肾移植中霉酚酸血浓度的监测

背景：作为抗代谢免疫抑制剂,霉酚酸酯以其低毒副作用的优点已经在实体器官移植中得到广泛应用。然而,临床上移植患者常联合用药,霉酚酸酯与其他免疫抑制剂（如环孢素A和他克莫司）联合使用时的药代动力学特点尚不清楚。目的：动态监测霉酚酸浓度,比较霉酚酸酯与不同免疫抑制剂联用时药代动力学特点,以探讨其最佳治疗浓度窗,指导临床个体化用药,从而提高疗效,降低其毒副反应。方法：应用SyvaEmit-2000药物浓度检测分析仪检测肾移植受者服药（霉酚酸酯）前（C0）、服药后0.5h（C0.5）和服药后2h（C2）霉酚酸血浓度,并根据3个时间点的浓度值来计算0-12h的霉酚酸血浆浓度-时间曲线下面积值。结果与结论：入选340例肾移植受者,共检测霉酚酸3点血浆浓度-时间曲线下面积820例次,霉酚酸酯＋他克莫司联合用药组574例次;霉酚酸酯＋环孢素A联合用药组246例次。霉酚酸酯与环孢素A联合应用时,0-12h的霉酚酸血浆浓度-时间曲线下面积值显著低于霉酚酸酯与他克莫司联合应用时,差异有显著性意义（P〈0.05）。霉酚酸酯联用他克莫司组服药前、服药后0.5h霉酚酸浓度值高于霉酚酸酯联用环孢素A组（P〈0.05）,霉酚酸酯联用环孢素A组服药后2h霉酚酸浓度值高于霉酚酸酯联用他克莫司组（P〈0.05）。霉酚酸酯联用他克莫司组服药后0.5h出峰的病例数高于霉酚酸酯联用环孢素A组（P〈0.05）。结果可见霉酚酸酯与不同免疫抑制剂联用时应根据相应的药代动力学特点给药,如与他克莫司联用时,应该更早地减低他克莫司剂量。三点霉酚酸血浆浓度-时间曲线下面积监测相对简便易行,在临床应用更具有可操作性。     

霉酚酸酯预防肾移植术后急性排斥的临床观察及护理

目的探讨霉酚酸酯(MMF)在预防肾移植术后急性排斥中的作用及找出其治疗期间有效的护理措施.方法选择本院101例肾移植受者为研究对象,随机分为MMF治疗组50例,硫唑嘌呤(Aza)治疗组51例进行对比研究,进行了连续6个月的观察.结果 MMF组急性排斥发生率16%,较Aza组急性排斥发生率40%低,最常见副反应为胃肠道症状18%,肝功能损害MMF组发生率10%,Aza组为20%,MMF组细菌感染9例(16%).结论 MMF能更有效地预防肾移植术后急性排斥,但需加强胃肠道护理,监测肝功能,防范感染合并症.     

霉酚酸酯等新三联在肾移植术后的近期疗效

目的：观察霉酚酸酯（MMF）在预防肾移植术后急性排斥及肺部感染的情况。方法：89例肾移植后应用皮质激素（Perd），环孢素（CsA），MMF（或）硫唑嘌呤（Aza）三联免疫抑制剂治疗，其中分成MMF组52例，Aza组37例，MMF组中适当减少CsA用量。结果：临床观察3个月中，急性排斥（AR）发生率MMF组7．7％（4／52），Aza组16．2％（6／37），肺部感染率MMF组13．5％（7／52），Aza组21．6％（8／37），两者之间存在明显差异（P＜0．05）。结论：MMF组方案对减少AR发生率与并发肺部感染率有一定作用。     

硫唑嘌呤和霉酚酸酯对应用环孢素A肾移植患者血脂的影响

目的:肾移植术后环孢素A和皮质醇联合应用可使患者发生高脂血症的风险升高,观察在此基础上应用硫唑嘌呤和霉酚酸酯对肾移植患者血脂的影响。方法:选择2003-01/2006-01解放军第四军医大学西京医院泌尿外科收治的肾移植患者65例,患者均知情同意。①实验分组及方法:按服用免疫抑制剂不同将患者分为2组,硫唑嘌呤组35例,霉酚酸酯组30例。患者肾移植术后1年内均以环孢素A和皮质醇为基础免疫抑制治疗方案,免疫抑制方案始终为环孢素A 硫唑嘌呤 皮质醇或环孢素A 霉酚酸酯 皮质醇。②实验评估:检测两组患者术前、术后3个月、个月及12个月的血脂指标,包括总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密6度脂蛋白胆固醇和极低密度脂蛋白胆固醇,同时检测血清肌酐水平。结果:65例患者全部进入结果分析,无脱落。①术前患者高脂血症的发生率是35.2%,至术后第3个月为62.7%,术后第6个月为52.3%,术后第12个月为39.3%。②术后1年中两组患者的总胆固醇和三酰甘油水平均较术前显著升高(P<0.05),术后第3个月时霉酚酸酯组的总胆固醇水平显著高于硫唑嘌呤组(P<0.05),但在第6个月以后,两组间总胆固醇与三酰甘油水平差异无显著性意义(P>0.05)。在1年的监测中,两组患者的高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白水平皆未发生显著变化(P>0.05)。结论:在以环孢素和皮质激素为基础免疫抑制方案的肾移植患者中,血清总胆固醇和三酰甘油有明显的升高倾向,而这种升高倾向可能与长期服用硫唑嘌呤或霉酚酸酯无关。     

环孢素A在肾移植后的应用及血药浓度监测分析

目的:通过分析不同免疫抑制剂在肾移植后的作用,评价环孢素A的应用价值及肾移植后环孢素A血药浓度与患者血常规因素的相关性.方法:以计算机检索方法在检索中国期刊全文数据库中(CNKI:2007/2009)检索关于环孢素A在肾移植后应用的临床研究相关文献并回顾分析辽宁省电力医院检验科收集的近年肾移植后应用环孢索A的患者资料.检索词为"肾移植、环孢素A、血药浓度监测",检索后对每项相关资料进行提取、分析.结果:收集9项与本院77例患者治疗过程相近的文献共纳入患者717例,6项使用不同免疫抑制剂的文献作为比较分析,昧唑立宾、西罗莫司、吗替麦考酚酯、赛尼哌、巴利昔单抗、布雷迪宁等免疫抑制刺在器官移植中起着极其重要的作用,但仍存在很多问题有待进一步探讨.通过对免疫抑制作用机制的深入分析和临床使用的发现,环孢素A的应用更适合普通临床患者的消费,而且综合来讲不良反应少与其他免疫抑制剂合用可更好的获得协同作用,减少毒副作用.结论:结合患者的临床表现作用全面分析,及时调整治疗方案,实现个体化用药,可使环孢素A在肾移植后的应用得到最佳治疗效果.同时,寻求高效低毒的药物最终实现特异性耐受是免疫抑制剂研究的最终目标.     

重组人血小板生成素在小鼠体内的代谢分布和排泄

用125Ⅰ标记结合分子排阻高效液相色谱(SHPLC)研究小鼠体内重组人血小板生成素(rhTPO)代谢、分布和排泄.标记-rhTPO体外可刺激TPO依赖细胞系TD3增殖;体内刺激外周血血小板增加活性与未标记标准rhTPO相似,而SHPLC放化纯度(96.9±1.5)%(n=3)符合药动学研究要求.小鼠皮下注射1微克/鼠后血清和尿SHPLC分析除原形外,出现了分子量较小的125Ⅰ-代谢物Ⅰ和Ⅱ.血清以原形和125Ⅰ-代谢物Ⅰ为主,尿中有少量原形,主要是125Ⅰ-代谢物Ⅰ和Ⅱ.原形消除半衰期为10.8小时,组织TCA可沉淀放射性分布特点是靶器官骨髓较高,泌尿系统最高,脑内最低.主要经尿排泄,少量经粪排泄.72小时排出(98.3±5.6)%.     

两种方法检测3种药物血药浓度比较研究

目的比较高效液相色谱法（HPLC）和酶增强免疫法（EMIT）在检测患者体内抗癫痫药物苯巴比妥（PB）、苯妥英（PHT）及卡马西平（CBZ）血药浓度方面的相关性。方法将检测对象按测定项目、性别、年龄对同一患者的标本同时用HPLC和EMIT进行检测,以HPLC参考方法为准进行配对t检验和相关性分析。结果A（CBZ）组中A1组（所有检测对象）两种方法检测结果相差2.256,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）;A2组（女性）两种方法检测结果相差2.74,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）;A3组（男性）两种方法检测结果相差2.11,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）;A4组（年龄小于20岁）两种方法检测结果相差2.81,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）;A5组（年龄大于或等于20岁）两种方法检测结果相差2.09,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。B（PHT）组总标本两种方法检测结果相差12.05,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。C（PB）组总标本两种方法检测结果相差7.77,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）。结论EMIT与HPLC参考方法差异有统计学意义,二者具有较好的相关性。     

万古霉素血药浓度监测的临床应用

目的 探讨万古霉素血药浓度监测的临床应用,以指导临床合理用药.方法 收集临床上有病原学依据而应用万古霉素病人的血液标本,应用高效液相色谱法(HPLC)测定万古霉素血药浓度,实现个体化给药.结果 18例病人进行万古霉素血药浓度监测,设为治疗组,其中4例病人血药浓度在治疗窗范围内,未调整给药方案;14例病人经调整给药后,血药浓度亦控制在正常范围内.34例病人未进行万古霉素血药浓度测定,设为对照组.治疗组与对照组病人治愈率分别为100%和76.5%,两组疗效差异有统计学意义(P<0.05);肾毒性发生率分别为0和26.5%,两组肾毒性差异有统计学意义(P<0.05);两组均未出现耳毒性病人.结论 应用高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度,根据血药浓度制定个体化给药方案,能提高疗效,减少不良反应.     

肝移植受者早期霉酚酸药代动力学临床特点

目的:探讨联合应用他克莫司(FK506)治疗肝移植受者早期霉酚酸(MPA)药代动力学的临床特点。方法:71例肝移植受者术后联合应用FK506和霉酚酸酯(MMF)治疗,MMF单剂口服剂量为1.0g,每日2次。患者术后1至2周内,分别在服药前及服药后0.5、1、1.5、2、4、6、8、10和12h取外周血,采用高效液相色谱法(HPLC)测定其血浆MPA浓度,分别标为MPA-C0～12h,并计算其曲线下面积(AUC)。同一天测定FK506谷浓度(FK506-C0h)及肝、肾功能和血细胞计数。结果:合并108套数据,MPA-AUC0～12h平均为(45.77±18.69)μg·h/ml(范围:10.66～117.01μg·h/ml)。MPA-C0～12h与MPA-AUC0～12h均相关(P0.05)。血清白蛋白(ALB)异常者的MPA-AUC0～12h均显著低于ALB正常者(P<0.05)。结论:原位肝移植后患者个体间早期MPA-AUC0～12h差异很大;单个时间点MPA浓度不能有效反映其全程的血药浓度。FK506-C0h不影响MPA-AUC0～12h,而血清ALB浓度则对其有显著影响。     

肾移植术后不同时间麦考酚酸暴露量的变化——附16例报告

目的:观察肾移植术后不同时间麦考酚酸暴露量的变化,为肾移植术后麦考酚吗乙酯剂量的调整提供理论依据.方法:16例首次肾移植患者,均于肾移植术后24小时内给予麦考酚吗乙酯(mycophenolate mofetil,MMF)1.5 g/d治疗,长期应用.于术后第7日、第28日、第90日测定其服药前、服药后半小时及服药后2小时的麦考酚酸的血药浓度,采用Shaw简易公式计算对应的麦考酚酸血药浓度-时间曲线下面积(the area under the drug concentration in the plasma versurs time curve,AUC)并比较其差异.结果:术后第7日、第28日、第90日的麦考酚酸AUC分别为(32±9)(mg/L)·h、(41±10)(mg/L)·h和(47±13)(mg/L)·h,比较差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论:在术后3个月内连续服用同等剂量(1.5 g/d)MMF的情况下,麦考酚酸AUC逐渐升高,在术后第90日达到(47±13)(mg/L)·h,已超过能有效预防急性排斥反应的AUC.提示应在用药的90日内监测麦考酚酸AUC,并及时减少用量,以免发生严重的不良反应.     

中国肾移植患者常用霉酚酸酯剂量下霉酚酸血浆浓度监测

目的:观察中国人在服用0.75g·次~(-1),2次·d~(-1)的固定剂量的霉酚酸酯后,肾移植术后1周内霉酚酸(MPA)的药物动力学特点。方法:对15例第1次尸体肾移植患者移植术后1周内的MPA药物动力学特点进行了研究。使用高效液相(HPLC)测定MPA血浆浓度。结果:术后第1天口服单剂0.75g霉酚酸酯后MPA AUC(0～24h)均值为25.907μg×h·ml~(-1),变异系数达62.02%。术后第5天MPA AUC均值为30.283μg×h·ml~(-1),变异系数达37.48%,MPA的清晨服药前浓度平均值为1.2088μg·ml~(-1),变异系数为67.8%。MPA C_0与MPA AUC_(0～24h)的相关性有统计学意义,但相关性并不令人满意。建立了一个由C_(0.5h)、C_(2h)、C_(6h)、C_(8h)组成的简易MPA AUC方程。y=0.923×C_(0.5h) 1.652×C_(2h) 3.062×C_(6h) 5.035×C_(8h) 1.890。结论:在服用同一剂量霉酚酸酯的情况下,MPA AUC、MPA C_0在不同的个体之间存在较大的变异,因此有必要对MPA AUC进行监测。单独测定MPA C_0可能不完全反映患者体内MPA的作用量,必要时仍需要进行MPA AUC监测。     

Therapeutic drug measurement of mycophenolic acid derivatives in transplant patients

Introduction:

Mycophenolic acid, the active metabolite of the prodrug mycophenolate mofetil, is widely used as an immunosuppressive agent in transplant patients for the prophylaxis of acute rejection. Recent prospective trials suggested the need for therapeutic drug monitoring, which raises the necessity to acquire accurate methods to measure MPA and its metabolites.

Objective:

Present an overview of the reasons to monitor MPA and its metabolites as well as a review of the currently available methods for their determination.

Methods:

Articles published from January 1992 to December 2006 were reviewed.

Results:

Most of the cited references use either chromatographic or immunoassay techniques. Basic information about biological samples used for the analysis, sample preparation, stationary phase, mobile phase, detection mode and validation data are discussed. Current information suggests the feasibility to set up method(s) to monitor MPA and its metabolites in most centers.     

盐酸伐昔洛韦在人体内的药动学和相对生物利用度

目的研究伐昔洛韦在正常人体内药动学和相对生物利用度。方法20名健康志愿者单剂量交叉口服伐昔洛韦300mg和参比片，用高效液相色谱（HPLC）法检测受试者血药浓度，并计算两者的药动学参数。结果受试药与参比药的血药浓度水平一致。其主要药动学参数t1/2分别为（3．81±0．66）h和（4．15±0．74）h；Tmax分别为（1．48±0．58）h和（1.38±0．56）h，Cmax分别为（1．86±0．50）mg／L和（2．07±0．62）mg／L，AUC分别为（7．51±1．71）mg·h／L和（7．03±0．98）mg·h／L，两制剂的药动学参数相近。用AUC估算的伐昔洛韦试验药相对生物利用度为98．0％±11．8％。结论伐昔洛韦片和参比片的AUC、Cmax经方差分析和双向单侧t检验表明两制剂生物等效；Tmax经非参数法检验表明两种制剂差异无统计学意义（P〉0.05）。     

Clinical evaluation of a dried blood spot method for determination of mycophenolic acid in renal transplant patients

Objectives

The aim of this study is to evaluate the clinical application of dried blood spots (DBS) sampling in renal transplant patients under mycophenolic acid (MPA) immunosuppression, comparing measurements performed in paired plasma and DBS samples.

Design and methods

77 paired DBS and plasma samples were obtained from 19 renal transplant patients. MPA was measured in both matrices by HPLC-DAD. Estimated plasma concentrations (EPC) were calculated from DBS concentrations (DC) using the formula EPC = DC/[1 − (Hct/100)], using either individual or mean hematocrit (Hct). Agreement between methods was evaluated using Passing–Bablok regression and Bland–Altman difference plots.

Results

MPA concentrations in DBS were in mean 60.7% of those measured in plasma. EPC calculated from DBS and patient's individual Hct presented a high correlation with blood plasma (r = 0.9862), and comparable absolute values (slope 1.0563 and intercept − 0.0739), being in mean 102.2% of the measured plasma concentrations. EPC can also be calculated with the mean Hct of the group of patients, with similar results.

Conclusions

DBS sampling can be used for TDM of MPA in a clinical setting, employing conventional HPLC equipment, presenting similar results to plasma samples after a proper mathematical treatment. Moreover, due to its intrinsic stability and handling safety, DBS sampling can be considered a useful alternative especially in developing countries where sample logistics could be a major difficulty.     

声诺维超声造影在移植肾中的应用分析

肾脏移植是治疗肾功能衰竭的有效方法,而移植肾并发症是影响手术成功率和患者生存率的关键,许多并发症的病理改变可引起移植肾血流灌注的变化。声诺维（SonoVue）超声造影为实时监测移植肾实质的微循环血流灌注提供了可能,并可以进行定性和定量评价,同时具有无肾毒性、无禁忌症等优点。因此,本文就超声造影的研究进展进行总结与分析。     

In vitro effects of mycophenolic acid on cell cycle and activation of human lymphocytes

The immunosuppressant mycophenolic acid (MPA) selectively inhibits proliferation of T- and B-lymphocytes by blocking inosine 5′-monophosphate-dehydrogenase (IMPDH), the key enzyme for de-novo-synthesis of guanine nucleotides. In an in vitro study the effects of MPA on human peripheral blood lymphocyte activation markers and on cell cycle characteristics were investigated. Mononuclear cells from healthy volunteers were incubated with phytohaemagglutinin (PHA) and increasing doses of MPA. After 72 h incubation an aliquot of the cells was stained with propidium iodide and measured by FACS analyses to assess the DNA shape. In addition, the expression of the activation markers HLA-DR and CD25 on T- and B-lymphocytes was determined by flow cytometry analysis.

PHA stimulation led to a significant increase of the S-phase of cell cycle. PHA stimulation clearly increased mean fluorescence intensity (MFI) of HLA-DR expression on B-lymphocytes. PHA stimulation also elevated the number of CD25 positive B-lymphocytes. Expression of HLA-DR on T-lymphocytes was not influenced by PHA, whereas CD25 expression and MFI significantly increased. All the observed PHA induced effects were reduced by co-incubation with increasing doses of MPA. The data presented show that in vitro the immunosuppressive effect of MPA can be demonstrated using FACS technology on a cellular level. MPA leads to an inhibition of cell cycle proliferation in peripheral blood lymphocytes.