夹心法ELISA检测血吸虫循环抗原的研究

用抗血吸虫成虫抗原的多克隆抗体为捕捉抗体，抗虫卵抗原的单克隆抗体ＭＧ２为标记抗体的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ检测血吸虫循环抗原。对慢性血吸虫病的阳性率为９５．４％；检测正常人血清２２２份，１１例假阳性，对１７例肺吸虫病人和４０例其他寄生虫病人的交叉反应率分别为１１．７％和２．５％；检测血吸虫病中度流行区人群６２２名和低感染区人群１０９９名，阳性率分别为２２．５％和４．６％。对血吸虫病疗效考核的结果表明     

三联抗原酶免疫试验诊断日本血吸虫病

用血吸虫成虫—卵—尾蚴三联抗原EIA,检测类卵阳性患者血清94份、非疫区有疫水接触史皮试阳性者血清190份、基本消灭血吸虫病地区人群血清205份,阳性率分别为100％、27.9％及10.2％。69份肝吸虫病人血清,虫卵抗原EIA假阳性率为1.4％;与72份肺吸虫病人血清未显交叉反应;153份献血员血清,其虫卵及尾蚴抗原EIA假阳性率分别为1.3％和2.6％。用三联抗原EIA、成虫粗抗原ELISA、COP及CHR检测94份粪卵阳性患者血清,仅卵抗原EIA 阳性率明显高于COP;成虫及尾蚴抗原 EIA的阳性率分别和成虫粗抗原 ELISA、CHR 的阳性率相同。     

金标免疫渗滤法（DIGFA）快速检测血吸虫循环抗原的研究

目的建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法在已建立的检测血吸虫抗体的DIGPA基础上，以抗血吸虫重组蛋白SVLBP多抗为捕捉抗体，金标抗SEA多抗为覆盖抗体，建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心DIGFA。结果用该法检测了急性血吸虫病病人血清30人份和慢性血吸虫病病人血清38人份，其阳性检出率分别为100％和52．6％；120人份流行区健康人血清全为阴性；100人份非流行区健康人群血清的阴性符合率为100％，与10例华支睾吸虫病病人血清无交叉反应；15例肺吸虫病病人血清有1例阳性，交叉反应率为6．7％；与双夹心ELISA的符合率为97.4％，经x^2检验表明两法检测效果无显著性差异。结论用DIGFA检测血吸虫循环抗原具有较高的敏感性和特异性，并且方法简便、快速、不需特殊仪器设备，有广阔的应用前景。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断日本血吸虫病的研究

本文系采用血吸虫可溶性虫卵抗原,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测日本血吸虫粪便孵化阳性血清144份;痰检肺吸虫卵阳性血清27份;正常人血清127份。当被检血清稀释为1:200时,选择阳性诊断标准为OD492nm≥0.4时,则144份阳性血清检出率为98.5％;27份肺吸虫阳性血清和127份正常人血清的交叉反应和假阳性分别为7.4％和2.4％。如果将诊断标准定为≥0.6时,则血吸虫病人检出率为95.8％;27份肺吸虫血     

日本血吸虫成虫67kDa分子抗原的纯化及其对血吸虫病的诊断和疗效考核

目的 为检测日本血吸虫成虫67kDa分子抗原(SjAWA67)对血吸虫病的诊断及疗效考核价值。方法 通过SDS-PAGE和电渗方法,从日本血吸虫成虫抗原中分离纯化出67kDa分子抗原,并用该抗原包被酶标反应板微孔,进行ELISA检测。结果 SjAWA67的纯度已达到电泳纯和免疫纯,对急、慢性血吸虫病患血清的捡出率分别为100％和95％,与正常人血清、肝吸虫病和肺吸虫病患血清均未出现明显的交叉反应,44例血吸虫病患治疗后3、6和12个月后的阴转率分别达45．5％、75．0％和90,9％。结论 SjAWA67分子抗原具有较好的疗效考核价值和现场应用前景。     

肺吸虫抗原与日本血吸虫病兔血清的交叉反应

肺吸虫成虫粗抗原与日本血吸虫病兔血清可出现交叉反应,煮沸后的成虫粗抗原与血吸虫病兔血清也存在交叉反应。成虫粗抗原经Sephadex G-200过柱后得到两个蛋白峰,环状沉淀试验、对流免疫电泳和间接血凝试验证实,第1个蛋白峰与血吸虫病兔血清存在交叉反应,第2个蛋白峰无交叉反应。成虫粗抗原、煮沸的成虫粗抗原和过柱后得到的两个蛋白峰,分别经圆盘电泳后作过碘酸雪夫(PAS)染色,证实第2个蛋白峰不含糖蛋白。由此推断,肺吸虫成虫粗抗原与抗血吸虫血清发生交叉反应的成分是一类热稳定的糖蛋白。     

日本血吸虫成虫67kDa分子抗原的诊断价值

为检测日本血吸虫成虫67kDa分子抗原（sjAWA67）对血吸虫病的诊断价值,本研究通过SDS-PAGE和电渗方法,从日本血吸虫成虫抗原中分离纯化出67kDa分子抗原,并用该抗原包被酶标反应板微孔,进行常规ELSA检测。结果对急、慢性血吸虫病患者血清的检出率分别为100％和95％,与正常人血清、肝吸虫病和肺吸虫病患者血清均未出现明显的交叉反应,44例血吸虫病患者治疗后3、6和12个月后的阴转率分别达45.5％、75.0％和90.9％。表明SjAWA67蛋白具有较好的疗效考核价值和现场应用前景。     

血吸虫病间接红细胞凝集试验的标准化研究——抗原的筛选及标准化

分别用日本血吸虫的虫卵可溶性抗原(SEA)、成虫尿素提取抗原(AUA)、成虫表皮膜抗原(ATA)以及SEA与AUA、SEA与ATA的混合抗原致敏绵羊红细胞,并用于检测198例日本血吸虫病人血清,IHA的阳性符合率分别为95.45％、84.67％、90.23％、98.08％、96.25％;检测100例健康人血清,结果全部阴性;检测191例肺吸虫病,旋毛虫病、华枝睾吸虫病和囊虫病患者血清,其总交叉反应率分别为13.61％(SEA)、3.14％(AUA)、4.71％(ATA)、8.37％(SEA+ATA)和3.66％(SEA+AUA)。结果表明:SEA+AUA的制备方法简单,并具有较高的敏感性和特异性。     

应用日本血吸虫成虫31/32KD抗原诊断血吸虫病

采用IHA和ELISA对纯化的日本血吸虫成虫31/32KD抗原与虫卵可溶性抗原的诊断特异性和敏感性进行比较。结果表明,前者的特异性高,检测正常人血清未见假阳性反应,与肝吸虫或肺吸虫病人血清无交叉反应;治后一年的阴转率达70％,故疗效考核价值较高。二种抗原的敏感性无显著差异。     

DOT—ELISA对斯氏肺吸虫病的免疫诊断研究

用DOT－ELISA（斑点－酶联免疫吸附试验）对20例斯氏肺吸虫病进行检测，19例阳性反应，阳性检出率为950％，26例对照血清中，12例日本血吸虫病，2例阳性，交叉反应率16．9％．同时，对DOT－ELISA的特异性，敏感性进行研究，32例其他血吸虫病和肺部疾病血清经该法检验，出现交叉反应率为12．5％．24例可疑斯氏肺吸虫血清分别用DOT－ELISA和平板－ELISA检测，阳性总符合率为85．7％．本文认为DOT－ELISA具有较高的特异性、敏感性，成本低,操作简便，观测结果直接，为期氏肺吸虫病免疫诊断的较好方法．     

日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3对日本血吸虫病的诊断价值

目的 探讨纯化的日本血吸虫(中国大陆株)重组信号蛋白14—3—3(rSjl4—3—3)诊断血吸虫病的价值。方法 利用纯化的rSjl4—3—3抗原与成虫抗原，间接EUSA法检测急、慢性日本血吸虫病患者血清。结果 急、慢性血吸虫患者血清rSjl4—3—3抗体检出率为100％和92．0％，与正常人血清未出现交叉反应；抗AWA抗体检出率为98．0％和94．0％，与正常人有7．3％的交叉反应。结论 rSjl4—3—3为抗原诊断日本血吸虫病显示出高度的敏感性和特异性，具有实用价值。     

检测日本血吸虫病胶体碳试纸条的研制与初步应用

目的：开发一种快速检测血清中日本血吸虫抗体的免疫诊断方法。方法：用胶体碳标记日本血吸虫成熟虫卵可溶性抗原（SEA）,与待测血清中日本血吸虫抗体结合,再用SEA包被在硝酸纤维素膜（NC膜）上以捕捉碳标SEA-血吸虫抗体复合物,达到检测血吸虫抗体的目的。 结果：检测137份血清,与间接血凝法（indirect haemagglutination assay,IHA）检测结果一致性为98.54%,如经IHA试剂盒检测呈阳性者即视为阳性血清,则该方法的检测敏感性为98.99%,特异性为97.37%;且检测条带的灰度与血清效价具有曲线关系,因而可以对待测血清作半定量分析。 结论：胶体碳试条层析法操作简便,快速,具有较高的敏感性和特异性,适合作血吸虫现场检测。     

检测日本血吸虫病胶体碳试纸条的研制与初步应用（英文）

目的：开发一种快速检测血清中日本血吸虫抗体的免疫诊断方法。方法：用胶体碳标记日本血吸虫成熟虫卵可溶性抗原（SEA）,与待测血清中日本血吸虫抗体结合,再用SEA包被在硝酸纤维素膜（NC膜）上以捕捉碳标SEA-血吸虫抗体复合物,达到检测血吸虫抗体的目的。结果：检测137份血清,与间接血凝法（indirect haemagglutination assay,IHA）检测结果一致性为98.54%,如经IHA试剂盒检测呈阳性者即视为阳性血清,则该方法的检测敏感性为98.99%,特异性为97.37%;且检测条带的灰度与血清效价具有曲线关系,因而可以对待测血清作半定量分析。结论：胶体碳试条层析法操作简便,快速,具有较高的敏感性和特异性,适合作血吸虫现场检测。     

乙型肝炎病毒血清前S1抗原的检测及其临床意义

目的:探讨乙型肝炎病毒与前S1抗原的相关性。方法:采用ELISA检测419例乙型肝炎病毒感染者血清中的前S1抗原。结果:在172例HBeAg阳性标本中前S1抗原阳性的140例,阳性率81.4%;200例HBeAg阴性而抗HBe阳性的标本中前S1抗原阳性的76例,阳性率38.0%;47例HBeAg和抗HBe均阴性的血清中前S1抗原阳性仅10例,阳性率21.3%;前S1抗原在血清学表达上与HBeAg的阳性符合率高达81.4%。结论:乙型肝炎病毒前S1抗原与HBeAg阳性高度相关,血清前S1抗原是乙肝病毒在体内复制的可靠标志。     

丙型肝炎患者抗-NS5抗体与α-干扰素疗效关系的研究

目的探讨丙型肝炎患者IgG抗-NS5抗体与α-干扰素疗效的关系.方法以重组HCV抗原及NS3、NS5区段多肽作为抗原,以EHSA法检测丙型肝炎患者α-干扰素治疗前血清IgG抗-NS3、抗-NS5、抗-HCV抗体及其滴度.结果α-干扰素治疗有效组的抗-NS5抗体的阳性率为80%(8/10),无效组为20%(2/10),两组比较有显著差异(P＜0.05);有效组抗-NS5抗体滴度显著性高于无效组(P＜0.05);有效组和无效组抗-NS3、抗-HCV抗体阳性率及抗体的滴度无明显差异(P＞0.05).结论治疗前血清IgG抗-NS5抗体可以作为α-干扰素疗效的一个预测指标.     

斑点酶联免疫吸附试验检测伤寒特异性抗体

目的　验证斑点酶联免疫吸附试验 (Dot -ELISA)检测伤寒抗体的敏感性和特异性。方法　采用Dot -ELISA测定伤寒沙门菌包膜抗原V、菌体抗原O和鞭毛抗原Hd 的特异性抗体 ,并与肥达氏反应相比较。结果　肥达氏反应均为阴性 ,而经Dot -ELISA试验 ,疑似伤寒患者血清中检出 3种抗体阳性 1例 ,非伤寒发热病人血清中检出单项Hd 抗体阳性1例。Dot -ELISA法比肥达氏反应敏感 10倍以上 ,且无交叉反应。结论　该法有较高的特异性和敏感性 ,且操作简单、快速、无需特殊设备 ,宜于临床推广应用。     

斑点酶联免疫吸附试验检测血吸虫病

用成虫、卵及尾蚴抗原做斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)检测96份血吸虫患者血清,阳性率分别、为70.8%、91.7%及81.3%。三种抗原 Dot—ELISA 的互补阳性率为93.8%。而对50份献血员及38份肺吸虫患者血清进行检测都是阴性。Dot—ELHSA 的重现性及稳定性好,抗原用量少、简单、出结果快。     

不同乙肝检测模式中Pre-S_1抗原分析

目的:通过不同乙肝检测模式中P re-S1抗原的检测情况分析,了解P re-S1抗原与乙肝病毒复制的关系。方法:采用EL ISA法对300份乙肝阳性血清进行P re-S1抗原检测。结果;P re-S1抗原检测在HB sA g(+)、HB eA g(+)、HB cA b(+)模式的阳性率为86%,在HB sA g(+)、HB eA b(+),HB cA b(+)模式的阳性率为40%,在HB sA g(+)、HB cA b(+)模式中阳性率为25%,而在HB eA b(+)、HB cA b(+)模式中,HB sA b(+)、HB eA b(+)、HB cA b(+)模式中,HB sA b(+)、HB cA b(+)模式中及HB cA b(+)模式中阳性率都为0。结论:P re-S1抗原测定可作为检验乙肝病毒存在和复制的血清学指标。     

非小细胞性肺癌患者血清硫酸粘多糖片段的检测及其临床意义

目的 :探讨血清硫酸粘多糖片段的检测对非小细胞性肺癌诊断的临床应用价值 ,为肺癌的早期诊断提供依据。方法 :应用乳胶凝集法检测非小细胞性肺癌患者血清硫酸粘多糖片段 ,同时应用化学发光法检测CEA。结果 :非小细胞性肺癌患者血清硫酸粘多糖阳性率为 86 2 0 % ,显著高于血清CEA阳性率 5 2 87% (P <0 0 5 )。在肺癌早期血清硫酸粘多糖阳性率即可达78 2 6 %。其检测敏感性为 86 2 0 % ,特异性为 94 83% ,两者联合检测阳性率可达 91 95 %。结论 :血清硫酸粘多糖是诊断及早期诊断非小细胞性肺癌的可靠指标 ,敏感性、特异性高 ,和CEA联合检测 ,可提高阳性率。     

血清学方法检测SARS病毒抗体的比较

目的：比较血清学方法(间接ELISA法和双抗原夹心ELISA法)对SARS患者特异性抗体的检出情况。方法：采用间接法和双抗原夹心法分别检测健康人、发热非SARS患者、不同时期的SARS患者血清中的特异性抗体水平。结果：双抗原夹心法的阳性检出率为73．6％，而间接法的阳性检出率为57．5％，前者对SARS患者各时期特异性抗体的阳性检出率高于间接法，特别是住院第1周的阳性检出率为30％，而间接法对住院第1周的阳性检出率为0％。结论：双抗原夹心法检测SARS患者特异性抗体优于间接法。