六味地黄丸血中移行成分的含量测定

目的对六味地黄丸的2种原型血中移行成分进行含量测定.方法采用RP-HPLC法建立了六味地黄丸体外指纹图谱及大鼠血清色谱指纹图谱,在此基础上通过标准品对照法确认六味地黄丸的原型血中移行成分并对其进行含量测定.结果确认丹皮酚和马钱素为六味地黄丸原型血中移行成分,测定丹皮酚含量为0.93±0.01 mg/g,马钱素含量为0.37±0.01 mg/g.结论该方法以六味地黄丸入血成分的含量为指标,为更好地控制其内在质量提供了科学依据.     

六味地黄丸血中移行成分的分离及结构鉴定

目的：在前期六味地黄丸血清药物化学初步研究的基础上分离并鉴定六味地黄丸血中移行成分。方法：以血清色谱指纹图为指导,采用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱及RP-C18柱制备色谱进行分离纯化,根据波谱数据进行结构鉴定。结果：对11种六味地黄丸血中移行成分进行分离和结构鉴定,共分离得到了8个化合物,分别鉴定为5-羟甲基-2-糠酸（A）、莫诺苷（B）、獐牙菜苷（C）、马钱子苷（D）、2-羟基-苯乙酮-4-葡萄糖醛酸苷（E）、4-甲氧基-5-磺酸基苯乙酮-2-葡萄糖醛酸苷（F）、2,4-二羟基-苯乙酮（G）、（H）2,5-二羟基-4-甲氧基苯乙酮。其中5-羟甲基-2-糠酸（A）为熟地、山茱萸和泽泻中的成分代谢形成;莫诺苷（B）、獐牙菜苷（C）、马钱子苷（D）为山茱萸所含成分直接入血而形成;2-羟基-苯乙酮-4-葡萄糖醛酸苷（E）、4-甲氧基-5-磺酸基苯乙酮-2-葡萄糖醛酸苷（F）、2,4-二羟基-苯乙酮（G）、（H）2,5-二羟基-4-甲氧基苯乙酮为丹皮酚的代谢产物。结论：将血清药物化学方法引入到化合物的分离制备领域中,成功地分离鉴定了六味地黄丸的体内直接作用物质。     

六昧地黄丸血中移行成分的含量测定

目的对六味地黄丸的2种原型血中移行成分进行含量测定.方法采用RP-HPLC法建立了六味地黄丸体外指纹图谱及大鼠血清色谱指纹图谱,在此基础上通过标准品对照法确认六味地黄丸的原型血中移行成分并对其进行含量测定.结果确认丹皮酚和马钱素为六味地黄丸原型血中移行成分,测定丹皮酚含量为0.93±0.01 mg/g,马钱素含量为0.37±0.01 mg/g.结论该方法以六味地黄丸入血成分的含量为指标,为更好地控制其内在质量提供了科学依据.     

六味地黄丸对肾虚型老年痴呆动物模型的改善作用

目的:研究六味地黄丸对肾虚型老年痴呆动物模型的改善作用.方法:48只小鼠随机分为对照组、模型组、六味地黄丸组、塞络通组;各试验组按照15 mg·kg-1连续sc氢化可的松40 d,第20天时侧脑室注射β-淀粉样蛋白(25-35)(Aβ25-35)6μg建立肾虚型老年痴呆动物模型,对照组给予等量生理盐水.从第21天开始,六味地黄丸组小鼠按8 g·kg-1 ig六味地黄浓缩丸,塞络通组小鼠按32 mg· kg -1 ig塞络通,对照组和模型组以相同体积每日ig蒸馏水.从第31天开始观察、检测各组小鼠的体重及状态、学习记忆能力、自主活动、抗疲劳能力、血清皮质酮含量、免疫学指标及脑组织病理学变化.结果:与对照组相比,模型组小鼠出现体重增长缓慢,自主活动受到抑制,水迷宫学习记忆能力受损,跑步力竭时间缩短,胸腺和脾指数降低,脾细胞刺激指数降低,血清皮质酮值降低.与模型组比较,六味地黄丸组小鼠的体重增长、自主活动、水迷宫上台潜伏期及游出率、跑步力竭时间、胸腺和脾指数、脾细胞刺激指数、血清皮质酮值等得到明显改善(P＜0.05,P＜0.01),而塞络通组小鼠各项指标改善不明显.结论:六味地黄丸对肾虚型老年痴呆症状具有显著改善作用,而塞络通不适合用于改善肾虚症状.     

六味地黄丸及其类方血中移行成分的比较研究

目的：首次进行六味地黄丸及其类方知柏地黄丸和桂附地黄丸的血中移行成分的比较研究，试图从体内直接作用物质的角度初步阐明地黄丸类方的配伍规律。方法：利用RP-HPLC建立六味地黄丸及其类方给药后的大鼠血清色谱指纹图，比较分析，确定各复方的血中移行成分；进而通过单味药样品的对照，鉴定出衍生方与主方的差异血中移行成分及生药来源。结果：六味地黄丸及类方出现了14个共有血中移行成分，另外，知柏地黄丸产生了5个血中移行成分，桂附地黄丸产生了2个特有血中移行成分。结论：血中移行成分的数目与状态从体内直接作用物质的层面上反映了六味地黄丸及其类方功效上的异同，提示从经典方剂及其类方的体内成分入手进行深入研究，将是阐明复方配伍规律的有效途径。     

中药血中移行成分研究

血中移行成分的研究近年来在中药复方研究领域取得较快发展。本文总结了一些中药复方血中移行成分研究的成功经验,并对其研究方法进行归纳。     

六味地黄丸主要血中移行成分对培养大鼠成骨细胞促增殖作用的研究

目的：阐明六味地黄丸主要血中移行成分对培养大鼠成骨细胞促增殖作用。方法：将六味地黄丸主要血中移行成分以适当浓度添加到大鼠成骨细胞培养液中，用MTT法测定细胞的增殖速度。结果：六味地黄丸主要血中移行成分莫诺苷、獐牙菜苷、马钱子苷的混合物各剂量组均明显表现出对大鼠成骨细胞的促增殖作用。结论：初步确定六味地黄丸主要血中移行成分莫诺苷、獐牙菜苷、马钱子苷是其治疗骨质疏松的药效物质基础。     

六味地黄丸对老年性高血压患者肾保护作用的随访调查

目的:观察六味地黄丸对老年性高血压患者的肾保护作用。方法:采用大样本流行病学调查的方式,筛选符合诊断标准的558例老年性高血压患者随机分为两组,治疗组282例,给予六味地黄丸进行干预性治疗,同时服用得高宁20 mg,日2次;对照组276例,单服得高宁20 mg,日2次。两组患者治疗随访2年,观察其对患者的血压、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、尿微量清蛋白(mALB)、血清内皮素(ET)、血清一氧化氮(NO)等指标的影响。结果:治疗组的高血压临床总有效率及平均降压值,改善BUN、Cr、mALB等肾功能指标方面优于对照组(P<0.01);在对ET、NO的调节方面也明显优于对照组(P<0.01)。结论:六味地黄丸对老年性高血压患者具有多重性肾保护作用。     

大承气汤血中移行成分的代谢分析

目的:通过分析口服给药后大鼠血清中成分,以确定中药及复方的体内直接作用物质。方法:待大鼠给药大承气汤吸收入血后取血,利用HPLC-DAD方法分析检测血中移行成分。结论:大鼠给药大承气汤复方后,不同部位血清中入血成分含量不同,因此可以推测,大鼠不同取血方法获得的血液中血清移行成分含量不同,且在色谱条件68.79min处,存在一特定的某血清移行成分,物质在401nm处有很大吸收。     

六味地黄丸对甲亢型肾阴虚大鼠滋阴作用的研究

目的：观察六味地黄妨滋阴作用。方法：大鼠灌服3周甲状腺素造成甲亢型肾阴虚模型。结果：六味地黄丸能显著减慢阴虚大鼠心率,减少饮水量,增加尿量和体重,升高血糖、痛阈、甲状腺指数、血清IgG含量,降低血浆粘度,血清T3、T4、铜含量及铜／锌比值,呈明显剂量依赖关系。结论：六味地黄丸对甲亢型肾阴虚大鼠具有明显滋阴作用。     

六味地黄丸入血成分对自杀基因杀伤肝癌细胞的增效作用

目的:探讨六味地黄丸主要入血成分对单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-tk/GCV)自杀基因系统杀伤大鼠肝癌细胞(CBRH7919)的增效作用.方法:按CBRH7919/tk占总细胞数10％的比例混合CBRH7919与CBRH7919/tk细胞,分别接种96孔板,每孔加细胞悬液100 μL(2×103个/孔),设置对照组、低、中、高3种浓度的六味地黄丸入血成分组、GCV组、各浓度六味地黄丸入血成分联合GCV组;培养24h后分别加入入血成分马钱素和丹皮酚(质量浓度均为25,50,100 μmol·L-1),莫诺苷、5-羟甲基-2-糠酸、獐牙菜苷(浓度均为37.5,75,150 μmol·L-1)5种化合物和5种化合物混合组分(质量浓度为0.0067,0.0135,0.027 g·L-1);及其混合组分(质量浓度为0.034 g·L-1)作用后淋巴细胞培养上清(占培养液体积分数7.5％,15％,30％),设6个复孔,37℃,5％ CO2培养箱培养72 h后MTT法测定细胞存活率,检测六味地黄丸主要入血成分及淋巴细胞培养上清对自杀基因系统杀伤肝癌细胞的影响.结果:自杀基因系统联合马钱素、莫诺苷、5-羟甲基-2-糠酸、獐牙菜苷和丹皮酚5种化合物及5种化合物的混合组分,均未显示其对肿瘤自杀基因疗法的直接增效作用;但含药上清联合GCV组对肝癌细胞生长抑制率分别为(22.72±3.12)％,(26.68±1.92)％,(30.50±3.53)％;与单独自杀基因(10％ tk/GCV)组抑制率(15.37±3.96)％比较,差异均有统计学显著性意义;q值分别为1.50,1.75,2.24,均大于1.15,具有协同增效作用,并呈一定的量效关系.结论:六味地黄丸主要入血成分能刺激淋巴细胞产生某些活性物质,并发挥了对HSV-tk/GCV自杀基因治疗系统对肝癌CBRH7919细胞杀伤的增效作用,这些淋巴细胞产生的内源性活性物质可能才是六味地黄丸对肿瘤自杀基因疗法增效作用的药效物质基础.     

六味地黄丸合金匮肾气丸加减治疗较小肾结石100例临床观察

目的 观察六味地黄丸合金匮肾气丸加减治疗不适合手术的较小肾结石(直径<1.0cm)的临床疗效.方法 将200例肾结石患者随机分为两组,治疗组100例辨证分为肾阴虚组(治疗A组)、肾阳虚组(治疗B组)各50例,分别采用六味地黄丸加减与金匮肾气丸加减治疗;对照组100例采用排石冲剂治疗.结果 治疗A组治愈率为60%、有效率为86%;治疗B组治愈率为62%、有效率为88%.对照组治愈率为7%、总有效率为35%.两治疗组的治愈率、总有效率均较对照组有显著性差异(P<0.01).结论 六味地黄丸合金匮肾气丸加减治疗较小肾结石有效.     

六味地黄丸中丹皮的质量研究

本文以不同种丹皮为对照,对六味地黄丸的原料药丹皮进行了鉴定;用无水乙醇提取、薄层扫描法测定了丹皮药材及六味地黄丸中丹皮酚的含量。本法与水蒸汽蒸馏-紫外分光光度法,醇浸出-紫外分光光度法作了比较,排除了杂质干扰,结果准确可靠。     

六味地黄丸对老年大鼠学习记忆及脑内M1胆碱受体阳性神经元的影响

目的:观察六味地黄丸对老年大鼠学习记忆及脑内M1胆碱受体(MI-AchR)阳性神经元的影响,探讨滋阴补肾法改善老年大鼠学习记忆能力的可能机制.方法:将雄性SD大鼠分为青年对照组(3月龄)、老年对照组(24月龄)和六味地黄丸组(24月龄).六味地黄丸组大鼠按3 g·kg-1 ig六味地黄丸液,老年对照组ig同体积生理盐水,各30 d;青年对照组ig同体积生理盐水7d.通过Morris水迷宫实验,比较其学习记忆能力,并运用免疫组织化学方法,检测大脑海马和皮质相关区域M1-AchR阳性神经元变化.结果:老年对照组各指标与青年对照组比,有极显著性差异(P＜0.01).六味地黄丸组平均逃避潜伏期自第3天起较老年对照组明显缩短,有极显著性差异(P＜0.01).目标象限游程占全部游程百分比方面,与老年对照组相比,六味地黄丸组有极显著性差异(P＜0.01);六味地黄丸组与老年对照组穿越平台次数相比,有极显著性差异(P＜0.01).与老年对照组相比,六味地黄丸组M1-AchR阳性细胞数目增多,在海马CA3区及第一躯体感觉区(S1Tr)内,有极显著性差异(P＜0.01).结论:六味地黄丸可以改善自然衰老大鼠的空间学习记忆能力,可能与其保护海马CA3区及S1Tr内胆碱能毒蕈碱M1-AchR阳性神经元,增强中枢胆碱能系统功能有关.     

基于HPLC-UV的代谢组学方法对 味地黄丸的抗炎药效评价

目的:了解能否借助已建立的基于HPLC-UV的代谢组学技术对六味地黄丸的抗炎药效作用进行分析评价.方法:在提取获得六味地黄丸亲水或亲脂成分物质组的基础上,采用测定角叉菜胶致炎大鼠后右爪肿胀度及基于HPLC-UV的代谢组学方法对这两物质组的抗炎药效作用进行评价.结果:高剂量组对大鼠足肿胀有一定的抑制作用,差异明显;低剂量组与炎症组间没有统计学差异.而代谢组学分析显示大鼠给予低剂量的2种提取液后,其尿液HPLC-UV指纹图谱特征在主成分分析得分图上具有明显的回归趋势,其中亲水成分组尤为明显.结论:本研究结果表明基于HPLC-UV的代谢组学方法可用于六味地黄丸的抗炎药效评价,具有灵敏、整体等优点.     

六味地黄汤及其组方对小鼠血糖和肝糖元的影响

讨论了六味地黄汤及其组方的水煎剂对正常小鼠血糖和肝糖元的影响。三补、山茱萸加丹皮和山药加茯苓可降低血糖水平;全方、三补、熟地加泽泻及山茱萸加丹皮可增加肝糖元的含量。对六味地黄汤对糖代谢的影响及其配伍机理进行了初步的探讨。