宫内生长迟缓对大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ受体mRNA表达的影响

目的探讨宫内生长迟缓(IUGR)对大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ受体mRNA表达的影响,为研究发育程序化成年疾病的发病机制提供实验依据。方法SD大鼠,孕期全程低蛋白(6%蛋白)营养,建立IUGR大鼠模型。选取IUGR雄鼠作为研究对象。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测生后1d和4周龄大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ-1型受体(AT1)亚型AT1A、AT1B及血管紧张素Ⅱ-2型受体(AT2) mRNA含量;放免法测定4周龄大鼠血浆中肾素、血管紧张素Ⅱ和醛固酮浓度。结果与对照组相比,IUGR新生鼠肾脏AT1A、AT2 mRNA表达明显下调(P均<0.05)。4周龄时,IUGR大鼠肾脏AT2 mRNA表达仍明显降低(P<0.05);AT1A mRNA表达虽较对照组增加,但差异无统计学意义(P>0.05);血浆中肾素、血管紧张素Ⅱ和醛固酮浓度两组之间无统计学意义(P>0.05)。结论肾内血管紧张素Ⅱ受体的异常表达可能是IUGR影响肾脏发育和引起高血压的分子机制之一。     

宫内生长迟缓对新生幼鼠胃肠发育的影响

为了解宫内生长迟缓（ＩＵＧＲ）新生儿胃肠发育状况，分别采用妊娠第１（Ｓ１）、第１７（Ｓ１７）日母鼠饥饿饲养，直至分娩以及正常妊娠第１７日子宫动脉结扎（ＵＡＬ）建立ＩＵＧＲ模型，运用生物体视学技术对新生幼鼠的胃肠组织切片定量分析。结果显示，小于胎龄（ＳＧＡ）新生幼鼠胃肠重量、长度及组织结构多项指标明显低于正常新生幼鼠；Ｓ１组胃肠发育受损程度轻于Ｓ１７组，两组小肠粘膜吸收面积无显著性差异；ＵＡＬ组胃肠重量、胃肠粘膜体积、小肠粘膜吸收面积低于Ｓ１７组；直线相关分析发现，ＳＧＡ新生幼鼠胃、肠重量与体重呈正相关，相关系数分别为０．６９及０．７３；而小肠长度以及胃肠相对重量与身长呈正相关，相关系数分别为０．６４及０．６８。提示：（１）ＩＵＧＲ对胎鼠胃肠发育产生了不良影响；（２）作为推测ＳＧＡ新生幼鼠胃肠发育状况的指标，身长优于体重；（３）ＩＵＧＲ发生时期、原因不同的ＳＧＡ新生幼鼠，可以出现不同的胃肠发育损害。     

血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ1型受体阻断剂--氯沙坦对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡程度的影响,分析促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2在该影响中的变化.方法 选24只雄性SD大鼠(8周龄),分为对照组、心衰组和氯沙坦干预组各8只.采用阿霉素腹腔注射造模,氯沙坦干预组同时灌胃给氯沙坦连续6周.透射电镜观察心肌超微结构改变,检测血清中CPK、CK-MB及LDH的含量.应用原位脱氧核糖核酸酶末端标记法(TUNEL法)检测大鼠心肌细胞凋亡,免疫组化法检测大鼠心肌Bax、Bcl-2蛋白的表达.结果 心衰组血清CPK、CK-MB、LDH活性和心肌细胞凋亡指数均较对照组升高,氯沙坦干预组血清中CPK、CK-MB和LDH的活性和心肌细胞凋亡指数均较心衰组降低,并可见凋亡小体.心衰组和氯沙坦干预组心肌细胞Bax和Bcl-2蛋白表达显著高于对照组;与心衰组相比,氯沙坦干预组明显下调Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达.结论 心力衰竭过程中发生了心肌细胞凋亡,氯沙坦可明显提高Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达,从而达到有效抑制心肌细胞凋亡,减轻心肌超微结构损伤,减少心肌酶外漏,具有积极逆转心肌受损、改善心力衰竭进程的作用.     

建立大鼠宫内生长迟缓模型的方法

建立大鼠宫内生长迟缓模型在研究宫内生长迟缓 (IUGR)发生机制、疾病发生过程及病理改变起着重要作用。目前造模的方法有孕期营养干预法、子宫动脉结扎法、被动吸烟法、更生霉素药物法、低氧吸入法等 ,营养干预法、子宫动脉结扎法是最常用的。不同方法的难度不一样 ,效果也不同。由于即使同一种方法、同一种大鼠 ,其仔鼠的出生体质量也有很大的差异 ,因此均采用低于对照组出生体质量减 2倍标准差作为判断试验组仔鼠是否是IUGR的条件。     

新生儿休克时血浆肾素活性,血管紧张素Ⅱ的变化

本文观察新生儿休克36例。血浆肾素活性（RA）、血管紧张素Ⅱ（AⅡ）浓度显著高于正常组（RA：15．64±1．25、2．61±1．31及AⅡ：706．27±1．25、99．48±1．19P＜0．0001，单位为ng／ml）；休克好转后RA、AⅡ下降至正常水平。随休克程度加重．RA、AⅡ随之增高，差异显著。血浆RA、AⅡ与毛细血管再充盈时间（CRT）呈正相关，与血pH呈负相关。提示新生儿肾素-血管紧张素系统已发育成熟．有充分的应激能力。     

血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂在儿童慢性肾脏疾病中保护作用的研究进展

针对肾素-血管紧张素系统作用的降压药物,如血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）和血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂（ARB）具有减少尿蛋白的排泄和延缓肾功能减退的作用,近年来逐渐在儿科临床试验中得到证实。ACEI与ARB对于多种慢性蛋白尿性疾病,如激素抵抗型肾病综合征、IgA肾病、先天肾脏畸形、溶血尿毒综合征后遗症、过敏性紫癜性肾炎及胱氨酸病等均有明显作用,而且两类药在6个月到1年的治疗期内,对于儿童具有不良反应小、耐药性好的特点。ACEI在保护肾脏方面,其减少尿蛋白作用并非依赖于它的降压作用,而是独立的;而且减少尿蛋白的效果具有剂量依赖性。ACEI和ARB分别单独使用时降低蛋白尿的效果相似,而联合使用时减轻尿蛋白和保护肾脏的作用却并不是两药效果的简单相加,而是具有更强的延缓慢性肾病进展的作用。     

血管紧张素Ⅱ对新生大鼠心肌成纤维细胞增殖及其信号转导机制的影响

目的 研究血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)对新生大鼠心肌成纤维细胞(MFs)增殖及蛋白激酶Cε(PKCε)和蛋白激酶Cα(PKCα)的表达及转位的影响,了解AngⅡ的促增殖和信号转导机制.方法 以差速贴壁法原代分离提纯培养SD乳鼠MFs为实验模型,免疫组织化学法鉴定后传代培养,第2-4代MFs分为实验组(加AngⅡ 10-6 mol/L)和对照组(不加AngⅡ)培养;四氮唑盐(MTT)比色法检测MFs增殖;通过间接免疫荧光法观察实验组和对照组PKC亚型ε和α在细胞内的分布和定位,Image-Pro-Plus 4.0版专业图像处理软件对荧光强度进行半定量统计.结果 1.实验组MFs数量较对照组显著增加(P<0.001);2.实验组和对照组荧光显微镜下初步观察:对照组PKC亚型ε存在于细胞膜、胞质和核-细胞骨架3个部分,但均较弱;实验组PKC亚型ε在细胞膜、胞质和核-细胞骨架3个部分强度明显增强,尤以核-细胞骨架为甚;对照组PKC亚型α主要存在于核-细胞骨架;实验组PKC亚型α在细胞膜、胞质和核-细胞骨架3个部分强度均明显增加,尤以核-细胞骨架为甚;且PKC亚型ε和α荧光强度半定量比较,实验组均显著高于对照组(Pa<0.001).结论 AngⅡ有促进MFs增殖的作用,PKC亚型ε、ε可能在MFs信号转导过程中起重要作用.     

中枢神经系统感染儿心钠素和血管紧张素Ⅱ的变化及意义

目的：探讨中枢神经系统（CNS）感染儿脑脊液和血浆心钠素（ANP）、血管紧张素Ⅱ（ANGⅡ）含量变化与病情的关系。方法：应用放射免疫法对28例CNS感染儿血浆及脑脊液ANP、ANGⅡ含量进行测定，并与12例对照组比较。结果：急性期儿血浆和脑脊液ANP均低于对照组（P＜0．05或P＜0．01），Glasgow昏迷评分（GCS）≤8分者增高幅度更明显。恢复期患儿ANP和ANGⅡ含量与对照组相似（P＞0．05）。结论：CNS感染时中枢和周围ANP、ANGⅡ平衡失调，并与病情轻重相关。及时纠正ANP与ANGⅡ失平衡状态，对改善CNS炎症损伤和脑水肿具有意义。     

血管紧张素Ⅱ阻滞剂对肾小球硬化的防治作用

各种肾小球疾病发展的结果均可导致肾小球硬化。血管紧张素Ⅱ阻滞剂在降低全身血压的同时，还能调节肾血流动力学，抑制系膜细胞增生、肥大和细胞外基质增生，减轻蛋白尿等，从而防治肾小球硬化。本文对比了血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体－１拮抗剂（ＡＴＩＲＡ）在这方面的作用，并提示ＡＴ１ＲＡ可能成为在保护肾功能、防治肾小球硬化方面具有潜力的药物。     

血管紧张素转换酶在庆大霉素诱导的大鼠急性肾衰竭中的变化

血管紧张素转换酶（ACE）是肾素-血管紧张素系统（hAS）的关键酶之一,其主要生理功能是将血管紧张素Ⅰ（Ansi）转化为效应肽AngⅡ。肾脏自身存在RAS,AngⅡ具有丝裂原活性,可以促进细胞增殖。急性肾衰竭的恢复伴随着小管细胞的增殖,ACE作为AngⅡ转化酶,其在ARF中的变化及意义报道较少,本研究于2004年5月至12月通过对庆大霉素（GM）诱导的大鼠急性肾衰竭（ARF）肾皮质、血浆、尿液中ACE活性的研究,探讨ACE在ARF中的变化。     

血管紧张素Ⅱ对幼鼠输尿管梗阻后AQP2表达变化的调控

目的 通过观察血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,ANG Ⅱ受体阻滞剂坎地沙坦对双侧输尿管梗阻(bilateral ureteral obstruction,BUO)幼鼠肾脏水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)表达的影响,探讨ANG Ⅱ对梗阻肾脏功能和AQP2的调控作用。方法 24只慕尼黑幼鼠随机分为BUO组、坎地沙坦干预组(BUO+ CAN)和对照组(Sham),每组n=8只。BUO组和BUO+ CAN组均行双侧输尿管结扎,并采用微型泵分别给以生理盐水和坎地沙坦,Sham组仅游离输尿管但不结扎,24h后解除梗阻并继续观察48h后收集血液和肾脏标本,采用免疫印记技术检测肾脏AQP2表达水平。结果 梗阻解除后BUO组与Sham组相比尿量显著增高,(92±7)μl·min-1 ·kg-1比(25±3)μl· min-1·kg-1、尿渗透压显著降低,(636±55) mosmol/kgH2O比(1 853±163) mosmol/kgH2O、血浆渗透压和血浆醛固酮均显著增高,分别为(336±10) mosmol/kgH2O比(303±7)mosmol/kgH2O和(4.1±0.2)nmol/L比(1.4±0.1)nmol/L;肾脏AQP2表达下调到Sham组17％各组比较差异有统计学意义,P＜0.05。BUO+ CAN组与BUO组相比尿量显著减少,(55±5)μl·min-1 ·kg-1比(92±7)μl·min-1 ·kg-1,尿渗透压显著增高(783±47) mosmol/kgH2O比(636±55) mosmol/kgH2O,血浆醛固酮含量显著降低(2.8±0.5) nmol/L比(4.1±0.2)nmol/L,肾脏AQP2表达增高,各组比较差异有统计学意义,P＜0.05。结论 ANG Ⅱ受体拮抗剂可通过阻止AQP2下调纠正水代谢紊乱,保护肾功能,提示ANG Ⅱ通过调节肾脏AQP2表达参与输尿管梗阻后肾脏水代谢变化。     

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌细胞血小板源生长因子-β受体与细胞外信号调节激酶表达的影响

目的 观察川芎嗪对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌细胞血小板源生长因子-β(PDGF-β)受体、细胞外信号调节激酶 (ERK1/2) 表达的影响,探讨其治疗心肌肥大的作用机制.方法 体外培养新生大鼠心肌细胞,分为AngⅡ组(以 10-7 mol/L AngⅡ刺激)、川芎嗪组(10-7 mol/L AngⅡ加10 mg/L川芎嗪刺激)及对照组(正常培养的心肌细胞).3组分别培养24 h,收集心肌细胞,采用[3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,免疫印迹法测定其PDGF-β受体、ERK1/2表达.应用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 3组间心肌细胞蛋白合成速率比较有显著性差异(F=20.71 P<0.01),其中AngⅡ组较对照组显著增加(P<0.01),川芎嗪组较AngⅡ组显著降低(P<0.01); AngⅡ组心肌细胞PDGF-β受体表达水平较对照组显著增加(P<0.01),川芎嗪组心肌细胞PDGF-β受体表达显著低于AngⅡ组 (P<0.05);AngⅡ组心肌细胞ERK1/2表达显著高于对照组(P<0.01),川芎嗪处理后AngⅡ诱导的心肌细胞ERK1/2表达较AngⅡ组显著降低 (P<0.01).结论 川芎嗪可抑制AngⅡ诱导的心肌细胞PDGF-β受体与ERK1/2的表达,这可能是川芎嗪治疗心肌肥大的重要机制之一.     

感染性休克患儿血管紧张素Ⅱ和一氧化氮的关系及意义

Angll是哺乳动物和人体内发现的一种内源性血管活性肽，在调节水盐代谢中有重要作用，可引起强烈的血管收缩，NO是造成组织损伤和炎症反应的因子之一，具有扩张血管的作用。两者在感染性休克时均有明显变化，但感染性休克时二者之间变化的关系尚未见报道。为探讨它们在感染性休克中的相互作用，本研究检测了14例感染性休克患     

抑制Notch信号对血管紧张素Ⅱ诱导的肺血管重构的影响

目的：Notch信号对胚胎发育、血管损伤修复、肿瘤生长过程中的血管重构发挥了重要作用,但对肺动脉高压肺血管重构研究很少,本研究旨在探讨抑制Notch信号对血管紧张素Ⅱ（AngII）诱导的肺血管重构的影响。方法：采用AngⅡ持续刺激培养7 d的肺动脉血管条,测定血管管壁厚度及血管壁细胞增殖细胞核抗原（PCNA）和caspase-3阳性率。同时部分血管条还加入γ-分泌酶抑制剂DAPT抑制Notch信号,测定血管条Notch 1~4 受体及其下游转录因子HERP1、HERP2 mRNA水平。结果：AngⅡ持续刺激血管7 d,血管壁厚度增加近50%,伴有血管壁细胞PCNA阳性率升高和caspase-3阳性率降低（P＜0.05）。加入DAPT后,血管条Notch 1~4受体mRNA水平无明显改变,但HERP 1、2 mRNA水平降低（P＜0.05）,管壁厚度、PCNA和caspase-3阳性率的改变程度明显降低（P＜0.05）。结论：抑制Notch信号能抑制AngⅡ诱导的肺血管重构,可能成为肺动脉高压治疗的一个新思路。     

宫内发育迟缓儿脐血内脂素及胎盘内脂素mRNA的表达

目的探讨内脂素与胎儿生长发育的关系。方法选择2008年12月—2010年6月足月出生的宫内发育迟缓(IUGR)儿、巨大儿及正常足月儿各35例,采用ELISA法测定脐血内脂素水平,Real-time PCR法检测胎盘内脂素mRNA相对含量,放射免疫法测定脐血胰岛素水平;分析脐血内脂素、胰岛素水平、胎盘内脂素mRNA相对含量与出生体质量的关系及脐血内脂素、胰岛素水平与胎盘内脂素mRNA相对含量间的关系。结果 IUGR儿脐血内脂素水平高于巨大儿及正常足月儿,差异有统计学意义(P<0.05);巨大儿与正常足月儿之间脐血内脂素水平差异无统计学意义(P>0.05)。三组间新生儿脐血胰岛素水平差异有统计学意义(P<0.05)。脐血内脂素水平与出生体质量呈负相关性(r=-0.341,P<0.05),与胰岛素水平无相关性(P>0.05)。三组间胎盘内脂素mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),胎盘内脂素mRNA水平与出生体质量、脐血内脂素、胰岛素水平均无相关性(P>0.05)。结论新生儿期内脂素与IUGR有关,可通过调节代谢而影响胎儿宫内的生长发育。     

肝细胞生长因子在哮喘大鼠气道内的表达及血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对其表达的影响

目的探讨哮喘大鼠发病过程中,肝细胞生长因子(HGF)在其气道内表达的变化及血管紧张素II受体AT1拮抗剂对其表达的影响。方法清洁级SD大鼠48只,随机分为正常对照组、卵蛋白(OVA)激发3 d组、OVA激发2周组、OVA激发4周组、OVA激发4周后使用AT1受体拮抗剂组、OVA激发4周后使用盐水对照组。观察OVA激发的不同时间、药物干预后哮喘大鼠气道的病理改变;免疫组化方法观察HGF、血管紧张素II(AngII)、转化生长因子(TGF)-β1表达的变化。结果HGF在OVA激发3 d即明显高于正常对照组(P<0.05),OVA激发2周HGF在气道中的表达水平最高,OVA激发4周时下降;AngII、TGF-β1表达水平随OVA激发时间的延长而持续上升;使用AT1受体拮抗剂后,气道HGF表达水平有所上升,而AngII、TGF-β1均下降,同时哮喘大鼠的气道重塑有所改善。结论HGF在哮喘发病过程中起保护作用,AngII、TGF-β1对HGF具有负向调节作用,AT1受体拮抗剂在一定程度上可提升内源性HGF表达,改善哮喘大鼠的气道重塑。     

胰岛素受体底物在宫内发育迟缓新生鼠肌肉组织中的表达

目的探讨胰岛素受体底物(IRS-1I、RS-2)基因在宫内发育迟缓(IUGR)新生鼠心肌、骨骼肌(股四头肌)中的表达及意义。方法采用母孕期饥饿法建立IUGR新生鼠模型,正常新生鼠作对照,应用RT-PCR技术检测心肌、股四头肌组织IRS-1I、RS-2mRNA水平,凝胶电泳条带用成像系统照相定量分析结果,分别计算PCR产物条带与-βactin条带光密度值的比值,作为目的基因相对表达量。结果IUGR鼠出生时体质量、身长显著小于对照组(P均<0.01)。IUGR新生鼠心肌IRS-1 mRNA相对表达水平显著高于对照组(t=2.568 P=0.022),股四头肌IRS-1 mRNA相对表达水平、心肌IRS-2 mRNA相对表达水平显著低于对照组(t=2.868 P=0.012;t=2.358 P=0.035),股四头肌IRS-2 mRNA相对表达水平与对照组相比无显著差异(t=1.426 P=0.177)。结论IUGR对心肌、骨骼肌IRS-1基因表达的影响具有组织选择性,心肌IRS-1基因表达上调是适应宫内营养不良环境的结果;骨骼肌IRS-1基因表达下降,并可能“程序化”,可能是IUGR易患代谢综合征的分子机制之一。     

支气管哮喘患儿血管紧张素Ⅱ的致炎作用

目的观察哮喘患儿血管紧张素Ⅱ(AⅡ)的表达及其对正常儿童外周血单核细胞(PBMC)表达单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和细胞间黏附分子(ICAM-1)的影响。方法对21例急性发作期哮喘患儿和11例正常儿童采用放射免疫测定法进行血浆AⅡ测定;后者PBMC经AⅡ刺激,检测MCP-1、ICAM-1的表达。结果21例哮喘患儿急性发作期血浆AⅡ为(113.4±47.1)ng/L,11例正常儿童血浆AⅡ为(45.9±30.6)ng/L,两者比较有显著差异(P<0.05)。11例正常儿童PBMC与不同浓度的AⅡ(10-9、10-8、10-7、10-6mol/L)混合培养,在细胞培养24 h后,MCP-1I、CAM-1的表达均明显高于0 mol/L组,以10-6mol/L的AⅡ刺激的表达最高。10-6mol/L的AⅡ条件下,刺激2、24、48 h,在24、48 h MCP-1I、CAM-1的表达均明显高于AⅡ刺激组,以24 h表达最高。结论哮喘患儿急性发作期血浆AⅡ水平增高,AⅡ可通过刺激MCP-1I、CAM-1的表达,参与哮喘的慢性炎症过程。