154例HBV血清学标志物阳性PCR检测结果分析

１５４例ＨＢＶ血清学标志物阳性ＰＣＲ检测结果分析黄华健邵阳市中心医院检验科为了解ＨＢＶ—ＤＮＡ与乙型肝炎５种血清学标志物——即乙肝二对半（ＨＢｓＡｇ、Ａｎｔｉ—ＨＢｓ，ＨＢｅＡｇ，Ａｎｔｉ—ＨＢｅ，Ａｎｔｉ—ＨＢｃ）之间关系，本文对１５４例乙肝二对半...     

乙型肝炎患者HBV M和HBV DNA的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）血清学标志（ＨＢＶ Ｍ）与ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果的相关性与临床意义。方法 对４１４例乙型肝炎的ＨＢＶ Ｍ和ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果进行比较。ＨＢＶ Ｍ用ＥＬＩＳＡ定量分析法检测,ＨＢＶ ＤＮＡ用斑点杂交法检测。结果 急性、慢性乙型肝炎患者中ＨＢＶ ＤＮＡ的阳性率与乙型肝炎肝硬化患者的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异有显著性;ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异无显著性;ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢｅＡｇ的滴度与ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率呈正相关关系。结论 ＨＢＶ ＤＮＡ是评价ＨＢＶ活动最理想的标志;抗－ＨＢｅ的出现不能作为ＨＢＶ复制停止的指标;ＨＢｓＡｇ的滴度和ＨＢｅＡｇ的滴度变化可作为临床评价病毒复制程度和     

丁型肝炎病人肝组织HDVRNA与 HBVDNA的表达及关系

目的 探讨丁型肝炎病人肝组织中ＨＤＡｇ、ＨＤＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡＧ表达及关系。方法 应用免疫组化和原位杂交技术检测了７９全丁型肝炎病人肝组织ＨＤＡｇ、ＨＤＶＲＡＮ～ＨＢＶＤＮＡ表达,以５２例型肝炎病人肝组织作对照。结果 丁型肝炎ＨＢＶＤＮＡ检出率（２７％）低于乙型肝炎（４４％）（Ｐ〈０．０５）。在坏死灶边缘肝细胞和气球样变肝细胞浆内有大量的ＨＤＶＲＮＡ蓄积或ＨＤＡｇ呈强型强表达,ＨＤＶＲＮＡ表达     

乙型肝炎病毒表面抗原定量检测临床意义的探讨

为探讨乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）定量检测作为反映乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制情况的临床意义,本文对２００例ＨＢｓＡｇ阳性标本分别做ＨＢｓＡｇ定量检测和ＨＮＢ－ＤＮＡ检测,血清学标志物检测,并对１０例患者地行随访检测以上项目。根据测得的ＨＢｓＡｇ含量将２００例标本分为五组,计算出各组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率,发现随ＨＢｓＡｇ含量增高,ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率也显著增高（Ｐ〈０．０１）。根据ＨＢＶｅ系统不同模式分组显示,随ＨＢＶ感染好转,ＨＢｓＡｇ含量也随之降低（Ｐ〈０．０５）。对６例ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴患者ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴前后的ＨＢｓＡｇ含量比较,发现随ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴,ＨＢｓＡｇ量也显著降低（Ｐ〈０．０１）。综合以上结果,可以说明血清中ＨＢｓＡｇ含量,可以间接反映体内ＨＢＶ的情况,ＨＢｓＡｇ定量检测可作为间接反     

原位杂交法检测肝组织中丁型和乙型肝炎病毒核酸

利用国外引进的重组质粒获得纯化基因片段，分别以随机引物法和ＰＣＲ法制备地高辛素标记的ＨＢＶＤＮＡ探针和ＨＤＶｃＤＮＡ探针。用原位杂交法检测了石蜡包埋的肝组织切片ＢＶＤＮＡ和ＨＤＶＲＮＡ。４９例感染肝组织分为两组：丁肝组２３例；单纯乙肝组２６例，ＨＢＶＤＮＡ的检出率丁肝组（７８．２６％）与乙肝组（７６．９２％）无统计学差异；而ＨＤＶＮＡ的检出率丁肝组（６０．８７％）明显高于乙肝组（１５．３８％）。ＨＢＶＤＮＡ可见于受染肝细胞的胞核或胞浆内，而ＨＤＶＲＮＡ绝大部分见于肝细胞胞核。两种病毒核酸阳性细胞在肝组织中的分布特点大致相同：弥漫或散在地分布于肝小叶或假小叶内，或局灶性分布于小叶周边。ＨＤＶＲＮＡ阳性的肝组织都或多或少地同时存在ＨＢＶＤＮＡ。同一例肝组织中，ＨＢＶＤＮＡ阳性细胞从数量和颗粒密度上似略高于ＨＤＶＲＮＡ。将乙肝组和丁肝组两组病人肝内ＨＢ－ｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ及血清ＨＢｅＡｇ作了比较，各指标阳性率虽有差异，但均无统计学意义。因此，未发现ＨＤＶ感染对ＨＢＶ的复制有明显抑制作用。此结果对以往用血清学或免疫组化方法对ＨＤＶ的研究有所补充和深入，亦可为研究其它类型病毒性肝炎之间的重叠感染所借鉴。     

肝细胞内HBcAg和HBsAg分布的演变特点

本文报道用免疫组化（ＡＢＣ）法检测２９例慢性乙型肝炎患者肝活检组织中ＨＢｃＡｇ和ＨＢｓＡｇ分布的动态演变，结合血清ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ ＤＮＡ的演变探讨其病毒学意义。ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶ ＤＮＡ全阳性反映ＨＢＶ高复制相，全阴性为非复制相，不一致为两相之间的过渡型（低复制相）。肝细胞内ＨＢｃＡｇ由核浆型为主演变为核型或浆型为主乃至阴性意味着ＨＢＶ从高复制相转入低复制相乃至非复制相，同时伴有血     

血清乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其与病毒复制的关系

用抗Ｓ和抗前Ｓ１单抗的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测１５０例慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）携带者和健康人血清中的ＨＢＶ前Ｓ１抗原，其结果和ＨＢＶＤＮＡ聚合酶链反应（ＰＣＲ）、乙型肝炎血清标志的检测结果进行比较。结果表明：前Ｓ１抗原在乙型肝炎病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性组中的检出率和相对滴度显著高于ＨＢｅＡｇ阴性组（Ｐ＜０．０１）；在ＨＢｅＡｇ阴性组中，抗－ＨＢｅ阴性人群前Ｓ１抗原的检出率和相对滴度也显著高于抗－ＨＢｅ阳性人群（Ｐ＜０．０１）。前Ｓ１抗原和ＨＢＶＤＮＡ检测结果的符合率达８０％，两者检出率的相关系数ｒ＝０．９８２６（Ｐ＜０．０１）。结论：血清前Ｓ１抗原和乙型肝炎病毒的存在关系密切。     

肝硬变内HBV DNA及其五种抗原的表达及意义

取２２５例人肝硬变活检组织石蜡切片，检测了ＨＢＶＤＮＡ及其５种抗原。分别用免疫组化ＡＢＣ法检测ＨＢｘＡｇ、ｐｒｅ－Ｓ＿１和ｐｒｅ－Ｓ＿２抗原；用ＰＡＰ法检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ；用原位杂交方法检测ＨＢＶＤＮＡ；用免疫组化、原位杂交双标记方法检测ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｘＡｇ或ＨＢｃＡｇ。结果显示，阳性检出率ＨＢｓＡｇ为７０．０％（１２８／１８３例），ｐｒｅ－Ｓ＿１抗原为６４．４％（８５／１３２例）、ｐｒｅ－Ｓ＿２抗原为６１．４％（８１／１３２例），ＨＢｘＡｇ为７５．３％（１１３／１５０例），ＨＢｃＡｇ为２２．４％（３９／１７４例），ＨＢＶＤＮＡ为６２．４％（５８／９３例）。双标阳性检出率ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ为３７．３％（１９／５１例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｘ－Ａｇ为８６．３％（４４／５１例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｃＡｇ为３９．２％（２０／５１例）。ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢＶ５种抗原阳性病例中８０％以上均伴有肝细胞不典型增生。这一结果表明，在我国肝硬变的发生发展与ＨＢＶ慢性感染有密切的关系。     

成年树Qu实验感染丁型肝炎病毒的初步研究

在证实成年树Ｑｕ可感染人乙型肝炎病毒的基础上，进行了丁型肝炎病毒－乙型肝炎病毒实验感染的探索。ＨＤＶ／ＨＢＶ阳性人血清经同时和重叠感染方式接种于成年树Ｑｕ后，定期留取感染树Ｑｕ血清及肝组织，检测血清中ＨＢｓＡｇ、ＨＤＡｇ、抗－ＤＥ、ＨＢＶＤＮＡ及ＨＤＶＲＮＡ，初步探讨成年树Ｑｕ实验感染ＨＤＶ的可能性。     

套式PCR和原位杂交技术检测肝病患者单个核细胞？…

目的 了解慢性乙型肝炎（中度）和原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ存在情况。方法 采用套式ＰＣＲ以及原位杂交技术检测外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 套式ＰＣＲＳＷＩＭ２６例慢性乙型肝炎（中度）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ阳性７例。阳性率２６．９％,非常显著高于健康对照（Ｘ＾１２＝１４．３,Ｐ〈０．００１）;２１例原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）虱ＰＢＭＣ内ＴＴ     

应用聚合酶链反应技术检测肝组织中的HBV－DNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对４２例肝活切组织石蜡切片中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ进行检测，并与乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）的免疫组织化学及血清学检测进行比较，ＨＢＶ－ＰＣＲ阳性率为７３．８％，高于组织及血清ＨＢｓＡｇ阳性率（分别为５９．５％和５０．０％）。３例病理形态呈肝炎改变，而血清ＨＢｓＡｇ（─）的肝组织中有２例检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，提示ＰＣＲ的高度敏感性和准确性。８３．３％的门脉性肝硬变和８７．５％的肝细胞癌组织中ＨＢＶ－ＰＣＲ呈阳性，进一步证实了上述两病与ＨＢＶ的关系密切。我们还发现肝细胞淤胆患者ＨＢＶ感染率较高，ＨＢＶ－ＤＮＡ及组织ＨＢｓＡｇ阳性比例各为６／９和４／８。     

PCR鉴定HBsAg阴性肝炎HBV DNA感染的意义

ＰＣＲ鉴定ＨＢｓＡｇ阴性肝炎ＨＢＶＤＮＡ感染的意义１李伟１王学春１张金池２刁玉贞收集ＨＢｓＡｇ阴性ＨＢｃＡｂ阳性的慢性肝炎病人血清３０例及恢复期急性乙型肝炎病人血清１００例（共计１３０例），利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＨＢＶＤＮＡ。ＰＣＲ方法及步骤...     

HBV感染与IgA肾病肾小管间质病变的关系

目的探讨ＩｇＡ肾病ＨＢＶ感染与肾小管间质病变的关系。方法利用原位分子杂交（ＨＢＶＤＮＡ）、免疫组化（ＨＢＡｇ、ＣＤ３、ＣＤ８）以及ＨＢＶＤＮＡＨＢＡｇ和ＨＢＡｇＣＤ４３双标记技术，对９１例ＩｇＡ肾病肾穿刺标本进行研究。结果肾组织内ＨＢＡｇ阳性率为６９．２％。ＨＢＶＤＮＡ原位杂交阳性率为４２９％。ＨＢＶＤＮＡ阳性的病例，双重标记染色发现ＨＢＶＤＮＡ阳性的肾小管上皮细胞可表达ＨＢｃＡｇ或／和ＨＢｓＡｇ。ＨＢＶ感染标记（ＨＢＶＤＮＡ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｓＡｇ）阳性组ＣＤ３阳性细胞和ＣＤ８阳性细胞数明显高于阴性组（Ｐ＜００１），并可见数量不等的Ｔ淋巴细胞入侵ＨＢｃＡｇ及ＨＢｓＡｇ阳性肾小管管壁或围绕其周围。结论感染ＨＢＶ的肾组织细胞能够表达ＨＢＡｇ，并诱导ＣＤ３阳性细胞和ＣＤ８阳性细胞浸润，从而加重肾小管、间质损害。ＨＢＶ感染对ＩｇＡ肾病的发生发展可能起着重要作用     

检测孕妇血清、乳汁及新生儿血清乙肝标志物的优生学意义

本文通过对１４６例乙肝标志物阳性产妇乳汁及其新生儿静脉血清学检测两对半，结果 乙肝大三阳母条乳汁内ＨＢｓＡｇ阳性检出率为８２．１４％。单纯ＨＢｓＡｇ阳性母亲乳汁内ＨＢｓＡｇ阳性检出率为３．３９％，免疫法血清学检测新生儿乙肝标志物阳性率为１６．６７％，结论 乙肝大三阳母亲不宜母乳喟养；免疫法血清学检测新生我 肝标志物了性率可能是不是春起初宫内感染率。     

应用PCR检测406例HBV—DNA与HBVM关系的初步观察

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了４６例患者血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，并同时检测乙肝标志物（ＨＢＶＭ），结果表明，急性乙型肝炎和慢性活动性肝炎患者的血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率较高。２８名乙肝标志物均为阴性的患者中有２名ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；也性率占７．１４％，表明ＰＣＲ技术比ＨＢＶＭ更为敏感、特异。血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测有助于发现ＨＢｓＡｇ阴性的乙肝患者，这对于筛选献血员，保证血源质量及肝病的早期     

应用PCR检测406例HBV－DNA与HBVM关系的初步观察

本文应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了４０６例患者血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，并同时检测乙肝标志物（ＨＢＶＭ），结果表明，急性乙型肝炎和慢性活动性肝炎患者的血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率较高。２８名乙肝标志物均为阴性的患者中有２名ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；阳性率占７．１４％，表明ＰＣＲ技术比ＨＢＶＭ更为敏感、特异。血清ＨＢＶ－ＤＮＡ的检测有助于发现ＨＢｓＡｇ阴性的乙肝患者，这对于筛选献血员，保证血源质量及肝病的早期诊断有较大的价值。     

肝癌及癌旁组织HBVDNA原位杂交HBsAg免疫组织化学双标记研究

用原位分子杂交和免疫组化双标记技术，检测４０例肝癌（ＨＣＣ）及癌旁组织中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ，癌及癌旁中ＨＢＶＤＮＡ阳性率为６５％，ＨＢｓＡｇ阳性率为８２．５％，表明ＨＢＶ感染与ＨＣＣ发生密切相关。二者在ＨＣＣ中表达较癌旁组织中少而弱，可能系ＨＣＣ中ＨＢＶＤＮＡ整合后复制减弱之故。发现的碎点状ＨＢｓＡｇ小包涵体可能为ＨＣＣ中ＨＢｓＡｇ的特有表现形式。小细胞ＬＣＤ中ＨＢ－ｓＡｇ表达显著高于癌旁其他类型病变，支持其更接近癌前病变的观点。     

成年树鼩实验感染丁型肝炎病毒的初步研究

在证实成年树可感染人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的基础上，进行了丁型肝炎病毒－乙型肝炎病毒（ＨＤＶ／ＨＢＶ）实验感染的探索。ＨＤＶ／ＨＢＶ阳性人血清经同时和重叠感染方式接种于成年树后，定期留取感染树血清及肝组织，检测血清中ＨＢｓＡｇ、ＨＤＡｇ、抗－ＨＤ、ＨＢＶＤＮＡ及ＨＤＶＲＮＡ，初步探讨成年树实验感染ＨＤＶ的可能性。研究发现：①成年树对人ＨＢＶ易感，ＨＢｓＡｇ阳性率为７５％，其血清学反应及肝组织病理改变与文献报道一致；②ＨＤＶ可通过同时和重叠两种方式感染成年树，感染树血清中可出现ＨＤＡｇ及抗－ＨＤ，经分子杂交证实其血清及肝内均有ＨＤＶＲＮＡ和ＨＢＶＤＮＡ存在，且可导致明显的肝细胞损伤。结果提示：成年树既可感染人ＨＢＶ也可感染ＨＤＶ，可作为研究ＨＤＶ人工感染的实验动物；成年树感染ＨＤＶ后的特点与人及黑猩猩感染时十分相似，能较好地反映人丁型肝炎的真实情况。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞Fas和FasL的表达及临床意义

Ｆａｓ和ＦａｓＬ是介导细胞凋亡的主要系统 ,我们应用逆转录 ＰＣＲ方法 ,对 37例慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达进行检测 ,初步探讨其在慢性乙型肝炎患者活化诱导的外周血淋巴细胞凋亡中的作用。对象与方法病例来源 :我院 1998～ 1999年 37例慢性乙型肝炎患者 ,男 2 6例 ,女 11例 ,年龄 16～ 6 0岁。诊断按1995年全国传染病与寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎标准〔1〕。活动期 :ＡＬＴ >10 0Ｕ/Ｌ ,乙肝标志物 :ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ阳性 ,ＨＢＶＤＮＡ阳性。排除ＨＡＶ、ＨＣＶ、ＨＤＶ、ＨＥＶ…     

用聚合酶链反应检测人肝细胞癌乙型肝炎病毒DNA和丙型肝炎病毒RNA

为研究乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）和丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＤＮＡ）与肝细胞癌的关系，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和巢式ＰＣＲ（ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）分别检测４２例肝肿瘤组织中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。结果：１例胆管细胞癌组织ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ均阳性，１例胆管囊腺瘤ＨＢＶＤＮＡ阳性。４０例肝细胞癌组织中，单纯ＨＢＶＤＮＡ阳性１９例，单纯ＨＣＶＲＮＡ阳性３例，二者均阳性１０例。ＨＢＶＤＮＡ阳性率７２．５％，ＨＣＶＲＮＡ阳性率３２．５％。ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ感染与肝癌组织学分型无关；且肝细胞癌中ＨＣＶ感染与ＨＢＶ未见相关。结果提示，我国ＨＢＶ感染仍是引起肝细胞癌的主要原因。但由于肝细胞癌患者中ＨＣＶ的感染率也较高，且有上升趋势，因此ＨＣＶ可能也是肝细胞癌发生的重要原因之一。