+菌/G-菌=26.4%/73.6%,大肠埃希菌占比49.2%。其他优势菌Sa、Se、ET、Kp、Ec及Pa占比分别为7.6%、6.8%、5.2%、6.5%、5.7%及4.9%,耐药率增高/持平/降低的品种分别为9/4/3、7/7/2、8/4/4、11/4/3、12/5/1及12/4/2个。134个药敏试验组合中82个(61.2%)为耐药率增高。结论 UTI细菌构成比例与耐药性在不断变化中,主要菌种对常用抗菌药的耐药率超6成在增高。提高标本送检率,加强临床监测,对减缓细菌抗药性蔓延与恶化有积极意义。