急性脊髓损伤时核因子κB与胶质原纤维酸性蛋白相关性研究

目的　明确急性创伤性脊髓损伤 (acutespinalcordinjury,ASCI)后胶质原酸性蛋白 (glialfibril laryacidicprotein ,GFAP)变化分布 ,以及与核因子κB(NF κB)变化的关系。方法　将 2 8只SD大鼠随机分为对照组与损伤组 ,制作脊髓损伤模型 ,使用免疫组化分别测试GFAP与NF κB在急性脊髓损伤后的变化。结果　ASCI后 6h ,白质内GFAP表达开始增强 ,ASCI后 5d ,灰白质内仍有大量的GFAP阳性表现 ;AS CI后 1h ,NF κB的免疫反应在病灶内和边缘部位可以探测到 ;ASCI后 5d ,NF κB的反应明显减少。结论　NF κB部分参与了脊髓损伤后GFAP表达 ,抑制NF κB的表达 ,将一定程度上抑制GFAP表达。     

NF-κB在急性脊髓损伤中的研究现状及前景

核转录因子-κB是一种重要的转录因子,在急性脊髓损伤(Acute spinal cord injury,ASCI)后早期即可高表达,在ASCI后所出现的炎性反应、免疫应答、局部缺血再灌注、游离钙释放、过氧化基团异常变化及细胞凋亡等起着重要作用.同时,NF-κB又具有神经保护作用.因此,如何有效抑制NF-κB的损伤作用,充分发挥其保护作用,在治疗ASCI中具有重要意义.     

大鼠局灶脑缺血预处理对核因子-кB活化及神经元凋亡的影响

目的:观察局灶脑缺血预处理对核因子-кB(nuclear factor-кB,NF-кB)表达及神经元凋亡的影响.方法:将36只SD大鼠随机分为3组,对照组给予两次假手术,其余2组分别在2 h大脑中动脉阻塞(MCAO)及22 h再灌注前3 d给予10 min的预缺血或假手术,比较各组神经元凋亡及NF-кB的表达变化.结果:与缺血组相比,预缺血组凋亡神经元数减少(P＜0.01),同时伴NF-кB表达降低 (P＜0.01).结论:10 min MCAO缺血可减少再次缺血后的神经元凋亡,抑制NF-кB激活,NF-кB活化受抑可能是局灶性脑缺血预处理抗凋亡的分子机理之一.     

促红细胞生成素对大鼠急性脊髓损伤后核因子κB及炎症因子表达的影响

目的观察促红细胞生成素(EPO)对大鼠急性脊髓损伤后脊髓组织核因子κB(NF-κB)表达及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6水平的影响,探讨其减轻急性脊髓损伤后继发性脊髓损伤的机制。方法 18只SD大鼠随机均分为对照组、损伤组和治疗组,用动脉瘤夹从两侧夹闭脊髓30 s造成脊髓损伤模型。治疗组分别予术后1 h和1、2、3 d腹腔注射EPO 5000U/kg。术后3 d处死大鼠取材,用EMSA法检测脊髓组织中NF-κB活性,ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6表达。结果治疗组脊髓组织中NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6的水平均比损伤组显著降低(P<0.05)。结论 EPO能下调急性脊髓损伤后脊髓组织中炎症因子的表达,从而抑制炎症反应,对继发性脊髓损伤有一定的保护作用。     

七氟醚对大鼠急性肺损伤NF-кB活性的影响及肺保护作用

目的：应用大鼠酸吸入急性肺损伤模型,在酸吸入损伤后早期吸入七氟醚,观察对大鼠急性肺损伤NF-кB活性的影响及肺保护作用。方法：随机将SD大鼠分为5组（n=16）,生理盐水组：气管内注入生理盐水1mL/kg;盐酸吸入组：气管内注入pH=1.25盐酸溶液1mL/kg;七氟醚处理组：气管内注入盐酸溶液,并分为3个亚组（七氟醚0．5h组,七氟醚1h组,七氟醚2h组）,分别在给予盐酸溶液1h后,吸入2．4％七氟醚0．5h、1h、2h。于注入生理盐水或稀盐酸5h后处死各组大鼠,检测肺组织NF-кB活性及肺泡灌洗液中TNF-a、IL-6和IL-10的浓度。结果：与生理盐水组比较,盐酸吸入组肺组织NF-кB/p65阳性细胞增多（P<0.01）,七氟醚处理1h与2h后阳性细胞较盐酸吸入组减少（P<0．05）;盐酸吸入组肺泡灌洗液中TNF-a、IL-6和IL-10的浓度较对照组增高（P<0.01）,七氟醚处理1h与2h后,与盐酸吸入组比较,TNF-a、IL-6的浓度降低（P<0．05）,IL-10的浓度无明显改变。结论：七氟醚对酸吸入急性肺损伤可起部分保护作用,其机制与抑制NF-кB在大鼠肺组织中激活有关。     

脊髓背角星形胶质细胞Cx43组成的半通道在大鼠急性切口痛中的作用

目的 研究脊髓背角星形胶质细胞Cx43半通道在大鼠急性切口痛中的作用。方法 成年雄性SD大鼠60只,随机分为对照组(C组)、切口痛组(I组)和Gap19组。Western blot分别检测大鼠急性切口痛术后脊髓背角的Cx43及星形胶质细胞GFAP的表达变化;术前30 min,鞘内应用Gap19测定术后大鼠50%机械缩足阈值(PWT)的变化,免疫荧光检测大鼠脊髓背角的Cx43及GFAP表达的变化,ELISA检测炎症因子的变化。结果 与C组相比,I组大鼠脊髓背角Cx43和GFAP表达在术后6 h明显增加,术后3 d和7 d无改变。I组和Gap19组大鼠在切口建立后2 h、6 h、24 h、3 d的PWT明显降低(P<0.01),术后7 d无变化。与I组比,Gap19组PWT在术后2、6、24 h明显增加(P<0.01),3 d和7 d无变化。免疫荧光结果显示,I组术后6 h脊髓GFAP和Cx43表达相较C组增加(P<0.01);与I相比,Gap19组GFAP和Cx43表达明显下降(P<0.05),但术后7 d各组间无统计学差异。ELISA显示,与C组相比,I组脊髓背...     

缺血后处理对肾移植急性排斥反应中细胞毒作用的影响

目的探讨缺血后处理(IPO)对大鼠移植肾急性排斥反应(AR)中细胞毒杀伤作用的影响及机制。方法实验分为对照组(同基因移植:供、受鼠均为Wistar大鼠)、AR组和IPO组(异基因移植:供鼠为SD大鼠,受鼠为Wistar大鼠)。其中IPO组受鼠于移植完成后实施IPO,即开放肾动脉30 s,阻断30 s,共循环3次,然后完全开放。术后1、3、5、7d取各组受鼠血清和移植肾组织,检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平;观察肾脏组织学改变;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测移植肾核因子-кB(NF-кB)P65、穿孔素、颗粒酶B及FasL mRNA和蛋白的表达。结果 IPO组大鼠肾功能及肾组织病理损伤均较AR组减轻。术后各时间点,AR、IPO组穿孔素、颗粒酶B及FasLmRNA和蛋白表达均明显高于对照组(P<0.01),IPO组均较AR组降低(P<0.05,P<0.01)。AR、IPO组肾细胞核内NF-кBP65蛋白水平也较对照组明显升高(P<0.01),IPO组较AR组明显降低(P<0.01),但AR组NF-кB P65 mRNA的表达与IPO组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。肾细胞核内NF-кB P65蛋白表达分别与穿孔素、颗粒酶B和FasL蛋白表达呈正相关(r=0.541、0.267、0.433,P<0.05)。结论 IPO可减轻移植肾AR中的细胞毒杀伤作用,其机制可能与抑制NF-кB活性,从而抑制穿孔素-颗粒酶B和Fas/FasL途径有关,而非下调NF-кB的表达。     

磷脂酰肌醇3-激酶调控白介素-18诱导核因子-кB活化(英文)

目的:研究磷脂酰肌醇(PI)3-激酶在白介素18(IL-18)诱导核因子-кB(NF-кB)活化中的作用。方法:Lipofectin介导反义PI 3-激酶寡核苷酸转染HepG2细胞。用逆转录PCR法检测PI 3-激酶mRNA表达水平,以Sandwich ELISA法检测NF-кB的活化。结果:(1)反义PI 3-激酶寡核苷酸抑制PI 3-激酶mRNA表达。(2)IL-18诱导NF-кB活化。(3)反义PI3-激酶寡核苷酸呈时间(5-24h)和浓度(1-8mg/L)依赖性地抑制IL-18诱导的NF-кB活化。结论:PI 3-激酶调控白介素-18诱导的NF-кB活化。     

鞘内注射甘珀酸对腰5脊神经切断大鼠痛觉高敏的影响

目的观察鞘内注射甘珀酸(CBX)对腰5脊神经切断(SNT)大鼠机械痛阈及脊髓背角星形胶质细胞标志物(GFAP)和TNF-α、IL-1β表达的影响。方法 36只成年♂SD大鼠,随机分成3组(n=12),假手术组(Sham组)、SNT+NS组(NS组)、SNT+CBX(CBX组)。Sham组仅暴露腰5脊神经,不切断,NS组和CBX组切断腰5脊神经。术后10d,Sham组和NS组鞘内注射生理盐水10μl,CBX组鞘内注射甘珀酸5μg(10μl),分别于术前1 d,术后1、3、5、7、10 d及给药后1、2、4、6 h随机取6只大鼠测损伤侧机械痛阈(MWT),并采用免疫组化技术观察给药后2 h后损伤侧脊髓背角中GFAP表达的变化,ELISA测定损伤侧脊髓背角TNF-α和IL-1β的水平。结果 3组大鼠术前1 d,MWT差异均无显著性(P>0.05);Sham组术后各时间点与术前相比损伤侧MWT差异无显著性(P>0.05);与Sham组相比,NS组和CBX组术后1、3、5、7、10 d痛阈明显下降(P<0.05);NS组术后10 d给药后1、2、4、6 h,MWT与给药前无差异(P>0.05),但给药后2 h损伤侧脊髓背角GFAP的表达和TNF-α、IL-1β的水平较Sham组明显增高(P<0.05);CBX组给药后1、2、4 h损伤侧MWT较给药前明显提高(P<0.05),6 h无差异(P>0.05),给药后2 h损伤侧脊髓背角GFAP的表达和TNF-α、IL-1β的水平较NS组明显降低(P<0.05)。结论单次鞘内注射5μg CBX可改善脊神经切断大鼠损伤侧机械痛敏行为,该效应可能与其抑制损伤侧脊髓背角星形胶质细胞的活化,减少TNF-α、IL-1β的释放有关。     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠急性脊髓损伤后继发性脊髓损伤的保护作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠脊髓急性损伤后继发性脊髓损伤的保护机制.方法 成年SD大鼠18只随机均分成单纯椎板切除(对照组)、急性脊髓损伤(损伤组)和急性脊髓损伤后NAC治疗(治疗组)三组.用30 g力量动脉瘤夹从两侧夹闭脊髓30 s建立脊髓损伤模型.治疗组术后15 min、1、2和3d分别予NAC 150 mg/kg腹腔注射;对照组和损伤组腹腔注射等量生理盐水.所有动物于术后3d处死取材,用凝胶电泳迁移率分析和免疫组化检测脊髓组织中核因子κB(NF-κB),ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6表达.结果 损伤组脊髓组织中NF-κB、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均比对照组升高(P＜0.05),治疗组脊髓组织中各因子水平均比损伤组显著降低(P＜0.05).结论 NAC可以通过抑制大鼠急性脊髓损伤后NF-κB的活性,进一步下调TNF-α、IL-1β和IL-6的表达,从而减轻继发性炎症反应所导致的脊髓损伤.     

大鼠急性脊髓损伤时NSE的表达及临床意义

目的:探讨不同时间的神经元特异性烯醇化酶(Neuron-specificenolase,NSE)在急性脊髓损伤大鼠中的水平变化及与脊髓损伤严重程度的相关性.方法:入选SD大鼠48只,将雌、雄性大鼠随机分成2组:对照组为1组(大鼠8只)和损伤组(大鼠40只),其中急性脊髓损伤组按损伤0h、6h、1d、3d、7d的时间点分成5组(8只/组),利用损伤大鼠的脊髓组织,分别制作损伤后0h、6h、1d、3d、7d的脊髓切片,采用激光共聚焦扫描显微境技术,观察不同时间窗的NSE水平在大鼠脊髓损伤组织的微观结构.结果:大鼠急性脊髓损伤组NSE水平明显高于对照组NSE的水平(P＜0.01)；NSE在急性脊髓损伤后6h开始升高、3d时表达最高、7d时逐渐递减.结论:NSE水平与大鼠急性脊髓损伤的时间密切相关,NSE的水平可以作为评估急性脊髓损伤严重程度的生化指标.     

同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞IкB和NF-кB表达的影响

目的:观察同型半胱氨酸(Hey)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)核因子(NF)-кB的表达、激活的影响及其诱导动脉粥样硬化形成的分子机制.方法:将体外培养的HUVECs分为对照组、2.5(H1),5(H2),10(H3)及15 mmol/L(H4)5组,培养24 h.通过四甲基噻唑氮蓝(MTT)比色法测定细胞活力,采用RT-PCR法检测NF-кB p65 mRNA的表达,Westem blot检测NF-KB抑制蛋白-α(IKB-α)的蛋白降解,免疫组化法检测NF-кB的核转移趋势.结果:H2,H3,H4组HUVECs细胞活力较对照组明显下降(P<0.01);Hey可使NF-кB p65 mRNA的表达明显增强(P<0.05或P<0.01);Hey可促进IкB-α蛋白降解,且呈现明显的剂量依赖性;Hey处理HUVECs后,大量的NF-кB p65从细胞质进入细胞核.结论:Hey可通过增强NF-кB p65 mRNA的表达,加速IкB-α蛋白的降解,促进NF-кB p65的释放、活化,从而转移进细胞核,调节其下游的趋化因子、细胞黏附分子的表达,促进动脉粥样硬化的形成和发展.     

芍药总苷调控巨噬细胞核因子-кB p65蛋白核转移作用的研究

目的:研究芍药总苷调控巨噬细胞核因子-кB(NF-кB)p65蛋白核的转移作用,探讨芍药总苷对NF-кB活化的影响.方法:原代培养大鼠腹腔巨噬细胞,经脂多糖和芍药总苷作用后,用Western blot方法观察NF-кB亚基p65蛋白在胞浆和胞核的表达.结果:经脂多糖刺激后,p65蛋白在胞浆中表达显著减少,在胞核中表达显著增多;芍药总苷显著增加了脂多糖刺激后p65蛋白在胞浆中的表达,并减少了其在胞核内的表达.结论:芍药总苷可抑制NF-кB p65蛋白从胞浆向胞核的转移,提示其具有抑制NF-кB活化的作用.     

大鼠急性脊髓损伤后血小板活化因子的变化及甲基强的松龙对其的影响

目的利用大鼠急性脊髓损伤（ASCI）模型探讨大剂量甲基强的松龙（MP）对脊髓神经组织中血小板活化因子（PAF）的影响。方法54只Wister大鼠分为3组：未损伤组（A组）6只,损伤后注射0．9％氯化钠溶液组（B组）24只,损伤后注射MP组（C组）24只。用Allen氏重物坠击法（WD）,以25g×10cm致伤力造成B脊髓损伤模型,C组分别于术后即刻经尾静脉按首次剂量30mg／kg注射MP,以后按5．4mg·kg^-1·h^-1,共23h,分4次静脉推注;B组在同时间点注入等量0．9％氯化钠溶液。分别于术后2、5、12、28d取血及3组损伤部位脊髓组织做PAF测定。结果脊髓受损后,血及损伤组织中PAF均明显增高（P〈0．05）,注射MP后,血清及受损脊髓组织中PAF含量均明显下降（P〈0．05）。结论大剂量MP可能通过抑制损伤脊髓组织中PAF的表达,来发挥其对受损脊髓神经细胞的保护作用。     

NF-KB在家兔腹主动脉瘤模型中的表达及意义

目的 观察家兔腹主动脉瘤(AAA)中核转录因子(NF-кB)及其靶基因的表达.方法 16只家兔按灌注液(盐水灌注组,弹力蛋白酶灌注组)随机分为两组,观察灌注后腹主动脉的形态学变化;Westem Blot检测NF-кB细胞核内的表达;免疫组化检测MMP-9的蛋白表达;ELISA法检测血清IL-6水平.结果 术后7d腹主动...     

维生素E对继发性脊髓损伤保护作用的实验研究

目的探讨维生素E对兔急性脊髓损伤(ASCI)保护作用的机制。方法新西兰大白兔51只,随机分为3组,A组:正常组,B组:ASCI组,C组:ASCI 维生素E处理组。3%戊巴比妥钠(1ml/kg)腹腔注射麻醉,常规消毒铺巾,显露L1-3棘突及椎板,显露硬膜。A组在显露硬膜后予以止血后缝合伤口。B、C组按改良的Allen’s重物打击法制备ASCI模型,在急性脊髓损伤后30min,给B组腹腔注射生理盐水1ml/kg,C组腹腔注射维生素E10mg/kg。48h后每组随机抽取10只动物处死,以打击处为中心切取伤段脊髓0.8cm长,将标本从中间分两半,一半常规HE染色,光镜下观察其组织学形态改变,另一半作水量测定。每组2只兔经灌流固定后,取损伤段脊髓常规制作透射电镜标本。于两星期后观察3组剩余5只动物行为学指标。数据进行统计学分析。结果各损伤段脊髓含水量均高于正常对照组(P<0.01),B组伤段脊髓含水量高于C组(P<0.01)。HE染色及透射电镜观察,C组结构破坏明显轻于B组。伤后两星期斜板维持率及Gale评分C组明显高于B组(P<0.01)。结论维生素E不仅可以减轻脊髓水肿,而且还可以改善脊髓组织破坏,维生素E治疗组脊髓神经功能明显优于非治疗组,为临床治疗ASCI后继发损伤提供了一种新途径。     

a-突触核蛋白在急性脊髓损伤大鼠早期的表达

目的:于不同时间点对a-突触核蛋白在急性脊髓损伤大鼠早期表达情况进行检测,探讨其对脊髓组织损伤和再生的影响.方法:Wistar大鼠48只,按随机分组法分为6组,取5组制作急性脊髓损伤模型,另一组为对照组.于伤后0h、6h、1d、3d、7d,采用蛋白印迹法检测损伤脊髓组织中a-突触核蛋白表达量的变化.结果:蛋白印迹法法显示a-突触核蛋白在脊髓损伤后6h表达量达到峰值,之后有所下降,1d表达量降到低谷,后再次升高,于损伤后3d到达第二次表达高峰,7d后逐渐恢复.结论:a-突触核蛋白在脊髓损伤后6h表达最明显,之后随着时间的延长表达逐渐降低,1d后再次升高,3d到达第二次表达高峰,表明脊髓损伤早期a-突触核蛋白表达随时间的变化,与脊髓损伤动物神经组织的损伤和修复有密切关系.     

硫酸甲基异硫脲对急性肺损伤小鼠肺组织核因子-κB活性的影响

目的探讨硫酸甲基异硫脲(SMT)对急性肺损伤小鼠肺组织核因子(NF)-κB活性的影响.方法利用腹腔内注射内毒素(LPS)诱导小鼠急性肺损伤模型,180只小鼠随机分为LPS组、LPS+SMT组(LPS注射前腹腔内注射SMT20 mg/kg),LPS注射后0 h、1 h、3 h、6 h、12 h迁移率改变电泳法(EMSA)检测肺组织NF-кB活性,同时测定肺组织中肿瘤坏死因子(TNF)α、白介素10(IL-10)浓度及其mRNA表达,并观察肺组织的病理改变.结果与LPS组比较,1～12 h SMT组肺组织核蛋白NF-κB活性明显增强(P＜0.05);肺组织匀浆细胞因子TNFα及其mRNA表达显著增高(P＜0.05).与LPS组比较,SMT组IL-10及其mRNA表达均明显下降.结论SMT通过活化NF-κB,启动炎症因子表达,但同时抑制抗炎介质的表达,加重肺损伤.     

黄芪甲苷对心脏保护作用的研究现状

黄芪甲苷通过抑制核因子-кB(NF-кB)通路、降低NF-кB的表达水平来抑制缺氧心肌细胞的凋亡。黄芪甲苷通过调节自噬基因、上调B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2),降低Bcl-2相关X蛋白(Bax)及半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3的表达以及上调低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达等途径对缺血再灌注心脏发挥保护作用。黄芪甲苷也可降低心肌转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2/3和Smad4蛋白表达,抑制心肌纤维化,保护心脏。黄芪甲苷对异丙肾上腺素致心脏损伤、对血管紧张素Ⅱ致心脏损伤、对高血糖性心脏损伤都具有一定的保护作用。     

小檗碱抑制核因子NF-кB p65的核转位改善高糖诱导的3T3-L1细胞胰岛素抵抗的分子机制

目的:观察小檗碱对高糖诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型核因子NF-кB p65表达及转位的影响,探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的分子生物学机制.方法:以25mmol·L-1葡萄糖加0.6nml·L-1胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗,以小檗碱进行干预,同时阿司匹林作为阳性对照,以2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖摄入法推算葡萄糖的转运率,用Western blot检测3T3-L1脂肪细胞总NF-кB p65蛋白及核NF-кB p65蛋白的表达,激光扫描共聚焦(CLSM)对NF-кB p65蛋白进行定位显示.结果:25mmol·L-1葡萄糖加0.6nmol·L-1胰岛素作用18h后使3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运率抑制60%, Western blot显示核NF-кB p65蛋白表达明显增加, CLSM显示NF-кB p65核转位增加;同时加入小檗碱或阿司匹林则可逆转上述效应.但高糖、小檗碱、阿司匹林对3T3-L1脂肪细胞总NF-кB p65蛋白的表达无明显影响.结论:小檗碱可以改善高糖诱导的胰岛素抵抗,其分子机制可能与小檗碱抑制NF-кB p65的核转位有关.