日本血吸虫不同方式感染宿主的免疫病理研究

目的建立等量血吸虫尾蚴单次感染和多次感染的动物模型,比较这两种不同感染方式对家兔肝脏的损害程度。方法制作肝脏病理切片,测量单个虫卵肉芽肿的体积;放免法检测家兔血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN);RT-PCR-ELISA半定量测定肝组织中的TGF-β1mRNA。结果单次感染组家兔急性期肉芽肿反应最明显,慢性期和晚期肉芽肿体积逐渐缩小,而多次感染组肉芽肿缩小不明显;血清中HA和LN、肝组织中的TGF-β1mRNA量,在感染各组均高于正常对照,但多次感染组升高更明显。结论等量的尾蚴,多次感染比单次感染的危害引起的肝纤维化更为严重。     

芦荟大黄素和吡喹酮联合治疗对血吸虫肝纤维化小鼠TGF-β/Smad通路的影响

目的:探讨芦荟大黄素和吡喹酮的联合治疗对血吸虫肝纤维化小鼠TGF-β/Smad通路的影响.方法:80只小鼠随机分为4组.前3组每只小鼠感染日本血吸虫尾蚴25条,感染8 wK(后,第一组小鼠以吡喹酮500 mg/(kg·d)治疗2 d(吡喹酮组),第2组小鼠以吡喹酮500 mg/(kg·d)治疗2 d后用芦荟大黄素0.3 mg/(kg·d)治疗8 wk(吡喹酮+芦荟大黄素组),第3组不作任何治疗(实验对照组),第4组小鼠作为正常对照.第16周末处死小鼠留取肝脏组织.应用HE染色法、RT-PCR法和免疫组织化学染色法观察、分析各组小鼠肝脏病理改变与Smad2 mRNA、Smad7mRNA、TGF-β1、TIMP-1、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的表达变化.结果.芦荟大黄素治疗后血吸虫肝纤维化程度减轻,肝组织中Smad2 mRNA、TGF-β1、TIMP-1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达明显低于实验对照组和吡喹酮组(q=6.20,4.38;q=6.22,4.41;q=6.30,4.52;q=6.25,4.44;q=6.29,4.48,P<0.01或0.05);肝组织中Smad7mRNA的表达,明显高于实验对照组和吡喹酮组(q=6.32,4.62,P<0.0 1或0.05).结论:芦荟大黄素可通过降低肝组织中TGF-β1、TIMP-1、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达,抑制Smad2基因的表达,促进Smad7的表达发挥抗肝纤维化作用.     

吡喹酮治疗对血吸虫病肝纤维化小鼠血清细胞因子水平的影响

目的　研究吡喹酮治疗血吸虫肝纤维化小鼠前后血清 TNF-α,IFN -γ水平的变化。方法　制备血吸虫肝纤维化小鼠模型 ,应用 EL ISA方法检测血吸虫肝纤维化小鼠在吡喹酮治疗前后血清TNF-α,IFN-γ水平的变化。结果　吡喹酮治疗组 TNF-α含量较感染组显著降低 (P<0 .0 1) ,吡喹酮治疗组 IFN-γ含量较感染组显著增加 (P<0 .0 1)。结论　吡喹酮可通过降低血吸虫肝纤维化小鼠血清 TNF-α的含量 ,提高 IFN-γ的含量从而发挥抗肝纤维化的作用。     

IFN-γ对日本血吸虫病肝纤维化小鼠Smads表达的影响

目的 从转录水平探讨参与TGF-β1信号转导的Smads在日本血吸虫感染的BALB/c小鼠形成肝纤维化过程中,以及IFN-γ治疗后的表达情况. 方法 BALB/c小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第16周,将其随机分成3组:安慰剂组、吡喹酮治疗组和吡喹酮联合IFN-γ治疗组,治疗8周.分别在感染后第8周、12周、16周和24周,处死小鼠取肝脏组织,一部分进行天狼猩红染色,观察胶原沉积情况;另一部分提取总mRNA,通过RT-PCR检测Smad2.Smad3,Smad4和Smad7 mRNA的表达水平. 结果 肝纤维化模型在感染16周后形成.胶原表达随着感染时间的延长而增加.胶原表达在吡喹酮联合IFN-γ治疗组表达下降,而在安慰剂组和吡喹酮治疗组之间的差别无统计学意义.在肝纤维化形成过程中,Smad3 mRNA在感染16周时增加到正常水平的2倍;Smad2 mRNA的表达水平在感染12周时下降,在16周时,又恢复到正常水平;Smad4和Smad7 mRNA水平变化不明显.在联合治疗后,Smad7 mRNA水平明显增高,Smad2 mRNA保持在低水平上,Smad3 mRNA高于正常对照组,Smad4 mRNA水平仍无明显变化. 结论 Smad3 mRNA表达上调,Smad2 mRNA表达下调以及Smad7 mRNA的低水平表达可能导致小鼠肝纤维化的形成,IFN-γ可能通过诱导Smad7 mRNA表达上调,从而达到抗纤维化的作用.     

吡喹酮治疗血吸虫病肝纤维化的实验研究

目的观察吡喹酮对血吸虫病肝纤维化的治疗作用。方法将小鼠随机分为正常对照组、模型组、吡喹酮组。模型组、吡喹酮组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴诱导肝纤维化模型,吡喹酮组于感染8周后灌胃吡喹酮治疗2次。16周末测小鼠血清中ALT、AST;观察小鼠肝脏形态,HE染色观察肝纤维化病理组织变化,测定虫卵肉芽肿面积;免疫组化测定肝脏Ⅰ和Ⅲ型胶原表达。结果吡喹酮治疗可降低血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏指数及血清ALT、AST,改善肝组织形态结构,降低肝脏Ⅰ和Ⅲ型胶原表达及虫卵肉芽肿面积。结论吡喹酮对血吸虫病肝纤维化有明显治疗作用。     

吡喹酮与γ-干扰素对肝纤维化胶原代谢影响的实验研究

目的：探讨吡喹酮杀虫治疗和IFN－γ抗肝纤维化的分子机制。方法：以日本血吸虫尾蚴感染新西兰兔制成肝纤维化动物模型,感染后第16周随机分成3组：感染组,吡喹酮治疗组和吡喹酮联合IFN－γ治疗组,另以10只正常兔为阴性对照组,感染后28周处死,取肝组织进行病理检测以及I型胶原,Ⅲ型胶原,Ⅳ型胶原,MMP－1,MMP－9,TGFβ1和IFN－γmRNA水平检测。结果：吡喹酮治疗后肝纤维化程度明显减轻,但仍显著高于正常组;I型胶原,Ⅲ型胶原和Ⅳ型胶原mRNA水平显著下降,尤其Ⅲ型胶原已接近正常水平,而MMP－1和MMP－9 mRNA水平变化不大;TGFβ1 mRNA水平下降不明显,而IFN-γ mRNA水平显著增高,TGFβ1/IFN-γmRNA比值明显减少,但仍高于正常。杀虫治疗后加IFN－γ后进一步降低I型胶原,Ⅳ型胶原mRNA水平,并使MMP－1和MMP－9 mRNA的表达显著增加,TGFβ1 mRNA水平明显下降。结论： 杀虫治疗后抗肝纤维化仍属必要,IFN－γ主要通过直接抑制胶原合成,促进胶原降解,抑制TGFβ1起抗肝纤维化作用。     

槲皮素抑制小鼠血吸虫病肝组织即早基因和基质金属蛋白酶组织抑制因子1的表达

分别运用槲皮素及吡喹酮治疗小鼠日本血吸虫肝纤维化。槲皮素治疗后小鼠肝纤维化程度减轻，肝组织中即早基因c-fos与c-jun及基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP1）和Ⅰ、Ⅲ型胶原含量均明显低于感染对照组；与吡喹酮组相比，c-jun mRNA、Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显降低，而c-fos mRNA、TIMP1含量无显著改变，提示其远期抗血吸虫肝纤维化效果优于吡喹酮。     

蕲艾提取液对免疫性肝纤维化大鼠转化生长因子-β1表达的影响

目的:观察蕲艾提取液对肝纤维化大鼠血清和肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其对肝纤维化的作用及相关机制。方法:Wister大鼠72只随机分为正常对照组、肝纤维化模型组及小、中、大剂量蕲艾提取液处理组和丹参对照组,采用猪血清腹腔内注射法构建肝纤维化大鼠模型;病理切片HE染色评价各组大鼠肝组织纤维化程度;应用ELISA法检测大鼠血清中TGF-β1含量的变化;同时分别采用荧光定量PCR和Western blot检测大鼠肝脏组织TGF-β1mRNA和蛋白表达水平。结果:不同剂量蕲艾提取液处理组大鼠与肝纤维化模型组相比,肝纤维化程度显著减轻;血清TGF-β1水平、肝脏组织中TGF-β1mRNA和蛋白水平均明显降低,差异有显著性意义。结论:蕲艾提取液能有效抗大鼠肝纤维化,其作用机制可能与通过抑制TGF-β1表达和分泌有关。     

吡喹酮与γ-干扰素对肝纤维化小鼠Smads转录水平的影响

[目的]研究吡喹酮杀虫治疗和γ-干扰素(IFN-γ)抗肝纤维化治疗对日本血吸虫性肝纤维化小鼠体内Smads分子的影响.[方法]日本血吸虫尾蚴感染BALB/c小鼠16周后形成肝纤维化动物模型,随机分成3组:0.85%氯化钠组、吡喹酮组和吡喹酮联合IFN-γ(联合)组,并以10只正常BALB/c小鼠作为正常对照.治疗8周后取小鼠肝组织,进行肝组织病理学检查,观察肝纤维化程度;应用RT-PCR法检测肝组织中Smad2、Smad3、Smad4、Smad7和IFN-7 mRNA水平.[结果]吡喹酮组治疗后,肝纤维化程度、Smad2 mRNA水平与0.85%氯化钠组比较差异无统计学意义,Smad3 mRNA水平下降到正常,IFN-γ mRNA水平明显增高.联合组治疗后,肝纤维化程度明显减轻,但尚未达到正常水平,Smad2 mRNA水平仍低于正常水平,Smad3和Smad7 mRNA水平上调,IFN-γ mRNA处于正常水平.[结论]吡喹酮联合IFN-γ抗纤维化的机制是促进Smad7的表达,但Smad2 mRNA的下调,Smad3 mRNA的上调可能导致联合治疗未能使肝纤维化完全逆转.     

青蒿琥酯对日本血吸虫诱导的早期肝纤维化小鼠热休克蛋白47表达影响的研究

目的研究青蒿琥酯对日本血吸虫诱导的早期肝纤维化小鼠血清和肝组织中热休克蛋白47(HSP47)表达的影响,探讨青蒿琥酯抑制日本血吸虫病肝纤维化作用的可能机制。方法 30只ICR小鼠随机分成感染模型组、感染治疗组和健康对照组等3组,每组10只。感染组每鼠经腹部皮肤贴壁感染日本血吸虫尾蚴(20±1)条,健康对照组不感染。感染后第6周,用吡喹酮300 mg/kg 2日疗法杀虫,同时感染治疗组小鼠按60 mg/kg剂量每天腹腔注射0.3 ml青蒿琥酯,连续2周;感染模型组和健康对照组腹腔注射灭菌生理盐水0.3 ml。治疗结束次日,各组小鼠用戊巴比妥钠麻醉后采血,应用ELISA检测血清HSP47和转化生长因子β1 (TGF-β1)含量,取小鼠肝、脾称重,计算脏器指数。取部分肝组织,应用碱水解法检测肝羟脯氨酸含量。取部分肝组织,用10%多聚甲醛固定,行苏木素-伊红(HE)和Masson染色,观察肝组织病理学变化和胶原增生情况。取部分肝组织,应用实时荧光定量PCR检测肝脏HSP47 mRNA、Ⅰ型胶原α1链mRNA表达水平。结果健康对照组小鼠肝脏指数为(4.72±0.52),低于感染模型组(10.50±0.57)和感染治疗组(8.31±0.52)(P 0.01),感染治疗组小鼠肝脏系数与感染模型组差异有统计学意义(P 0.01);健康对照组小鼠脾脏系数为(0.38±0.04),低于感染模型组(2.41±0.44)和感染治疗组(2.26±0.06)(P 0.01),感染治疗组小鼠脾脏系数与感染模型组差异无统计学意义(P 0.05)。HE染色结果显示,感染治疗组小鼠肝脏肿大程度和表面虫卵结节较感染模型对照组轻、小。Masson染色结果显示,感染治疗组小鼠肝脏肉芽肿大小和胶原纤维面积均较感染模型组小,感染模型组胶原增生面积为(25.78±2.61)%,高于感染治疗组的(6.87±3.54)%和健康对照组的(1.19±0.18)%(P 0.01)。ELISA检测结果显示,感染治疗组小鼠血清HSP47、 TGF-β1含量分别为(169.81±20.94) pg/ml、(20.82±1.90) ng/ml,均低于感染模型组[(203.14±46.29) pg/ml、(27.49±6.81) ng/ml](P 0.05),二者HSP47、TGF-β1含量均高于健康对照组(P 0.01)。羟脯氨酸含量和肝组织HSP47 mRNA、Ⅰ型胶原α1链mRNA表达量与血清HSP47、 TGF-β1含量的趋势一致:感染治疗组小鼠肝羟脯氨酸含量为(0.27±0.08) mg/g肝湿重,低于感染模型组的(0.69±0.07) mg/g肝湿重(P 0.01),二者肝羟脯氨酸含量均高于健康对照组[(0.11±0.04) mg/g肝湿重](P 0.05);感染治疗组小鼠肝脏HSP47 mRNA、Ⅰ型胶原α1链mRNA表达水平分别为(0.49±0.27)、(0.67±0.09),均低于感染模型组的(0.84±0.17)、(0.91±0.11)(P 0.05),二者HSP47 mRNA、Ⅰ型胶原α1链mRNA表达水平均高于健康对照组(0.24±0.04、 0.24±0.05)(P 0.01)。血清HSP47水平与TGF-β1水平呈正相关关系(r=0.928 0);血清HSP47水平、 TGF-β1水平与肝组织Ⅰ型胶原α1链mRNA表达水平间均呈正相关关系(r=0.926 2、 0.872 8)。结论青蒿琥酯对日本血吸虫诱导的小鼠早期肝纤维化具有较好的干预效果,其机制可能系通过下调HSP47的表达水平抑制胶原合成,进而减轻肝纤维化程度。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.