TSA对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及其机制

目的:研究去乙酰化转移酶抑制剂TSA对肝癌细胞SMMC-7721的作用及其机理。方法:利用细胞计数,流式细胞仪分析细胞凋亡及细胞周期,Tunel试验研究TSA对肝癌细胞SMMC-7721的作用;利用western研究TSA对肝癌细胞蛋白表达的影响。结果:TSA可明显抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长,并可诱导细胞凋亡。可阻滞肝癌细胞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期。可增加p53,p21,bax等基因的表达,降低BCL-2的表达。结论:去乙酰化转移酶抑制剂TSA可明显抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长并诱导其凋亡,其主要通过调控一些肿瘤相关基因的表达起作用。     

曲古霉素A对肺腺癌细胞株NCI-H1299增殖的抑制作用及其机制

背景与目的：曲古霉素A（trichostatin A,TSA）是具有组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDAC@强效非竞争性抑制剂,对血液系统肿瘤和实质性肿瘤均有较强的生长抑制作用。本文观察HDACs抑制剂TSA对体外培养的肺腺癌NCI-H1299细胞株的增殖、凋亡和周期以及相关基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：MTT法检测不同浓度（0.1、0.2、0.4、2.0μmol/L@的TSA对人肺腺癌NCI-H1299细胞株体外增殖的影响,流式细胞术检测药物处理后细胞周期及凋亡率的变化;Western blot法检测细胞内组蛋白H4乙酰化水平的变化;Real-time PCR检测NCI-H1299细胞内p21、CyclinB1、Bcl-2和Bax的基因表达。结果：TSA能明显抑制NCI-H1299细胞的体外生长,其抑制作用呈明显的剂量和时间依赖性。TSA诱导后,流式细胞术检测结果显示细胞阻滞于G2/M期,细胞凋亡增加。TSA可明显提高NCI-H1299细胞内组蛋白H4的乙酰化水平,诱导p21和Bax的mRNA表达增加,同时抑制Bcl-2和CyclinB1表达。结论：TSA可通过诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期而发挥体外抗肺腺癌细胞生长的作用,其机制可能与组蛋白乙酰化水平的提高以及调控相关基因p21、Bax、Bcl-2和CyclinB1的表达变化有关。     

薏苡仁油注射液对人体肝癌SMMC-7721细胞株体外抗肿瘤作用及机制研究

目的：研究薏苡仁油注射液（KLT）对人体肝癌SMMC-7721的体外抗肿瘤作用及机制。方法：在人肝癌SMMC-7721细胞模型上采用CCK-8细胞增殖试验、划痕试验、Transwell小室穿膜试验、Matrigel克隆形成试验观察KLT对细胞增殖、迁移及侵袭的影响;应用流式细胞术检测KLT对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响;Western blot检测KLT对肿瘤细胞中目的基因的表达情况。结果：经KLT作用后的人肝癌细胞生长、迁移及侵袭功能被抑制;流式细胞术检测发现KLT处理的肝癌细胞阻滞于G2/M期,细胞晚期凋亡较明显;KLT上调了cyclin B1的表达,下调了cyclin D1、cyclin E的表达。结论：KLT在体外对肝癌细胞具有良好的抗肿瘤活性,其作用机制可能与其诱导的细胞周期阻滞、细胞凋亡、抑癌基因的上调、癌基因的下调有关。     

Survivin反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察Survivin反义寡核苷酸对SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响.方法：设计合成特异性Survivin 反义寡核苷酸,转染肝癌SMMC-7721细胞,MTT法测定Survivin ASODN对细胞增殖抑制情况的影响,FCM法检测对细胞周期、凋亡及Survivin蛋白表达的影响.结果：Survivin ASODN可抑制SMMC-7721细胞的生长增殖,并呈浓度和时间依赖性.ASODN转染组可诱导SMMC-7721细胞凋亡（P＜0.01）,细胞周期阻滞于G2/M期（P＜0.05）.ASODN转染组Survivin蛋白表达水平显著降低（P＜0.01）.结论：Survivin ASODN能下调SMMC-7721细胞Survivin表达,并可抑制其增殖并诱导凋亡.     

人参皂苷Rg3抗人肝癌细胞株侵袭和转移的实验研究

目的:探讨人参皂苷Rg3抗人肝癌细胞侵袭和转移的作用及其相关机制。方法:选择人类肝癌细胞株SMMC-7721细胞和建株人脐静脉内皮细胞株ECV304作为研究对象,通过细胞抑制实验(MTT法)、细胞粘附试验和免疫组化方法系统地观察人参皂苷Rg3体外对SMMC-7721细胞及ECV304细胞生长的抑制作用、SMMC-7721细胞与纤维粘连蛋白(FN)粘附以及表达nm23、CD44、VEGF基因蛋白的影响。结果:人参皂苷Rg3能够显著地抑制肝癌细胞株SMMC-7721细胞及内皮细胞株ECV304的生长,抑制SMMC-7721细胞与FN粘附及CD44、VEGF的表达,而增强nm23基因的表达。结论:人参皂苷Rg3具有抗人肝癌细胞侵袭和转移的作用,机制可能与其能够抑制肝癌细胞侵袭活力、调节与肝癌细胞侵袭与转移密切相关的基因表达和抗肿瘤血管形成有关。     

棘霉素对肝癌SMMC7721细胞凋亡相关基因影响的研究

目的：探讨棘霉素诱导肝癌SMMC7721细胞的凋亡作用及对转录因子Twist、p53、Survivin和hTERT（人端粒酶）基因的影响。方法：采用MTT法测定棘霉素对肝癌细胞的生长抑制率；半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测与肝癌的发生和转移密切相关的转录因子Twist，与细胞增殖和凋亡联系紧密的p53、Survivin和hTERT的mRNA表达水平的改变；利用Westernblot方法分析棘霉素治疗后上述基因的蛋白表达情况。结果：体外实验证实，棘霉素浓度〉10．0ng／mL各组对细胞的生长抑制均显著增加，P〈0．05，随棘霉素药物浓度增加，细胞抑制率明显增大。棘霉素抑制肝癌细胞株SMMC7721的作用呈剂量一时间依赖性。RT-PCR方法证实，随着棘霉素剂量的增加，肝癌SMMC7721细胞株中Twist、Survivin和hTERTmRNA表达水平逐渐下调，P〈0．01，p53mRNA表达水平微弱上调，P〈0．05。Westernblot检测显示，Twist、Survivin和hTERT蛋白的表达量呈递减趋势，P〈0．01，p53蛋白的表达微弱上调，P〈0．01。结论：随着棘霉素剂量的增加，细胞凋亡率显著增加。棘霉素能够抑制与肝癌生长密切相关基因的Twist、Survivin和hTERTmRNA表达，促进p53mRNA表达上调，相应蛋白的表达呈下调和上调。棘霉素可能通过抑制肝癌细胞的生长、转移和促进肝癌细胞的凋亡起到抑制肿瘤生长的作用。     

珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应及机制研究

目的观察珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应并初探其分子机制。方法体外细胞培养采用人肝癌细胞株SMMC-7721,分为对照(BL)组、珠子参(PJ)组、二甲基亚砜(DMSO)组及5-FU组,采用电镜观察作用后肝癌细胞超微结构改变;流式细胞仪检测肝癌细胞周期和凋亡率;RT-PCR法检测癌基因c-myc、c-fos和抑癌基因p53、p21表达的变化。结果与对照组比较,电镜下珠子参组SMMC-7721细胞染色质浓缩,分解成大小不一有膜包绕团块,内含有新月形DNA物质及细胞器,形成凋亡小体;周期分析可见G0/G1期细胞阻滞,阻止了细胞向S期的转换,并引起细胞凋亡,凋亡率达38.34%;RT-PCR半定量分析珠子参能降低癌基因c-myc表达(P<0.05),增高抑癌基因p53和p21表达(P<0.05)。结论珠子参能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,部分作用机制可能与阻滞细胞停留在G0/G1,降低癌基因c-myc和c-fos表达,增高抑癌基因p53和p21表达有关。     

紫杉醇诱导肝癌细胞SMMC—7721凋亡的实验研究

目的：研究紫杉醇（Taxol)对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制和诱导凋亡的作用。方法：应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用。通过瑞氏染色，荧光显微镜，透射电镜，流式细胞仪和TUNEL染色研究紫杉醇对SMMC-7721诱导凋亡的作用。结果：紫杉醇对肝癌细胞SMMC-7721有明显的生长抑制作用，其IC50为21.6nmol/L。紫杉醇作用细胞后，可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化。细胞核固缩，染色质凝集成新月型紧贴于核膜周边，核碎裂，染色质片断化，凋亡小体形成等，流式细胞仪上可见S期和G2/M期和DNA含量增加，并出现典型的亚二倍体“凋亡小峰”。TUNEL染色显示。紫杉醇作用于SMMC-7721后，随药物浓度增加和作用时间延长，凋亡指数增加。结论：紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用；紫杉醇对SMMC-7721有诱导凋亡的作用。     

多烯紫杉醇抑制SMMC-7721肝癌细胞的研究

目的探索多烯紫杉醇对在体和离体SMMC-7721肝癌的生长抑制作用及其机制.方法(1)将SMMC-7721肝癌细胞种植于培养皿,贴壁后给予不同浓度的多烯紫杉醇作用24小时,10天后观察多烯紫杉醇对集落形成率的抑制作用;(2)多烯紫杉醇作用于SMMC-7721肝癌细胞24小时后,利用电子显微镜观察细胞凋亡的形态学特征,用流式细胞仪测定细胞周期的变化;(3)制备SMMC-7721肝癌荷瘤鼠模型,观察多烯紫杉醇诱导对在体SMMC-7721肝癌生长曲线和相对生长速率的影响.结果(1)多烯紫杉醇对离体和在体SMMC-7721肝癌细胞生长具有明显抑制作用,并且存在剂量依赖性;(2)多烯紫杉醇可以通过将肝癌细胞阻滞于G2-M期来发挥抗癌作用.结论多烯紫杉醇通过将肝癌细胞阻滞于G2-M期并且诱导肝癌细胞凋亡来发挥抗癌作用,是很有潜力的抗肝癌药物.     

叶酸诱导人肝癌细胞凋亡及其机制的研究

目的：研究叶酸诱导人肝癌细胞凋亡的作用及其机制。方法：应用叶酸连续处理体外培养的人肝癌细胞（SMMC－7721）,4天后光镜及电镜观察细胞形态改变,细胞计数测定细胞生长及增殖情况,DNA凝胶电泳分析DNA改变,流式细胞仪检测细胞周期分布,细胞凋亡指数及凋亡相关基因及其表达的改变。结果：10ug/ml叶酸可诱导SMMC－7721细胞出现凋亡特征性形态改变,其细胞NDA电一现“梯状”断裂现象,细胞凋亡指数为16．8％（空白对照组为6．9％）,S期细胞减少,细胞生长和增殖被明显抑制,且凋亡相关基因fas 和p53表达增加,而bcl-2和TGF－β1表达降低。结论：叶酸具有诱导人肝癌细胞凋亡的作用,其机制可能与凋控细胞凋亡相关基因的表达有关。     

Pharmacogénétique des fluoropyrimidines. La méthylènetétrahydrofolate réductase

Résumé: Lefficacité optimale des fluoropyrimidines nécessite des concentrations élevées en 5-10 méthylènetétrahydrofolate (CH₂FH₄), contrôlées par la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR) qui convertit irréversiblement le CH₂FH₄ en 5-méthyltétrahydrofolate (CH₃FH₄). Les polymorphismes 677CT et 1298AC du gène MTHFR sont associés à une baisse dactivité de lenzyme. Les tumeurs «MTHFR mutées» devraient donc être plus sensibles aux fluoropyrimidines que les tumeurs «MTHFR sauvages». Les études expérimentales et cliniques publiées à ce jour tendent à montrer une plus grande sensibilité au 5-FU (associé ou non à lacide folinique) dans les tumeurs MTHFR mutées par rapport aux tumeurs sauvages. Ces résultats montrent la nécessité de poursuivre ces recherches afin de confirmer limpact de ces polymorphismes sur lefficacité des fluoropyrimidines.     

Oncogénétique et psycho-oncologie, une collaboration recommandée...

Résumé: La possibilité depuis 1994, de connaître la probabilité individuelle de développer certains cancers a permis de proposer de nouvelles modalités de prévention, de traitements et contribué au développement actuel de loncogénétique. Une meilleure connaissance des répercussions psychologiques tant pour les patients que pour les apparentés est désormais possible et limplication des psycho-oncologues dans ce cadre de la réalisation des tests prédictifs, recommandée. La mission de «messager» qui incombe au «cas-index» doit faire lobjet dune attention particulière. La complexité de linformation et la dimension paradoxale que peut avoir parfois la communication à propos des choix, rend difficile lévaluation de la qualité du consentement. La situation particulièrement délicate dune aide à la décision à légard de la chirurgie prophylactique, exige une collaboration étroite des généticiens et des psycho-oncologues.Les soins de support en oncologie     

The role of papillomaviruses in human cancers

This review comprehensively evaluates the influence of gene-gene, gene-environment and multiple interactions on the risk of colorectal cancer (CRC). Methods of studying these interactions and their limitations have been discussed herein. There is a need to develop biomarkers of exposure and of risk that are sensitive, specific, present in the pathway of the disease, and that have been clinically tested for routine use. The influence of inherited variation (polymorphism) in several genes has been discussed in this review; however, due to study limitations and confounders, it is difficult to conclude which ones are associated with the highest risk (either individually or in combination with environmental factors) to CRC. The majority of the sporadic cancer is believed to be due to modification of mutation risk by other genetic and/or environmental factors. Micronutrient deficiency may explain the association between low consumption of fruit/vegetables and CRC in human studies. Mitochondrial modulation by dietary factors influences the balance between cell renewal and death critical in colon mucosal homeostasis. Both genetic and epigenetic interactions are intricately dependent on each other, and collectively influence the process of colorectal tumorigenesis. The genetic and environmental interactions present a good prospect and a challenge for prevention strategies for CRC because they support the view that this highly prevalent cancer is preventable.     

Antifungal combination therapy in localized candidosis

A mouse model of localized candidosis in air-filled subcutaneous cysts imitating thrush has been developed. We have now tested various antifungal combinations in this animal model. Flucytosine (5-FC) + amphotericin B (Amph B) showed the highest efficacy, a clear additive or even synergistic effect was seen. The combination of 5-FC + imidazole or triazole derivative was less efficacious, an additive effect was rare. The combination of 5-FC + Amph B was also tested against Candida albicans strains showing various degrees of 5-FC-resistance. A significant reduction in 5-FC-resistant mutants was seen after the treatment with the combination.     

Les génériques en cancérologie: à molécule identique, médicaments identiques? Les biosimilaires, des super-génériques?

Résumé: Les biosimilaires vont bientôt voir leur apparition en Europe. Comment un laboratoire peut-il aborder le développement de son dossier dAMM? Quelles sont les bases légales et les recommandations officielles? Comment la similarité et/ou le caractère générique peuvent-ils être démontrés? Les règles sont-elles identiques à celles des produits chimiques conventionnels pour lesquels, notamment en cancérologie, il existe des médicaments génériques? Comment faire pour que la sécurité et lefficacité des médicaments biosimilaires soient assurées pour les patients?     

PSA-Test zur Früherkennung des Prostatakarzinoms

Zusammenfassung Prostatakrebs ist hierzulande seit einigen Jahren die häufigste Krebserkrankung bei Männern. Da über die Ätiologie wenig gesichertes Wissen vorliegt und daher kaum Möglichkeiten zur primären Prävention bestehen, konzentrieren sich die Anstrengungen auf die Suche nach wirksamen Verfahren zur sekundären Prävention. Hierbei gilt die Verwendung des PSA-Tests zur Früherkennung des Prostatakarzinoms als derzeit aussichtsreichstes Verfahren. Bevor ein neues Früherkennungsverfahren zur breiten Anwendung empfohlen oder in das gesetzliche Früherkennungsprogramm aufgenommen wird, muss jedoch seine Wirksamkeit in hierfür geeigneten wissenschaftlichen Untersuchungen nachgewiesen werden. Bis jetzt gibt es bereits eine ganze Reihe epidemiologischer Studien zur Effektivität des PSA-Screenings, doch konnte ein Wirksamkeitsnachweis bisher nicht erbracht werden. Zwei große randomisierte Studien in Europa und den USA lassen für die Jahre 2005–08 erste Ergebnisse erwarten. Da epidemiologische Arbeiten belegen, dass durch PSA-Screening eine nicht unerhebliche Überdiagnostik und Übertherapie eintritt, d. h. Schaden angerichtet werden kann, ist das Ergebnis der genannten randomisierten Studien vor weitergehenden Entscheidungen unbedingt abzuwarten. Bis dahin sollte von der Anwendung des PSA-Tests zur Prostatakrebsfrüherkennung unmissverständlich abgeraten werden. Da für den Test bereits ausgiebig Werbung betrieben wurde, kommt einer gründlichen ärztlichen Aufklärung von an dem Test interessierten Personen eine Schlüsselrolle zu.     

Cancer immunotherapy

Unprecedented progress has seen made in the last decade in the field of cancer immunotherapy. The recent approval of nivolumab （Opdivo）, the first anti-programmed cell death-1 （PD-1） antibody, for metastatic melanoma in Japan, marked a milestone in the rapidly advancing field of cancer immunotherapy. Nivolumab together with ipilimumab （Yervoy）, the anti-cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 （CTLA-4） antibody, are the first 2 drugs in the class of ＂immune checkpoint inhibitors＂ that have delivered impressive responses in patients with metastatic melanoma and renal cell cancer （RCC） as well as a variety of solid tumors.     

异基因造血干细胞移植后患者肝损害病因与临床特征分析

 【摘要】　目的　总结异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后患者肝损害的发生率、发生原因、诊断方法与治疗选择。方法　回顾性分析郑州大学附属肿瘤医院2006～2010年接受allo-HSCT的83例良、恶性血液病患者中Ⅱ～Ⅳ级肝损害的发生率、各种病因的构成比、临床表现以及诊断方法,分析移植后不同时期肝损害病因的差异、治疗方法、疗效。结果　83例allo-HSCT患者中,发生Ⅱ～Ⅳ级肝损害45例（54.2 %）。按肝损害致病病因分类,预处理化疗所致7例,环孢素所致9例,肝静脉闭塞病（HVOD）所致2例,肝脏移植物抗宿主病（GVHD）所致24例,乙型肝炎病毒再激活所致2例,多器官衰竭所致1例。发生于移植后1个月内者20例（44.4 %）,以药物性肝损害为主,1个月～100 d者13例（28.9 %）,101 d～1年者12例（26.7 %）,均以肝脏GVHD为主。经减停肝损害药物、抗排异、保肝等治疗后,27例治愈,10例好转,2例未愈,6例死于原发病复发或移植相关并发症。结论　肝损害是allo-HSCT后常见的并发症,药物及肝脏GVHD是其最主要的致病原因,肝损害与其发生时间的相关性可作为肝损害病因学诊断的参考依据。根据肝损害的病因选择针对性的治疗方法,可取得较好的疗效。     

Pharmacokinetics and dosage of fluconazole in continuous hemofiltration (CAVH, CVVH) and hemodialysis (CAVHD, CVVHD)

Continuous haemofiltration (CAVH, CVVH) and haemodialysis (CAVHD, CVVHD) are increasingly used in patients with acute renal failure (ARF). The elimination rates of fluconazole vary considerably among the different procedures. In CVVHD, the elimination rate is, depending on the combined dialysate/ultrafiltrate flow rate, the most marked compared to CVVH and intermittent dialysis with a fluconazole clearance exceeding the values of healthy persons in CVVHD 2 L/h. To achieve therapeutic plasma levels during continuous renal replacement therapy, the same loading dose as in patients without renal failure should be applied, followed by the adjusted maintenance dose for anuric patients multiplied by a factor taking the extracorporeal elimination of the absorbed dose into account (CAVH, CVVH: x 2.2, ultrafiltrate flow 0.5 L/h; CAVHD, CVVHD: x 3.8, combined dialysate/ultrafiltrate flow 1.5 L/h). Despite the broad therapeutic margin of fluconazole, drug monitoring is recommended with respect to the very limited number of investigations with relatively low dosages up to 200 mg/day and--which is of paramount importance--to achieve therapeutic drug levels in vital indications.