双重免疫组化技术在乳腺癌组织芯片中的应用

在生物医学和临床研究实践中,经常需要检测两种不同物质是否在同一样品或同一种细胞中共存,最好使用双重染色法在同一个组织样本上进行杂交.双重染色的方法有两种类型,免疫酶组织化学和免疫荧光化学法.目前,在实体肿瘤中,由于甲醛固定石蜡包埋组织过高的荧光信号,免疫荧光法更适合用于冰冻保存的组织[1].双重免疫酶组织化学需要选择不同显色底物、不同的抗体、不同修复方法进行搭配,操作繁琐,在科研使用比较广泛,但临床操作要求稳定性高、操作简单,所以在临床不常规使用.     

组织芯片微量抗体的免疫组化染色

组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissue microarrav)技术，是由Kononen等于1998年首先建立并报道，一般是将数十至上百个甚至更多小的组织整齐有序地排列在一张载玻片上而制成缩微组织芯片，即组织切片。组织芯片蜡块可连续切片100～200张，这样用同一套组织芯片即可对上百种生物分子标记(如抗体、DNA和RNA)进行分析、检测，     

组织芯片的Feulgen反应和免疫组化染色

组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissue microarray)技术，由Kononen等于1998年首先建立并报道，是将数十至上千个小组织整齐有序地排列在一张载玻片上而形成的缩微组织切片。组织芯片体积小，信息含量大，一次实验可获得大量结果，能用于HE常规染色、特染、免疫组化和原位杂交等各种染色技术，有广阔的应用前景。     

弹力纤维染色与免疫组织化学双重染色技术

我们采用Gomori醛品红弹力纤维染色法和免疫组织化学SP法结合的双重染色方法 ,可同时显示血管壁上的弹力纤维和某些抗原成分 ,效果满意 ,介绍如下。一、材料与方法1.材料 :大鼠髂动脉粥样硬化标本 35份 (例 ) ,经 4 %甲醛固定 ,常规脱水、石蜡包埋 ,切片厚 5 μm。2 .试剂 :(1)醛品红染液 :碱性品红 0 .5g ,70 %乙醇10 0ml,浓盐酸 1ml,三聚乙醛 1ml,将碱性品红溶于 70 %乙醇 ,然后加入浓盐酸混合均匀后 ,加入三聚乙醛 ,轻轻摇动使混合均匀 ,于室温下静置 2d ,成熟时呈深紫色。过滤于小口砂塞瓶 ,置冰箱备用。 (2 ) 70 %乙醇。 (3)免疫组织…     

组织芯片在免疫组化染色阳性对照中的应用

目的应用组织芯片制作一种高效方便的免疫组化阳性对照片。方法选择60例不同病变不同抗体染色的免疫组化阳性片和相应的组织蜡块,使用组织芯片制备仪制成组织芯片蜡块,经过连续切片,共获得150张组织芯片,每张组织芯片包含77个组织芯点位,每个组织点的直径为0·6mm,芯片中组织所占面积为0·8cm×0·5cm。每张芯片至少包含了50种常见的抗原。然后将常规工作中测试片裱贴在同一张芯片组织的旁边,同时进行免疫组化染色。结果常见的数10种抗体染色,总能在芯片中出现至少1个阳性点位,其余点位则成为了阴性对照。旁边的测试组织是否阳性有了明确的对照。结论与传统的阳性对照片相比,组织芯片阳性对照片具有更高的效率,参考值更多,更科学,并且简便易行。     

介绍一种PAS与免疫组化双重染色技术

用过碘酸-无色晶红法与免疫组化SP法双重染色可同时显示胃肿瘤中癌细胞成分及组织中腺体所分泌的黏液成分,能更好的进行鉴别诊断。     

免疫组化双酶双标记和组织化学复合染色方法的探讨

免疫组化双酶双标记和组织化学复合染色方法的探讨赵秀兰，孙保存，林建韶，王欣，李薇，谭郁彬随着免疫组化技术的发展，已有可能在同一张切片上标记出不同的细胞成分，若与组织化学染色相结合，则可显示更多的细胞成分，为同时观察几种细胞的分布特点、相互关系提供了新...     

组织芯片技术在实验教学中的研究与应用

组织芯片(tissue chip)作为一项新兴的革命性技术,已逐步应用于形态学的观察研究和免疫组织化学、原位杂交等技术。组织芯片技术是将数十个、数百个乃至上千个小组织片,按实验设计的需求整齐地排列在一张载玻片上,而制备成的微缩组织切片。它具有高信息量、体积小、高效、快速、低耗、易于标准化等优点,我们使用此项技术制作成系统的微缩病理学图谱,初步应用于本利生、研究生的实验教学中,取得了较为满意的效果。     

CD34与D2-40双重免疫组织化学染色技术在鉴别血管与淋巴管中的应用

在恶性肿瘤中,血道和淋巴道转移是肿瘤转移的重要途径,并且肿瘤的转移与患者的预后密切相关。常规HE染色中,区别淋巴管和血管非常困难,不可避免地存在主观性。CD34是一种比较特异的血管内皮标记物,已被广泛使用,而D2-40是新近发现的相对特异的淋巴管内皮标记物。我们应用CD34、D2-40对恶性肿瘤组织进行双重免疫组织化学染色,以便更清晰地判断恶性肿瘤细胞在血管、淋巴管中的侵犯情况,取得了比较理想的结果。     

自制组织微阵列在自动免疫组化染色中应用

自动免疫组化染色机能够自动完成免疫组化染色的所有步骤,具有节省试剂、染色速度快、工作效率高等优点,能有效地保证染色的准确性、可重复性以及整体染色的一致性.使用自动免疫组化染色机要求每次染色流程必须包含阳性对照和阴性对照,其目的是为了确定试剂和仪器功能的可靠性.但一般的阳、阴性对照片因组织较大,给待染色组织裱在载玻片的下端提供了较小的区域,不利于使用小剂量模式滴加试剂(如LabVision Autostainer采用的微量滴加技术,最小试剂量低至80 μl),也不利于检测滴加的试剂对组织的覆盖效果.     

组织芯片技术在特殊染色阳性对照中的应用

组织芯片亦称组织微阵列（tissue microarray,TMA）是将数十个,数丰个组织标本整齐地排列在同一张载玻片上的微缩组织切片。组织芯片具有高通量、节约组织原材料和检测试剂、实验条件一致性和实验结果可比性好、实验误差小等优点,在病理学研究中有广阔的应用前景。我们利用组织芯片技术制作特殊染色阳性对照的组织芯片,将阳性对照的组织芯片与待检测的组织裱在同一张玻璃切片上,进行特殊染色,取得了比较理想的结果。     

HPV6B/11原位杂交和免疫组化双重染色

ＨＰＶ6Ｂ/ 1 1原位杂交和免疫组化双重染色指同一组织切片上用原位杂交和免疫组化同时进行实验及显色〔1～ 3〕。利用不同底物 ,显示不同颜色 ,原位杂交用ＮＢＴ/ＢＣＩＰ为底物呈紫蓝色 ,免疫组化用ＤＡＢ为底物呈棕色 ,使待测核酸靶序列和待测蛋白质均能理想显色 ,克服了实验标本空间和样本的误差。1　材料与方法1 1　材料　地高辛标记检测ＨＰＶ6Ｂ/ 1 1型双链ＤＮＡ(ｄｓＤ ＮＡ)探针及碱性磷酸酶标记抗地高辛抗体Ｆａｂ片断 (Ａｎｔｉ ＤＩＣ ＡｇＦａｂ)检测系统 ,ＮＢＴ/ＢＣＩＰ显色系统 (Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｍａｎｎｈｅｉｍ…     

免疫组化双重染色技术在非小细胞肺癌PD-L1检测中的应用

目的 探讨免疫组化双重染色技术应用于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)PD-L1表达检测的价值.方法 建立PD-L1/TTF-1和PD-L1/p40免疫组化双重染色技术,分析TTF-1和p40阳性癌细胞中PD-L1肿瘤比例评分(tumor proportion score,...     

免疫组化对照芯片的设计和应用

组织芯片（tissue chip）又称组织微阵列（tissue microarrays,TMAs）,是近年发展起来的以形态学为基础的分子生物学新技术,1998年,Kononen等对其进行了首次介绍。它是将数十个、数百个乃至上千个细小组织片整齐地排列在某一载体上（通常是载玻片）而形成的微缩组织切片,最多可含1000个直径0.6mm的组织。     

弹力纤维染色与双重免疫组化染色在肺腺癌胸膜侵犯判断的应用及体会

<正>肺癌是严重威胁人类生命健康的恶性肿瘤之一。患者的5年生存率低于20%,主要死亡原因是复发和转移。根据NCCN指南TNM分期标准,即使肿瘤直径≤3 cm,只要侵犯脏层胸膜,应归为T2期,而非T1期。因此对肺癌患者进行准确临床分期具有重要意义,正确判断肿瘤是否侵犯脏层胸膜尤为重要[1-2]。本科室在实际工作过程中采用维多利亚蓝弹力纤维染色结合免疫组化双重染色,能清楚地显示肺癌组织弹力纤维与肿瘤细胞间的关系,以准确判断是否存在胸膜侵犯。     

组织固定对免疫组织化学染色的影响

影响免疫组化染色结果的因素较多 ,从组织离体到取材前对组织进行预处理能大大改善免疫组化结果。作者在这方面进行了摸索 ,现将有关体会介绍如下。1　材料与方法1 1　 标本　所有组织均选用 1999年 4～ 7月本校附属湘雅医院外科手术切除的乳腺癌、肝癌及肺癌根治术标本各 2 0例。每例标本均见明显的肿块。1 2　组织处理方法　手术标本从外科送病理科后立即从肿块中央切开 ,把组织分为两部分 ,一部分置原固定液中 (组织离体后已置固定液中 )不作任何处理 (未处理组 ) ;另一部分按下列方法进行处理 (处理组 ) :(1)用脏器刀将组织切开 ,每刀之…     

提高免疫组化染色质量的相关处理和操作

恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素[1].在组织细胞准备过程中,不仅要求保持组织细胞形态的完整,更需要保持组织或细胞内的抗原,使之不受损失或弥散,防止组织自溶.很显然,在一张组织或细胞已坏死、抗原已丢失的材料上,再好的技术和抗体也难以成功染色.本文就组织标本及时取材、固定、组织脱水和包埋、切片以及免疫组化规范操作等过程进行分析与讨论,旨在与技术人员一起学习交流,以提高免疫组化染色的质量,为病理诊断提供有力保证.     

人县岛内分泌细胞的双重免疫组化研究

本采用单酶双标法对成人胰岛内分泌细胞进行了双重免疫组化染色。结果发现：（1）成人胰岛为鞘型胰岛，即A，D细胞位于胰岛的周围部形成鞘，且二间存在位置分布上的一致性；B细胞位于胰岛的中央部。（2）即使由于有结缔组织隔将胰岛分隔成不同的“亚单位”，其每一“亚单位”的周围部仍为A，D细胞，中央部仍为B细胞。