组织芯片制备过程中的体会与注意事项

组织芯片又称组织微阵列 ,是将数百个组织按预先设计的需要在某种载体 (如载玻片、尼龙膜片等 )上排列成矩阵的缩微组织切片。组织芯片具有平行、高通量对组织进行分析研究 ,节约组织原材料和检测试剂 ,且由于实验条件一致而减小实验误差〔1〕。由于其操作简单 ,应用广泛 ,近年来发展迅速。它是从组织块中挑选典型部位的组织以获得数百个圆柱状的样本 ,并按次序排列在一个新的石蜡块上 ,制作成ＨＥ切片 ,然后按研究的需要进行免疫组化及原位杂交等研究〔2〕。组织芯片技术最重要的特点是 :一次可以同时对多个组织块检测研究而对原来的组织材…     

肺癌石蜡包埋组织及新鲜标本组织芯片制备方法学探讨

目的：探讨和建立石蜡包埋组织和新鲜冷冻标本制备组织芯片的方法，以及在基因表达分析中的应用。方法：选取肺癌石蜡包埋组织90例，新鲜液氮冻存肺癌及癌旁组织20例，常规切片HE染色下确定穿刺部位，石蜡包埋组织芯片制作按Kononem等方法（1998），每例穿取0.6mm组织柱2条，制备180点阵组织芯片；而新鲜组织芯片参考Fejzo等方法（2001），并略作改良，制备50点阵组织芯片。所有组织芯片模块，经4цm切片、常规组织学染色和免疫组化染色，以评价其在形态学及基因表达分析中应用的可行性。结果：180点阵石蜡包埋肺癌组织芯片，组织排列整齐，HE染色后组织形态可观察率在98%以上；p53、c-myc、bcl-2、bax和Ki-67等免疫组化染色后，肺癌组织可见不同程度的抗原表达，组织点阵的形态可观测率在89%-95%之间。新鲜组织芯片经HE染色后，形态可观测率和基因表达可分析率在70%左右。结论：手工法组织芯片制备简便易行，使用组织少，不破坏原蜡块；实验均一性、可比性好，且节省试剂。与常规组织切片相比，2点0.6mm组织可以获得原蜡块95%以上的信息，完全可以用于组织形态学和蛋白水平上的基因表达分析；新鲜组织芯片技术已经初步建立，但尚有待于进一步完善制备技术和mRNA分析方法。     

二次包埋法手工制作病理学教学组织芯片

目的探讨手工制作教学组织芯片方法的可行性。方法利用组织芯片制备系统,通过二次包埋法,手工制作病理教学组织芯片,经HE染色,光镜下检测组织芯片制作质量。采用四川省病理技术专业委员会对石蜡切片HE制片质量评定得分标准对切片进行评分,并与传统教学组织切片比较。结果组织微阵列(TMA)蜡块中的组织芯点排列整齐,与受体蜡块融合紧密;组织芯片切片基本完整,厚薄均匀,经HE染色后组织形态可利用率为94%～100%,切片质量评分优秀率79%,良好率10%。二次包埋法手工制作的教学组织芯2片与传统组织切片制作方法制作的教学组织切片质量无明显差异性(χ=3.073,P0.05)。结论二次包埋法手工制作教学组织芯片方法简便易行,经济实用低消耗,具有高效快速染色均一性好、自身内对照和可比性强的特点,可在病理教学中推广应用。     

组织芯片微量抗体的免疫组化染色

组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissue microarrav)技术，是由Kononen等于1998年首先建立并报道，一般是将数十至上百个甚至更多小的组织整齐有序地排列在一张载玻片上而制成缩微组织芯片，即组织切片。组织芯片蜡块可连续切片100～200张，这样用同一套组织芯片即可对上百种生物分子标记(如抗体、DNA和RNA)进行分析、检测，     

密集型组织芯片手工制作方法的改进

组织芯片是将数十个甚至更多的临床组织标本芯按预先设计的顺序排列在一张玻片上,用于形态学、免疫组化及原位杂交等多种方法的实验研究.有机械和手工两类制作方法,原则上都是在原组织包埋蜡块上采集组织芯,再植入受体蜡块已打好的孔中,然后让组织芯与受体蜡融合、切片[1].     

组织芯片制孔器和受体蜡块的制作

组织芯片是将几十个以上的小组织有序地包埋在一个蜡块里而制成的组织切片,在科研和临床中加以应用。我们制作了组织芯片制孔器和取材针以代替组织芯片仪制作的组织芯片受体蜡块,取得良好的结果。[第一段]     

手动组织芯片仪在髓母细胞瘤中的应用

正临床病理研究通常需要收集大量的组织样本,进行多组、多类病理项目检测,现今国内依然普遍采用普通切片技术进行实验操作,消耗大量的劳动力及资金成本。我科采用简易手动组织芯片仪制作多组织芯片蜡块,应用于髓母细胞瘤分型实验,可大幅降低实验工作量及成本,现介绍如下。     

胃癌高通量组织芯片及切片制作经验技巧总结

正利用术后病理蜡块组织样本切片染色是非常重要的研究方法之一,常见的如免疫组化,原位杂交等研究方法,定性或半定量检测组织中蛋白或基因的表达。然而蜡块组织的切片过程对组织造成一定的消耗和破坏,不利于术后病理存档保存,限制了其研究应用。组织芯片(tissue chip,Tc)又称组织微阵列(tissue microarray,TMA),是将数十个到上千个的不同个体组织样本,有序地排列在同一张     

组织学考试用组织芯片制作初探

目的实现组织芯片在组织学教学中的应用。方法取正常Wistar大鼠心、肝、肾、脾等器官,采用组织芯片仪制作组织微阵列蜡块,常规切片,经苏木精—伊红染色制成组织学考试用组织芯片。结果芯片中组织微阵列排列整齐,各样本组织染色清晰,组织定位良好,可判断性强。结论与传统组织切片相比,组织学考试用组织芯片具有低消耗、可比性强、简便易行、局限性小的特点,应用前景广阔。     

组织芯片的制备与应用

组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissue microarray)是一种将一系列标准小组织标本整齐有序地排放在石蜡块上,从而在一张切片上对数十个、数百个、乃至上千个组织样本同时进行分析的技术方法。组织芯片能够在分子水平对肿瘤和其它疾病进行快速、全面、高通量的原位分析,作为一种新型的组织学研究工具,不仅在肿瘤研究中具有价值而且还将在病理学的其他领域发挥重要作用。     

一种制作组织芯片的简易方法

正组织芯片也称组织微阵列~([1]),是指将许多不同个体组织标本按一定的顺序排列于同一载体上,进行同一指标的原位组织学研究。利用组织芯片可以节省时间和试剂,同时其也被应用于形态学教材、实验室评估和科研等方面。有文献介绍组织芯片制作技术及其应用,但制作过程相对较复杂。本文采用经过脱水、透明和浸蜡处理后的白萝卜作为载体,用穿刺针获取供体组织块的方法,制作出组织芯片。该方法制作的组织芯片价格低廉,适合在临床病理质控和科研等日常工作中推广应用,     

超声波快速石蜡细胞块切片技术在细针穿刺活检中的应用

细针穿刺(fine needle aspiration，FNA)细胞学检查可以对体表及实质器官的肿块作定性及分类诊断，但有局限性，对少见疑难病难以定性和分类，文献报道细胞块切片可一定程度地弥补细胞学诊断的局限性，因在制作细胞块切片过程中可部分恢复原组织结构，其中的微小组织碎片经切片也更清楚地显示其组织学特征，对疾病的病理诊断、分类有一定帮助。     

组织芯片在免疫组化染色阳性对照中的应用

目的应用组织芯片制作一种高效方便的免疫组化阳性对照片。方法选择60例不同病变不同抗体染色的免疫组化阳性片和相应的组织蜡块,使用组织芯片制备仪制成组织芯片蜡块,经过连续切片,共获得150张组织芯片,每张组织芯片包含77个组织芯点位,每个组织点的直径为0·6mm,芯片中组织所占面积为0·8cm×0·5cm。每张芯片至少包含了50种常见的抗原。然后将常规工作中测试片裱贴在同一张芯片组织的旁边,同时进行免疫组化染色。结果常见的数10种抗体染色,总能在芯片中出现至少1个阳性点位,其余点位则成为了阴性对照。旁边的测试组织是否阳性有了明确的对照。结论与传统的阳性对照片相比,组织芯片阳性对照片具有更高的效率,参考值更多,更科学,并且简便易行。     

不同保存条件下石蜡切片乳腺癌PR、ER和HER-2状态的变化

<正>在临床及科研工作中,经常要对石蜡组织进行预切片,其组织抗原性必然受到外界的影响。临床工作中,为了减少组织浪费,尤其是一些微小病变,进行组织切片时会保存一些未染色的切片;再者在利用组织芯片进行科研工作时,科研工作者也习惯将组织芯片连续切片,贴好片后保存。本文通过观察三种不同条件下长期保存的乳腺癌石蜡切片PR、     

大脑神经递质分布的三维可视化及其应用

目的:通过使用可视化工具包VTK的光线投射体绘制算法,实现大脑组织三维重建,获得大脑内神经递质及相关物质在脑内的三维分布图。方法:将大脑组织按笛卡尔坐标系切成2418个5 mm×5 mm×5 mm的连续大脑组织块,对脑组织块取样做成组织芯片并测定脑组织切片中神经递质及相关物质的含量,利用可视化工具包VTK的三维重建技术,在VC++6.0的编译环境下实现对大脑内神经递质及相关物质的三维重建。结果:通过重建,可以获得大脑内各种神经递质及物质的三维分布图,并可从任意角度直接的观察物质的空间分布位置及分布浓度。结论:本研究以大脑内神经递质的分布数据和VTK为基础,实现了脑组织的三维重建,从而为以后的大脑的功能和疾病研究打下良好的基础。     

提高组织芯片切片成功率的方法和体会

Ｋｏｎｏｎｅｎ等[1] 于 1998年创立了真正意义的组织芯片或称组织微阵列 (ｔｉｓｓｕｅｍｉｃｒｏａｒｒｙ ,ＴＭＡ)技术 ,将直径 0 .6ｍｍ的乳腺癌小组织样本 ,以阵列方式包埋于同一块 2 0ｍｍ× 45ｍｍ的石蜡块中 ,然后进行切片 ,用于同一实验指标的研究。而由此产生的蜡块切片可同时用于ＤＮＡ、ＲＮＡ或蛋白水平的原位组织学研究 ,使基因、蛋白水平的研究与组织形态学特征相结合。目前已应用到肿瘤的进展、预后、早期诊断以及与ｃＤＮＡ基因芯片相结合 ,进行高表达基因的定位研究 ,研究报道的有乳腺癌[1 3] 、前列腺癌[4 6 ] 、脑肿瘤…     

组织芯片技术在特殊染色阳性对照中的应用

组织芯片亦称组织微阵列（tissue microarray,TMA）是将数十个,数丰个组织标本整齐地排列在同一张载玻片上的微缩组织切片。组织芯片具有高通量、节约组织原材料和检测试剂、实验条件一致性和实验结果可比性好、实验误差小等优点,在病理学研究中有广阔的应用前景。我们利用组织芯片技术制作特殊染色阳性对照的组织芯片,将阳性对照的组织芯片与待检测的组织裱在同一张玻璃切片上,进行特殊染色,取得了比较理想的结果。     

HE染色质控组织的选取及优化

<正>良好的HE切片对病理诊断至关重要，高质量的HE染色红蓝对比鲜明；可见3种红色(大红、粉红和紫红),显示色彩亮丽、对比鲜明及细腻的细节；核染色质清晰^[1]。使用质控组织评估染色效果是HE染色质量控制的重要手段，以往质控组织多选用单一类型组织，存在较大的局限性，无法全面地反映不同类型标本的染色效果。本科室运用组织芯片进行HE染色质控，取得了良好的效果，同时也遇到了组织收集和芯片蜡块制备难度大、对质控人员能力要求高、质控时间偏长等问题，     

苏木精─伊红整块染色法

组织学切片染色方法众多，采用什么样的方法才能又快又好，是值得探讨的问题。我们过去都是用组织片染法进行染色，也能取得满意的染色效果，但用的时间长，步骤多，费试剂，染色结果不稳定，而且未经染色的组织不易切片。我们经过大量的实践和探索，与组织切片染色进行比较，组织块染色能取得相同的染色结果。此方法稳定可靠，染色效果好，不褪色，操作简便，既节省时间，又节约试剂，染色后的组织块易切，适合制作大量的教学切片。     

二次包埋法手工制作病理学教学组织芯片

组织芯片又称组织微阵列（tissue micmarray,TMA）是将数十个、数百个乃至上千个组织样本整齐地排列在某一载体上（通常是载玻片）而成的微缩组织切片。由于其具有高效,快速,低消耗,信息含量大,可比性强,可按不同的需要进行设计和组合等特点,组织芯片在医学科学研究中得到迅速发展。