80株解脲脲原体的药敏及耐药机制分析

目的　分析解脲脲原体(Ureaplasmaurealyticm ,Uu)的耐药情况,并探讨Uu可能的耐药机制。方法　对80株临床上分离到的Uu进行了药敏分析、PCR生物分群、tetM基因的检测和PCR扩增喹诺酮类药物耐药区(QRDR ,gyrA、gyrB、parC及parE)基因并分析其核苷酸序列。结果　80株临床分离的Uu有6 6份为生物1群,占82 .5 % ;对所测的9种药物全敏感的Uu比例仅为10 % (8 80 ) ;7株耐四环素Uu中有3株出现了tetM基因阳性条带;对6株临床分离Uu的QRDR(gyrA、gyrB、parC及parE)进行了突变分析,未发现环丙沙星、氧氟沙星均敏感Uu株有gyrA、gyrB、parC及parE突变,但耐喹诺酮Uu株有gyrA、parC和parE基因的点突变,并导致其编码的氨基酸改变。在这些QRDR的改变中,gyrA 137C→A和parC基因10 0C→T的误义突变导致其编码的相应氨基酸的改变,但parC基因的2 2 5G→A和parE基因4 0G→A ,4 1T→C的误义突变导致其编码的相应氨基酸的改变。对Uu耐药率及生物群分型结果进行分析发现,虽然两群Uu的耐药率不完全一样,但差异无统计学意义(P均>0 .0 5 )。结论　UuQRDR的改变是导致耐喹诺酮类药物的原因,单独parE基因突变引起其酶蛋白的氨基酸改变也可导致Uu耐喹诺酮类药物。     

女性生殖泌尿道解脲脲原体和人型支原体培养分离鉴定、计数、药敏分析

目的探讨女性生殖泌尿道解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）感染及耐药情况,为临床提供用药参考。方法采用解脲脲原体和人型支原体培养分离鉴定、计数、药敏试剂盒,对我院妇科门诊疑似非淋菌性尿道炎（NGU）女性患者,取宫颈拭子进行支原体培养、鉴定及药敏试验。结果2662例疑似非淋菌性尿道炎患者中,总的支原体检出率为59.6%,其中主要为解脲脲原体,检出率为46.5%,人型支原体感染检出率为13.1%,混合感染检出率为3.3%。药敏结果表明支原体主要对强力霉素（DOX）（81.3%）、美满霉素（MIN）（79.2%）、交沙霉素（JOS）（75.9%）、克拉霉素（CLA）（72.6%）等抗生素敏感,对阿奇霉素（AZI）、氧氟沙星（OFL）、左旋氧氟（LEV）等抗生素为中介,对罗红霉素（ROX）、司帕沙星（SPA）等抗生素耐药。结论解脲脲原体和人型支原体是女性生殖泌尿道感染的主要病原体,其中感染率^UU〉^Mh,且混合感染已是一个越来越严重的问题。支原体对罗红霉素、司帕沙星等抗生素有较高的耐药性,对强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素等抗生素敏感,并提示该类抗生素可作为治疗NGU支原体感染的首选药物。     

解脲脲原体Parvo和T960生物群msr基因的检测

目的 检测解脲脲原体(Uu)是否携带介导对红霉素耐药的msr基因,并分析其在Uu两生物群间分布的差异.方法 采用微量肉汤稀释法测定72株Uu临床株对红霉素的体外耐性,PCR检测msrA、msrB、msrG、msrD基因,并对Uu进行PCR分群.结果 72株Uu的最低抑菌浓度(MIC)范围是≤0.125 μg/ml≥128 μg/ml,MIC_(50)为32 μg/ml,MIC_(90)≥128μg/ml.分群结果示Parvo生物群51株,占70.83%,T960生物群21株,占29.17%.共检测到msrD基因的Uu24株,msrB基因12株,msrA基因1株,没有发现Uu菌株携带msrC基因.5株Uu同时检测到msrB和msrD基因,1株Uu同时检测到msrA、msrB和msrD基因.以MIC≥8μg/ml为耐药判定值时,两生物群对红霉素耐药性无显著差异,msrB基因主要分布在T960生物群.结论 Uu临床菌株携带对大环内酯类耐药的msr基因(包括msrA、msrB、msrP),msrB基因主要分布在T960生物群.     

128例原发性不育患者精液解脲脲原体的检测

采用解脲脲原体检测试剂对１２８例原发性不育患者的精液进行解脲脲原体病原学诊断，阳性率为３１．２５％（４０／１２８）。本文结果提示在山西省大同地区，解脲脲原体感染可能是引起男性原发性不育的重要原因之一。     

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备

作者用提纯的解脲脲原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞FO融合,获得3株稳定分泌抗解脲脲原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株进行了鉴定。用ELISA法测定该抗体腹水效价为1:64000～1:2048000,1F9、2B2抗体的Ig类型为IgG1,5H1为IgG2b。建立的3株能稳定分泌抗解脲脲原体的McAb杂交瘤细胞林,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。     

解脲脲原体的实验室检测方法的研究现状

解脲脲原体是一种条件致病菌，多与宿主共存，仅在某些条件下引起机会性感染，感染部位常为男女泌尿道，其中更易致病的为U．urealyticum型。近年来检测解脲脲原体的方法主要有液体培养法、固体培养法、免疫学方法和分子生物学方法等等，这些检测方法各有优劣。本文就临床使用较多的液体培养法、固体培养法和分子生物学方法进行重点分析，希望能给临床提供更多的帮助。     

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备抗解脲脲原体(Uu)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法:用灭活的Uu免疫BALB/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备抗Uu的mAb。以ELISA和免疫组织化学染色法对mAb的亚类、效价及特异性进行鉴定。结果:获得3株抗Uu的mAb,均为IgG2b亚类。3株mAb的腹水ELISA效价为10-4~10-5。有2株只与Uu产生反应而不与肺炎支原体、淋球菌(gonococcus/GC)及豚鼠气单胞菌(A.cariae)等病原体发生交叉反应。免疫组化结果表明,mAb能和解脲脲原体特异性结合。结论:制备了3株具有较高的特异性和效价的抗UumAb,为Uu的免疫学检测及相关研究提供重要的制剂。     

免疫组化法检测解脲脲原体的研究

目的　建立检测解脲脲原体 (UU)的实验方法。方法　应用亲和素 生物素 酶复合物技术 (ABC法 )观察UU感染者 ,并与培养法和PCR法相比较。结果　ABC法对 75例临床标本的检出率为 5 2 % ,与培养法和PCR法比较 ,在统计学上差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　ABC法可作为诊断UU感染的快速检测方法 ,在临床应用中有一定实用价值。     

解脲脲原体感染的检测与体外耐药性分析

目的探讨本地区解脲脲原体(Uu)感染及耐药情况,指导临床合理用药。方法对临床送检的531份标本进行Uu培养、计数、鉴定和药敏试验;对775份标本进行荧光定量PCR(FQ-PCR)法和培养法检测Uu。结果FQ-PCR法检出Uu阳性339例,阳性率43.74%。培养法检出Uu206例,阳性率38.79%。Uu对9种抗菌药物的耐药率最高为环丙沙星(CIP)80.10%,最低为交沙霉素(JOS)0.00%,敏感率最高为原始霉素(PRI)98.54%。结论Uu用两种方法检测均可有效检出。培养法能提供药敏结果,更有利于临床治疗。药敏结果提示本地区Uu感染经验用药可选择交沙霉素和强力霉素。     

套式PCR鉴定精液解脲脲原体培养结果报告

应用套式（Ｎｅｓｔｅｄ）ＰＣＲ鉴定７０例精液解脲脲原体培养结果。显示两种方法的阳性符合率为７８．０４％，其中包括：１．培养结果２４－４８小时阳性，而后转阴性１３例，经套式ＰＣＲ检测６例阳性，阳性率为４６．１％，占阳性经率的１６．２％（６／３７）。２．培养７２小时后才显示阳性结果６例，经套式ＰＣＲ检测均为阳性，占阳性比率的１６．２％（６／３７），说明培养法只能用于初筛。     

PCR法解脲脲原体分群和四环素耐药检测

目的 建立解脲脲原体(Ureaplasma urealyxicum，Uu)的分群和四环素耐药PCR检测方法。方法 1．根据Uu的多带抗原(multi—banded antigen，MBA)基因序列自行设计引物(P15′-ATT，TGC，AAT，CTT，TAT，ATG，TT；P25′-TTC，AGC，TGA，TGT，AAG，TGC，AGC，ATT，AAA，T)，并建立分群PCR反应体系。2．根据TetM基因序列自行设计引物(P15′-TTA，TCA，ACG，GTT，TAT，CAG，G；P25′-GCT，ATA，TAT，GCA，AGA，CG)，并建立四环素耐药反应体系。结果 1．MBA基因PCR能将Uul4个血清型正确分为二个生物群，其中生物一群(1、3、6、14等4个血清型)出现404bp的产物带，生物二群(2、4、5、7、8、9、10、11、12、13等10个血清型)出现448bp的产物带。60株Uu临床分离株经MBA基因PCR检测，生物一群53例、生物二群6例、生物一／二群同时存在1例。2.Uu典型株14个血清型，TetM基因PcR扩增的不能出现任何条带；60株Uu临床分离株经TetM基因PCR检测41例出现目的条带。结论 PCR法进行Uu生物分群和四环素耐药检测简单、快速，为相关研究提供了手段。     

广州地区新生儿解脲脲原体感染及高危因素调查

对１４１例新生儿做鼻咽部及尿道口分泌物的解脲脲原体（ＵＵ）培养，结果显示：无症状正常组的新生儿（ＵＵ的阳性率为２０％，患病组的新生儿ＵＵ的阳性率为４５％，两者差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。新生儿出生前其母有胎膜早破的，其ＵＵ阳性率为２５％，出生前其母无胎膜早破的新生儿ＵＵ阳性率为１９％，两者差异显著（Ｐ＜０．０５）。本文认为ＵＵ是引起新生儿感染的重要病原体之一。     

解脲脲原体生物膜胞外多糖的检测

目的 研究解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)4个型别标准株在体外形成的生物膜之胞外多糖的分布及结构成分.方法 将Uu标准株Parvo群中4、8血清型和T960群中3、14血清型进行体外生物膜培养后,扫描电镜下观察生物膜组成及结构,并在FITC-ConA/PI及ECA/PI双荧光染色后进行激光共聚焦显微镜观察及测定平均荧光强度.秩和检验及t检验分别比较两种荧光标记物、两生物群的总体平均荧光强度的差异.结果 4个型别Uu标准株均可在体外形成生物膜,生物膜结构主要呈网格状,胞外物质占大部分比例.在激光共聚焦显微镜下,Uu生物膜胞外多糖均可被FITC-ConA和ECA染色,FTTC-ConA呈网格状分布,ECA小片状聚集分布.FITC-ConA的总体平均荧光强度较ECA高,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 Uu体外培养生物膜主要呈网格状结构,胞外多糖中含有葡萄糖、甘露糖、半乳糖、N-乙酰葡聚糖残基,并以葡萄糖、甘露糖残基为主.     

100例不孕患者解脲支原体培养及其药敏分析

目的了解不孕患者解脲支原体感染及其药敏情况.方法对100例不孕患者进行解脲支原体培养及其药敏试验.结果不孕患者感染解脲支原体阳性率30%,药敏结果显示对克拉霉素、交沙霉素、罗红霉素、阿齐霉素最为敏感,而耐药性最强的为环丙沙星,其敏感率仅为13.33%.结论解脲支原体在不孕患者中感染率较高,阳性患者对环丙沙星等抗生素耐药.诊治不孕应将支原体检查及其药敏试验作为常规检验.     

解脲脲原体感染研究进展

解脲脲原体属于支原体科中的脲原体属,与男女性生殖道炎症、HIV感染、不孕不育、不良妊娠结局以及新生儿疾病等有关。该文从以上几个方面就解脲脲原体与人类健康的关系进行阐述。     

生殖支原体及解脲脲原体对妊娠的影响研究

目的：进一步探讨生殖支原体（Mg)及解脲脲原体（Uu)对妊娠的影响。方法：应用灵敏、特异的套式PCR（nPCR）技术对219例胎盘组织进行Mg、Uu检测,并对Mg、Uu nPCR阳性产物各1例进行了DNA序列测定以验证。结果：早产、胎膜早破者的Mg、Uu,胎儿窘迫者的Mg之阳性检出率均明显高于正常妊娠者（P均小于0．01）;另外,上胎流产、死胎者和本次妊娠3．00以上,呈强关联。结论：Mg与Uu一样,围产期感染可致不良妊娠结局。     

解脲脲原体与男性不育及生殖道炎症关系的探讨

本文对218例男性精液解脲脲原体(ureaplasma Urealyticum,UU)分离培养,发现不育症组UU检出率56.8%,生殖道炎症组检出率45.0%,正常对照组检出率22.0%,不育组和炎症组与正常组之间存在非常显著性差异(P<0.01),分析结果,亦证明UU是导致男性不育及生殖道炎症的病因之一.     

解脲脲原体套式（Nested）PCR检测研究

本文报告解脲脲原体（ＵＵ）的套式（ＮＥＳＴＥＤ）ＰＣＲ检测方法。经方法学考核表明，本法的特异性、灵敏度以及试剂的稳定性和对临检标本的顺应性均较好。９３份各种生殖道炎症患者之宫颈拭子标本套式ＰＣＲ检出２１份阳性（阳性率２２．６％），而市售ＰＣＲ试剂盒仅检出１份阳性（阳性率１．１％）。前者阳性检出率明显高于后者（Ｐ＜０．０１）。