TGF-β1对小鼠子宫内膜基质细胞 MMP-9表达的影响

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）对小鼠子宫内膜基质细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响。方法分离和纯化小鼠子宫内膜基质细胞,在此细胞培养体系中加入不同浓度的 TGF-β1,终浓度为0．1、2．5、5．0、10．0、20．0 ng／mL ,培养48 h 后通过 ELISA 法检测培养液中 MMP-9的含量。结果与对照组比较,实验组随 TGF-β1浓度的增加,小鼠子宫内膜基质细胞 MMP-9表达上升,差异有统计学意义（P＜0．01）。结论小鼠子宫内膜基质细胞体系中,TGF-β1可能通过调控 MMP-9的表达,参与调节细胞外基质代谢。     

IL-1β对人分泌中期子宫内膜细胞分泌MMP-9及TIMP-3蛋白的影响

目的初步研究白介素-1β(IL-1β)对离体培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其特异性组织抑制物-3(TIMP-3)的影响。方法原代培养人分泌中期子宫内膜细胞,利用粘附式细胞仪570型,采用间接免疫荧光法检测IL-1β对内膜细胞分泌MMP-9和TIMP-3的影响。结果(1)MMP-9:空白对照组为1491.38±68.95,50U/ml组为1592.40±47.57,100U/ml组为1702.63±75.31,500U/ml组为1994.49±52.98,1000U/ml组为2347.58±45.87。随着IL-1β的浓度增加,原代培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌MMP-9表达量呈浓度依赖性显著升高(P<0.05);(2)TIMP-3:空白对照组为1643.31±61.29,50U/ml组为1597.27±49.07,100U/ml组为1443.93±81.23,500U/ml组为1343.28±54.80,1000U/ml组为1157.85±47.95。随着IL-1β的浓度增加,原代培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌TIMP-3表达量呈浓度依赖性显著下降(P<0.05)。结论IL-1β通过促进MMP-9分泌,抑制TIMP-3分泌,使细胞外基质降解,有利于绒毛滋养层细胞侵入。     

痛经宁对子宫内膜异位症大鼠在位及异位内膜中ICAM-1、MMP-9及VEGF表达的影响

目的:观察中药痛经宁对子宫内膜异位症(EMs)大鼠在位与异位内膜中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:自体移植法建立EMs大鼠模型,随机数字表法随机分为模型组、西药组及痛经宁低、中、高剂量组;另设正常对照组。分别给予灌胃蒸馏水、孕三烯酮及痛经宁高、中、低浓度的药液,共28 d。观察各组大鼠异位内膜的生长情况,游标卡尺测量其体积;免疫组化S-P法、免疫印迹(Western blot)法测定各组大鼠在位与异位内膜中ICAM-1、MMP-9及VEGF蛋白表达,RT-q PCR法测定ICAM-1、MMP-9及VEGF mRNA表达。结果:模型组大鼠异位内膜处出现广泛黏连及小血管生成,各用药组的黏连及小血管生成情况有不同程度的改善,以痛经宁高剂量组效果最佳;各用药组大鼠异位内膜体积较模型组有不同程度的减少,其中痛经宁高剂量组较其他药物组减少最多(P0.05)。在位及异位内膜中,模型组大鼠ICAM-1、MMP-9、VEGF蛋白及mRNA均较正常组呈高表达(P0.05),且异位内膜强于在位内膜;与模型组比较,各用药组上述指标表达均有不同程度的下降,且痛经宁高剂量组显著低于其他药物组(P0.05)。结论:痛经宁可显著缩小异位内膜的体积,改善黏连、血管生成等情况;可下调在位及异位内膜中ICAM-1、MMP-9、VEGF蛋白及mRNA表达。     

活血消异方对子宫内膜异位症大鼠ICAM-1、MMP-9及VEGF的影响

目的观察中药活血消异方对子宫内膜异位症(EMs)大鼠细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响,探讨活血消异方抑制EMs发生的作用机理。方法建立大鼠EMs模型,随机分为活血消异方组、孕三烯酮组、模型对照组、正常对照组,采用免疫组织化学染色法检测给药3周及停药3周时各组大鼠子宫内膜组织中ICAM-1、MMP-9、VEGF的表达水平的变化。结果用药3周时,ICAM-1、MMP-9在模型对照组异位内膜中表达水平均高于其他各组(P<0.05),在活血消异方组异位内膜中的表达水平均低于孕三烯酮组(P<0.05)。VEGF在模型对照组异位内膜中表达最强,而孕三烯酮组中VEGF的表达较之模型对照组,差异无统计学意义(P>0.05),较之活血消异方组则表达增强(P<0.05)。停药3周后,ICAM-1、MMP-9及VEGF在活血消异方组异位内膜中的表达均低于模型对照组(P<0.05)。结论 "黏附、侵袭、血管生成的过程"(即"AAA通路")与EMs的发生密切相关,活血消异方可下调"AAA通路"相关因子的表达,通过抑制异位内膜的黏附、侵袭和局部新生血管的形成,降低异位内膜组织种植、侵袭、转移能力,最终抑制EMs的形成。     

慢性心力衰竭患者TNF-α、IL-1β与MMP-9及心功能的相关性研究

目的探讨CHF患者血清TNF-α、IL-1β与MMP-9水平的变化、相关性及其与心功能的关系。方法CHF患者43例，按心功能分级并根据二维超声心动图检查（2-DE）结果分为舒张性心衰与收缩性心衰两个亚组。采用ELISA法测定血清MMP-9、IL-1β水平，平衡放射免疫法测定血清TNF-α水平并记录2-DE各指标。结果与30例正常对照进行对比分析。结果CHF患者血清TNF-α、IL-1β与MMP-9水平较正常对照组均明显增高（P〈0．05），并且与心功能严重程度一致；收缩性心衰者较舒张性心衰者各指标升高更明显；CHF患者TNF-α与MMP-9、IL-1β成正相关，与EF值成负相关；IL-1β与MMP-9、TNF-α成正相关，与EF成负相关：TNF-α、MMP-9、IL-1β均与左室舒张末内径成正相关；左室舒张末内径与EF成负相关。结论TNF-α、IL-1β及MMP-9在慢性心衰尤其是收缩性心衰的发生发展中起重要作用，是逆转心肌重塑改善心功能延缓心衰发展的具体目标；与对照纽相比，CHF组TNF-α、IL-1β均显著增高并伴随心肌纤维化程度的预测指标MMP-9的明显增高，且与心功能严重程度密切相关；提示二者在某种程度上也可以作为心肌纤维化程度的预测指标。     

MMP-2、MMP-9及TIMP-1在多囊卵巢综合征病人种植窗口期内膜的表达及其临床意义

目的 检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)在多囊卵巢综合征(PCOS)病人种植窗口期子宫内膜组织中的表达情况,并探讨其临床意义。 方法 选择接受促排卵后治疗的PCOS病人(PCOS组)12例和因男方因素不孕且月经正常前来就诊病人(对照组)15例,检测2组排卵后第7天子宫内膜组织中MMP-9、MMP-2和TIMP-1蛋白表达情况,利用病理图像分析技术,对实验结果进行半定量分析。 结果 MMP-9、MMP-2和TIMP-1在2组子宫内膜组织中均呈阳性表达,在间质细胞和腺上皮细胞的细胞质内均有棕黄色颗粒物沉着,以腺上皮表达为主。PCOS组子宫内膜腺上皮MMP-2、MMP-9及TIMP-1表达均明显低于对照组(P < 0.01),子宫内膜间质MMP-9表达亦低于对照组(P < 0.05)。 结论 MMP-9、MMP-2和TIMP-1在PCOS组病人的种植窗口期子宫内膜中的表达水平较低,这可能是导致PCOS病人采用促排卵治疗后妊娠率低、流产率高的原因之一。     

ICAM-1、MMP-2及iNOS表达与胃癌侵袭转移的关系

目的 探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在胃癌组织中的表达及与胃癌侵袭转移的关系.方法 RT-PCR法检测了45例胃癌组织及15例癌旁正常胃黏膜组织中ICAM-1 mRNA、MMP2 mRNA及iNOS mRNA的表达.结果 ICAM-1 mRNA、MMP2 mRNA及iNOS mRNA在胃癌组织中的阳性表达率与癌旁正常胃黏膜组织比较,差异有高度统计学意义(P<0.01);ICAM-1 mRNA、MMP-2 mRNA及iNOS mRNA表达与胃癌TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05),与肿瘤的大小及分化程度无关(P>0.05),三者之间存在着相关性(P<0.05).结论 ICAM-1、MMP-2及iNOS参与了胃癌的形成,其相互作用在胃癌浸润和转移中可能起着重要作用.     

TGF-β和EGF对人分泌中期子宫内膜间质细胞MMP-9的影响

目的：观察转化生长因子-β（TGF-β）和表皮生长因子（EGF）对人分泌中期子宫内膜间质细胞（ESC）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的影响。方法：体外培养ESC,分离、纯化后的ESC以1×105个/孔接种于96孔板,加入含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液。24h后换无血清的DMEM/F12培养液,每孔200μL,分别加入TGF-β和EGF,终浓度均为2.5、5.0和10.0ng/mL,培养48h后通过ELISA法测培养液中MMP-9的含量。结果：与对照组比较,实验组随着TGF-β浓度的增加,ESC分泌的MMP-9明显下降（P〈0.05,P〈0.01）;而随着EGF浓度的增加,ESC分泌的MMP-9则显著上升（P〈0.05,P〈0.01）,且二者的变化具有剂量依赖性。结论：TGF-β和EGF可能通过调节人子宫内膜间质细胞MMP-9,而参与胚胎植入过程。     

IL-1β对兔关节软骨细胞MMP-1/-13mRNA表达和NO的影响

目的观察白介素-1β(IL-1β)对体外培养的兔关节软骨细胞基质金属蛋白酶-1/-13(MMP-1/-13)基因表达的调节作用和对一氧化氮(NO)的影响,以了解骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨损伤的机制。方法将体外培养的兔关节软骨细胞随机分为5组,每组有3个样本,第1组为空白对照组,第2,3,4,5组分别加入10ng/mL的IL-1β,作用时间分别为8,16,24,36h。采用实时荧光定量PCR(real-timePCR)的方法,观察兔关节软骨细胞MMP-1/-13基因的表达情况,以空白组为对照,比较不同时间段软骨细胞MMP-1/-13基因表达,并收取培养细胞上清液测定一氧化氮(NO)含量,比较各组变化。结果正常兔关节软骨细胞具有MMP-1/-13基因表达,但是表达量较低,而各实验组MMP-1/-13mRNA都明显增高。尤其是MMP-1mRNA增高明显,在36h内随着时间的延长逐渐增高,且各组间差异具有统计学意义(P<0.05);MMP-13mRNA增高后维持在高水平,但各组间无明显差异。NO的含量也随着时间的延长而逐渐增高。结论IL-β1随着时间延长,正向调节兔关节软骨细胞MMP-1/-13mRNA表达,并能促进NO的释放增加,从而使它们在OA软骨破坏的机制中发挥重要作用,但对MMP-1/-13具体调节机制不尽相同。     

MAPK和NF-κB通路抑制剂对IL-1β诱导滑膜细胞MMP-2活性的影响

目的研究白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)对人膝关节滑膜细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloprotein-ase-2,MMP-2)活性的影响及MAPK和NF-κB信号通路抑制剂对该过程的影响。方法用不同浓度的IL-1β处理体外培养的滑膜细胞72 h,明胶酶谱法检测细胞培养液中MMP-2的活性;选取10 ng/ml的IL-1β单独或分别与4种信号通路抑制剂(NF-κB抑制剂Bay11-7082,MAPK抑制剂SB203580、PD98059和SP600125)处理滑膜细胞,处理后12、24、48、72 h检测MMP-2的活性。结果 IL-1β随浓度和处理时间的增加明显上调滑膜细胞MMP-2的活性(P<0.05);与IL-1β处理组比较,Bay11-7082明显抑制了IL-1β诱导MMP-2活性的上调,并使72 h时MMP-2的活性降至13%(P<0.01);其他抑制剂对IL-1β诱导MMP-2活性上调的影响无统计学差异(P>0.05)。结论 IL-1β以时间和剂量依赖方式,通过NF-κB信号通路诱导滑膜细胞MMP-2活性。     

血液透析对可溶性细胞间粘附分子-1水平的影响及其意义

目的：探讨血液透析对可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）水平的影响及其长期透析患者免疫能力下降的可能作用。方法;采用夹心ＥＬＩＳＡ方法检测血透患者血清及透析液中ｓＩＣＡＭ－１水平的变化。结果;透析开始后,血清ＳＩＣＡＭ－１显著下降,同时,伴随外周血白细胞减少。透析５ｈ,患者血清ｓＩＣＡＭ－１水平基本恢复至透析前水平。结论：ｓＩＣＭＡ－１在血透中有规律的变化。导致了外周血白细胞减少,同时,可能     

银杏提取物对糖尿病大鼠肾组织MMP-2和MMP-9表达的影响

目的：观察银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响。方法：取成年SD级大鼠50只,随机分成3组：正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组）、EGB治疗组（EGM组,8mg.kg-1.d-1）。腹腔注射链脲佐菌素（STZ,30mg/kg）诱导大鼠造成糖尿病模型,EGB组用银杏叶提取物进行腹腔注射8周后,用免疫组化法检测各组大鼠肾皮质MMP-2、MMP-9的蛋白表达。结果：免疫组织化学：DM组大鼠肾小球MMP-2和MMP-9蛋白表达较正常对照组明显减少（P〈0.01）;EGB组MMP-2和MMP-9较DM组表达升高（P〈0.01）。结论：EGB可通过上调MMP-2和MMP-9蛋白表达,减少细胞外基质积聚而对糖尿病大鼠肾组织损伤起到一定的治疗作用。     

STUDY ON INTERCELLULAR ADHESIONMOLECULE-1 AND P-SELECTIN IN LIVER ISCHEMIA AND REPERFUSION INJURY

ResumeObjectifL'articleapourbutd'dtudierieroledeL'adhesionmolecule--iintercellulaire(ICAM--I)etP--sdlectindanslagendsedelesionhdpatiqueparischemie--reperlusion.MethodesLe/Oiedesratscumisdl'ischdmie--reper/usionpendant60minutesaservicommemodule.Lesanimauxscutdivisdsen3groupes.iegroupefantome;iegrooveischemiquedecontrblecUl'donneseulementduserumphysiologique,etiegroupetraitsoUondonnel'anticorpsmonoclonalanti--P--selectine(Mab)ddosedeZing/kg15minutesavantlareperfusion.RdsultatsCommeresulta…     

邻苯二甲酸酐哮喘大鼠模型制备及其肺组织中细胞间粘附分子-1 mRNA的表达

目的:制备邻苯二甲酸酐(phthalic anhydride, PA)大鼠哮喘模型,探讨细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)与PA哮喘气道炎症的关系.方法:用PA免疫大鼠制备哮喘模型,观察哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞的变化及支气管肺组织的病理改变;用Northern杂交方法检测哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA的表达.结果:哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞数较对照组显著增加,支气管肺组织炎性细胞浸润程度较对照组增加,支气管粘膜皱缩加重;哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA 比对照组表达增高,表达量与炎性细胞的改变呈显著正相关.结论:哮喘大鼠肺组织ICAM-1 mRNA表达量的增高不仅与哮喘气道炎症的发生有关,还与哮喘气道炎性细胞浸润的严重程度有密切关系.     

体外受精与胚胎移植研究进展

作者综述我院自１９９０年建立体外受精与胚胎移植技术应用于治疗不育的研究。目前本技术已处于国内领先地位，技术的改进着重于如下几方面：①改进治疗周期超排卵方案，提高卵子受精率；②改良选择性减胎术，达到准确、简便、安全，减少多胎妊娠；③应用体外受精与胚胎移植（ＩＶＦ－ＥＴ）技术为卵巢早衰患者及遗传病夫妇提供赠卵、赠胚胎治疗的方法；④建立第２代ＩＶＦ－ＥＴ技术，应用卵母细胞单精显微注射技术（ＩＣＳＩ）治疗严重男性因素与不明原因不育，同时展望人工辅助破‘壳’（ａｓｉｓｔｅｄｈａｔｃｈｉｎｇ）和提高子宫内膜对胚胎的接受性及提高种植率和妊娠率，利用显微注射操作技术发展种植前的诊断。     

MMP-1及TIMP-1在异位内膜组织中的表达

①目的　探讨基质金属蛋白酶 1(MMP 1)及其抑制剂 (TIMP 1)在子宫内膜异位症 (EMs)发生发展中的作用。②方法　采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶染色法 (S P法 )检测 5 1例EMs病人的异位内膜和在位内膜及 30例正常子宫内膜中MMP 1、TIMP 1的表达 ;并利用银染的方法观察嗜银网状纤维的完整性及细胞外基质的崩解情况。③结果　在异位内膜组织中MMP 1均呈高表达状态 ,而TIMP 1则均呈低表达 ,与正常子宫内膜和EMs在位内膜相比 ,差异有显著性 (H =9.86～ 13.6 2 ,P <0 .0 1) ,而且失去二者在正常内膜组织中表达的周期性变化。但二者在EMs、在位内膜与正常子宫内膜之间则无显著差别 (P >0 .0 5 )。④结论　异位内膜组织中MMP 1高表达 ,TIMP 1低表达 ,MMP 1/TIMP 1比例失衡 ,使异位内膜组织具有更强的侵袭能力 ,可能在EMs的发生发展中起重要作用     

PGE1对糖尿病肾病血清黏附因子和Ⅳ型胶原的影响

目的探讨前列腺素E1(PGE1)对早期糖尿病肾病血清黏附因子(sICAM-1)和Ⅳ型胶原(C-IV)的影响。方法对136例早期糖尿病肾病,在常规治疗基础上,加用PGE110μg 生理盐水100 ml,每日1次,静脉注射,连续14 d。观察治疗前后sICAM-1和C-IV的变化,并与对照组比较。结果治疗后s ICAM-1、尿白蛋白排泄率(UAER)、C-IV的水平与对照组比较有显著差异(P<0.01,P<0.05)。结论PGE1可有效降低早期糖尿病肾病患者sICAM-1和C-IV。从而起到改善和保护肾脏功能的作用。     

胚泡着床前后小鼠子宫内膜中LN和FN的表达

选用未经产雌性昆明种小鼠,取未孕及孕４～８ｄ 的子宫作切片,用免疫组化染色及图像分析法观察着床前后子宫内膜中层粘连蛋白（ＬＮ）和纤连蛋白（ＦＮ）的分布状况及含量变化,探讨它们与着床过程的相关关系。结果显示,在未孕子宫,ＬＮ 主要分布于各类上皮基膜中,ＦＮ 存在于基膜和基质细胞之间;着床前后,各类上皮基膜中ＬＮ、ＦＮ 含量明显增多,与未孕小鼠差异有显著性。随着蜕膜发育,蜕膜细胞周围出现ＬＮ 和ＦＮ,呈不甚连续的线样膜环绕蜕膜细胞。ＬＮ 及ＦＮ 在着床前后子宫内膜中表达增多,提示这两种物质与着床过程及蜕膜细胞的功能有关     

围生期窒息新生儿血清sICAM-1水平的动态变化及其临床意义

目的　了解围生期窒息新生儿血清 s ICAM-1水平的动态变化。方法　采用双抗体夹心 ELISA方法 ,检测 41例围生期窒息新生儿及 11例正常新生儿生后 0、3、7d血清 s ICAM-1的水平。结果　 41例围生期窒息新生儿中 2 6例并发缺氧缺血性脑病 ,其中轻度 12例 ,中度 8例 ,重度 6例。对照组血清 s ICAM-1水平随日龄增加呈上升趋势 ,重度 HIE组水平均显著高于对照组、单纯窒息组及轻度、中度 HIE组的水平 (P<0 .0 5或 0 .0 1) ,其余 4组间的水平相差无显著性。结论　 ICAM-1参与 HIE的发病过程 ,血清 s ICAM-1水平与脑损伤的程度及预后密切相关