葛根素对心肌梗死大鼠心肌iNOS，eNOS蛋白表达及AKT磷酸化水平的影响

目的:探讨葛根素诱导血管生成的分子机制.方法:通过大鼠心肌梗死动物模型,运用Western-blot的方法检测心肌iNOS、eNOS,AKT,p-AKT的蛋白表达.结果:葛根素120mg/kg腹腔注射四周能不同程度增加心肌梗死大鼠缺血区域和非缺血区域心肌eNOS蛋白表达以及AKT磷酸化水平,而对iNOS蛋白表达没有明显的影响.结论:葛根素诱导血管生成作用的分子机制与其促进AKT磷酸化水平,从而激活eNOS,使NO生成增加有关.     

葛根素对心肌梗死大鼠心肌HIF-1、eNOS、VEGF基因表达及血清NO浓度的影响

目的:探讨葛根素诱导血管生成的分子机制。方法:通过大鼠心肌梗死动物模型,运用分光光度法检测血清NO水平;RT-PCR的方法检测心肌HIF-1、VEGF、eNOS mRNA的表达。结果:葛根素120 mg/kg腹腔注射4周能不同程度增加心肌梗死大鼠缺血区域和非缺血区域心肌VEGF mRNA、eNOS mRNA、HIF-1 mRNA的表达和血清NO的含量。结论:葛根素诱导血管生成作用的分子机制与其激活HIF-VEGF-AKT-eNOS-NO信号转导通路有关。     

葛根素注射液对心肌梗塞后大鼠缺血心肌血管新生及VEGFmRNA表达的影响研究

目的观察葛根素注射液对大鼠缺血心肌血管新生和缺血心肌血管内皮生长因子mRNA(VEGFmRNA)表达的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉后,随机分为葛根素注射液组、麝香保心丸组(阳性对照)、模型组(阴性对照),并设假手术组。6周后检测各组大鼠缺血心肌中微血管数(MVC)、微血管密度(MVD)及VEGFmRNA的表达及其灰度值。结果模型组、麝香保心丸组及葛根素注射液组大鼠心肌梗塞边缘区MVC和MVD较假手术组明显增多(P<0.05);葛根素注射液组明显高于模型组(P<0.05),与麝香保心丸组相似(P>0.05)。模型组VEGFmRNA表达及其灰度值明显高于假手术组(P<0.05);葛根素注射液组明显高于模型组(P<0.05),低于麝香保心丸组(P<0.05)。结论葛根素注射液可促进大鼠缺血心肌血管新生,其机制可能与促进VEGFFmRNA的表达有关。     

葛根素对兔血管内皮细胞凋亡及凋亡基因GRP78表达水平的影响

目的 观察葡萄糖调节蛋白(glueose regulated Protein,GRP)78在动脉粥样硬化(AS)组织中的表达,探讨葛根素防治动脉粥样硬化的可能机制.方法 葛根素诱导培养的兔血管内皮细胞凋亡,组织原位杂交观察凋亡基因GRP78在兔斑块组织中的表达水平.结果 兔斑块组织原位杂交显示该基因片段在动脉粥样硬化斑块组织中表达水平增高.结论 葡萄糖调节蛋白78在As细胞质中表达增高,可能是葛根素作用靶点之一,如上调该基因,则可促进内皮细胞凋亡,将对动脉粥样硬化治疗产生一定作用.     

葛根素对大鼠心肌肥厚的相关细胞因子的影响

目的:探讨葛根素(Puerarin,Pue)对异丙肾上腺素(Isoproterenol,Iso)所致大鼠心肌肥厚的相关细胞因子的影响。方法:40只SD大鼠随机分成正常对照组(空白组)、异丙肾上腺素组(Iso组)、葛根素组(Pue组)和卡托普利(Captoril,Cap)组(Cap组)各10只。通过皮下注射Iso制成心肌肥厚模型,以葛根素干预,卡托普利为对照,对4组大鼠行心室重量指数(VW/HW)、心肌细胞横径(TDM)、血液和组织中的内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量的测定。结果:Iso组的上述指标与空白组相比显示心肌肥厚模型制备成功(P<0.01);Pue组数据显示Pue能改善Iso所引起的NO含量降低和其它指标的升高,与Cap组之间指标无明显差异。结论:葛根素对异丙上腺素所致大鼠心肌肥厚的相关细胞因子具有一定的调节作用。     

葛根素抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及c-fos和bcl-2蛋白表达

目的：观察葛根素对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及对c-fos和bcl-2蛋白的表达作用,旨在认识葛根素作用的分子机制。方法： 建立凝血酶（T）诱导VSMC增殖的模型,以细胞计数和流式细胞仪DNA含量测定、细胞周期分析法观察T及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。T及葛根素等各处理因素作用24 h后,用免疫印迹法（Western blot）检测c-fos蛋白和bcl-2蛋白表达。结果：T对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24 h 末达峰,且T在0.1～1.0 U·L^-1有剂量依赖关系；葛根素呈剂量依赖性地抑制T诱导的细胞增殖、DNA合成以及 VSMC c-fos和bcl-2蛋白的表达。结论： 葛根素能抑制T诱导的VSMC增殖,这可能与其抑制c-fos和bcl-2蛋白表达有关。     

葛根素对大鼠血脂水平影响的研究

目的研究中药葛根素对大鼠血脂水平的影响。方法通过实验分组(空白对照组,实验对照组,实验组)喂养大鼠,采用酶联试剂(盒)使用半自动生化分析仪分别测定甘油三脂肪酸(TC)、胆固醇(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量。结果葛根素能有效降低大鼠血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量(P<0.01),而明显升高HDL含量和HDL-C/TC比值(P<0.01)。结论葛根素具有明显的降脂作用。     

葛根素对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:探讨葛根素(Puerarin,Pue)对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法:40只SD大鼠随机分成空白组、糖尿病模型组、Pue低剂量组和Pue高剂量组各10只。对4组大鼠行空腹血糖、心肌细胞凋亡指数(AI)、免疫组化和Western-Bloting检测。结果:Pue各治疗组均较模型组有显著意义改变:空腹血糖降低;AI下降;Bcl-2表达升高,Caspase 3和Cyt-C表达均下降;且高剂量组的改善情况更为理想。结论:Pue可以改善糖尿病大鼠空腹血糖和AI,其机制可能与调节Bcl-2、Caspase 3和Cyt-C水平有关。     

芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌mRNA表达水平的影响

目的用RT-PCR检测中成药芎芍胶囊对心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生作用。方法采用开胸结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌梗死模型,SD大鼠分为模型对照组和芎芍胶囊高、中、低剂量组,灌胃给药,连续给药6周;RT-PCR法检测缺血心肌EGF、VEGF、TGF-β1、PDGF-A、PDGF-BB等促血管生成因子的表达。结果其中芎芍胶囊低、中、高剂量组VEGF、EGF与模型对照组比较均有统计学意义,高剂量组对VEGF的促进作用较中、低剂量组有统计学意义,中剂量组对EGF的促进作用较高、低剂量组有统计学意义,对照组对TGF、PDGF促进作用较高、中、低剂量组有统计学意义。结论芎芍胶囊具有促进心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生、提高心肌梗死大鼠心肌细胞VEGF、FGF、EGF蛋白的表达、具有保护心肌缺血性损伤的作用。     

补气活血药对急性心肌梗死模型大鼠梗死心肌边缘区域SDF-1、CXCR4蛋白及mRNA表达的影响

目的:观察补气活血药对急性心肌梗死模型大鼠梗死心肌边缘区新生微血管数目以及基质细胞衍生因子-1（SDF-1）、趋化因子受体（CXCR4）蛋白及mRNA表达的影响。方法：建立大鼠急性心肌梗死动物模型,采用免疫组化SP法检测心肌组织中VIII因子相关抗原（vWF）蛋白的表达,计数微血管数目（MVC）;用Western Blot和Real-Time PCR技术检测各组大鼠梗死心肌边缘区域的SDF-1因子和其特异性受体CXCR4蛋白和基因表达情况。结果：假手术组、模型组、各给药组大鼠梗死心肌边缘区域均可见vWF因子标记染色的新生微血管,假手术组大鼠心肌中新生微血管不明显,模型组大鼠梗死心肌边缘区域可见到少量新生成的微血管,各给药组大鼠梗死心肌边缘区域可见较多新生微血管。模型组与假手术组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;各给药组与模型组相比较差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。与假手术组比较,模型组大鼠心肌中SDF-1、CXCR4蛋白和mRNA表达明显增多（P＜0.05或P＜0.01）;与模型组比较,各给药组SDF-1、CXCR4蛋白和mRNA表达均明显增多（P＜0.05或P＜0.01）。结论：丹参、丹参黄芪药对等药物可以促进血管的生成,推测这些药物促进血管生成的机制可能是通过促进SDF-1、CXCR4蛋白及mR原NA表达水平,从而增加SDF-1、CXCR4的含量以促进新生血管的生成。     

麝香保心丸对心肌一氧化氮合酶及左室功能的影响

观察了麝香保心丸对心肌组织内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）的表达及左室功能的影响,在大鼠心梗模型上治疗组给予麝香保心丸３３ｍｇ／ｄ２或６周,用心导管测定心脏功能,免疫组织化学地测定心肌ｅＮＯＳ水平,结果表明,麝香保心丸可同时增加心肌ｅＮＯＳ的表达水平,改善心梗后左室收缩及舒张功能。     

Hypolipidemic Effects of Andrographolide and Neoandrographolide in Mice and Rats

Andrographolide (AND) and neoandrographolide (NEO) are the diterpenoids from the Andrographis paniculata (Acanthaceae). It is reported the diterpenoids exhibit a wide spectrum of biological activities. The aim of this study was to investigate the hypolipidemic effect of AND and NEO in hyperlipidemic mice induced by 75% yolk emulsion and in hyperlipidemic rats induced by high fat emulsion, respectively. The results showed that the levels of triglyceride, total cholesterol (TC) and low‐density lipoprotein cholesterol were reduced by AND and NEO in a dose‐dependent tendency in mice. Compared with the model group, the plasma TC levels of experimental groups with AND and NEO at 100 mg/kg dosage decreased by 23.9 and 20.2% in rats, respectively (P < 0.05). It was also found that the plasma aspartate transaminase and alanine transaminase levels were significantly decreased by feeding with AND and NEO in rats, compared with positive group (simvastatin) (P < 0.01). Otherwise, AND and NEO could protect the cardiovascular due to down‐regulation of iNOS expression and up‐regulation of eNOS expression. In conclusion, AND and NEO have potent hypolipidemic effects and protect the cardiovascular without significant liver damage. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

益气活血法对血瘀证兔缺血再灌注心肌eNOS蛋白表达的影响

目的研究益气活血法对血瘀证缺血再灌注损伤（IRI）兔心肌eNOS蛋白表达的影响,以探讨其对心肌1RI保护作用机制。方法建立兔血瘀证IRI模型,以加味丹参饮对该模型进行干预,采用免疫组化法观察心肌eNOS蛋白表达。结果IRI组心肌eNOS蛋白表达降低,与空白组比较差异具有统计学意义;加味丹参饮组可以提高eNOS蛋白表达,与IRI组比较差异具有统计学意义。结论益气活血法可以提高eNOS蛋白表达,其为保护心肌IRI作用机制之一。     

葛根素对大鼠心肌缺血/再灌注损伤中Apelin表达的影响

目的：观察葛根素对新发现的小分子活性肽Apelin在大鼠心肌缺血/再灌注损伤中表达的影响。方法：将SD大鼠60只,随机分成4组：缺血/再灌注（IR）组即缺血20min后再灌注180min;葛根素＋缺血/再灌注（IP）组;假手术（SH）组和正常对照（NC）组。体表心电图标Ⅱ导联全程记录,进行心律失常得分评估;用放免法测定各组大鼠血浆中Apelin-36蛋白含量变化;RT-PCR方法观察心肌Apelin mRNA表达。结果：（1）葛根素IP组心律失常得分仅为IR组的69.9%（P〈0.01）。（2）血浆Apelin-36浓度：SH组、IR组、IP组分别是NC组93.4%（P〉0.05）、51.5%（P〈0.01）和73.5%（P〈0.01）。IP组比IR组含量高,两者有统计学差异（P〈0.01）。（3）心肌Apelin mRNA的表达：IR组明显降低,仅为NC组的40.2%（P〈0.01）;IP组为NC组的68.1%（P〈0.01）;IP组比IR组高（P〈0.05）。结论：药物葛根素处理后能使大鼠血浆Apelin-36含量及心肌中ApelinmRNA表达升高。提示葛根素能影响小分子活性肽Apelin在大鼠心肌缺血/再灌注损伤过程中的表达。     

电针“内关”对内毒素休克鼠肝组织一氧化氮合酶活性的影响

目的 :观察电针“内关”对内毒素休克时肝功能的保护作用和肝组织一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法 :静脉注射内毒素 (LPS) 1.5mg/kg、腹腔注射D 氨基半乳糖 (D GalN)10 0mg/kg造成内毒素休克模型 ,用电针“内关”和氨基胍 (AG)作对照干预处理 ,取血清检测肝功四项 ,用免疫组化方法检测诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)、内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)在肝组织内的表达。结果 :电针“内关”可以使肝功四项中ALT、AST、LDH值显著下降 ,使肝内iNOS表达减弱、eNOS表达增强 ,肝损害减轻。结论 :电针“内关”可以减轻内毒素休克造成的肝损害 ,这种保护作用可能是通过调节肝组织NOS表达而产生的     

首乌丹参方预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤PKC与iNOS mRNA表达的影响

目的观察首乌丹参方(GTSMP)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(I/R)保护作用。方法将实验大鼠分为假手术组、模型组、首乌丹参方高剂量组(9g生药/kg)、首乌丹参方中剂量组(4.5g生药/kg)、首乌丹参方低剂量组(2.25g生药/kg)、阳性对照药复方丹参滴丸组(4.5g生药/kg)、工具对照药消心痛组(1.67mg/kg),共7组。采用结扎大鼠冠状动脉前降支30min/开放120min建立心肌I/R模型。通过RT-PCR分子生物学方法,观察蛋白激酶C(PKC) mRNA和iNOS mRNA的表达情况以及首乌丹参方预处理对其的影响。结果与假手术组相比,模型组和首乌丹参方各组PKC mRNA表达均有所下降;与模型组相比,首乌丹参方中剂量组、复方丹参滴丸组和消心痛组表达上调,均表现出显著性差异,首乌丹参方高剂量组及低剂量组也能促进PKC mRNA的表达,但没有显著性差异;假手术组心肌iNOS mRNA弱表达,模型组呈现高表达,首乌丹参方可下调iNOS mRNA基因表达。结论首乌丹参方预处理可促进I/R的大鼠心肌的PKC表达,下调I/R大鼠心肌iNOS mRNA的表达;其通过激动PKC,使心肌组织iNOS mRNA弱表达,可能是首乌丹参方对缺血再灌注损伤的心肌的保护效应机制之一。     

黄芪失笑散对急性心肌梗死大鼠Fas、FasL表达的影响

目的:观察不同剂量黄芪失笑散对急性心肌梗死大鼠梗死边缘区细胞凋亡及Fas、FasL蛋白表达的影响.方法:取雄性SD大鼠60只,随机分为黄芪失笑散高剂量组、黄芪失笑散中剂量组、黄芪失笑散低剂量组、模型组和对照组.连续灌胃7d后,结扎冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,对照组不结扎.手术后4.5h留取心脏标本,采用原位末端标记染色法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,采用Western blot法检测Fas、FasL蛋白表达量.结果:与对照组比较,黄芪失笑散各组可明显降低心肌细胞凋亡指数和Fas、FasL的蛋白表达量(P＜0.01).不同剂量组间差异无统计学意义(P＞0.05),且黄芪失笑散大剂量组效果最好.结论:黄芪失笑散能够保护急性心肌梗死大鼠的缺血心肌,其作用机制可能与降低梗死边缘区Fas、FasL蛋白表达水平从而抑制心肌细胞凋亡有关.     

丹蒌片对心肌梗死大鼠心肌Bcl-2,Caspase-3表达的影响

目的:观察丹蒌片对异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)所致急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)大鼠心肌梗死面积和心肌原癌基因Bcl-2 (B-cell lymphoma leulemia-2,Bcl-2)、半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartates pecific proteinase-3,Caspase-3)表达的影响.方法:雄性Wistar大鼠40只随机分为4组:空白组(生理盐水10 mL·kg-1);模型组(生理盐水10 mL·kg -1);丹蒌高剂量组(900mg·kg-1);丹蒌低剂量组(450 mg·kg-1),各组10只,连续ig 14 d.14 d后除空白组以外,其他各组一次性sc Iso 15 mg·kg-1制备急性心肌梗死模型.造模后24h观测心肌病理形态学、梗死面积、心肌Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平.结果:与模型组比较,丹萎片900 mg·kg-1可明显减轻缺血心肌病理损害程度,缩小心肌梗死面积[2组依次为(2.185±0.637)％及(1.224±0.365)％,P＜0.01],上调缺血心肌Bcl-2积分吸光度(IA):(27.32±7.00及42.41±8.13,P ＜0.01)蛋白表达,下调心肌Caspase-3积分吸光度(IA):(38.40±6.33及26.26±6.79,P＜0.01)蛋白表达.结论:丹萎片通过上调心肌Bcl-2蛋白表达,下调Caspase-3蛋白表达,减轻心肌细胞凋亡,减少心肌梗死面积,保护心肌缺血损伤.