黄板树根提取液对骨性关节炎作用的实验研究

目的:探讨滑膜细胞体外培养方法,了解黄板树根在骨性关节炎(osteoarthritis,OA)中的作用及意义。方法:取OA患者(n=22)关节滑膜组织,随机分为对照组(n=11)和干预组(n=11),分别原代培养滑膜细胞,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量检测两组滑膜细胞培养上清液中炎性因子IL-18蛋白的表达水平。结果:酶消化加组织块贴壁培养法可适用于体外培养试验用滑膜细胞;ELISA检测OA患者对照组细胞培养上清液中IL-18的含量为(61.324±19.281)pg/mL,干预组细胞培养上清液中IL-18的含量为(20.823±2.746)pg/mL,具备组间统计学差异(P0.05)。结论:黄板树根可以使OA关节滑膜细胞中炎性因子IL-18表达下调,提示其可能对OA有治疗作用。     

黄板树根提取液对白细胞介素-18在骨性关节炎滑液中的表达影响及意义

目的:了解使用黄板树根提取液外用熏洗对骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者白细胞介素-18(Interleukin 18,IL-18)在滑液中表达的影响及意义。方法:观察正常膝关节滑膜组织与OA病变滑膜组织在组织形态及病理切片的差异,对OA患者(n=30)使用黄板树根提取液熏洗治疗,分别提取治疗前后的关节滑液,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)定量检测熏洗治疗前后关节滑液中IL-18蛋白的表达水平,并比较其表达的差异。结果:正常滑膜组织肉眼观为淡红色或瓷白色,OA滑膜组织多为粉红色;病理切片显示:相比正常滑膜组织,OA滑膜组织出现明显的血管增生和炎细胞浸润,符合组织慢性炎症病变特征;ELISA检测治疗前OA患者滑液中IL-18的表达含量为(52.625±11.336)pg/ml,治疗后OA患者滑液中IL-18的表达含量为(22.512±2.021)pg/ml,两者之间具备统计学差异(P0.05)。结论:黄板树根提取液熏洗治疗可以使OA关节滑液中炎性因子IL-18表达水平下降,提示黄板树根提取液可能对OA有一定的治疗作用。     

滑膜成纤维细胞环氧化酶-2和诱导型一氧化氮合酶在类风湿性关节炎中的表达

目的　研究类风湿性关节炎 (RA)患者关节滑膜成纤维细胞环氧化酶 2 (COX 2 )、诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)及其诱导产物前列腺素E2 (PGE2 )、一氧化氮 (NO)的表达水平 ,探讨它们在RA致病过程中的作用。方法　分离滑膜成纤维细胞 ;用酶联免疫吸附法和酶还原法检测正常人关节滑膜液和滑膜细胞培养上清液中PGE2 、NO的含量 ;采用半定量逆转录 聚合酶联反应法检测滑膜组织及滑膜细胞COX 2、iNOSmRNA表达 ;并用细胞酶联免疫法检测细胞COX 2、iNOS蛋白表达水平。结果　RA患者关节滑膜组织COX 2、iNOSmRNA表达及滑膜液PGE2 、NO的水平分别为 0 42 ,0 83和(4 82± 1 74) μg/L、(80 4± 2 3 2 ) μmol/L ,明显高于正常对照组的 0 0 8,0 1 4和 (0 64± 0 1 3) μg/L、(2 6 2± 1 4 4) μmol/L(P <0 0 1 ) ;在炎性细胞因子刺激下RA患者滑膜成纤维细胞COX 2、iNOSmRNA水平 (0 48,0 98)、蛋白表达水平 (0 92± 0 1 8,0 78± 0 1 3)以及培养上清液中PGE2 、NO含量 [(2 1 44±4 2 6) μg/L ,(1 2 6 6± 32 2 ) μmol/L]均显著高于正常对照组 (P <0 0 1 )。 结论　滑膜成纤维细胞COX 2、iNOS的过度表达及PGE2 、NO的大量合成 ,可能是RA关节病变的一个重要因素     

复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠模型滑膜细胞分泌及肿瘤坏死因子的影响

目的研究复方丹参Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节模型(CIA)关节功能及滑膜细胞分泌前列腺素E2(PGE2)及肿瘤坏死因子(TNF)的影响。方法采用消化分离的方法获得滑膜细胞,放免法检测原代大鼠滑膜细胞培养上清液中PGE2及TNF的水平。结果复方丹参可以明显下调CIA大鼠滑膜细胞分泌PGE2及TNF的水平,改善其关节活动功能。结论复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞分泌PGE2及TNF的水平有关。     

类风湿性关节炎滑膜组织PADI4的表达

目的 研究类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)和强直性脊柱炎(AS)滑膜液中肽酰基精氧酸脱亚胺酶4(PADI4)的表达.方法 收集RA(n=73)、OA(n=96)和AS(n=32)滑膜液标本及RA(n=6)、OA(n=6)和AS(n=32)关节滑膜标本,应用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白印迹分析的方法检测滑膜液中PADI4蛋白表达,应用实时定量PCR比较RA、OA和AS患者滑膜中PADI4的mRNA的表达,并研究抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体和类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)与PADI4的相关性.结果 RA患者滑膜液中PADI4、抗CCP抗体、RF含量较高,OA、AS患者滑膜液中PADI4、抗CCP抗体、RF含量无明显改变,RA患者与OA、AS患者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 以上结果证实RA患者滑膜中PADI4表达较高,PADI4在RA发病过程中发挥作用,PADI4的表达水平可能与一些临床表现有关.     

血府逐瘀汤影响慢性粒细胞白血病VEGF表达的体外研究

目的:体外研究血府逐瘀汤含药血清对慢性粒细胞白血病细胞VEGF表达的影响。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测20例初治CML患者、20例正常人骨髓细胞以及人慢性粒红白血病急性变K562细胞上清液的VEGF含量,并测定CML原代细胞和K562细胞加入不同浓度血府逐瘀汤含药血清共同培养后上清液的VEGF含量。结果:CML原代细胞上清液VEGF浓度为(389.27±65.77)pg/mL、K562细胞VEGF浓度为(461.24±137.57)pg/mL,均比正常人(125.45±28.24)pg/mL显著增高(P<0.05),加入不同浓度的含药血清,在中、高浓度范围,CML原代细胞、K562细胞VEGF表达均明显下降,分别为(152.43±26.29)pg/mL、(80.31±19.73)pg/mL和(188.86±32.77)pg/mL、(114.81±14.16)pg/mL(P<0.05)。结论:异常血管新生可能参与CML发病,血府逐瘀汤含药血清在体外能显著抑制CML原代细胞和K562白血病细胞表达VEGF,该方有参与抑制CML异常血管形成的作用。     

类风湿关节炎患者自身反应性B细胞异常表达相关分子的检测和分析

目的:分析类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者自身反应性B细胞及与之功能相关的自身抗体和信号分子的表达。方法:采用流式细胞仪分析22例RA患者及10例正常对照者的外周血自身反应性B细胞比率及RA和骨关节炎(OA)患者(n=10)外周血单个核细胞(PBMC)Th2的表达。用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测RA患者及正常对照者PBMC细胞外信号调节激酶(ERK)、黏着斑激酶(FAK)基因的相对表达量,并采用蛋白印迹法检测NF-κB信号通路的磷酸化格局;用ELISA法检测和分析RA及OA患者血清及关节滑膜液抗Ⅱ型胶原抗体水平,同时检测RA患者血清及关节滑膜液中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达状况。结果:相对于正常对照者,RA患者外周血中存在高表达CD19+的自身反应性B细胞;同时其PBMC中ERK基因相对表达量提高、NF-κB信号通路磷酸化活跃。相对于OA患者,RA患者关节滑膜液中抗Ⅱ型胶原抗体水平显著升高。RA患者关节滑膜液中MMP-3及TIMP-1等水平较其自身血清中升高。结论:RA患者自身反应性B细胞及相关分子的异常表达可能是介导RA发病的又一重要因素。     

类风湿性关节炎患者关节滑膜液中RF和PGE2检测的意义

目的观察类风湿性关节炎(RA)患者关节滑膜液中类风湿因子(RF)和前列腺素E2(PGE2)指标的变化.方法分别用免疫散射比浊法和酶联免疫吸附法检测关节滑膜液中RF、PGE2的含量.结果RA患者关节滑膜液中RF和PGE2的含量显著高于正常对照组(P＜0.01).结论关节滑膜液中RF和PGE2的大量合成对RA的诊断和治疗有重要意义.     

复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠模型滑膜细胞分泌及肿瘤坏死因子的影响

目的 研究复方丹参Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节模型（CIA）关节功能及滑膜细胞分泌前列腺素E2（PGE2）及肿瘤坏死因子（TNF）的影响。方法 采用消化分离的方法获得滑膜细胞,放免法测原代大鼠滑膜细胞培养上清液中PGE2及TNF的水平。结果 复方丹参可以明显下调CIA大鼠滑膜细胞分泌PGE2及TNF的水平,改善其关节活动功能。结论 复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞分泌PGE2及TNF的水平有关。     

间充质干细胞调控趋化因子配体2对系统性红斑狼疮作用的机制探讨

目的:探讨趋化因子配体2[chemokine(C-C motif)ligand 2,CCL2]在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中的作用。方法:采用酶联免疫吸附试验检测SLE患者及正常对照者的血清、尿液及骨髓MSCs培养上清中的CCL2及白细胞介素(interleukin,IL)-17的表达水平,并采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Th17-CD4+IL-17+的百分率及其表面CCR2的表达。将18只雌性MRL/lpr SLE小鼠随机分为SLE小鼠组(n=6)(未治疗组)、脐带MSCs移植联合CCL2中和抗体治疗SLE小鼠组(n=6)及脐带MSCs移植联合同型对照IgG2B治疗SLE小鼠组(n=6),另选6只同周龄雌性C57BL/6小鼠作为健康阴性对照组。采用酶联免疫吸附试验检测各组血清CCL2及IL-17的水平,流式细胞术检测各组PBMCs中CD4+CCR2+IL-17+细胞百分率。结果:SLE患者血清[(839.0±160.5)pg/mL]、尿液[(881.8±162.7)pg/mL]及骨髓MSCs培养上清[(22 935±2 304)pg/mL]的CCL2含量均显著高于正常对照者[(433.0±31.0)pg/mL、(222.7±52.8)pg/mL、(8 394±5 125)pg/mL];SLE患者PBMCs中CD4+CCR2+IL-17+细胞百分率较正常对照者显著升高(P<0.01)。脐带MSCs移植联合CCL2中和抗体治疗SLE小鼠组血清CCL2浓度显著低于未治疗组,PBMCs中CD4+T细胞亚群IL-17、CCR2表达较未治疗组显著降低。结论:MSCs移植治疗SLE的效果可能通过抑制CCL2表达,进而下调患者Th17细胞水平来实现。     

2006年湖南省霍乱监测结果分析

目的 监测人群中霍乱病例和被霍乱弧菌污染的水体及食物,以便尽早采取预防控制措施,防止疫情扩散.方法 全省范围开展腹泻患者及外环境、食品监测,选择重点地区开展甲鱼霍乱弧菌污染状况专项监测.结果 2006年湖南省共登记腹泻患者111 526例,检测霍乱弧菌89 661例,检测率为80.39%,检出阳性4例,均为0139群霍乱弧菌感染;检测环境和食品样44 533份,其中水体35 113份,全部为阴性,水产品5377份,阳性16份,阳性率为0.30%,阳性标本为甲鱼和牛蛙,其他食品4043份,均为阴性;甲鱼专项监测2323份,检出阳性33份,阳性率为1.42%;霍乱毒素基因检测34株菌,20株为产毒株,占58.80%;药敏试验28株菌,均对诺氟沙星、环丙沙星、丁胺卡那霉素100%敏感,对强力霉素、复方新诺明的敏感率为92.86%.结论 甲鱼、牛蛙等水产品是湖南省发生霍乱的主要因素,应加强水产品的监测和卫生管理.     

新生儿抚触技术在产科中的应用体会

目的探讨新生儿抚触促进新生儿生长发育、融洽护患关系、提高产妇满意度的临床价值。方法选择2008年1月至2008年8月在我科住院正常分娩和剖宫产的健康儿200例,随机分为对照组100例,抚触组100例,观察新生几吃奶量、睡眠时间、排便时间和产妇满意度。结果抚触组新生儿吃奶量、睡眠时间、排便时间及产妇满意度均优于对照组。结论新生儿抚触既能促进新生儿生长发育,又能融洽护患关系,提高产妇满意度。是一种值得推广的简单易行效果好的新型护理技术。     

流程管理在见习期护士护理培训管理中的应用研究

目的 探讨流程管理应用于护士见习期护理培训管理与现代护理继续教育管理的适应关系.方法 采用自行制定的各项护理培训管理流程及考核量化表对2006年及2007年的各50名见习期护士分别从护理部考核、科护士长考核、护士长考核、责任带教护师评价、患者评价、转正率角度按照职业道德、操作能力、服务质量、绩效考核、适应能力等5项指标进行2次测评.结果 评价者对见习期护士的2次测评评分比较,差异明显.结论 流程管理在见习期护士护理培训管理中的实施有利于临床护理管理规范化、程序化、科学化,是适应新医疗环境下对见习期护士较好的护理培训管理方式.     

流程管理在见习期护士护理培训管理中的应用研究

目的 探讨流程管理应用于护士见习期护理培训管理与现代护理继续教育管理的适应关系.方法 采用自行制定的各项护理培训管理流程及考核量化表对2006年及2007年的各50名见习期护士分别从护理部考核、科护士长考核、护士长考核、责任带教护师评价、患者评价、转正率角度按照职业道德、操作能力、服务质量、绩效考核、适应能力等5项指标进行2次测评.结果 评价者对见习期护士的2次测评评分比较,差异明显.结论 流程管理在见习期护士护理培训管理中的实施有利于临床护理管理规范化、程序化、科学化,是适应新医疗环境下对见习期护士较好的护理培训管理方式.     

流程管理在见习期护士护理培训管理中的应用研究

目的 探讨流程管理应用于护士见习期护理培训管理与现代护理继续教育管理的适应关系.方法 采用自行制定的各项护理培训管理流程及考核量化表对2006年及2007年的各50名见习期护士分别从护理部考核、科护士长考核、护士长考核、责任带教护师评价、患者评价、转正率角度按照职业道德、操作能力、服务质量、绩效考核、适应能力等5项指标进行2次测评.结果 评价者对见习期护士的2次测评评分比较,差异明显.结论 流程管理在见习期护士护理培训管理中的实施有利于临床护理管理规范化、程序化、科学化,是适应新医疗环境下对见习期护士较好的护理培训管理方式.     

流程管理在见习期护士护理培训管理中的应用研究

目的 探讨流程管理应用于护士见习期护理培训管理与现代护理继续教育管理的适应关系.方法 采用自行制定的各项护理培训管理流程及考核量化表对2006年及2007年的各50名见习期护士分别从护理部考核、科护士长考核、护士长考核、责任带教护师评价、患者评价、转正率角度按照职业道德、操作能力、服务质量、绩效考核、适应能力等5项指标进行2次测评.结果 评价者对见习期护士的2次测评评分比较,差异明显.结论 流程管理在见习期护士护理培训管理中的实施有利于临床护理管理规范化、程序化、科学化,是适应新医疗环境下对见习期护士较好的护理培训管理方式.     

流程管理在见习期护士护理培训管理中的应用研究

目的 探讨流程管理应用于护士见习期护理培训管理与现代护理继续教育管理的适应关系.方法 采用自行制定的各项护理培训管理流程及考核量化表对2006年及2007年的各50名见习期护士分别从护理部考核、科护士长考核、护士长考核、责任带教护师评价、患者评价、转正率角度按照职业道德、操作能力、服务质量、绩效考核、适应能力等5项指标进行2次测评.结果 评价者对见习期护士的2次测评评分比较,差异明显.结论 流程管理在见习期护士护理培训管理中的实施有利于临床护理管理规范化、程序化、科学化,是适应新医疗环境下对见习期护士较好的护理培训管理方式.     

流程管理在见习期护士护理培训管理中的应用研究

目的 探讨流程管理应用于护士见习期护理培训管理与现代护理继续教育管理的适应关系.方法 采用自行制定的各项护理培训管理流程及考核量化表对2006年及2007年的各50名见习期护士分别从护理部考核、科护士长考核、护士长考核、责任带教护师评价、患者评价、转正率角度按照职业道德、操作能力、服务质量、绩效考核、适应能力等5项指标进行2次测评.结果 评价者对见习期护士的2次测评评分比较,差异明显.结论 流程管理在见习期护士护理培训管理中的实施有利于临床护理管理规范化、程序化、科学化,是适应新医疗环境下对见习期护士较好的护理培训管理方式.     

流程管理在见习期护士护理培训管理中的应用研究

目的 探讨流程管理应用于护士见习期护理培训管理与现代护理继续教育管理的适应关系.方法 采用自行制定的各项护理培训管理流程及考核量化表对2006年及2007年的各50名见习期护士分别从护理部考核、科护士长考核、护士长考核、责任带教护师评价、患者评价、转正率角度按照职业道德、操作能力、服务质量、绩效考核、适应能力等5项指标进行2次测评.结果 评价者对见习期护士的2次测评评分比较,差异明显.结论 流程管理在见习期护士护理培训管理中的实施有利于临床护理管理规范化、程序化、科学化,是适应新医疗环境下对见习期护士较好的护理培训管理方式.