健脾与补肾对脑内精氨酸加压素水平和基因表达的影响

目的:比较健脾与补肾对脑内精氨酸加压素(AVP)水平和基因表达的影响.方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化和原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层精氨酸加压素(AVP)基因表达变化.结果:模型组上述脑区AVP免疫阳性反应物明显降低;健脾组与补肾组上述脑区的AVP免疫阳性反应物明显升高.模型组下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层AVP mRNA表达显著下降;健脾组与补肾组AVP mRNA表达明显升高.结论:脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的AVP水平和基因表达有变化,健脾与补肾可能通过调节AVP水平和基因表达而影响学习记忆能力.     

健脾与补肾对脾虚模型大鼠学习记忆及脑内P物质、血管活性肠肽的影响

目的探讨脾虚模型大鼠学习记忆和脑内P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)的变化,以及健脾、补肾中药对上述变化的改善作用。方法采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,检测健脾与补肾对其学习记忆及脑内SP、VIP变化的影响。结果水迷宫实验学习期和记忆期,模型组游全程时间长,错误次数多;健脾组与补肾组游全程时间短,错误次数少。跳台实验学习期和记忆期,模型组错误次数较多,潜伏期短;健脾组错误次数较少,潜伏期长;在学习期补肾组错误次数较少,潜伏期较长,但记忆期错误次数较多。模型组SP免疫阳性反应物在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层显著减少;健脾组在上述脑区则显著增加;补肾组海马CA1区和前额叶皮层明显增加,但在下丘脑腹侧核减少。模型组VIP免疫阳性反应物在海马CA1区、前额叶皮层显著减少;健脾组与补肾组海马CA1区、前额叶皮层VIP免疫阳性反应物显著增加。结论脾虚模型大鼠学习记忆及脑内对学习记忆有促进和增强作用的SP、VIP明显下降。健脾、补肾中药对上述变化有明显改善作用。     

健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素水平和受体基因表达的影响

目的比较健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素(SS)水平和受体基因表达的影响。方法采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化和原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层SS及生长抑素受体1(SSR1)mRNA基因表达变化。结果模型组上述脑区SS免疫阳性反应物及SSR1 mRNA表达阳性反应物明显降低,与正常组比较差异显著;健脾组与补肾组上述脑区的SS免疫阳性反应物及SSR1 mRNA表达阳性反应物明显升高,与模型组比较差异显著,与正常组比较无显著差异。结论脾虚模型大鼠脑内对学习记忆有促进作用的SS水平和SSR1 mRNA基因表达有变化,健脾与补肾可能通过调节SS水平和SSR1基因表达而影响学习记忆能力。     

脾虚模型脑内脑源性神经营养因子表达变化及归脾汤的影响

目的:研究脾虚模型脑内脑源性神经营养因子(BDNF)表达变化及归脾汤的影响作用.方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,采用免疫组化法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层BDNF变化及归脾汤的影响作用.结果:模型组BDNF免疫阳性反应物在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层明显降低;归脾汤治疗组上述脑区的BDNF免疫阳性反应物明显增加.结论:脾虚模型脑内BDNF表达有变化,提示归脾汤可能通过对BDNF调节作用而影响学习记忆.     

脾虚模型脑内一氧化氮与乙酰胆碱酯酶表达变化及归脾汤的影响

目的:研究脾虚模型脑内一氧化氮(NOS)与乙酰胆碱酯酶(ACHE)表达变化及归脾汤的影响作用。方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,免疫组化法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层NOS与ACHE变化及归脾汤治疗的影响作用。结果:模型组NOS和ACHE免疫阳性反应物在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层明显降低;治疗组上述脑区的NOS和ACHE免疫阳性反应物明显增加。结论:脾虚模型脑内NOS和ACHE表达有变化,提示归脾汤通过影响NOS与ACHE而调节学习记忆功能。     

脾虚大鼠模型脑内胆囊收缩素、P物质、血管活性肠肽变化及归脾汤的影响

目的：探讨脾藏意理论.方法：采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化方法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层胆囊收缩素（CCK）、P物质（SP）、血管活性肠肽（VIP）变化.结果：模型组在上述脑区CCK、SP免疫阳性反应物显著降低,治疗组CCK、SP免疫阳性反应物显著增加;模型组VIP免疫阳性反应物在海马CA1区、前额叶皮层显著减少;治疗组则明显增加.结论：脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的神经肽CCK、SP、VIP有变化,归脾汤对上述脑区的CCK、SP、VIP变化有调节作用.     

脾虚大鼠脑内TGF-β_1、TNF-α的变化以及益气扶正中药干预研究

目的:研究脾虚模型大鼠脑内转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的活性表达,以及扶正益气中药的干预作用。方法:40只大鼠随机分成4组,正常组、模型组、治疗1组(四君子汤组)、治疗:2组(玉屏风散组),每组各10只。采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立大鼠脾虚模型,采用免疫组化法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区的TGF-β1和TNF-α表达变化与四君子汤玉屏风散的治疗作用。结果:TGF-β1在海马CA1区和下丘脑腹侧核表达明显降低,TNF-αmRNA在海马CA1区和下丘脑腹侧核表达明显降低;与模型组比较,治疗1组和治疗2组TGF-β1水平及TNF-αmRNA表达水平显著上升。结论:益气扶正中药四君子汤、玉屏风散可能通过影响免疫器官、调控细胞因子TGF-β1和TNF-α活性表达而调节机体免疫功能。     

健脾益智法对AD大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPYmRNA表达水平影响的研究

目的研究健脾益智法对AD大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPYmRNA表达水平的影响及其关联,探讨脾脑相关理论的微观机制。方法运用右侧海马注射凝聚态AB1-40的方法制作AD大鼠模型,以健脾益智胶囊、生理盐水分组灌胃给药连续治疗4周,采用半定量RT-PCR法检测比较模型对照组和中药组大鼠海马区、大肠区脑肠NPYmRNA的表达水平。结果与结论健脾益智胶囊可上调AD大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPYmRNA表达水平,脾脑相关理论的微观机制可能与NPY有关。     

阿尔茨海默病大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPYmRNA表达水平及其关联的研究

目的:研究AD大鼠大肠区、海马区脑肠肽NPYmRNA表达水平及其关联,探讨脾脑相关理论的微观机制。方法:运用右侧海马注射凝聚态Aβ1-40的方法制作AD大鼠模型,采用半定量RT-PCR法检测比较假手术组和模型对照组药物大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPYmRNA的表达水平。结论:AD大鼠海马区、大肠区脑肠肽NPYmRNA表达水平均降低。脾脑相关理论的微观机制可能与NPY有关。     

银杏酮酯对自然衰老大鼠学习记忆及海马、前额叶皮层c-fos、Caspase-3和Caspase-8表达的影响

目的:探讨银杏酮酯(Ginkgo biloba extract,GBE50)对自然衰老大鼠学习记忆及海马、前额叶皮层c-fos、Caspase-3和Caspase-8表达的影响。方法:21月龄大鼠随机分为模型组、银杏酮酯组和阳性药银杏叶提取物组,1月龄大鼠作为正常组。其中正常组和模型组用1%羧甲基纤维素钠灌胃,银杏酮酯组和银杏叶提取物组分别予100 mg/kg的药物灌胃60天。新物体识别实验检测学习记忆,免疫组织化学方法检测海马CA1区和前额叶皮层c-fos和Caspase-8的蛋白水平,免疫印迹方法检测海马和前额叶皮层Caspase-3蛋白表达。结果:新物体识别实验结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物可使大鼠的分辨指数和优先指数明显升高。免疫组织化学结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物可使海马CA1区和前额叶皮层cfos表达增加,Caspase-8表达降低。免疫印迹结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物组可使海马和前额叶皮层Caspase-3蛋白表达下降。结论:100mg/kg的银杏酮酯可以改善自然衰老大鼠学习记忆缺陷,这种改善可能与上调自然衰老大鼠海马和前额叶皮层c-fos表达,降低Caspase-3和Caspase-8蛋白水平有关。     

肠激安胶囊对IBS-D模型大鼠脑肠轴中NPY mRNA表达及ACTH含量的影响

目的探讨肠激安胶囊对腹泻型肠易激综合征（diarrhea predominant irritable bowel syndrome,IBS-D）大鼠下丘脑和结肠组织神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）mRNA表达和血清促肾上腺皮质激素（adreno-cortico-tropic hormone,ACTH）含量的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组,模型组,匹维溴铵组（0．018g／kg）,肠激安胶囊高（2．812g／kg）、中（1．406g／kg）、低（0．703g／kg）剂量组,每组8只,模型组以及给药组采用母乳分离＋醋酸刺激＋四肢束缚法制备IBS—D大鼠模型,正常组和模型组给予生理盐水,给药组灌胃14天,采用ELISA法检测各组大鼠血清ACTH含量,采用RT-PCR法检测各组大鼠下丘脑及结肠组织NPYmRNA表达。结果与正常组比较,模型对照组大鼠血ACTH明显升高（P〈0．01）,下丘脑、结肠组织NPYmRNA表达明显降低（P〈0．01）;与模型组比较,肠激安胶囊高、中剂量组及匹维溴胺组大鼠血ACTH明显降低（P〈0．01,P〈0．05）,匹维溴铵组和肠激安胶囊高、中、低剂量组下丘脑、结肠组织NPYmRNA表达上调（P〈0．05）。结论肠激安胶囊对IBS．D大鼠脑肠轴异常有调节作用,其作用机制可能是通过上调下丘脑和结肠组织NPYmRNA表达和下调HPA轴中ACTH含量。     

益气止血中药复方对脾不统血证大鼠脑组织POMC mRNA表达的影响

目的：观察益气止血中药对脾不统血证模型大鼠前阿黑皮素(POMC)基因表达的影响。方法：以原位杂交结合图像分析的方法检测大脑皮层、海马、下丘脑前阿黑皮素信使核糖核酸(POMC mRNA)的积分光密度和面积。结果：脾不统血证模型大鼠脑组织POMC mRNA的积分光密度和面积均较正常显著增强，益气止血中药复方对各部位POMC的基因表达均有下调作用。结论：益气止血中药复方对各部位POMC的基因表达均有较好的调节作用，表现出单纯用药的协同作用，且其作用也略强于阳性对照药归脾丸。     

针刺对糖尿病大鼠下丘脑神经肽Y及其mRNA表达的影响

目的:观测针刺对STZ所导致的糖尿病大鼠下丘脑NPY及其mRNA表达的影响。方法:Wistar大鼠4 3只,1 3只为正常对照,另30只行链脲左菌素腹腔注射造模,造模成功的大鼠随机分为模型组和针刺治疗组(针刺“胰俞”“足三里”“关元”) ,针刺治疗2个疗程后取脑,运用免疫组化法和原位杂交法分别检测下丘脑NPY蛋白及其mRNA的表达。结果:STZ糖尿病大鼠下丘脑室旁核、弓状核NPY阳性纤维较正常组大鼠明显增多,下丘脑外侧区NPYmRNA表达较正常明显增多(P <0 .0 5 ) ,针刺治疗后糖尿病大鼠下丘脑室旁核、弓状核NPY阳性纤维及下丘脑外侧区NPYmRNA表达明显减少(P <0 .0 5 )。结论:针刺可以降低STZ糖尿病大鼠下丘脑增多的NPY的合成及其含量,这可能是针刺改善糖尿病能量代谢的中枢机制之一。     

中药复方WCA-P及其拆方对人胰腺癌BxPC-3细胞悬液裸小鼠皮下接种瘤的影响

目的:通过Bx PC-3细胞株悬液造成胰腺癌裸小鼠皮下接种瘤模型,研究中药复方WCA-P及其拆方对皮下瘤的影响。方法:以人胰腺癌Bx PC-3细胞株悬液对裸小鼠进行皮下接种成瘤,随机分为复方组、清热解毒组、健脾组、5-FU组和空白对照组,分别予以相应治疗药物,观察各组抑瘤率,并检测血清NK及CA199水平。结果:空白对照组小鼠非灌胃死亡率高,消瘦明显,中药干预小鼠非灌胃死亡率低,营养状况较好。实验结束时,空白对照组小鼠体质量明显轻于健脾组和复方组(P0.05);清热解毒组小鼠体质量轻于健脾组、复方组和5-FU组,健脾组小鼠体质量重于复方组和5-FU组,复方组小鼠体质量重于5-FU组,但差异均无统计学意义(P0.05)。空白对照组小鼠血清NK水平低于5-FU组、健脾组和复方组(P0.01),复方组血清NK水平最高。各药物干预治疗组血清CA199水平均低于空白对照组(P0.01)。结论:中药及腹腔化疗可以改善人胰腺癌Bx PC-3细胞悬液皮下接种瘤裸小鼠的营养状况和体质量;中药,尤其是含有健脾作用的中药复方可提高人胰腺癌Bx PC-3细胞悬液皮下接种瘤裸小鼠血清NK水平并降低CA199水平,并可能对人胰腺癌Bx PC-3细胞悬液皮下接种瘤裸小鼠的带瘤生存期有延长趋势。     

脑出血后抑郁大鼠脑内单胺神经递质的变化及中药的干预作用

目的:探讨脑出血后抑郁动物模型脑内单胺神经递质5-羟色胺、去甲肾上腺素、酪氨酸羟化酶的变化,研究中药颐脑解郁方对脑出血后抑郁的干预机理。方法:用免疫组织化学方法观察脑出血后抑郁模型大鼠脑内5-羟色胺、去甲肾上腺素、酪氨酸羟化酶的表达变化及以西药百忧解为对照和中药的干预作用。结果:模型组脑内海马CA1区、扣带皮质、梨状皮质内5-HT阳性细胞表达减少,下丘脑TH阳性细胞表达减少,扣带皮质和下丘脑内NE表达减少;西药增加海马CA1、扣带皮质5-HT的表达,增加下丘脑TH的表达面积,增加扣带皮质、下丘脑内NE的表达面积增多。中药颐脑解郁增加海马CA3、梨状皮质5-HT的表达,增加下丘脑TH的表达面积,增加扣带皮质、下丘脑内NE的表达面积和光密度。结论:脑出血后抑郁模型大鼠脑内5-羟色胺、去甲肾上腺素、酪氨酸羟化酶表达下降,中西药可以通过增强TH、NE、5-HT的功能,增加其浓度,起到改善抑郁的作用。     

中药复方对糖尿病大鼠肾脏TGF—β_1 mRNA表达的影响

目的:观察健脾益肾活血化瘀法组成的中药复方对早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质转化生长因子β1(TGFβ1)的影响,探讨其作用机理。方法:实验采用链脲佐菌素(STZ)按53mg/kg剂量腹腔一次性注射建立糖尿病肾病大鼠模型,造模成功后随机分为中药组(中药复方)、西药组(瑞泰)、模型组和正常组。灌胃8周后RT—PCR法检测大鼠肾皮质TGFβ1mRNA表达。结果:各治疗组与模型组比较均明显降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1mRNA表达(P<0.01),且中药组优于西药组(P<0.01)。结论:中药复方通过降低糖尿病大鼠肾皮质TGFβ1mRNA的表达,从而起到保护肾脏,延缓肾脏病理损害,抑制糖尿病肾病形成的作用。