维生素C与三氧化二砷联用诱导K562细胞株凋亡的研究

目的：观察维生素C与三氧化二砷相互联用时K562细胞株凋亡率的变化。方法：联用不同浓度的维生素C与三氧化二砷孵育K562细胞株不同时间，采用电镜观察及流式细胞术通过PI染色检测在两种药物单用及联用情况下的细胞凋亡比例。结果：维生素C与三氧化二砷联用组细胞凋亡率明显高于单用三氧化二砷组。结论：与维生素C联用可明显提高三氧化二砷对K562细胞株凋亡诱导作用，与低剂量1μmol/L三氧化二砷联用时其凋亡率甚至明显高于单用5μmol/L三氧化二砷组。为临床上砷剂对急性非淋巴细胞性白血病治疗的应用提供了新思路。     

三氧化二砷诱导慢性髓细胞性白血病K562细胞株凋亡与c-myc的表达

目的：观察三氧化二砷(As2O3)诱导慢性髓细胞性白血病K562细胞株凋亡和c-myc mRNA表达的作用，并探讨其作用机制。方法：应用MTT法、苔盼蓝拒染法、DNA凝胶电泳和细胞周期凋亡检测，观察0μmol／L、0．5μmol／L、lμmol／L、2μmol／L、4μmol／L、8μmol／LAs2O3分别作用24h、48h、72h后，对K562细胞增殖及活力的影响。应用RT-PCR和免疫组织化学法检测As2O3处理后K562细胞c-myc mRNA和蛋白表达的变化。结果：As2O3诱导后K562细胞核DNA凝缩，核片段化，最后形成凋亡小体。在一定范围内，随着As2O3浓度的增加和As2O3处理时间的延长，细胞存活率明显下降；流式细胞仪检测可见As2O3诱导K562细胞凋亡，影响细胞周期，细胞阻滞于G2／M期；As2O3处理后c-myc mRNA和c-myc蛋白表达均有先上调后回落的趋势。结论：As2O3可以抑制K562细胞增殖并诱导凋亡，其作用机制可能是使细胞受阻于G2／M期而进入凋亡程序，c-myc基因参与了As2O3诱导细胞凋亡的基因调控。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡的初步研究

目的：探讨三氧化二砷治疗慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ）的机制。方法：以ＣＭＬ细胞系Ｋ５６２为模型，通过细胞增殖、活力检测，形态学观察，肿瘤集落形成的琼脂糖凝胶电泳等检验。结果：经≥２．５μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３处理的Ｋ５６２细胞可出现增殖受抑和凋亡的形态学改变及ＤＮＡ片段化。结论：Ａｓ２Ｏ３能有效地诱导Ｋ５６２细胞凋亡。     

三氧化二砷诱导卵巢癌细胞株SKOV3和COC1凋亡

目的：对比研究三氧化二砷(As2O3)诱导卵巢癌细胞株SKOV3和COC1凋亡的作用．方法：用不同浓度的As2O3溶液作用人卵巢癌细胞株SKOV3及COC1,于不同时间点收集细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率及分析细胞周期的变化,原位末端标记法观察细胞凋亡形态学特征．结果：不同浓度的As2O3溶液对卵巢癌细胞株SKOV3及COC1均有不同程度的生长抑制作用．随着药物浓度的升高、作用时间的延长,As2O3对COC1细胞的生长抑制率升高．15．0μmol/L(10ppc)浓度组的As203对SKOV3的生长抑制效应最显．低于15．0μmol/L的浓度组对SKOV3细胞株的抑制率之间没有显性差异．As2O3对COC1细胞的生长抑制作用比SKOV3强．6．0μmol/L As2O3作用48 h SKOV3细胞出现凋亡形态学改变,COC1细胞在1．5μmol/L As2O3作用48h就出现了凋亡形态学改变,且随着作用时间的延长凋亡细胞增多．15．0和6．0μmol/L As2O3作用下SKOV3细胞周期的变化出现了随着药物作用时间的延长G1期细胞比例逐渐上升,S期、G2／M期细胞的比例同时降低的现象．在3．0和1．5μmoL／L As2O3作用下COC1细胞周期也出现了相同的改变．结论：As2O3可以诱导卵巢癌细胞株SKOV3和COC1发生凋亡,COC1比SKOV3对砷剂更敏感．诱导细胞发生G1期阻滞是As2O3抑制卵巢癌细胞生长作用的可能机制之一。     

去甲斑蝥素诱导人T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的实验研究

目的：探讨去甲斑蝥素诱导人T淋巴细胞白血病细胞株6T－CEM的凋亡作用。方法：利用DNA断裂点标记法（TUNEL）、DNA凝胶电泳、活细胞拒染以及光镜方法研究有关细胞的凋亡。结果：UNEL标记及DNA凝胶电泳显示：10－40μg/ml剂量的去甲斑蝥素作用6T－CEM细胞24h及10μg/ml剂量的去甲斑蝥素作用6T－CEM细胞超过18h后即出现典型的细胞凋亡特征。结论：一定剂量范围内的去甲斑蝥素可在直接杀伤作用较小的情况下明显诱导6T－CEM细胞凋亡,不会因细胞坏死而引起炎症反应,这对于去甲斑蝥素应用于临床将有十分重要意义。     

三氧化二砷诱导人胃癌细胞株MGC—803细胞凋亡的研究

为探讨三氧化二砷对胃癌细胞的作用及可能的机制。用不同浓度的Ａｓ２Ｏ３作用于增减的胃癌细胞株ＭＧＣ－８０３细胞。噻唑蓝细胞活力测定显示Ａｓ２Ｏ３能明显抑制ＭＧＣ－８０３细胞生长；     

三氧化二砷诱导恶性肿瘤细胞凋亡的研究进展

三氧化二砷(As2O3)是一种剧毒物质，它可以通过调控某些基因的表达和信号传导等途径来影响肿瘤细胞的生物活性。现已证实，As2O3在白血病尤其是急性早幼粒细胞白血病的治疗方面效果显著，其机制主要是诱导细胞凋亡。最近，一些基础研究表明，As2O3亦可诱导实体瘤细胞凋亡。所以，进一步拓展As2O3的抗瘤谱及药用价值是十分必要的.     

霉酚酸诱导T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4凋亡的作用及机制

目的:研究霉酚酸(Mycophenolic acid,MPA)诱导T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4凋亡的作用及其机制.方法:光学显微镜及透射电镜观察细胞凋亡的形态学特征,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞仪分析细胞Annexin V表达、周期变化及caspase-3活性.人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji作为对照.结果:MPA诱导Molt-4细胞的凋亡率与作用浓度和时间成正比;细胞被阻滞于 S期.MPA作用24 h后细胞内caspase-3活性增高,呈浓度依赖性.MPA不诱导Raji细胞凋亡 .结论:MPA可诱导Molt-4细胞凋亡,其作用可能与激活caspase-3有关.     

三氧化二砷诱导白血病多药耐药细胞凋亡的形态学改变

目的 系统观察三氧化二砷（As2O3)诱导白血病多药耐药细胞凋亡时的形态学特征。方法 用As2O3诱导白血病多药耐药细胞K562/ADM细胞凋亡，光镜，激光共聚焦显微镜（Confocal)和电子显微镜观察凋亡细胞的形态学变化。结果 As2O3诱导K562/ADM细胞凋亡，形态学上出现典型的凋亡特征性改变。发生凋亡的细胞可被邻近的未凋亡细胞通过吞噬等方式清除，且正常细胞吞噬凋亡细胞后自身出现某些凋亡的形态学改变。结论 体外诱导凋亡的白血病耐药细胞可被邻近的同类细胞吞噬清除。这种行为可能引发同类“吞噬”细胞自身发生继发性凋亡。     

蜂毒素诱导人T淋巴细胞白血病细胞株6T-CEM的凋亡作用

目的：探讨蜂毒素诱导人T淋巴细胞白血病细胞株6T－CEM的凋亡作用。方法：利用DNA断裂点标记法（TUNEL）、DNA凝胶电泳、活细胞拒染以及光镜方法研究6T－CEM细胞的凋亡。结果：5μg/ml蜂毒素作用4h及4μg/ml蜂毒素作用24h诱导6T－CEM出现明显的凋亡特征。结论：蜂毒素在杀伤6T－CEM的同时能明显诱导细胞凋亡。     

三氧化二砷诱导血液肿瘤细胞凋亡的机制研究

目的 了解三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）诱导的细胞凋亡是否与线粒体跨膜电位（ΔΨｍ）改变有关及其可能机制。方法 以急性早幼粒细胞性白血病（ＡＰＬ）细胞系ＮＢ４、慢性淋巴细胞性白血病细胞系ＳＫＷ３、Ｂｕｒｋｉｔｔ’ｓ淋巴瘤细胞系Ｎａｍａｌｗａ及其它２个急性髓性白血病细胞系ＨＬ－６０和Ｕ９３７为体外模型,应用碘化丙啶（ＰＩ）／Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ１２３（Ｒｈ１２３）双重染色检测ΔΨｍ,通过测定细胞活力、亚Ｇ１     

三氧化二砷对急性早幼粒细胞性白血病细胞组织因子表达的影响

目的探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对急性早幼粒细胞性白血病（ＡＰＬ）细胞组织因子（ＴＦ）表达的影响。方法利用复钙时间检测使用１μＭＡｓ２Ｏ３处理ＡＰＬ细胞株ＮＢ４细胞以及使用Ａｓ２Ｏ３治疗中不同时间的ＡＰＬ病人的骨髓细胞的促凝活性（ＰＣＡ）,并用ＥＬＩＳＡ方法检测其ＴＦ抗原、利用半定量ＲＴＰＣＲ检测ＴＦｍＲＮＡ的转录水平。结果Ａｓ２Ｏ３可以以时间依赖的方式下调ＡＰＬ细胞的促凝活性、ＴＦ抗原水平以及ＴＦｍＲＮＡ的转录;此外,通过对ＰＣＲ产物进行测序,发现ＡＰＬ细胞中还存在ＴＦ第五个外显子缺失的转录本,其生物学意义尚不明了。结论Ａｓ２Ｏ３可下调ＡＰＬ细胞ＴＦ的表达;而且在使用Ａｓ２Ｏ３诱导ＡＰＬ细胞凋亡的同时,Ａｓ２Ｏ３有可能通过下调ＡＰＬ细胞ＴＦ的表达而预防ＤＩＣ的发生     

丹参酮与三氧化二砷协同诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株凋亡的体外研究

目的 为评估丹参酮ⅡA（Tanshinone ⅡA,Tan ⅡA）与三氧化二砷（As2O3）联合应用抑制NB4细胞增殖、诱导其凋亡的效应,观察二药的相互作用和相互影响,期望对两药的临床应用提供理论依据。方法 以不同浓度的As2O3、TanⅡA单独及联合应用作用于急性早幼粒细胞白血病细胞（NB4）作为实验组,通过观察细胞形态学改变,MTT法测定细胞存活率,并采用流式细胞术（FCM）检测细胞周期分布,分析不同浓度的As2O3、TanⅡA单独及联合应用对NB4细胞的增殖、凋亡的影响。结果 TanⅡA、As2O3均能抑制NB4细胞生长,以1.0 μmol/L As2O3作用更显著,二者联合应用后的增殖抑制作用表现为协同效应;经TanⅡA组处理后的NB4细胞,其形态改变更多显示一定程度的成熟粒细胞的特征,As2O3组则更多表现为细胞凋亡的形态学改变,并经电镜检查证实,两药联合应用可加强NB4细胞的凋亡形态改变;处理后的NB4细胞G0/G1期比例增高,S期细胞比例降低,细胞增殖指数（PI）下降,两药联合应用后具有协同效应。结论 1. TanⅡA、As2O3对NB4细胞均有增殖抑制作用,二者的增殖抑制作用具有协同效应,并与剂量相关;2. TanⅡA与As2O3联合作用于NB4细胞具有诱导凋亡作用,两药的诱导凋亡作用具有协同效应;3. 小剂量的As2O3联合TanⅡA即可对NB4细胞产生促进凋亡的效应,故临床可以选择小剂量的As2O3,以减轻砷剂的毒副作用。     

三氧化二砷联合阿糖胞苷诱导急性早幼粒白血病疗效分析

目的 探讨三氧化二砷（arsenic trioxide,ATO）联合阿糖胞苷和全反式维甲酸（all-trans retinoic acid,AT-RA）联合化疗治疗初治和复发急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocyticleukemia.APL）的缓解率和安全性.方法 回顾分析初治和复发急性早幼粒细胞白血病52例,分为ATO组28例和ATRA组24例,对比两组完全缓解率（CR）和副作用.结果 52例初治和复发APL患者诱导治疗一个疗程后,ATO组和ATRA组CR率分别为92.8％和70.8％;ATO组死亡2例,ATRA组死亡4例;比较两组CR差异有统计学意义（P＜0.005）.ATO组患者达到CR的中位时间为28.6 d（28～33 d）,明显短于ATRA组患者的37 d（29～50 d）（P＜0.001）.50％的ATRA组患者出现维甲酸综合征.外周血白细胞数和治疗过程中白细胞峰值与维甲酸综合征的发生几率呈正相关.结论 三氧化二砷联合阿糖胞苷诱导APL达CR的时间短于ATRA组,缓解率高于ATRA组,副作用小,早期死亡率低.     

亚砷酸两种给药方法治疗急性早幼粒细胞白血病的临床观察

目的 评价亚砷酸(ATO)的两种给药方法在治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)中的疗效及不良反应.方法 观察分别应用ATO两种给药方法治疗的APL 80例,试验组40例,按0.16mg/kg计算每例患者ATO的日治疗总量,加入5%的葡萄糖液500ml稀释,缓慢静脉滴注,约8h完成;对照组40例,按常规给药0.16mg/kg计算ATO日治疗总量,每日用药1次,2h完成.分别观察两组患者不同时间点的不良反应.结果 连续用药28d,试验组总有效率为92.5%,对照组为75%.患者达到完全缓解的时间分别为(28.2±2.5)d和(34.4±4.5)d.结论 缓慢静脉给药不良反应轻,并可缩短APL的完全缓解的时间,提高缓解率.     

三氧化二砷治疗初发急性早幼粒细胞白血病的临床观察

目的 观察三氧化二砷注射液(AS2O3)对初发急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的疗效.方法 22例APL初发患者三氧化二砷诱导缓解,再予DA方案巩固强化治疗.观察持续缓解时间及药物不良反应.结果 22例患者完全缓解率(CR)81.8%.20例随访患者均成活,最长5年.结论 三氧化二砷用于初发APL患者,疗效良好.     

Proteomic analysis of nuclear matrix proteins during arsenic trioxide induced apoptosis in leukemia K562 cells

Background Arsenic trioxide (As2O3 ) has been identified as a very potent anti-acute leukemic agent. However its role in apoptosis needs to be elucidated. As2O3 interferes with the proliferation and survival of tumor cells via a variety of mechanisms. Drug-target interactions at the level of nuclear matrix (NM) may be critical events in the induction of cell death by As2O3. This study dealt with As2O3 -target interactions at the level of NM in chronic myelogenous leukemia cell line K562 by proteomics. Methods K562 cells were cultured in MEM and treated with different concentrations of As2O3. The nuclear matrix proteins were analyzed by high-resolution two-dimensional gel electrophoresis and computer-assisted image analysis. Results As2O3 significantly inhibited the growth of chronic myelogenous leukemia cell line K562 at low concentrations. While more than 200 protein spots were shared among the nuclear matrices, about 18 distinct spots in the nuclear matrices were found characteristic for As2O3 treated cells. Conclusions: As2O3 induces apoptosis in K562 cells in a dose and time-dependent manner. Our results demonstrated that for the detection of the onset of apoptosis, the alteration in the composition of nuclear matrix proteins was a more sensitive indicator than nucleosomal DNA fragmentation test. These results indicated that As2O3 might be clinically useful in the treatment of chronic myelogenous leukemia. The changes of nuclear matrix proteins in the treated cells can be used as a useful indicator for this treatment.     

三氧化二砷诱导大鼠血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的机制。方法建立大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖模型。通过透射电镜、流式细胞仪观察As2O3作用后细胞凋亡形态学和细胞胞浆游离钙离子(Ca^2 )浓度的变化。结果经As2O3处理的VSMCs电镜下呈现凋亡的特征性改变,形态学上表现为细胞胞膜完整、染色质固缩及核碎裂。流式细胞仪分析显示,VSMCs在As2O3作用后出现凋亡峰,而As2O3能通过促进细胞外Ca^2 内流和细胞内Ca^2 池的释放提高胞浆游离Ca^2 浓度。结论As2O3可诱导VSMCs凋亡,并可能与胞浆游离Ca^2 浓度升高有关。     

三氧化二砷诱导人肝癌细胞凋亡及相关分子机制研究

目的:研究三氧化二砷(As2O3)诱导人肝癌细胞凋亡时,细胞周期及细胞周期调节蛋白的变化,探讨As2O3抗肝癌作用的分子机制.方法:体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用2μmol/L As2O3处理72h,流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡率;透射电镜观察细胞形态变化及细胞凋亡情况;免疫细胞化学检测cyclinD1、cyclinA、p21蛋白的表达.结果:As2O3使SMMC-7721细胞周期阻滞在G0/G1、S期,与对照组比较,Aa2O3在诱导SMMC-7721细胞发生凋亡的同时,p21蛋白的表达水平显著增高(对照组1.128;As2O3组:3.794),cyclinD1、cyclinA蛋白的表达水平明显下降(对照组:3.647,2.833;As2O3组:1.133,1.179).结论:As2O3能干扰细胞周期的进程,诱导SMMC-7721细胞凋亡.其作用机制与上调p21蛋白及下调cyclinD1、cyclinA蛋白的表达有关.