Th1/Th2类细胞因子对哮喘大鼠脾淋巴细胞神经生长因子表达的影响

目的:初步探讨IL-13和IFN-γ对支气管哮喘大鼠脾淋巴细胞神经生长因子NGF表达的影响.方法:建立Wistar大鼠哮喘模型,分离脾淋巴细胞并培养,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法测定NGF mRNA的基础,12 h, 24 h水平,并观察予以干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-13(IL-13)干预后NGF mRNA表达的情况.结果:哮喘大鼠脾淋巴细胞在基础状态下具有表达NGF mRNA的功能,并在ConA刺激下呈时间依赖性增强,IL-13组随着干预时间的延长基础NGF mRNA表达量逐渐升高,呈现时间和浓度依赖性,并且至12 h后分别高于各时间点的空白对照组(均P＜0.01).而随着IFN-γ干预浓度的依次增高,NGF mRNA表达相对值却逐渐降低,也表现出浓度和时间依赖特征.结论:在哮喘中Th2类细胞因子IL-13可上调淋巴细胞NGF mRNA表达,Th1类细胞因子IFN-γ可下调淋巴细胞NGF mRNA表达,两者均呈时间和浓度依赖性;Th1/ Th2类细胞因子免疫失衡可能通过调控NGF mRNA表达间接促进其诱导神经源性气道炎症.     

Alzheimer病患者外周血Th1/Th2亚群5种细胞因子的基因表达

目的:检测Alzheimer病(AD)患者外周血Th1/Th2亚群5种细胞因子的基因表达,探讨其在AD慢性病理过程中的作用?方法:应用RT-PCR反应体系分别检测AD患者?血管性痴呆(VD)患者和正常对照组外周血中IL-2?IL-4?IL-6?IL-10?IFN-γ 5种细胞因子的基因表达状况?结果:IL-2?IL-6的表达在AD患者明显上调,与VD组?对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);IL-4?IL-10?IFN-γ的表达各组间差异无统计学意义(P>0.05)?结论:Th1/Th2亚群分泌的5种细胞因子可以作为检测AD的外周血免疫标记物?     

Th1/Th2在乳腺癌组织中的表达与意义

目的:探讨Th1类细胞因子IL-2,IFN-γ及Th2类细胞因子IL-4和IL-10在青年和老年乳腺癌组织中的表达模式.方法:采用免疫组化方法检测105例良恶性乳腺组织中IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10的表达,并比较其阳性表达率和程度的差异.结果:青年组与老年组乳腺癌组织中Th1类细胞因子IL-2,IFN-γ阳性表达率较乳腺纤维瘤组显著降低,Th2类细胞因子IL-4和IL-10阳性表达率较乳腺纤维瘤组升高,差异有统计学意义(P＜0.01).IL-2的表达水平在青年组与老年组随乳腺癌临床分期的增加而降低(P＜0.05),青年组IL-2的表达水平低于老年组,差异有统计学意义(P＜0.01);在青年组和老年组中腋窝淋巴结阳性组IL-4的表达水平均明显高于淋巴结阴性组(P＜0.01).结论:乳腺癌癌组织中呈现Th2型免疫反应优势状态,Th1/Th2平衡向Th2方向漂移.在青年乳腺癌组织中Th1/Th2的比值更低.这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一.IL-2和IL-4联合检测对评价患者机体免疫水平、判断预后具有重要意义.     

幼年型类风湿性关节炎病儿Th1/Th2应答状态研究

①目的　研究幼年型类风湿性关节炎 (JRA)病儿Th1 /Th2免疫应答状态。②方法　ELISA法测定35例JRA和 1 8例健康儿童γ 干扰素 (IFN γ)和白细胞介素 4 (IL 4 )诱生水平。根据临床亚型、不同病程、血清免疫球蛋白增高和抗核抗体存在与否进行比较。③结果　JRA病儿IFN γ诱生水平与正常对照组比较无明显差异(t=1 .5 8,P >0 .0 5 ) ,而IL 4水平显著高于对照组 (t=4 .36 ,P <0 .0 1 ) ,IFN γ/IL 4比值明显低于对照组 (t=2 .2 2 ,P <0 .0 5 ) ;各临床亚型间IFN γ和IL 4水平及IFN γ/IL 4比值比较无显著性差异 (F =0 .2 6～ 1 .5 3,P >0 .0 5 ) ;病程≥ 1年者IL 4水平明显高于 <1年者 (t=2 .6 4 ,P <0 .0 5 ) ,而IFN γ水平和IFN γ/IL 4比值比较无显著性差异 (t=0 .4 1、0 .86 ,P >0 .0 5 ) ;免疫球蛋白增高 (1种或多种 )组与正常组的IFN γ水平无明显差异 (t=0 .6 0 ,P>0 .0 5 ) ,而IL 4水平显著增高 (t=2 .89,P <0 .0 1 ) ,IFN γ/IL 4比值明显降低 (t=2 .5 4 ,P <0 .0 5 ) ;血清抗核抗体阳性组与阴性组比较 ,其IFN γ和IL 4水平及IFN γ/IL 4比值皆无显著性差异 (t=0 .5 2～ 1 .5 1 ,P >0 .0 5 )。④结论幼年型类风湿性关节炎存在Th2细胞免疫应答过强现象 ,各临床亚型间无明显差异。Th2细胞免疫应答过强     

子宫内膜异位症病人Th1/Th2型细胞因子模式及意义

目的 探讨子宫内膜异位症(EM)病人外周血中辅助性T淋巴细胞(Th)1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)及Th2类细胞因子白细胞介素6(IL-6)偏移及其在疾病过程中的意义,从免疫学角度探讨EM的发病机制.方法 应用酶联免疫吸附法(ELASA)检测30例EM及20例正常妇女血液IFN-γ及IL-6的水平,并分析Th1/Th2 比值变化.结果 EM病人血液中IL-6水平与对照组比较显著升高(P<0.01);EM病人Ⅲ～Ⅳ期血液中IL-6的水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05);EM组IFN-γ/IL-6比值明显低于对照组(P<0.05),随着临床分期的加重IFN-γ/IL-6比值下降越明显(P<0.05).结论 EM病人Th2类细胞因子明显增多并占优势漂移的现象,Th1/Th2比值与疾病的分期相关,Th1/Th2细胞因子失衡在EM的发病机制及疾病进展中可能具有重要的作用.     

系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞因子的研究

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)水平,探讨SLE患者的发病与Th1/Th2优势活化状态之间的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定35例SLE患者和15名健康志愿者PBMC培养上清IL-4、IL-10、IL-2、IFN-γ水平。结果活动期SLE患者IL-4、IL-10水平明显高于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。活动期SLE患者IL-2水平明显低于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。IFN-γ水平3组间差异无显著性(P>0.05)。结论Th2型细胞因子介导的免疫应答在活动期SLE的发病机制中占主导地位。活动期SLE患者存在分泌型Th1细胞因子的细胞活化减弱。     

妊娠期高血压患者外周血Th1/Th2细胞因子的表达

目的:分析患妊娠期高血压疾病(PIH)妇女外周血γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平,计算IFN-γ/IL-4值变化.方法:连续选择近期住院确诊的PIH妇女27例,进行外周血IL-4、IFN-γ浓度及IFN-γ/IL-4比值等指标检测,并与同期住院的正常妊娠者(对照组,20例)测试结果比较.结果:P...     

Th1/Th2平衡在多器官功能障碍综合征发病过程中的变化

目的:从Th1/Th2平衡角度出发探讨多器官功能障碍综合征(MODS)的发病机制.方法:将体质量22～30 kg健康雄性家猪随机分为MODS组和正常对照组,每组各9只.采用失血性休克复苏 内毒素血症复合因素建立猪MODS模型.MODS组于放血前,内毒素注射前,内毒素注射后1、24、48及72 h留取血标本,动物死亡后留取脾脏标本.正常对照组同时间点留取标本.ELISA法检测血清IFN-γ和IL-4含量变化;实时荧光PCR法测定脾脏IFN-γ、IL-4 mRNA水平及Th1/Th2细胞特异性转录因子T-bet和GATA-3 mRNA的含量变化.结果:内毒素注射后1 h血清IFN-γ和IL-4浓度达到峰值,后IFN-γ浓度下降较快,内毒素注射后72 h IFN-γ/IL-4比值显著低于基础值水平(P=0.000);MODS组脾脏IFN-γ/IL-4 mRNA比值降低明显,与对照组比较差异具有显著性(P=0.020);脾脏T-bet/GATA-3比值也显著低于对照组(P=0.038).结论:MODS发生过程中存在Th1向Th2漂移现象.     

乌体林斯对哮喘病儿外周血Th1/Th2功能的影响

目的观察乌体林斯(简称U)对哮喘病儿外周血Th1/Th2功能平衡的影响。方法分离20例哮喘发作期病儿和15例健康儿童外周血单个核细胞(PBMC),分别经植物血凝素(PHA组)、PHA U1(草分支杆菌混悬物浓度为1×10-2g/L,U1组)、PHA U2(草分支杆菌混悬物浓度为1×10-3g/L,U2组)刺激后,对培养上清液中白细胞介素4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)含量进行测定。结果哮喘病儿PBMC经PHA诱生后IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值明显低于健康儿童组(t=3.05、4.16,P均<0.01);而IL-4水平则明显升高(t′=11.18,P<0.01)。哮喘病儿U1组PBMC诱生IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值明显高于单纯PHA组(F=33.69～262.63,q=7.34～31.76,P均<0.01),也明显高于U2组(q=4.96～21.41,P均<0.01);哮喘病儿U2组PBMC诱生IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值明显高于单纯PHA组(q=10.35、7.38,P均<0.01),而IL-4水平略低(q=3.29,P<0.05)。结论乌体林斯(1×10-2g/L)可明显提高哮喘病儿PBMC诱生IFN-γ和IL-4水平,尤以前者为著,在促进Th细胞成熟的同时上调Th1功能,改善哮喘病儿Th1/Th2功能失衡状态。     

粉尘螨抗原对脐血Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的观察新生儿脐血单个核细胞（CBMCs）Th1/Th2细胞因子的表达,探讨家族过敏史和过敏原刺激对健康足月新生儿Th1/Th2细胞偏移的影响。方法健康足月新生儿30名,家族过敏史阳性组（AD组）及阴性组（对照组）各15名,分离CBMCs,经不同浓度的粉尘螨刺激后,用ELISA法检测培养上清中白细胞介素-4（IL-4）和γ-干扰素（IFNγ-）的含量。结果 （1）低浓度粉尘螨刺激后,与对照组相比,AD组IL-4显著增高,IFNγ-显著降低（均P〈0.01）;（2）高浓度粉尘螨刺激后,与对照组相比,AD组IL-4显著增高（P〈0.01）,但IFNγ-无明显变化（P〉0.05）。（3）对两组新生儿随访观察1年,AD组过敏性疾病发生率明显高于对照组（P〈0.05）。结论母亲有家族过敏史的新生儿,CBMCs呈现Th2相对优势,提示家族过敏史对新生儿Th1/Th2平衡存在影响。     

经皮电刺激促进坐骨神经损伤大鼠脊髓GAP—43mRNA的表达

目的：观察经皮电刺激对坐骨神经损伤大鼠的脊髓中神经生长相关蛋白－43（GAP－43）mRNA表达的影响。方法：60只Wistar大鼠制成坐骨神经损伤模型,经皮电刺激治疗后,用原位杂交技术观察坐骨神经相应脊髓节段GAP－43mRNA的表达。结果：电刺激组第1d阳性细胞数增多,7d达高峰,14d后明显减少,28天后基本未见阳性细胞存在;模型组第1d至第7d持续阳性细胞数增多,14d略减少,28d后仍可见阳性细胞存在。结论：电刺激能缩短GAP－43mRNA表达时间,有利于突触重建。     

脱细胞异种神经移植体复合BMSCs修复大鼠坐骨神经缺损的研究

目的：对脱细胞异种神经的生物相容性进行评价,证明应用其复合BMSCs促进神经再生和功能恢复的效果。方法：采用化学萃取法制备兔的脱细胞神经,应用扫描电镜观察其超微结构;将BMSCs种植到神经支架构建神经移植体,体外培养后观察细胞形态;用构建的异种神经移植体桥接大鼠坐骨神经缺损,术后8周,检测胫前肌湿重比率,对再生神经进行组织形态学分析;并应用免疫荧光染色检测神经内NGF的表达。结果：脱细胞异种神经较完整地保留了天然立体的施万细胞基底膜管结构,完全地移除了神经内的施万细胞、轴突和髓鞘成分;在体外培养中支持种植的BMSCs黏附和生长。神经移植术后,与单纯异种脱细胞神经移植组相比,复合BMSCs的异种神经移植体移植能使胫前肌湿重比率增加、有髓神经纤维数目、髓鞘厚度和轴突直径增加;增加再生神经内NGF的表达。结论：异种脱细胞神经移植体具备天然的立体结构,移除了施万细胞、髓鞘等抗原成分;神经支架无细胞毒性,具有良好的细胞相容性;复合BMSCs的异种神经移植体可显著地促进神经再生及功能恢复。     

睫状节神经营养因子在大鼠损伤坐骨神经中的表达变化

目的：探索坐骨神经损伤后睫状节神经营养因子ＣＮＴＦ的表达变化。方法：采用抗ＣＮＴＦ抗体以Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ方法检测大鼠损伤两周坐骨神经远侧端和正常神经中ＣＮＴＦ表达。结果：正常神经组织中在２２ｋＤ处有特异性ＣＮＴＦ阳性反应条带,在损伤两周的坐骨神经远侧端中尚未出现ＣＮＴＦ阳性反应条带。结论：正常成年鼠坐骨神经中ＣＮＴＦ表达处于一定的水平。神经损伤两周后的坐骨神经远侧端中ＣＮＴＦ表达明显减少。     

远志对DPN大鼠坐骨神经Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:探讨远志对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠坐骨神经Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法:Wistar大鼠随机分为正常组、DPN模型组和远志治疗组.DPN模型组和远志治疗组大鼠均建立DPN大鼠模型.DPN成模后,远志治疗组大鼠给予远志灌胃6周.采用HE染色法观察各组大鼠坐骨神经形态结构的变化,免疫组织化学染色法检测各组大鼠坐骨神经Bcl-2和Bax蛋白的表达情况.结果:与正常对照组大鼠比较,DPN模型组大鼠坐骨神经的形态结构发生明显病理变化;并且,Bcl-2蛋白的表达明显降低,Bax蛋白的表达明显升高(P＜0.05).与DPN模型组比较,远志治疗组大鼠坐骨神经的形态结构明显改善;并且,Bcl-2蛋白的表达明显升高,Bax蛋白的表达明显降低(P＜0.05).结论:远志可通过升高Bcl-2表达、降低Bax表达,抑制神经纤维变性,对DPN大鼠坐骨神经损伤具有保护作用.     

大鼠坐骨神经损伤后脊髓后角内一氧化氮表达变化

目的对坐骨神经损伤引起的脊髓后角NADPH-d阳性神经元及纤维表达、分布变化进行形态学观察，探讨NO在脊髓内痛觉调制过程中的作用。方法采用NADPH-d酶组织化学方法。动物坐骨神经切断，术后分别存活3、7、14、21d。取L4～5脊髓节段观察NADPH-d阳性神经元、神经纤维变化，并对其数量、光密度进行定量分析。结果①脊髓后角浅层NADPH-d阳性神经元增多，反应增强。②脊髓后角Ⅱo层内出现NADPH-d阳性细胞、纤维。结论NO参与神经损伤后脊髓后角内痛觉调制，提示NO在痛觉过敏、异常疼痛产生机制中发挥重要作用。     

坐骨神经损伤后生长相关蛋白表达的免疫组化研究

目的：探讨周围神经在损伤后远侧端生长相关蛋白（GA9－43）的表达。方法：切除SD大鼠－侧坐骨神经5mm,造成坐骨神经缺损伤模型,两周后用免疫组化法检测损伤远侧端神经组织中GAP－43的表达,结果：损伤神经远侧端雪旺细胞表可见棕色阳性产物,而正常神经组织中未见阳性反应产物。结论：损伤神经远侧端雪旺细胞中可见GAP－43表达,在正常神经组织中GAP－43低表达或无表达。     

低强度脉冲超声对大鼠糖尿病周围神经病坐骨神经p53表达的影响

目的：探讨低强度脉冲超声（LIPUS）对大鼠糖尿病周围神经病（DPN）模型中坐骨神经中转录因子p53表达的影响。方法：大鼠随机分为正常组、模型组和LIPUS组。链脲佐菌素腹腔注射制备实验DPN大鼠模型,LIPUS组以低强度脉冲超声进行体外治疗,造模后4周检测各组血糖及坐骨神经传导速度,实时荧光定量PCR检测坐骨神经P53 mRNA表达。结果：与正常组比较,模型组和LIPUS组血糖显著增高,神经传导速度显著降低,坐骨神经p53 mRNA表达增加（ P＜0．05）。与模型组比较,LIPUS组神经传导速度显著增高,坐骨神经P53 mRNA表达显著下降（ P＜0．05）。结论：低强度脉冲超声可通过抑制受损神经中轴突抑制因子P53表达,促进糖尿病周围神经病坐骨神经功能恢复。     

人工组织神经移植物桥接狗缺损坐骨神经后腓肠肌内琥珀酸脱氢酶表达含量的变化

目的：了解人工骨组织神经移植植物辅加神经再生索桥接狗坐骨神经缺损后相应腓肠肌形态与酶的变化。方法:人工组织神经桥接修复狗的坐骨神经30mm缺损为实验组，自体神经桥接或神经缺损的为对照组I或II.术后6个月时取腓肠肌，按Nitro-BT法显示琥珀酸脱氢酶光镜标本。图像分析仪分析琥珀酸脱氢酶（SDH）染色后灰度值及腓肠肌截面积。结果：实验组腓肠肌SDH的灰度值及截面积均与对照组II有明显差别，而与对照组I无明显差别。结论：人工组织神经修复缺损神经后，重新支配靶器官，使腓肠肌萎缩明显减弱，琥珀酸脱氢酶活性的下降也明显减轻。     

HRP逆行示踪对人工组织神经移植物辅加NRF修复大鼠坐骨神经缺损的评价

目的：用HRP逆行示踪法评价人工组织神经移植物辅加神经再生素修复大鼠周围神经缺损的效果。方法：壳聚糖套管和聚乙醇酸纤维组成人工组织神经移植物并辅加神经再生素，修复大鼠的坐骨神经缺损（10mm)。术后24周时，进行大鼠HRP逆行示踪试验。结果：脊髓及背根神经节中均出现数量不等的被HRP标记的神经元胞体。结论：人工组织神经移植物辅加神经再生素对缺损的神经修复具有良好的桥梁作用和促神经生长作用。     

大鼠坐骨神经损伤后肌肉组织乙酰胆碱酯酶的变化

目的：探讨坐骨神经损伤后不同时间点大鼠小腿肌肉组织乙酰胆碱酯酶（AChE)的变化。方法：建立大鼠坐骨神经损伤的动物模型，制备特异识别神经系统AChE的单克隆抗体，以该抗体作为一抗，酶标羊抗鼠IgG作为二抗，建立酶联免疫检测方法；测定正常对照组，坐骨神经损伤后0．5，3，12h组，坐骨神经断点，胫神经及腓总神经所支配的肌肉组织AChE含量，结果：坐骨神经损伤0．5h后，断点处AChE含量最高，随时间延长逐渐降低，胫神经，腓总神经支配的肌肉组织中AChE 含量0．5h 时最低，3h时最高，12h时降低，结论：坐骨神经损伤后，断点及其远端神经支配的肌肉组织中AChE的变化呈时间依赖性，但变化不一。