应用rDNA ITS2区段基因序列分析对浙江省传疟媒介的鉴定

目的 对浙江省传疟媒介种类进行鉴定，以指导疟疾防治工作。方法 针对媒介按蚊核糖体核酸内转录间隔2（rDNAITS2）区段基因特征，应用PCR基因鉴别技术，对浙江省现场捕捉的按蚊与嗜人按蚊、八代按蚊、中华按蚊、雷氏按蚊实验室标本进行基因鉴别和比较。结果 浙江省现场捕捉的按蚊DNA样本的PCR扩增产物均为250bp，与实验室中华按蚊标本一致。结论 中华按蚊目前仍是浙江省的主要传疟媒介，现场调查未发现嗜人按蚊。     

一种简便的赫坎按蚊复合体近缘种按蚊基因鉴别新技术

目的 建立一种能鉴别赫坎按蚊种团内不同近缘种按蚊的基因鉴别技术。方法 依据赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊4种近缘种按蚊ITS2区段的基因序列特征设计特异性引物，建立一种能鉴别赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊4种近缘种按蚊的简便的PCR基因鉴别技术，并采用传统的形态学分类方法和新建立的基因鉴别技术对从辽宁、河南省以及在朝鲜现场捕获的按蚊分别进行了形态学和基因鉴别及比较。结果与结论 新建立的基因鉴别技术能准确鉴别赫坎按蚊种团内中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊4种近缘种按蚊。具有比传统的形态学分类方法准确，比已有的PCR-RFLP蚊种基因鉴别技术更简便、价廉和省时的特点。适用于不同的复合媒介地区的疟疾媒介调查和监测。     

嗜人按蚊和中华按蚊的ITS2区段序列分析和比较

目的 分析和比较不同地区中华按蚊和嗜人按蚊的ITS2区段的基因特征。方法 采用特异性ITS2引物对嗜人按蚊和中华按蚊江苏实验株以及从湖北省和越南现场捕获的嗜人按蚊和中华按蚊进行PCR扩增、克隆并对ITS2区段序列进行分析。结果 嗜人按蚊实验株的ITS2区段序列有452bp，与嗜人按蚊现场株的ITS2区段序列相同，中华按蚊实验株的ITS2区段序列有472bp，与中华按蚊现场株的ITS2区段序列也相同；但嗜人按蚊和中华按蚊的ITS2区段基因序列存在明显差异并存在不同的限制性内切酶位点。结论 可依据中华按蚊和嗜人按蚊的ITS2基因序列内限制性内切酶切位点不同的基因特征，采用PCR-RFLP技术建立中华按蚊和嗜人按蚊基因鉴别技术。     

四川省媒介按蚊地理分布与疟疾流行的关系

本文根据历年来媒介按蚊调查结果和疟疾流行情况，将四川省疟疾流行区划分为：①中华按蚊分布区；②中华接蚊、嗜人按蚊分布区；③嗜人按蚊分布争议区。讨论了媒介披蚊不同地理分布、喀人按蚊在人房中所占不同比例对疟疾流行程度和防治效果的影响。     

四川省疟疾流行情况与媒介按蚊种群的关系

四川省疟疾经40余年防治,其流行发生了很大变化。它既反映了防治效果,也反映了与媒介的关系。目前96.8％的病例分布于以嗜人按蚊为主要媒介的地区,其中55.5％的病例又集中在嗜人按蚊在人房按蚊组成中比例较高的少数县,它仅占总县数的7.5％。结果显示疟疾流行与媒介按蚊种群有密切关系。     

四川省基本灭疟地区近四年疫情分析

本文分析了我省已基本消灭疟疾的79个县近四年疫情,以嗜人按蚊为主要媒介的29个县,发病2207人,内源性病人占55.2％。病灶多为活动性,发病多集中于流行盛期,显示传播未阻断。以中华按蚊为媒介的50个县,发病1749人,主要为外源性病人,内源性病人占4.8％,病灶点多为非活动性,病例呈现高度分散,显示传播已基本阻断。     

PCR-RFLP技术用于鉴别赫坎按蚊复合体近缘种按蚊的研究

目的区别赫坎按蚊种团内近缘种.方法应用聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)技术,对辽宁省现场捕获的按蚊用特异性ITS2引物进行PCR扩增,限制性内切酶RsaⅠ和HinfⅠ消化,琼脂糖凝胶电泳分析.结果中华按蚊的PCR扩增产物能被限制性内切酶RsaⅠ酶切成350 bp和200 bp两条酶切DNA条带;嗜人按蚊核糖体DNA(rDNA)的PCR扩增产物能被限制性内切酶HinfⅠ酶切成410 bp的酶切DNA条带; 雷氏按蚊的ITS2基因PCR扩增产物能分别被限制性内切酶RsaⅠ和HinfⅠ酶切,分别显示350 bp和400 bp的酶切DNA条带;八代按蚊的PCR扩增产物没有显示明显的限制性内切酶RsaⅠ或HinfⅠ酶切条带.结论依据rDNA的ITS2区段基因特征建立的PCR-RFLP技术可用于鉴别赫坎按蚊种团的中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊4个近缘种按蚊.     

巢氏PCR判定西藏疟疾流行区传疟媒介

目的确定西藏墨脱县疟疾流行区的疟疾传播媒介。方法根据2005、2006和2007年疟疾发病情况,在墨脱县选择了3个疟疾发病较高的自然村,采用人诱、牛诱、灯诱及清晨人房全捕等方法捕获成蚊,经形态学鉴定后麻醉处死,密封干燥,带回实验室-20℃冻存备用,采用混合样本法随机抽取10只多斑按蚊复合体为一份混合标本,提取蚊虫DNA。根据文献采用巢氏PCR扩增疟原虫小亚单位核糖体脱氧核糖核酸(SSUrDNA),并对阳性结果克隆测序,比对证实。结果共捕获按蚊5345只,其中多斑按蚊复合体5190只,带足按蚊155只,提取的360份多斑按蚊复合体混合样本DNA中发现子孢子阳性扩增样品2份,种型鉴定2份阳性混合样本均为伪威氏按蚊,PCR产物经克隆测序,NCBIBLAST同源性比对证实为疟原虫SSurDNA基因片段。结论多斑按蚊复合体中的伪威氏按蚊为西藏林芝疟疾流行区的传疟媒介。     

1989～2003年江苏省疟疾流行态势分析

目的了解江苏省疟疾控制后的流行特点,为制定防治对策提供依据.方法收集全省各县1989～2003年疟疾疫情资料,对不同年份、不同地区的发病率或阳性率进行相关分析或显著性检验.结果全省疟疾疫情呈下降趋势,疫情出现波动与局部疟疾暴发有密切关系.2003年复媒介地区发病率为0.32/万,单一中华按蚊区发病率为0.06/万,前者发病率明显高于后者(P＜0.01).本地居民发热病例血检阳性率为0.06%,流动人口发热病人血检阳性率为0.55%,后者明显高于前者.间接荧光抗体(IFA)阳性率与发病率呈正相关.结论江苏省复媒介地区疟疾潜在流行的危险性仍较高,控制局部暴发点是当前的主要任务;必须加强对流动人口和媒介的监测力度.     

福建省不同地理株白纹伊蚊rDNA ITS2基因多态性分析

目的探讨福建省不同地理环境白纹伊蚊rDNA ITS2基因序列特征。方法在闽东福鼎市、闽北武夷山市、闽中涵江区和闽南东山县分别现场采集5个点的白纹伊蚊幼虫,实验室饲养,收集羽化成蚊,用75%酒精-20℃保存,PCR特异扩增白纹伊蚊rDNAITS2,用生物信息系统进行白纹伊蚊rDNAITS2基因多态性的分析。结果 PCR特异扩增福建省4个不同地理环境白纹伊蚊rDNA ITS2,在琼脂凝胶电泳上获得500bp左右的扩增片段。序列分析福建不同地理环境的白纹伊蚊在rDNA ITS2表现了基因的多态性,其rDNA ITS2基因单核苷酸存在转换、颠换和缺失,而同一地理环境的5只白纹伊蚊rDNA ITS2基因序列没有差异。结论福建省不同地理区域的白纹伊蚊在rDNA ITS2区表现的遗传多态性,可能与蚊虫生态环境如海拔高度、气温、降雨量和湿度等有一定的关系。     

江苏省疟疾传播媒介控制策略与研究

疟疾曾是江苏省流行的重大传染病之一,中华按蚊和嗜人按蚊是江苏省疟疾传播的主要媒介。经过几十年的积极防治,江苏省于2019年实现了消除疟疾目标,而媒介控制策略在全省消除疟疾过程中发挥了重要作用。本文回顾了江苏省主要疟疾传播媒介中华按蚊和嗜人按蚊的历史分布和生态习性以及不同防治阶段媒介控制策略和措施,并就媒介种类鉴定、品系构建、对疟原虫易感性、对杀虫剂抗性等媒介生物学及其防控研究概况进行了阐述。     

用PCR-RFLP技术鉴别嗜人按蚊和中华按蚊的研究

目的　依据嗜人按蚊和中华按蚊rDNA的ITS2区段基因特征 ,建立一种新的嗜人按蚊和中华按蚊基因鉴别技术。方法　对不同地区的嗜人按蚊、可疑嗜人按蚊和中华按蚊样本通过采用特异性ITS2 引物PCR扩增 ,限制性内切酶RsaI和HinfI消化 ,以及琼脂糖凝胶电泳分析进行PCR -RFLP基因鉴别。 结果　不同地区嗜人按蚊rDNA的ITS2 基因PCR扩增产物能被限制性内切酶HinfI酶切 ,并显示一条 4 5 0bp的酶切DNA条带 ;中华按蚊的ITS2 基因PCR扩增产物则能被限制性内切酶RsaI酶切 ,并显示 4 0 0bp和 2 0 0bp两条酶切DNA条带 ;辽宁可疑嗜人按蚊的PCR -RFLP结果与嗜人按蚊相同而广东珠海可疑嗜人按蚊的PCR -RFLP结果与中华按蚊相同。结论　依据rDNA的ITS2 区段基因特征建立的PCR -RFLP技术可用于嗜人按蚊和中华按蚊的基因鉴别。采用该PCR -RFLP基因鉴别技术发现辽宁可疑嗜人按蚊的基因与中国大陆的嗜人按蚊属同种 ,而广东可疑嗜人按蚊的基因与中华按蚊属同种。     

安徽省中华按蚊地区疟疾传播因素的调查

目的了解沿淮和淮河以北中华按蚊分布区疟疾流行因素和特征,为制定相应的防治措施提供依据。方法根据地理分布及疟疾发病情况,选择近年来疟疾发病率较高的怀远县褚集镇、固镇县新马桥镇、墉桥区大店镇、蒙城县立仓镇和涡阳县龙山镇作为疟疾监测点,调查居民疟疾发病情况,疟疾症状及防蚊措施情况,蚊虫密度及叮人率等相关因素。结果调查15个行政村,5 987户,24 433人,有纱门、纱窗690户,蚊帐6 727顶,蚊帐拥有率27.53%;使用蚊帐10 260人,蚊帐使用率为41.99%;经常使用蚊香及杀虫剂灭蚊户分别占68.33%和27.98%。血检疟原虫阳性1 308人(均为间日疟),平均阳性率为9.17%。2005年监测点共发生疟疾1 277例,比2004年同期上升48.48%。通宵帐内中华按蚊平均密度为0.42只/顶.次,平均叮人率为0.22只/人.夜;半通宵帐内人饵诱蚊密度为3.78只/h,叮人率为5.66只/人。疟疾病人发病后及时接受抗疟治疗者仅占3.97%,隔日治疗者占11.53%。结论沿淮和淮河以北中华按蚊分布区的疟疾疫情回升受多种因素影响,疟疾病人得不到及时发现和治疗是主要原因。     

2005-2009年江苏省传疟媒介调查

目的了解江苏省传疟媒介的种类、密度和季节变化,为控制疟疾流行提供科学依据。方法 2005-2009年,选择江苏省5个镇作为疟疾媒介监测点,采用夜间室外半通宵帐内人饵诱捕法和清晨蚊帐内（室内）搜捕法进行种群和季节变化调查。利用圆形分布法对5年逐月疟疾发病数据进行分析。结果 2005-2009年,江苏省5个疟疾媒介监测点仅捕获中华按蚊,中华按蚊密度高峰出现在7月上半月。疟疾发病高峰日出现于8月16日,疟疾病例分布与媒介的季节消长情况相吻合。结论疟疾防治中仍应继续加强媒介的监测与控制,警惕因中华按蚊密度升高而致疟疾疫情回升。     

江苏省全国疟疾监测点疫情分析

目的  了解江苏省疟疾的流行现状及其影响因素，掌握疟疾流行规律和趋势。方法根据疟疾发病情况，选择近年来发病率较高的睢宁县官山镇、铜山县棠张镇、泗洪县天岗湖镇、盱眙县仇集镇和宜兴市张渚镇作为疟疾监测点，调查居民疟疾发病情况、疟疾症状及防蚊措施、按蚊密度及叮人率等相关因素。结果2006年调查15个行政村，7 921户，27 903人，蚊帐拥有率为20. 29%；蚊帐使用率为34. 32%。2005年在清晨50顶蚊帐内捕获中华按蚊750只，平均叮人率为每夜0.17只／人；2006年在清晨50顶蚊帐内捕获中华按蚊1 927只，平均叮人率为每夜0. 38只／人。血检6 089人，平均血检率为2. 72%，检出疟原虫阳性29人，平均阳性率为0.47%。结论发热病人血检数量较少和镜检阳性率较低，中华按蚊密度增高是江苏省淮北地区出现疟疾疫情反复酌主要因素。     

Malaria transmission and major malaria vectors in different geographical areas of Southeast Asia

During the last decade, major progress in malaria control has been achieved in Vietnam, Laos and Cambodia. However, malaria is still a potentially fatal disease in some hilly-forested areas and continues to be endemic in a few coastal foci. To estimate the risk that stems from the major vectors after a decade of intensive malaria control, an entomological study based on human landing collections was conducted between April 1998 and November 2000 in six study villages (four in Vietnam, one in Cambodia and one in Laos) located in different physio-geographical areas. Five villages were selected in places where new cases of malaria still occurred. In the sixth village, in the northern hilly area of Vietnam, no case of malaria was detected during the past 3 years. In three study villages of the hilly forested areas of Cambodia and central Vietnam, Anopheles dirus A still played an important role in malaria transmission and maintain perennial transmission inside the villages despite its low density. Anopheles minimus A was found in all study villages except in the southern coastal village of Vietnam. Its role in malaria transmission, however, varied between localities and surveys. In one study village of central Vietnam it was almost absent (one specimen collected over 480 man nights), and in another village sporozoite positive specimens (2.8%) were only observed during the first two surveys whereas this species disappeared from the collections from November 1998 onwards (six surveys: 360 man nights). In the northern study site An. minimus A and C were found in all collections, but no local malaria transmission occurred. However, the constant presence of these two species associated with a high longevity (parous rate up around 80% and 65%, respectively), suggests that transmission can occur at almost any time if parasite reservoirs are reintroduced in the area. The proper management of malaria cases and population movement is, therefore, important to prevent outbreaks and the reintroduction of malaria in northern Vietnam. In the study site of the Mekong delta, An. sundaicus occurred at high densities (up to 190 bites/man/night). The recent changes in land use from rice cultivation to shrimp farming probably explains the increase of this brackish water breeding species during the study period. However, none of the 11,002 specimens was positive for Plasmodium circumsporozoite protein (CSP). The relative low survival rate as estimated by the parous rate (around 47%) may reflect its low vectorial status that could explain the very low malaria incidence (1.9 case/100 persons/year) in this study site. A calculated sporozoite rate of maximum 1/300,000 is enough to explain this low malaria incidence. Despite the successes in malaria control, the vector An. dirus A continues to play an important role in malaria transmission, whereas An. minimus A showed temporal and spatial variation in its role as vector. The role of An. sundaicus as vector could not be confirmed because of the low incidence in the coastal study village. Other Anopheles species may be locally involved, but in the five study villages where malaria is still present they probably do not contribute significantly to malaria transmission. The study also points towards the fact that in Southeast Asia it will become increasingly difficult to incriminate Anopheles species in malaria transmission while the risk for malaria transmission still persist.