MTT法检测LAK细胞活性的初步研究

本文应用MTT法测定了LAK细胞介导杀伤肿瘤细胞的细胞毒作用,现报道如下。1 材料与方法1.1 材料与试剂:白细胞介素2(IL-2):中国预防医学科学院病毒研究所候云德教授惠赠;MTT:3-(4,5 dimetyl-2-thiazoly-2,5-diphenyl-2H-tetrazoli-um-bromide,Fluka);PHA:广州医药工业研究所产品;酸化异丙醇:含0.04 mol/L HCl的异丙醇;96孔细胞培养板(Costar)购自美国;酶联免疫检测仪:     

地塞米松对小梁细胞水通道蛋白-1表达的影响

目的 观察地塞米松对培养的牛眼小梁细胞水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响.方法 应用含浓度为5,25,50,250μg/L的地塞米松培养液作用体外培养的第3～4代牛眼小梁细胞.7d后,免疫组织化学方法检测牛眼小梁细胞在不同浓度地塞米松作用下AQP-1的蛋白表达水平,与正常体外培养的细胞进行对照并进行定量分析.结果 正常牛眼小梁细胞可见AQP-1蛋白表达,其灰度值为184.83±1.52,在浓度为5,25,50,250μg/L地塞米松作用7d后,AQP-1蛋白表达灰度值分别为185.95±1.49,193.25±1.18,196.88±0.91,204.26±1.64.当地塞米松浓度≥25μg/L时出现抑制作用(P<0.05).结论 在体外培养条件下,地塞米松可抑制牛眼小梁细胞AQP-1的表达,这可能与糖皮质激素应用后房水流出阻力增加、眼压升高所继发的青光眼有关.     

压力对体外培养牛眼小梁细胞的影响

目的：观察压力对体外培养牛眼小梁细胞的影响．方法：对体外培养的牛眼小梁细胞施以不同程度的压力，用倒置相差显微镜，光镜，电镜观察细胞形态结构变化，台盼蓝染色观察比较各组细胞活力的差别．结果：当作用于细胞的压力为1．33和2．67kPa(1kPa＝7．5mmHg)，作用时间为48h时，与对照组比较，形态结构无明显变化，台盼蓝计数无显性差异(P＞0．05)，而当压力为5．33kPa作用时间为24h时，细胞形态结构有轻度的损伤，随着压力和作用时间的进一步增加，细胞的损伤程度也进一步加重。结论：小梁细胞承受压力的能力是有限的，压力过高或受压时间过长都会对细胞造成损伤。     

MTT法检测氧化石墨烯的细胞毒性

目的研究丝素一氧化石墨烯复合膜（SF-GO）的细胞毒性。方法采用MTY比色法检测含有不同浓度氧化石墨烯（0．1wt％、0．2wt％、0．5wt％、1．0wt％）制成的丝素一氧化石墨烯复合膜在不同时期（1d、3d、5d、7d）对小鼠成纤维细胞L929细胞相对增殖率（RGR）的影响;通过透射电镜观察各组细胞的形态,最终评价丝素一氧化石墨烯复合膜的细胞毒性。结果随着氧化石墨烯浓度的增加,细胞毒性在不断增加（P〈0．01）;随着测定天数的增加,氧化石墨烯的细胞毒性虽减小,但无统计学意义,且各组总体趋势均在减小;通过透射电镜照片可见各组细胞形态基本正常,细胞生长良好,为长梭形或卵圆形,并可见圆形分裂细胞,细胞折光性强。结论氧化石墨烯浓度≤1wt％时无明显细胞毒性。     

MTT法和LDH法检测T—AK细胞活性的研究

采用ＭＴＴ比色分析法和ＬＤＨ释放法检测了ＣＤ３单克隆抗体和白细胞介素－２共同激活的Ｔ－ＡＫ细胞的杀伤活生，并对检测方法进行了改良。     

MTT法检测CIK细胞的体外杀瘤活性

目的：观察CIK（cytokine induced killer)细胞的体外杀瘤活性。方法：以LAK（lympho kine activated killer) 细胞作对比，用MTT法测定并比较CIK细胞与LAK细胞的体外杀瘤活性。结果：CIK细胞的体外杀瘤活性明显优于LAK细胞，杀伤率分别为29％和15％，结论：CIK细胞是一种具有较强杀伤活性的免疫效应细胞，有可能用于抗肿瘤的生物治疗。     

改良MTT比色法检测NK细胞活性

目的 :探求更简便、实用的改良四甲基偶氮唑盐 ( MTT)比色法检测 NK细胞活性。方法 :1 2只 Wistar大鼠 ,取脾淋巴细胞 ,用 MTT比色法测定 NK细胞活性 ,效、靶细胞分别先孵育0 h和 4h,再与 MTT共同孵育 4h两种方法 ,对不同孵育时间的实验结果进行 t检验和相关性分析。结果 :两种方法差异有统计学意义 ,呈高度正相关。结论 :可以用效靶细胞不进行预先孵育的方法检测 NK细胞活性     

地塞米松对低渗诱导的人小梁细胞容积敏感性氯电流的影响

目的：分析地塞米松对低渗诱导的人小梁细胞容积敏感性氯电流的影响,探讨容积敏感性氯通道(VACC)在激素性青光眼(GIG)发病中的可能机制。方法：人小梁细胞悬液接种于直径35 mm塑料培养皿中单层生长,按培养液中是否含地塞米松分组,即正常培养液组和地塞米松培养1、3和7 d组,共4组,采用全细胞膜片钳技术分别记录4组细胞在低渗状态下的氯电流密度值,比较各组数值的差异。结果：正常培养液组小梁细胞低渗刺激后,在+100和－100 mV电压钳钳制下,外向和内向电流密度值分别为（19.94±0.87)和(－6.53±0.41)pA/pF。地塞米松培养1、3和7 d组的小梁细胞低渗刺激后,在+100和－100 mV电压钳钳制下,外向和内向电流密度值分别为（19.39±1.40)和(－6.42±0.28)pA/pF、（17.97±2.35)和(－5.82±0.94)pA/pF、（17.16±1.16)和(－5.65±0.43)pA/pF。地塞米松培养1 d组小梁细胞较正常培养液组低渗刺激后的外向和内向电流密度值减小,但差异无统计学意义（P＞0.05）;地塞米松培养3和 7 d组小梁细胞较正常培养液组小梁细胞低渗刺激后的外向和内向电流密度值明显减小（P＜0.05）。结论：地塞米松导致体外培养的正常人小梁细胞容积敏感性氯电流密度值降低,进而影响小梁细胞容积调节,可能是导致GIG房水流出阻力增加的原因之一。     

SRB法和MTT法检测PDGF-BB对牛眼小梁细胞增殖的影响

目的探讨血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)对体外培养牛眼小梁细胞增殖的影响及意义。方法分别用不同浓度的PDGF-BB(0 ng/ml、5.0 ng/ml、12.5 ng/ml、25.0 ng/ml)刺激第三代的牛眼小梁细胞。24小时后收集细胞,分别采用SRB法和MTT法检测PDGF-BB对牛眼小梁细胞增殖的影响。结果 SRB法和MTT法均显示,随着PDGF-BB浓度的增加,牛眼小梁细胞增殖能力加强。结论在体外培养的条件下,PDGF-BB可以促进牛眼小梁细胞增殖,可能对降低眼内压具有重要作用。     

地塞米松抑制培养牛眼小梁细胞AQP1表达

目的测定地塞米松对体外培养牛眼小梁细胞水通道蛋白-1(aquaporin1,AQP1)表达的影响,探讨糖皮质激素性青光眼房水引流阻力的形成机制。方法将传3代的牛眼小梁细胞用数字表法随机分为对照和地塞米松处理组。将不同浓度的地塞米松(10-5、10-6、10-7mol/L)分别加入培养液持续培养14 d,免疫细胞化学方法检测小梁细胞AQP1表达水平,计算机图像分析软件测量细胞表面积。结果经不同浓度地塞米松处理后的小梁细胞AQP1表达量吸光度值A显著低于对照组(均P=0.000)。10-7mol/L地塞米松作用下细胞表面积显著大于对照组,而10-6mol/L和10-5mol/L地塞米松作用下细胞表面积显著低于对照组(均P=0.000)。结论地塞米松抑制牛眼小梁细胞AQP1表达,可能参与了糖皮质激素性青光眼的发生。     

细胞图像分析仪怀MTT法用于牙科材料细胞毒性的检测

目的；对细胞图像分析仪测定法与ＭＴＴ法用于牙科材料细胞毒笥检测的评价。方法；先用Ｌ９２９细胞为靶细胞，同时牙科交换的铬合金，软磁铁氧体及生物活性陶瓷进行细胞毒性的检测。结果：铁镍合金，铁铬合金，软磁铁氧体及生物活性陶瓷ＭＴＴ法检测其细胞增殖率分别为１００．６８％，９２．２４％，１００．８６％，９０．５２％，毒性均为０级；细胞图像分析仪检测其细胞密度相对比分别为１０６．５２％，１０１．３０％，１０６     

MTT比色法在测定细胞活性中的影响因素

ＭＴＴ比色法在测定细胞活性中的影响因素郑耘，杨善民，颜江华，陈瑞川关键词：ＭＴＴ，甲化合物，细胞活性细胞活性检测试验一直是肿瘤药敏实验中的一项常规工作，目前采用的方法有多种，其中关于染色法、同位素法、集落形成法的研究较多，由于这些方法均有不少缺点，使...     

MTT法检测口腔恶性肿瘤细胞化疗药物的敏感性

目的　运用MTT 法测定口腔鳞癌细胞体外对化疗药物的敏感性及其适用价值。方法　选用不同剂量的8种抗癌药物与18例口腔及口咽鳞状细胞癌标本孵育不同时间后,噻唑兰(MTT) 法测定离体癌细胞对8种化疗药物的体外敏感性。结果　18例口腔及口咽鳞癌细胞对化疗药物均呈不同的敏感性,但不同个体对各种化疗药物的敏感性之间存在差异。结论　以MTT法检测口腔鳞癌细胞对化疗的敏感性有助于指导临床选择肿瘤敏感的化疗药物,避免盲目选用肿瘤非敏感性化疗药对机体造成的不良反应     

MTT法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的研究

目的：探讨3-（4,5）-2-噻唑-（2,5）-二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）药敏试验在指导临床乳腺癌化疗中的作用。方法：应用MTT法检测50例乳腺癌新鲜标本肿瘤细胞对10种化疗药物的敏感度。结果：对乳腺癌细胞抑制率强的药物为PTX、NVB、VP-16、5-FU、DDP,对乳腺癌细胞抑制率较弱的化疗药物为VCR、ADM、MTX、MMC、HCPT。结论：MTT体外药敏试验对指导临床乳腺癌个体化治疗具有重要意义。     

TUNEL法与MTT法检测脑胶质瘤细胞药物敏感性的比较

（1）目的 比较检测脑胶质瘤细胞药物敏感性的两种方法。（2）方法 同时采用DNA断端末端标记（TUNEL）法与噻唑蓝（MTT）法,体外检测人多形性胶质母细胞瘤BT325株细胞TUNEL法和MTT法所得结果高度一致;而用两种方法检测19例病人新鲜脑胶质瘤细胞药物敏感性,实验结果有一定的差异。TUNEL法优于MTT法,（4）结论 在细胞高度均一时,TUNEL法和MTT法均可较好反映药敏情况,但随着所分离的肿瘤细胞纯度降低,MTT法难以准确反映药敏试验结果。     

MTT法检测乳腺癌细胞的体外药物敏感率

乳腺癌是由乳腺导管上皮发生的恶性肿瘤,化学治疗包括手术前、中和后的化疗,尤以术后的辅助化疗最为常用,由于不同个体的乳腺癌细胞对抗癌药物的敏感性存在差异,即:恶性肿瘤存在"异质性(heterogeneity)"[1],因此,对乳腺癌患者实行化疗方案个体化受到肿瘤学界的高度重视.为了提高化疗的有效率,利用相对可靠的肿瘤化疗药物敏感实验方法来选择药物,实现个体化治疗.我们用MTT法测定了10种常用化疗药物对46例乳腺癌的抑制率,旨在为临床化疗提供客观依据.     

MTT法检测SLE IL—6活性水平的研究

采用ＩＬ－６细胞依赖株（Ｂ９细胞）及ＭＴＴ法检测１４例活动期ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）培养上清的ＩＬ－６活性水平。结果，经ＰＨＡ刺激并培养４８ｈ后，ＰＢＭＣ培养上清中ＩＬ－６的活性水平比正常人明显增高（Ｐ〈０．００１）。此外，与ＰＢＭＣ培养上清中ＩＬ－６水平相对应的外周血Ｂ细胞数量及ＩｇＧ含量亦明显高于正常人（Ｐ〈０．０１）。     

改良MTT法检测自然杀伤细胞的活性

采用经作者改良的ＭＴＴ比色测定自然杀伤细胞（ＮＫＣ）活性。本法简便，稳定可靠，是一种很有价值的测定ＮＫＣ活性的方法。     

细胞凋亡的MTT染色法检测

目的研究MTT染色法用于检测细胞凋亡的可行性。方法以As2O3诱导K562细胞建立凋亡细胞模型,并比较以下3种方法检测凋亡的结果。MTT染色法检测、直接在光镜下进行形态学观察以及DNA凝胶电泳。结果MTT染色法可准确判定细胞凋亡,并可清晰分辨正常细胞、凋亡细胞和死亡细胞。结论MTT染色法是一种简单、可行的检测细胞凋亡的方法。