兔脓毒症早期心肌功能的变化

目的　研究脓毒症早期心肌功能变化的意义。方法　 2 0只兔随机分成两组 :对照组 ( n=10 )行盲肠探查术 ;脓毒症组 ( n=10 )行盲肠结扎加穿孔术 ( CL P)制备脓毒症模型。两组均经右侧颈内动脉插管至左心室 ,每隔 1h测量 1次左室收缩峰压 ( L VSP)、左室压力最大上升速率 ( dp/ dt max)、左室压力最大下降速率 ( dp/ dt m ax) ;并采血检测肌钙蛋白 I( Tn I) ,设术后 0、1、2、3和 4共 5个时间点。结果　脓毒症组动物CL P术后 1h即出现 L VSP、 dp/ dt max、 dp/ dt m ax较基础值均明显下降 ( P均 <0 .0 5 ) ,且随着时间的发展有进一步下降趋势 ;血清 Tn I水平均明显升高 ( P均 <0 .0 5 ) ,且随着时间的发展进一步升高。而对照组无明显变化。结论　兔脓毒症早期即有心肌损害 ,表现为心肌收缩和舒张功能均下降     

Bcl-2和p 53蛋白表达在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的作用研究

目的 探讨Bcl-2和p53基因在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的作用.方法 将成年雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、假手术组(n=6)、模型组(n=24).以盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症大鼠模型.术后3、9、12和24 h各取6只大鼠的心肌组织备检.以电镜和原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡变化;用免疫组化法检测Bcl-2和p53的蛋白表达.结果 模型组大鼠心肌细胞凋亡指数(AI)随时间延长明显升高,于12 h达峰值C(55.633±2.073)%),24 hC(33.683±2.070)%]较12 h明显下降,但各时间点均明显高于正常对照组[(1.500±0.141)%]和假手术组[(1.567±0.258)%],差异均有统计学意义(P均<0.05).模型组各时间点p53基因的蛋白表达阳性数[3 h最低为(13.817±0.964)%.12 h峰值为(80.567±5.055)%]均较正常对照组C(0.617±0.232)%]和假手术组C(0.600±0.297)%)明显升高(P均<0.05),其变化与TUNEL检测凋亡的结果一致;而Bcl-2基因的蛋白表达阳性数C3 h最高为(31.650±1.799)%,12 h最低为(0.650±0.308)%]均较正常对照组[(47.017±0.691)%]和假手术组[(46.817±0.567)%]明显降低(P均<0.05),其变化与TUNEL检测凋亡的结果趋势相反.结论 细胞凋亡可能是脓毒症心肌损害的机制之一,其调控基因p53和Bcl-2基因的改变或许可以作为脓毒症病情改变的标志,对其进行干预,以改善脓毒症的预后.     

依达拉奉对脓毒症大鼠心肌线粒体SOD XOD及心肌组织NF-κB的影响

目的 观察依达拉奉对脓毒症大鼠心肌线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)及心肌细胞NF-κB表达的影响.方法 SD大鼠30只分为假手术组、手术对照组、依达拉奉治疗组,手术对照组和治疗组均予盲肠结扎穿刺法制作大鼠脓毒症模型,3组术前15 min及术后3 h各皮下注射盐酸左氧氟沙星20 mg/kg,治疗组于术前15 min及术后3 h各皮下注射依达拉奉5 mg/kg,3组术后18 h取心肌线粒体测SOD、XOD,及用RT-PCR法测定大鼠心肌组织的NF-κB mRNA的表达,并对心肌线粒体进行电镜检查.结果 手术对照组心肌细胞线粒体SOD活力显著低于假手术组,心肌组织NF-κB mRNA的表达显著高于假手术组;治疗组心肌细胞线粒体SOD活力显著高于手术组,心肌组织NF-κB mRNA的表达显著低于手术组,各组间心肌细胞线粒体XOD活力比较差异无统计学意义.手术对照组电镜下可见心肌线粒体轻度水肿,治疗组心肌线粒体嵴多、致密(正常).结论 依达拉奉能使心肌线粒体SOD活力升高,并使心肌细胞NF-κB mRNA的表达下降,提高清除自由基和抗氧化能力,减轻炎症级联放大效应,具有保护心肌作用.     

脓毒症大鼠心肌细胞凋亡与心功能的关系

目的观察脓毒症状态下大鼠心肌细胞凋亡对心肌力学的影响。方法 60只体重230~280 g的Wistar大鼠随机分成对照组(n=30)、脓毒症组(n=30)。脓毒症组采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制作脓毒症模型,对照组采取开关腹法(不进行盲肠结扎穿孔)。两组动物均经右颈内动脉插管监测术后24 h的血流动力学指标,检测左室心肌细胞凋亡率,两组间采用独立样本t检验进行心功能及细胞凋亡率比较,并就心室收缩峰压与心肌细胞凋亡率进行相关性分析。结果脓毒症组的收缩压(SBP,95±5 mm Hg),舒张压(DBP,62±10 mm Hg),平均动脉压(MAP,73±7 mm Hg)、左心室收缩峰压(LVSP,83±5 mm Hg)、左室压力上升最大速率(+dp/dtmax,2 784±40 mm Hg)明显低于对照组(130±7mm Hg,70±11 mm Hg,89±8 mm Hg,137±8 mm Hg,4 928±137 mm Hg),左心室舒张末压(LVEDP,-1±2 mm Hg)及左心室压力下降最大速率(-dp/dtmax,-2 386±210 mm Hg)明显高于对照组(-11±2 mm Hg,-4 814±344 mm Hg),差异有统计学意义(P0.01)。脓毒症组大鼠的心肌细胞凋亡率(8.10%±0.58%)明显高于对照组(0.51%±0.02%),差异有统计学意义(P0.01)。脓毒症组大鼠心肌细胞凋亡率增加,左心室收缩峰压降低,呈负相关性(r=-0.68)。结论脓毒症时心肌力学明显下降,心肌细胞凋亡率增加,脓毒症24 h心功能与心肌细胞凋亡存在负相关。     

美托洛尔对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨美托洛尔对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及机制。方法:72只大鼠随机分为对照组(n=24)、脓毒症组(n=24)及治疗组[n=24,脓毒症模型基础上美托洛尔0.05mg冲击量后0.2mg/(kg·h)静脉泵入]。于术后3、6、12、24h测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α),心肌髓过氧化物酶(MPO)和半胱氨酸天冬氨酸酶-3(caspase-3)活性,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,光镜下观察心肌组织病理改变。结果:脓毒症组和治疗组大鼠各时点血浆TNF-α,心肌MPO、caspase-3活性、心肌细胞凋亡指数均较对照组显著升高(P<0.05),以术后12h最显著。应用美托洛尔后,上述指标与脓毒症组各时点相比均有不同程度降低,其中血浆TNF-α和心肌MPO活性在12、24h有统计学差异(P<0.05),心肌caspase-3活性和心肌细胞凋亡指数在6、12和24h有统计学差异(P<0.05),且心肌损害病理改变较脓毒症组显著减轻。结论:美托洛尔具有对抗脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的作用,可能与抑制细胞因子、减轻心肌炎症反应、降低caspase-3活性有关。     

脓毒症大鼠心肌细胞凋亡与p53和Bcl-2基因表达的关系

目的 探讨脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的变化及其与Bcl-2和p53基因mRNA表达的关系.方法 取体重190～220 g的成年雄性SD大鼠42只,随机分为三组,脓毒症组30只,正常对照组6只,假手术组6只;脓毒症组以盲肠结扎穿刺法(CLP)复制脓毒症大鼠模型,于术后3 h、9 h、12h、24 h各处死6只大鼠,假手术组麻醉满意后打开腹腔,正常对照组仅行麻醉术,均取1.0 mm3大小的心肌组织,另外余下的6只脓毒症鼠术后待其自然死亡不取心肌.采用电镜和TUNEL法检测大鼠心肌细胞的凋亡,用RT-PCR方法检测大鼠心肌细胞Bcl-2和p53基因mRNA的表达.结果 电镜下大鼠凋亡的心肌细胞胞膜皱缩,核固缩、边集、碎裂,胞膜突起、凋亡小体形成,TUNEL法检测各时间点的脓毒症大鼠心肌细胞的凋亡率均较正常对照组和假手术对照组明显升高(P＜0.05),术后12h达到峰值;p53 mRNA表达明显升高(P＜0.05),其表达量与心肌细胞凋亡指数呈正相关性(r=0.976,P＜0.05);Bcl-2 mRNA表达明显降低(P＜0.05),其表达量与心肌细胞凋亡指数呈负相关性(r=-0.833,P＜0.05).结论 脓毒症大鼠心肌细胞的凋亡明显增高,p53和Bcl-2 mRNA的表达异常是其可能机制之一.     

线粒体损伤在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨线粒体损伤在脓毒症大鼠心肌细胞凋亡中的作用及其可能机制.方法 72只SD大鼠随机(随机数字法)分为2组:(1)阴性对照组18只,腹腔注射无菌生理盐水;(2)脓毒症组,按大肠杆菌内毒素注射后6、12、24 h分为3个亚组,各18只.取心脏组织,光镜和电镜下观察组织病理学和超微结构的变化,TUNEL法原位检测心肌细胞凋亡并计算凋亡指数,免疫印迹法检测核转录因子-κB (NF-κB) p65的表达,黄嘌呤氧化酶法测定线粒体超氧化物歧化酶(SOD)活性,比色法检测线粒体还原型谷胱甘肽(GPx)活性,硫代巴比妥酸法测定线粒体脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,OxyBlot TMas蛋白氧化检测试剂盒观察线粒体蛋白氧化.结果 脓毒症大鼠心肌有炎症细胞浸润,细胞水肿及空泡形成,并且在24 h最明显;心肌细胞凋亡指数和核蛋白NF-κB p65活化均显著增加(P＜0.05).脓毒症大鼠心肌线粒体损伤明显,至24 h病变最严重,线粒体膜破碎,线粒体嵴消失,大量空泡形成.脓毒症大鼠心肌线粒体抗氧化酶SOD和GPx活性显著下降(均P＜0.05),线粒体脂质过氧化和蛋白氧化均显著增加(均P＜0.05),并呈时间依赖性.结论 线粒体损伤在脓毒症心肌细胞凋亡中发挥重要作用,其作用机制可能与线粒体抗氧化物酶活性降低,活性氧产生过多和聚集有关.     

姜黄素抑制NLRP3炎症小体减轻早期脓毒症大鼠心肌细胞损伤的机制研究

目的:探讨姜黄素对早期脓毒症大鼠心肌细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白（NLRP3）炎性小体的作用及其机制。方法:24只雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为3组：假手术组（Sham组, n = 8）、脓毒症组（Sepsis组, n = 8）、姜黄素干预组（Cur组, n = 8）。...     

不同目标血糖水平对脓毒症大鼠心肌线粒体损伤的影响

目的探讨胰岛素控制不同目标血糖水平对脓毒症大鼠心肌线粒体损伤的保护作用及机制。方法40只SD大鼠随机分为5组各8只：假手术组、脓毒症组及血糖控制A组（控制血糖为〉4．4～6．1mmol／L）、B组（控制血糖为〉6．1～8．3mmol／L）、C组（控制血糖为〉8．3～10．0mmol／L）。盲肠结扎穿孔术后12h处死,比色法检测心肌线粒体超氧化物歧化酶及丙二醛水平;电镜观察心肌线粒体形态学变化,并进行线粒体损伤评分分析。结果脓毒症组线粒体氧化应激水平及线粒体损伤评分均明显高于假手术组及各控制组（P均〈0．05）,A组较B,c组明显降低（P均〈0．05）,B组低于c组,但差异无统计学意义（P〉0．05）;脓毒症组线粒体超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量分别与线粒体损伤评分呈负相关（r=-0．918,P％0．01）及正相关（r=0．872,P〈0．05）;A,B,C组心肌细胞超微结构改变较脓毒症组明显减轻。结论血糖控制为〉4．4～6．1mmol／L对脓毒症大鼠心肌线粒体损伤保护作用最明显。     

生理性缺血训练联合生长激素释放肽-6静脉注射对心力衰竭大鼠心功能的影响及作用机制分析

目的 探讨生理性缺血训练联合生长激素释放肽-6对心力衰竭大鼠心功能的影响及作用机制。方法 SD大鼠60只中取50进行造模,最终造模成功50只,将其分为5组,模型组(n=9)、假手术组(n=10)、生理性缺血训练组(A组,n=9)、生长激素释放肽-6组(B组,n=11)、生理性缺血训练联合生长激素释放肽-6组(C组,n=11)。模型组与假手术组尾静脉注射100μg/kg 0.9%氯化钠溶液,A组大鼠给予生理性缺血训练。B组尾静脉注射100μg/kg生长激素释放肽-6。C组给予生理性缺血训练与生长激素释放肽-6,5组均干预4周。观察5组大鼠的心功能及心脏结构指标、血清胱抑素C、氨基末端-脑钠肽前体(NT-proBNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及醛固酮水平、心肌胶原蛋白含量、胆碱酯酶活性、Bcl-2及Bax蛋白表达、胆碱能神经密度,分析Bcl-2、Bax蛋白表达与胆碱酯酶活性及胆碱能神经密度的相关性。结果 模型组大鼠的左室射血分数、左室短轴缩短率明显较假手术组、A组、B组、C组低,左室收缩末径、左室舒张末内径较假手术组、A组、B组、C组高;C组的左室射血分数、左室短轴缩短率、左室收缩末径、...     

还原型谷胱甘肽对脓毒症大鼠心肌组织中Toll样受体4表达的影响

目的:探讨还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)对脓毒症大鼠急性心肌损伤的保护作用及其机制。方法:采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立SD大鼠脓毒症致急性心肌损伤模型。按照随机数字表将大鼠随机分为正常组(n=6)、假手术组(n=18)、脓毒症组(n=18)、GSH干预组(n=18)。GSH干预组于CLP术后经尾静脉注射GSH60 mg/kg,共0.1 mL;假手术组和脓毒症组则给予等量0.9%氯化钠溶液。除正常组外,每组大鼠再按术后6 h、12 h、24 h分为3个亚组(每组各6只),各亚组组大鼠在CLP术后相应时间点采集血清及心肌组织标本。所有大鼠均于血标本采集完毕后处死。HE染色观察心肌组织病理改变;采用自动生化分析仪检测血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase MB isoenzyme,CK-MB)的水平,采用实时荧光定量逆转录–聚合酶链反应法检测心肌组织Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)的mRNA表达。结果:与假手术组及正常组比较,脓毒症组大鼠术后6 h血清CK-MB水平和心肌组织TLR4 mRNA表达开始升高,12 h达到高峰,24 h仍明显升高,差异有统计学意义(P0.05),且术后24 h心肌组织HE染色显示肌纤维结构排列疏松紊乱,间质充血水肿,见大量炎性反应细胞浸润等损伤性改变;与脓毒症组比较,GSH干预组大鼠术后6 h血清CK-MB水平和心肌组织TLR4 mRNA表达已有所下降,术后12 h、24 h明显下降,差异均有统计学意义(P0.05),且术后24 h时心肌组织上述病理学损伤性改变也明显减轻。结论:心肌组织TLR4 mRNA的高表达在脓毒症致急性心肌损伤中起着重要的作用,而在脓毒症早期应用GSH干预可抑制心肌组织TLR4 mRNA的表达,对脓毒症致急性心肌损伤有保护作用。     

大鼠心肺复苏后脑损伤研究

目的:探讨大鼠心肺复苏(CPR)后脑功能及病理组织学变化.方法:42只雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组(A组,6只),假手术组(B组,6只),复苏组(C组,按ROSC后1 h、6 h、12 h、24 h、72 h各时点分5亚组,6只).分别行神经功能缺损评分(NDS),测定脑组织含水量及病理形态学观察.结果:C组大鼠NDS评分降低,随ROSC时间延长,NDS水平逐渐上升,但72 h仍低于正常;大鼠ROSC后脑组织含水量呈上升趋势,24 h达高峰,各时点均高于B组(P<0.01);脑组织存在缺血性病理改变,神经元细胞坏死、胶质细胞增生、血管周水肿、尼氏体减少或消失,以24 h最明显,72 h损伤仍较重;体视学分析显示C组神经元细胞比表面、数面密度下降,平均体积增加(P<0.01).结论:大鼠CPR后出现神经元细胞坏死、脑水肿、整体行为学评分下降,存在脑功能损害.     

脓毒症大鼠不同时期炎症因子水平与心功能关系的研究

目的探讨脓毒症大鼠炎症因子与心功能之间的关系及其可能机制。 方法采用盲肠结扎穿孔法制备腹腔感染脓毒症动物模型。将120只大鼠分为对照组60只、脓毒症组60只,再按照造模后不同时点分成6个亚组（造模后3、6、12、24、48、72 h）,每个亚组10只大鼠。监测各亚组动物心功能指标左室舒张末压（LVEDP）、左室发展压（LVDP）、左室最大收缩速率（＋dP／dt max）及左室最大舒张速率（＋dp／dt max）,血清炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）及IL-10,心肌酶谱心肌肌钙蛋白I（cTn I）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）。同时电镜下观察心肌超微结构的变化情况。结果与对照组相比较,脓毒症组±dp／dt max、LVDP水平从3 h开始出现下降,至12 h下降最明显（P均〈0．05）,而脓毒症组LVEDP水平于造模后12～48 h与对照组比较均显著升高（P均〈0．05）。脓毒症组TNF—α、IL-6水平于3 h后与对照组比较出现升高（P均〈0．05）,而IL-10在6～72 h后与对照组比较差异均具有统计学意义（P均〈0．05）。同时脓毒症组cTn I、CK、CK．MB水平在不同时间点较对照组均显著增加（P均〈0．05）。此外,电镜观察脓毒症组大鼠心肌超微结构损伤明显至24 h病变最为严重。 结论脓毒症不同时期促炎因子与抗炎因子失衡,可能是导致脓毒症心功能改变的重要因素之-。     

复苏早期应用氨茶碱对心肌超微结构的影响

目的研究心搏骤停大鼠心肺复苏早期应用氨茶碱对复苏成功率、血液流变学、心功能及大鼠心肌超微结构的影响。方法选60只SD大鼠,随机分为3组:手术对照组(A组),肾上腺素治疗组(B组)和肾上腺素+氨茶碱治疗组(C组),各20只。分别于窒息前、自主循环恢复时及自主循环恢复30min后进行血流动力学及心功能测定,电镜观察心肌超微结构的变化。结果比较自主循环恢复时间,C组明显少于B组(P<0.05)。C组中有75%自主循环恢复,30min存活率为70%,B组分别为60%(P>0.05)和55%(P>0.05)。C组自主循环恢复时及自主循环恢复30min后的LVSP、dp/dtmax、经LVSP校正后的dp/dt和-dp/dt均明显高于B组(P<0.05)。A组心肌细胞超微结构正常,C组复苏后心肌超微结构略有部分改变,线粒体轻度肿胀及少量空泡形成。B组复苏后心肌细胞部分损害,心肌细胞肌丝排列不整齐,线粒体明显肿胀及空泡化,损害程度比C组严重。结论在复苏早期应用腺苷受体拮抗剂氨茶碱提高了复苏成功率,并且改善了心脏功能,减少了对心肌细胞超微结构的破坏,因此,氨茶碱可作为肾上腺素的增补剂。     

生长激素对大鼠心肌缺血/再灌注后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因NF-κB蛋白表达的影响

目的　研究生长激素 (growthhormone ,GH)对大鼠心肌缺血 /再灌注 (IR)后心肌细胞凋亡及相关基因NF -κB蛋白表达的影响。方法　 2 4只大鼠随机分为 3组 ,假手术组 (n =8,仅手术 2 4h)、心肌缺血 /再灌注 (IR)组 (n =8)、GH组 (n =8) ,后两组均缺血 30min ,再灌注 2 4h ,其中GH组的每只大鼠实验术前皮下肌注GH 1U/kg体重 ,连续 7d ,其中第 7次皮下注射于手术前进行。前两组每只大鼠相应皮下肌注生理盐水 0 .5mL/d。检测心肌细胞凋亡及心肌细胞核NF -κB蛋白表达并进行心肌组织病理学检查。结果　大鼠心肌IR 2 4h后心肌细胞凋亡指数明显上升 (对照于假手术组 ,P <0 .0 5 ) ,心肌细胞核NF -κB蛋白表达呈阳性染色指数明显升高 (P <0 .0 5 ) ,心肌病理检查见心肌缺血区呈大小不一的坏死孔灶 ,缺血心肌间有炎症细胞浸润 ,心肌排列不整齐 (HE染色 ) ,而GH组心肌细胞凋亡率及心肌细胞核NF -κB蛋白表达呈阳性染色指数明显好于IR组 (P <0 .0 5 ) ,心肌细胞炎症细胞也明显减少 ,坏死灶也少于IR组。结论　GH可以减少心肌缺血 /再灌注后心肌细胞凋亡及细胞核NF -κB染色阳性指数 ,说明GH对IR后的心肌具有保护作用     

核因子-κB在烧伤血清复合缺氧致心肌细胞损伤中的作用

目的探讨NF-κB在烧伤血清复合缺氧致心肌细胞损伤中的作用。方法体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,按施加刺激因素及是否进行拮抗剂预处理分为四组:正常对照组(n=4);烧伤缺氧组(n=4),10%自制大鼠烧伤血清 缺氧(1%氧浓度)刺激6h;PDTC组(n=4),于培养基中加入NF-κB特异抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,50mmol/L);PDTC预处理组(n=4),PDTC预处理30min后,施加烧伤缺氧刺激;MTT法检测心肌细胞活力;提取核蛋白,蛋白免疫印迹化学发光法检测NF-κB核内含量;EMSA检测NF-κBDNA结合活性。结果烧伤缺氧组NF-κB核内水平较正常组显著升高,DNA结合活性提高,心肌细胞活力下降;PDTC预处理后,核内NF-κB水平较烧伤缺氧组明显降低,DNA结合活性显著降低,烧伤缺氧所致的心肌细胞损伤明显减轻,活力提高。结论NF-κB参与烧伤缺氧致心肌细胞损伤作用,阻断NF-κB可能对防治严重烧伤所致的心肌细胞损伤具有一定潜在价值。     

姜黄素抑制NLRP3炎症小体减轻早期脓毒症大鼠心肌细胞损伤的机制研究

目的探讨姜黄素对早期脓毒症大鼠心肌细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP3)炎性小体的作用及其机制。方法 24只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为3组:假手术组(Sham组, n = 8)、脓毒症组(Sepsis组, n = 8)、姜黄素干预组(Cur组, n = 8)。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型, 造模后腹腔注射姜黄素100 mg/kg, 24 h后重复给药, Sepsis组注射生理盐水。于6、24、48 h通过ELISA法检测大鼠血浆中心肌损伤特异性肌钙蛋白T(cTnT)水平;取48 h大鼠心肌组织经苏木精-伊红(HE)染色观察心肌病理损伤情况;通过TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;Western-blot法检测Cleaved caspase-1、NLRP3、IL-1β蛋白的表达情况;透射电镜下观察心肌细胞内部超微结构改变。结果 Cur组6、24、48 h大鼠血浆cTnT水平明显低于Sepsis组, 差异有统计学意义(P<0.05);HE染色可见Sepsis组心肌炎性细胞浸润, 细胞水肿、坏死, 而Cur组仅见部分细胞水肿和坏死现象;TUNEL染...     

脓毒症大鼠心肌细胞凋亡及糖皮质激素的作用

目的 观察脓毒症状态下大鼠心肌细胞凋亡的变化并探讨糖皮质激素对心肌细胞凋亡的影响及其机制,为临床治疗脓毒症心脏损害提供依据.方法 采用盲肠结扎穿孔术制作脓毒症模型.60只体质量为230 ～ 280 g的Wistar大鼠被随机(随机数字法)分为糖皮质激素实验组(n=30)和对照组(n=30).每组大鼠均行盲肠结扎穿孔术,每组术后4h开始给予舒普深200 mg/kg,2次/d.实验组在以上基础上给予地塞米松0.5 mg/kg.每组随机分为3个亚组(6、24、72 h组),于相应时间点取出各组大鼠心脏,分离左心室,制备单细胞悬液,进行流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率.使用SPSS 11.5统计软件系统,所有数据以均数±标准差表示((x-)±s),两组间采取独立样本t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析.同时左心室行免疫组化检测抗细胞凋亡蛋白B淋巴细胞瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)的表达.结果 激素组大鼠各时间点心肌细胞凋亡率分别较对照组大鼠心肌细胞凋亡率明显减少(F=9.11,t=5.681,P＜0.01)(6 ht =11.416,P＜0.01;24 h=6.217,P＜0.01;72 h t=3.76,P＜0.01);6h对照组大鼠的心肌细胞凋亡率显著低于24 h及72 h对照组大鼠(F=13.254,sig =0.000,P＜0.01;sig=0.004,P＜0.01);24 h对照组大鼠的心肌细胞凋亡率显著高于72 h对照组大鼠(sig=0.039,P＜0.05);激素各组大鼠心肌细胞凋亡率差异无统计学意义(F=2.488,6/24 h sig=0.132,P＞0.05; 24/72 h sig=0.549,P＞0.05;6/72 h sig=0.053,P＞0.05).结论 脓毒症时存在心肌细胞凋亡,以24 h最明显,脓毒症时应用糖皮质激素能够减少各个阶段心肌细胞凋亡.     

脓毒症大鼠心肌内皮素-1、肿瘤坏死因子-α表达与心肌损伤的关系

目的:研究脓毒症时心肌损伤与心肌内皮素-1(ET-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的关系.方法:24只雄性SD大鼠随机均分为3组,正常对照组、假手术组、脓毒症组,每组8只.采取盲肠结扎穿刺术(CLP)建立脓毒症模型,24 h后动脉采血及分离左心室心肌,检测大鼠血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn Ⅰ)、心肌匀浆上清液中TNF-α、ET-1浓度.并分别观察心肌显微及超微结构改变.结果:脓毒症组大鼠血清cTn Ⅰ较正常时照组及假手术组明显升高(P<0.01),心肌出现典型变性及超微结构损伤;心肌TNF-α、ET-1较正常对照组及假手术组明显升高(P<0.01).脓毒症组血清cTn Ⅰ与心肌TNF-α、ET-1水平正相关(γ值分别为0.967和0.958,P<0.001).结论:脓毒症时心肌损伤与心肌TNF-α、ET-1水平上调有关.     

蛋白酶体-C2亚基基因在烫伤脓毒症大鼠心肌内的表达及意义

目的　探讨烧伤脓毒症时动物心肌内蛋白酶体核心亚基C2亚基m RNA表达及蛋白降解的变化及意义。方法　雄性Wistar大鼠4 5只,随机分为烫伤组、脓毒症组及对照组。烫伤组大鼠使用沸水致背部30 %总体表面积 度烫伤;脓毒症组大鼠用同样方法烫伤后,立即腹腔注射内毒素(6 m g/ kg)制成烫伤脓毒症大鼠模型。通过高效液相荧光法检测心肌内三甲基组氨酸(3MH)的含量,用核糖核酸印迹杂交(Northern杂交)检测心肌内蛋白酶体C2亚基m RNA表达的变化。结果　脓毒症大鼠烫伤后2 h和6 h,单位心肌内3MH含量较对照组和烫伤组均显著升高(P均<0 .0 1) ;烫伤组大鼠伤后2 h与对照组比较差异无显著性(P>0 .0 5 ) ,而伤后6 h较对照组显著升高(P<0 .0 1)。脓毒症大鼠伤后2 h和6 h心肌内蛋白酶体C2亚基m RNA表达较对照组和烫伤组均显著升高(P均<0 .0 1) ,烫伤组大鼠伤后2 h和6 h较对照组也均显著升高(P均<0 .0 1)。结论　严重烫伤特别是合并内毒素攻击后,早期动物心肌细胞内泛素蛋白酶体途径活性呈持续增强现象,蛋白降解率显著增加。这可能是烧伤脓毒症时心功能异常的蛋白代谢机制。