肺腺癌A549细胞株细胞活力变化及GDNF表达

目的探讨GDNF在肺腺癌A549细胞株的表达及细胞活力变化.方法体外培养肺腺癌A549细胞株,观察细胞形态变化.取第1代培养后1 d,5 d两个时间点分别计数细胞;MTT检测两时间点细胞活力变化;用免疫组化检测两时间点GDNF免疫阳性细胞数量变化.并进行统计学分析.结果培养5 d组肺腺癌A549细胞株的细胞数量与1 d组相比,明显增加（P〈0.05）;5 d组的细胞活力较1d组明显下降（P〈0.05）;GDNF的表达百分数比较显示;5 d组亦较1 d组明显下降（P〈0.05）.结论体外培养肺腺癌A549细胞株随细胞增殖过程,活力逐渐下降,同时GDNF表达明显下调,提示细胞增殖和细胞活力不一定完全一致,GDNF减少可能与活力减少有关.     

亚砷酸和STI571单用及联用对K562细胞增殖和凋亡的影响

目的研究亚砷酸(As2O3)、STI571单用及联用对K562细胞增殖和凋亡的影响,为As2O3和STI571联合应用于临床提供理论依据.方法细胞增殖采用细胞生长及活力测定;细胞凋亡采用细胞形态、Annexin-V/PI双染实验、DNA的PI染色及DNA电泳等方法测定.结果在As2O3和(或)STI571作用下K562细胞生长受抑伴随活力下降,流式细胞仪检测出凋亡细胞百分率呈时间剂量依赖关系,基因组DNA电泳出现““梯““状条带.结论 As2O3和STI571均有抑制K562细胞增殖和诱导该细胞凋亡的作用,两药联用效果更佳.     

继发性甲状旁腺功能亢进症大鼠Gcm2的表达

目的研究继发性甲状旁腺功能亢进症大鼠在病程中Gcm2的表达变化以及与甲状旁腺细胞增殖变化之间的关系。方法5/6肾切除结合高磷饲养建立大鼠继发性甲状旁腺功能亢进症模型,第1、4、7、14、21、28天取甲状旁腺和血清标本,ELISA检测血清i-PTH浓度变化,Real-time PCR和Western blot检测Gcm2mRNA和蛋白表达的变化,免疫组化观察不同时间点甲状旁腺细胞的增殖变化情况。结果与假手术对照组比较,造模后模型组i-PTH显著升高(P<0.01);模型组Gcm2mRNA的表达随时间进展升高趋势逐渐明显,在第1、4、7天仅缓慢升高,无统计学差异(P>0.05),第14天始升高趋势明显(P<0.01),于第21天升高至最高点,为假手术对照组的9.92倍(P<0.01),第28天表达量稍有下降(P<0.01);模型组Gcm2的蛋白表达呈先下调后升高的趋势,第1天先有所下调,第4天进行性升高,第7天稍有波动,第14天后一直处于显著升高的表达状态,于第21天到达最高点,第28天稍有回落(P<0.01);模型组甲状旁腺细胞增殖在第1天便显著增强(P<0.01),第4天达最高(P<0.01),之后开始回落,至第14天回落到与假手术对照组相近的水平,一直到实验结束。结论在继发性甲状旁腺功能亢进症发病过程中,Gcm2的表达变化和甲状旁腺细胞增殖在时间进程上有相反的趋势,两者的交互作用可能是导致甲状旁腺功能亢进的部分原因。     

肿瘤细胞增殖标志物蛋白功能及意义的研究进展

肿瘤的发生是一个多步骤、多因素、多阶段和多基因改变的过程,其中细胞周期调控失常、细胞增殖失控被认为是肿瘤发生的重要机制.目前,用于研究细胞增殖状态的方法有丝分裂计数、流式细胞技术、细胞周期相关抗原的免疫组化等,它们各有优缺点,细胞周期相关抗原的免疫组化因其技术成熟、操作简便、指标可靠、可对常规石蜡切片作回顾性研究兼形态学评价,在临床应用和研究中使用广泛.     

EGF 对前列腺细胞中鸟氨酸脱羧酶基因表达的调控

目的 :探讨EGF诱导前列腺增殖的分子机理。方法 :以MTT法测定不同浓度表皮生长因子(EGF)对前列腺癌细胞PC 3的促增殖作用 ;以最适浓度EGF(5 0ng/ml)刺激该细胞 ,分别于 0、1、3、6、12、2 4h提取总RNA ,用斑点杂交法分析测定各组细胞中ODCmRNA丰度 ;用免疫组化及流式细胞术两种方法检测EGF刺激细胞后ODC蛋白表达量的变化。结果 :①EGF能促进PC 3细胞的增殖 ,而且随着EGF浓度的升高 ,细胞增殖活性增加 ;②斑点杂交显示 ,EGF刺激细胞后 3h ,ODCmRNA开始明显升高 ,12h达高峰 (约为 0h的 3.6 6倍 ) ,至 2 4h时有所降低 ;③免疫组化及流式细胞术检测显示 ,EGF刺激细胞 3d后ODC蛋白阳性细胞表达率明显升高。结论 :EGF诱导ODC基因表达可能是其促进前列腺细胞增殖的分子机制之一     

C6/SD大鼠胶质瘤模型的建立及C6胶质瘤细胞增殖动力学研究

目的建立C6/SD大鼠脑胶质瘤模型,并在其基础上研究C6胶质瘤细胞的增殖动力学.方法应用免疫组化、HE染色和流式细胞仪测定,观察C6胶质瘤细胞的增殖动力学指标,并进行相关性分析.结果肿瘤细胞接种2周后,肿瘤模型建立,HE染色见肿瘤细胞增殖活跃,各项指标显示该肿瘤增殖活性较强.     

MiR-105抑制肝癌细胞增殖能力的实验研究

目的 探讨miR-105对人肝癌细胞增殖的影响及可能机制.方法 改变QGY-7703及HepG2两种细胞的miR-105表达,细胞克隆形成实验和软琼脂增殖试验检测细胞增殖能力的改变;流式细胞仪检测细胞周期改变.结果 细胞克隆形成和软琼脂增殖实验显示,过表达miR-105可抑制QGY-7703及HepG2细胞增殖,反之抑制miR-105表达则促进细胞增殖;细胞流式检测显示miR-105过表达能促进两种癌细胞G0/G1期阻滞.结论 miR-105抑制肝癌细胞增殖,其机制与引起细胞周期阻滞有关.     

益肝康的药物血清对大鼠HSCs增殖及PDGF基因表达的影响

目的探讨中药复方益肝康抗肝纤维化的作用机制.方法给正常大鼠灌服益肝康,提取药物血清,温育体外培养的肝星状细胞.3H-TdR掺入法测定细胞增殖,流式细胞技术分析细胞周期,透射电镜观察细胞超微结构,免疫细胞化学法检测PDGF-BB蛋白表达.结果益肝康药物血清显著抑制肝星状细胞的增殖,可使细胞生长周期延长,细胞增殖、活力受抑,并明显抑制PDGF-BB蛋白表达.结论益肝康可抑制肝星状细胞增殖,对PDGF-BB表达的抑制作用可能是该方抗肝纤维化的主要机制之一.     

幽门螺杆菌相关性胃炎胃粘膜上皮增殖动力学研究

采用流式细胞术、核仁组成区嗜银蛋白(AgNORs)银染法和增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化技术,对幽门螺杆菌(HP)相关性胃炎患者HP清除前后胃粘膜上皮增殖动力学进行了对比观察。结果表明,HP阳性患者胃粘膜S期细胞比率、G_2、M期细胞和细胞增殖指数显著高于HP阴性患者;经治疗HP清除者,其胃粘膜上皮PCNA标记指数和Ag-NORs数量显著下降,而HP未被清除者则无明显变化。PCNA标记指数、AgNORs数量和细胞增殖指数呈显著正相关。提示PCNA免疫组化和AgNORs计数可作为评价胃粘膜上皮增殖活性的指标,HP感染所致的细胞增殖加速可能是其重要的促癌机理之一。     

应用流式细胞仪对肺癌细胞增殖活力的分析

本文应用流式细胞仪对35例肺癌、10例良性病变肺组织及10例正常肺组织的细胞增殖活力(S％)进行了分析,结果显示肺癌组织细胞增殖活力非常显著高于良性病变组,良性病变组细胞增殖活力亦非常显著高于正常组,提示检测细胞增殖活力对肺癌的诊断、筛选有一定意义。     

Intrathyroidal parathyroid adenoma or hyperplasia. An occasionally overlooked cause of surgical failure in primary hyperparathyroidism.

In six surgically proved intrathyroidal parathyroid tumors, neither thyroid scan nor gross appearance of the thyroid at surgery allowed reliable detection of parathyroid glands wholly within the thyroid. Preoperative selective catheterization of thyroid veins with radioimmunoassay for parathyroid hormone facilitated successful removal of hyperfunctioning intrathyroidal parathyroid tissue in all five cases in which it was performed.     

Ectopic parathyroid adenoma localised with sestamibi SPECT and image-fused computed tomography

Confident localisation of ectopic parathyroid adenomas, particularly those outside the neck, can be difficult. Even preoperative radiological imaging may not be helpful, as there are few characteristic findings. We report a case in which hyperfunctioning ectopic parathyroid tissue in the mediastinum was detected with technetium-99m-sestamibi single-photon emission computed tomography and accurately localised non-invasively with image-fused computed tomography. This technique directly modified management.     

正常人甲状旁腺的高频超声断层影像50例

目的：加强对甲状旁腺高频超声解剖特征及检查方法的认识,以利于甲状腺疾病的超声诊断和超声介入治疗。方法：随机选择50例血清甲状旁腺激素测值正常的志愿、年龄18～45岁,平均27岁。采用仪器噗MEDISON SA-6000C数字化彩超,探头频率10MHz。超声探头由甲状腺上极自上而下横切扫查至锁骨上方,辨认和检测甲状旁腺的位置、形态、大小、数目及内部回声。结果：50例受检经超声共检出甲状旁腺140枚,平均每例检出2.8枚。其中检出4枚8例（16%）;检出3枚33例（66%）;检出2枚7例（14%）;仅检出1枚2例（4%）。上甲状旁腺的总检出数78枚（55.7%）,其中右上腺体42枚、左上腺体36枚;下甲状旁腺总检出数62枚（44.3%）,其中右下腺体33枚、左下腺体29枚。结论：（1）高频超声可以检出正常甲状旁腺;（2）检出3枚腺体占多数,且上腺体的检出率高于下腺体,纵隔内腺体是超声检查盲区;（3）甲状旁腺体积小、呈圆或椭圆形、内部回声低以及特殊的解剖位置是超声检查的主要线索。     

40例标本甲状旁腺的解剖特点

目的：通过对甲状旁腺的解剖研究找出甲状旁腺的形态学特点。方法：对40例尸体的颈部进行解剖,对甲状腺周围组织结构和甲状旁腺的数目、分布及与周围结构的关系进行描述。结果：甲状旁腺平均（3.41±0.59）个/例,主要集中在甲状腺后内侧（即上甲状旁腺主要集中在甲状软骨下角区域,下甲状旁腺主要分布于甲状腺下极）。上甲状旁腺多位于喉返神经外侧（62.3%）,而下甲状旁腺多位于喉返神经内侧（68.1%）。结论：通过对甲状腺解剖结构和特点的探讨,进一步了解甲状腺的特点,为其临床工作提供思路。     

雌兔甲状旁腺的结构与位置

目的探讨雌兔甲状旁腺的结构与位置以及在不同年龄、不同生理状态下雌兔甲状旁腺的结构变化．方法用连续切片间隔贴片法对不同年龄及不同生理状态下的１５只雌兔甲状腺及其毗邻组织进行光镜观察．结果不同年龄及不同生理状态下，雌兔甲状旁腺光镜结构无明显差异，其实质均由主细胞组成．无嗜酸性细胞．从与甲状腺的关系，甲状旁腺的位置可分为三类，按例数多少，依次为甲状腺旁、甲状腺实质内及远离甲状腺．结论雌兔甲状旁腺光镜下仅由主细胞组成，不同年龄、不同生理状态下无明显差异，但是否有功能改变，尚待进一步的研究．甲状旁腺的位置变化较大，与其胚胎发生发育过程有明显关系．     

应用内窥镜和引流液甲状旁腺激素测定对单个原位保留的甲状旁腺的形态及功能的研究

  目的  探讨单枚甲状旁腺原位保留后的大体形态和功能转归变化规律，为临床上不同血供类型的甲状旁腺原位保留后的存活，功能及预后的判断提供理论依据。  方法  将行单侧甲状腺切除，术中因甲状旁腺的类型和血供原因行一枚甲状旁腺移植，原位保留另一枚甲状旁腺的42例患者作为研究对象。术后不同时段通过事先留置的引流管用0.5 cm的鼻内窥镜对目标甲状旁腺进行动态观察。术后第1、2、3天，每天上午7点至8点抽取引流液测dPTH。根据甲状旁腺原位保留的具体情况分为3个两两比较组，1组:腺体裸化面积≤50%和 > 50% 。2组:原位保留的甲状旁腺肉眼可辨认血管蒂的有无。3组:上甲状旁腺和下甲状旁腺。统计分析用SPSS17.0软件包。  结果  术后不同时间段通过内窥镜共观察目标甲状旁腺26枚，其中上甲状旁腺19枚，下甲状旁腺7枚。手术24 h后内窥镜找到并记录18枚，3枚上甲状旁腺未找到。48 h后找到并记录19枚。4枚上旁腺未找到。术中15枚上旁腺中14枚基本完整保留其血供，有肉眼可辨的血管蒂相连。1枚无明显血管蒂，该上甲状旁腺术后24 h、48 h观察腺体均为黑色，认为坏死可能，其余上旁腺无坏死征象。7枚下旁腺原位保留后裸化面积在50.0%～95.0%，只有2枚有明显的血管蒂，其余5枚无血管蒂，4枚腺体只有纤维组织膜与周围相连。术中原位保留后只有2枚有淤血表现，5枚术中变色不明显。24 h后观察到2枚有轻度淤血呈显淡褐色，1枚缺血呈黄白色；其余2枚色泽正常。48 h后2枚有轻度淤血呈显淡红褐色，5枚色泽正常，1枚缺血呈黄白色。实验数据统计学分析结果:（1）不同裸化面积，不同时间段dPTH两两比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。术中甲状旁腺原位保留后腺体裸化面积越大，则血供破坏越大，对腺体功能影响越明显。（2）血管蒂的有无，不同时间段dPTH两两比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。单从术后不同时间段dPTH实验数据来看，两组间存在差异（P < 0.05），有血管蒂组术后dPTH的值大于无血管蒂组，但统计学分析两者无统计学差异（P > 0.05），考虑是否和样本数量有关。 （3）上、下甲状旁腺，不同时间段dPTH两两比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。进一步证实上甲状旁腺较下甲状旁腺更易原位保留，相对来说腺体裸化少，对血供破坏小，周围小血管和结缔组织较完整。上甲状旁腺原位保留后对血供的影响明显小于下甲状旁腺，术后功能好于下位甲状旁腺。  结论  通过内窥镜观察和监测甲状腺术后dPTH水平和变化规律完成了对单枚原位保留的甲状旁腺术后近期形态和功能的研究。术后dPTH维持在一个高水平是原位保留的甲状旁腺存活的直接证据。甲状腺术后高dPTH说明了大多数情况下手术只是影响了PTH分泌入血的途径，原位保留的甲状旁腺仍能持续分泌大量的PTH。术后dPTH 在24 h后就降至低水平，提示原位保留的甲状旁腺损伤较重，血供破坏明显，甲状旁腺的分泌功能明显低下。     

良性甲状腺肿瘤手术中甲状旁腺保护的经验分析

目的:探讨良性甲状腺肿瘤手术中甲状旁腺的保护方式,减少术后低血钙的发生率。方法:回顾性分析2006年8月-2012年8月500例良性甲状腺手术的临床资料,随机分传统组和改进组,传统组保留甲状腺后被膜,未寻找甲状旁腺;改进组暴露并保护甲状旁腺,精细被膜解剖,尽量保存甲状旁腺的血供及完整性。术后动态观察监测血清钙变化情况。结果:在术中暴露并保护甲状旁腺组中,术后低钙血症的发生率较未寻找甲状旁腺组患者明显降低,两组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:在良性甲状腺肿瘤手术中,采用精细被膜解剖,暴露并原位保护好甲状旁腺及血供,可有效降低甲状旁腺的损伤。     

甲状旁腺超声成像的应用解剖

目的：在开展甲状旁腺疾病的超声诊断及甲状旁腺增生的超声介入治疗前，认识和掌握甲状旁腺的解剖学特征。方法：在20具成人尸体上观测甲状旁腺的位置、数目，甲状旁腺与甲状腺的毗邻关系；测量甲状旁腺的最大长度、宽度和厚度，并测量甲状旁腺距甲状腺后缘或上、下极之间的距离。结果：20例标本共解剖出65个甲状旁腺，平均每例3.25个；其中上、下甲状旁腺成对出现7例（35%），成对的上甲状旁腺并单侧下甲状旁腺4例（20%），成对的下甲状旁腺并单侧上甲状旁腺1例（5%），只解剖到上甲状旁腺和下甲状旁腺的分别为4例（20%）。结论：本研究所获得的相关结果，对应用超声检查甲状旁腺以及进行超声引导下穿刺甲状旁腺时设计安全有效的进针路径具有指导意义。     

甲状旁腺超声检测对尿毒症继发甲状旁腺功能亢进的诊治意义

目的:探讨高分辨率超声对尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进(甲旁亢)的诊断价值及与血清甲状旁腺素(PTH)间的相关性.方法:对55例尿毒症患者进行甲状旁腺的超声检查,并测定血清PTH、钙、磷水平.结果:55例中52例患者(94％)测到增大的甲状旁腺64枚,其中测及2枚以上者11例(20％).多枚甲状旁腺患者,甲状旁腺体积、血清PTH及磷水平均较单枚患者明显增加(P<0.01),上述指标随病程的延长变化更加明显;但血清钙水平并无明显变化.结论:尿毒症甲状旁腺的大小与血清PTH及磷水平存在一定关系.超声对尿毒症继发性甲旁亢患者的甲状旁腺肿大有诊断价值.     

甲状腺全切术后甲状旁腺功能减退的防治体会

目的 探讨甲状腺全切术后甲状旁腺功能减退的防治。方法 回顾性分析安徽省铜陵市人民医院2013年7月至2015年12月进行甲状腺全切手术的23例患者的病例资料。结果 23例患者术中辨认并原位保留上甲状旁腺共40个,上甲状旁腺均位于腺体背侧中上1/3区域,喉返神经入喉处上方、甲状软骨下角周围。术中原位保护下甲状旁腺共33枚,其中下动脉主干上方发现下甲状旁腺共18个,下方发现下甲状旁腺15个。结论 术中辨认及保护甲状旁腺血供是预防术后甲状旁腺功能减退的有效方法,术后补充钙剂可减少低钙血症的发生,利于甲状旁腺功能的恢复。