四环素对兔膝骨关节炎的保护作用

目的　研究四环素对兔膝骨关节炎关节液中前列腺素 E2 (PGE2 )、一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (i NOS)以及大体形态学的影响 ,探讨其对骨关节炎防治的有效性。方法　 36只日本大耳白兔随机分成正常组、对照组和治疗组。对照组和治疗组以 Hulth法造出骨关节炎模型。治疗组以四环素灌胃 ,正常组、对照组给予生理盐水 ;分别于 4w、8w抽取关节液 ,检测 PGE2 、NO、i NOS含量 ;对照组和治疗组进行关节软骨大体形态学的观察。结果　对照组关节液 PGE2 、NO、i NOS明显高于正常组 (P<0 .0 1 ) ;四环素能有效降低兔膝骨关节炎关节液 PGE2 、NO、i NOS的水平 ,4w分别降低 2 .8%、9.4%、1 2 .2 %;8w分别降低 2 .2 %、6.4%、7.8%;与对照组相比有显著性差异 (P<0 .0 5,P<0 .0 1 )。从大体观察 ,治疗组软骨状况明显优于对照组。结论　四环素对骨关节炎有一定保护作用。     

四环素对骨关节炎模型的作用观察

将日本大耳白兔随机分为假手术组、模型组、四环素低及高剂量组各6只.将模型组和四环素组兔右侧膝关节前交叉韧带切断造成关节不稳定后,以石膏将左腿固定于腹部,右腿负重锻炼制成骨关节炎(OA)模型.四环素低剂量组给四环素20 mg/(kg*d),高剂量组给四环素40 mg/(kg*d)灌胃.8周后两四环素组关节软骨变性较模型组减轻,其关节液前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)和软骨基质金属蛋白酶-1(MMP-1) 表达均较模型组降低(P均<0.05).认为四环素可减轻OA模型的关节退行性变.     

兔膝骨关节炎负重模型的建立

目的 建立兔膝骨关节炎（osteoarthfitis，OA）负重模型，为骨关节炎实验研究奠定基础。方法 兔右侧膝关节前交叉韧带切断建成ACLT模型后，以石膏将左腿固定于腹部，右腿负重锻炼建成重模型，通过大体形态观察、关节液白介素-1（IL-1）、一氧化氮（NO）及软骨基质金属蛋白酶-1（MMP-I）含量的检测反映关节损害程度，比较负重模型与ACLT模型在不同造模时间关节损害的差别。结果 负重模型组较同期ACLT模型组关节退变更为明显；与ACLT模型组相比，负重模型能显著增加OA关节液IL-1、NO的产生和软骨MMP-1的表达（P〈0．05；P〈0．01），在造模4w升高6．5％、22．8％和26．2％，在8w升高3．0％、5．0％和3．6％。结论 兔膝骨关节炎负重模型可加快关节退行性变，缩短造模时间，是一种自然有效且造模时间较短的OA模型。     

金荞麦提取物对膝骨关节炎兔关节软骨Caspase-1、3、9及MMP-1的影响

目的观察金荞麦提取物对膝骨关节炎兔白细胞介素(IL)-1β、前列腺素(PG)E2、基质金属蛋白酶(MMP)-1、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1、Caspase-3、Caspase-9及病理影响。方法 32只新西兰大白兔随机分成4组,正常组、模型组、氨基葡萄糖组、金荞麦提取物组,建立膝骨关节炎模型。药物干预28 d后,取关节软骨和滑膜进行病理学检查,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清和关节液IL-1β、PGE2及软骨组织Caspase-1、Caspase-3、Caspase-9含量,免疫组化法检测软骨MMP-1表达。结果与正常组比较,模型组血清、关节液IL-1β、PGE2含量和软骨Caspase-1、Caspase-3、Caspase-9、MMP-1表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,氨基葡萄糖组、金荞麦提取物组以上指标明显下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,金荞麦提取物组病理形态和Mankin评分也明显改善。结论金荞麦提取物可降低兔膝骨关节炎模型兔关节软骨Caspase-1、Caspase-3、Caspase-9、MMP-1水平,减轻软骨损伤,具有骨保护作用。     

降钙素对兔膝骨性关节炎关节软骨的保护作用及机制

目的探讨降钙素(CT)对膝骨性关节炎(KOA)关节软骨的保护作用及机制。方法 36只健康大耳白兔随机分为假手术组(sham组)、CT治疗组(CT组)和生理盐水处理组(NS组),CT组和NS组采用改良Hulth法制备KOA模型,sham组以同样术式进入关节腔但不做其他处理。术后第6周开始CT组每天皮下注射CT 5 U/kg,sham组和NS组给与等量生理盐水皮下注射,连续4 w。观察KOA发病过程软骨形态变化、酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清和关节液白细胞介素(IL)-1β、免疫组化法检测关节软骨Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶(MMP)-1的变化、TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况。结果 NS组关节软骨损伤严重,Mankin评分明显高于sham组,血清及关节液IL-1β含量明显升高(P0.05),关节软骨Ⅱ型胶原含量明显降低,MMP-1活性和软骨细胞凋亡百分数明显升高(P0.05);而CT治疗组关节软骨损伤较NS组减轻、IL-1含量、MMP-1活性和软骨细胞凋亡百分数明显降低(P0.05),Ⅱ型胶原含量明显升高。结论 CT可能通过抑制IL-1β分泌,恢复软骨基质的合成与降解平衡,减少软骨细胞凋亡,对关节软骨具有一定的保护作用,从而延缓关节软骨退变过程。     

自拟组方补肾固筋方对膝骨性关节炎兔血清及关节液白细胞介素-1、肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察自拟组方补肾固筋方对膝骨性关节炎(KOA)兔血清及关节滑液白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达及调节机制。方法选取9个月龄健康雄性新西兰大白兔44只,随机盲法分为正常组、模型组、西药组、中药组,每组11只,除正常组外均采用改良Hulth造模法造模成功后连续给药12 w,取空腹血清及造模膝关节前方部分滑膜组织、股骨内侧髁软骨及软骨下骨及滑液,采用酶联免疫吸附(ELISA)检测血清及关节滑液IL-1、TNF-α的含量及变化。结果肉眼观察西药组关节间隙狭窄程度介于模型组和中药组之间,关节表面粗糙,软骨下骨赘生成明显;中药组关节间隙较其他各组稍窄,关节表面触之稍粗糙伴轻微骨赘生成;中药组光镜下见软骨细胞大小均匀排列整齐,模型组软骨细胞大小不均且呈簇状排列;模型组血清及关节液IL-1、TNF-α含量升高(P<0.01)。两个给药组与模型组比较血清及关节液IL-1、TNF-α含量降低(P<0.01),两给药组之间无明显差异(P>0.05)。结论补肾固筋方可以明显降低血清和关节滑液IL-1、TNF-α的分泌水平。     

骨痹颗粒防治兔骨关节炎的作用及机制

目的观察骨痹颗粒对兔骨关节炎(OA)的治疗作用机制。方法兔随机分为正常对照组、模型组、塞来昔布组及骨痹颗粒2.78,5.56,11.12 g生药/kg三个剂量组;采用兔关节腔注射木瓜蛋白酶法建立OA模型,连续给药8 w,检测家兔血清中白细胞介素(IL)-1β、前列腺素(PG)E2、基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1含量及关节液中诱导型一氧化碳合酶(i NOS)和一氧化氮(NO)水平,观察兔关节病理组织学变化。结果骨痹颗粒5.56,11.12 g生药/kg可抑制炎症因子IL-1β及PGE2的生成,降低MMP-1及MMP-3水平,提高TIMP-1水平,抑制关节液中i NOS表达及NO释放,减轻关节软骨病变,降低关节Mankin评分。结论骨痹颗粒对兔OA具有良好的治疗作用,其机制与抑制炎症介质和炎性因子生成、调节基质合成与分解代谢平衡有关。     

膝关节OA患者血清和关节液中IL-1、MMP-3、TIMP-1的水平变化及意义

目的探讨膝关节骨性关节炎（OA）患者血清和关节液中IL-1、基质金属蛋白酶（MMP）-3、MMP抑制剂-1（TIMP-1）水平及其与关节软骨损伤程度的关系。方法采用ELISA法检测46例膝关节OA患者（OA组）血清及膝关节液中的IL-1、MMP-1、TIMP-3水平,并与正常人血清（20例）和膝关节液（10例）标本（对照组）进行对比;依据关节镜下改良分度法对膝关节软骨损伤程度进行评价。结果 OA组患者血清、关节液中IL-1、MMP-3水平及关节液中MMP-3/TIMP-1均显著高于对照组（P均〈0.05）,血清TIMP-1水平与对照组无显著性差异,关节液中TIMP-1水平高于对照组（P〈0.05）。关节液中IL-1、MMP-3、TIMP-1水平及MMP-3/TIMP-1与关节软骨损伤程度呈正相关（P均〈0.05）。结论 OA患者血清和关节液中IL-1、MMP-3水平升高。血清、关节液中IL-1、MMP-3水平及MMP-3/TIMP-1是综合反映关节软骨损伤程度生物标志物,结合临床可作为早期诊断OA的手段之一。     

6w高强度跑台运动对大鼠关节软骨和关节滑液中基质金属蛋白酶-1、-3和-9的影响

目的探讨高强度跑台运动对大鼠关节软骨和关节滑液中基质金属蛋白酶(MMP)-1、-3、-9的影响。方法选取30只雌性SD大鼠,随机分成对照组和高强度运动组,每组15只,其中高强度运动组进行6 w高强度跑台运动。6 w后处死所有动物,取大鼠膝关节滑液以及股骨内侧髁软骨组织,HE染色观察软骨病理学改变;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠关节滑液中MMP-1、-3和-9蛋白的含量;Western印迹以及实时定量PCR法观察软骨组织中MMP-1、-3、-9蛋白和mRNA的表达。结果高强度运动组大鼠明显出现软骨损伤,并且关节滑液中MMP-1、-3、-9的蛋白水平明显高于对照组(P0.05);关节软骨中MMP-1、-3、-9的蛋白和mRNA水平明显高于对照组(P0.05)。结论高强度运动可导致关节软骨损伤;而关节滑液和关节软骨中MMP-1、-3、-9的高表达很可能是高强度运动致关节软骨损伤的机制之一。     

独活寄生汤对兔膝骨性关节炎关节液肿瘤坏死因子-α、白介素-6和基质金属蛋白酶-1水平的影响

目的通过观察独活寄生汤对兔膝骨性关节炎模型关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6和基质金属蛋白酶(MMP)-1水平的影响,探讨其治疗骨性关节炎的作用机制。方法将30只新西兰大耳兔随机分成3组,即正常组、模型组和独活寄生汤组,采用制动法复制膝骨性关节炎模型。独活寄生汤组兔予独活寄生汤灌胃,其余两组予生理盐水灌胃,连续治疗6 w后,测定各组兔膝关节液TNF-α、IL-6和MMP-1表达水平。结果治疗6 w后,独活寄生汤组与模型组比较,关节液中TNF-α、IL-6和MMP-1水平明显降低(P<0.01)。结论独活寄生汤能抑制IL-6、TNF-α、MMP-1的释放,从而延缓关节软骨的退变。     

臭氧对兔膝骨性关节炎关节冲洗液中细胞因子含量的影响

目的探讨臭氧对兔膝骨性关节炎关节冲洗液中细胞因子含量的影响。方法选取40只膝骨性关节炎模型新西兰兔,随机将其分为模型对照组和观察组,各20只,同时选取20只健康新西兰兔设为健康对照组。健康对照组和模型对照组兔采用空气对照治疗,观察组兔采取臭氧治疗。治疗结束后比较三组新西兰兔关节冲洗液中细胞因子白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α和一氧化氮(NO)的含量变化。结果模型对照组和观察组兔治疗前膝关节冲洗液中IL-1β、TNF-α和NO的含量明显高于健康对照组(P<0.05);观察组兔治疗后膝关节冲洗液中IL-1β、TNF-α和NO的含量明显对于模型对照组P<0.05)。结论臭氧治疗能够明显降低膝骨性关节炎兔关节冲洗液中细胞因子IL-1β、TNF-α和NO的含量,值得进一步临床研究。     

鱼腥草挥发油对膝关节骨性关节炎大鼠血清iNOS、MMP-3、MMP-13水平的影响

目的 观察鱼腥草挥发油对膝关节骨性关节炎(KOA)大鼠血清诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13水平的影响。方法 健康SD大鼠60只，分为正常组、模型组、阳性药物组(盐酸氨基葡萄糖水溶液灌胃)、鱼腥草挥发油制备液高、中、低剂量灌胃组(100、50、25 mg/kg),每组10只，正常组进行假手术，其余各组采用改良Hulth法进行造模，模型制备成功后连续给予6 w的药物灌胃，1次/d,正常组和模型组给予无菌生理盐水灌胃，于给药后的第1、3、5、6周检测各组右侧膝关节的宽度，给药结束后的次日，股动脉取血处死大鼠，取大鼠右侧膝关节软骨，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α、iNOS、MMP-3、MMP-13含量，观察各组大鼠膝关节软骨的病理学改变等。结果 在灌胃给药过程的不同测量时期，与正常组比较，模型组和各给药组膝关节肿胀度均非常明显(P<0.05);给药结束后，与模型组比较，阳性药物组和鱼腹草挥发油高剂量组膝关节肿度、血清TNF-α、IL-6、IL-8、iNOS、MMP-3和MMP...     

力竭性跑台运动对大鼠滑膜组织MMP-3及IL-1β表达的影响

目的 探讨力竭性跑台运动对大鼠滑膜组织基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为安静对照组和力竭性运动组,每组15只.力竭性运动组进行6 w力竭性跑台运动后,取两组大鼠膝关节滑膜组织,HE染色观察其组织变化,应用免疫组化法检测MMP-3及IL-1β在各组大鼠滑膜组织中的表达.结果 力竭性运动组大鼠滑膜组织中MMP-3及IL-1β的表达明显高于安静对照组大鼠(P＜0.05).结论 力竭性跑步运动能够增加滑膜组织MMP-3及IL-1β的表达,这种异常表达可能造成关节软骨的损伤,并增加发生骨性关节炎的危险性.     

不同负荷负重跑训练对老龄大鼠骨骼肌内MG29蛋白表达的影响

目的探讨不同负荷负重跑训练对老龄大鼠骨骼肌内MG29蛋白表达的影响。方法 28只17月龄的健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为对照组、低负重组、中负重组、高负重组,低、中、高负荷组大鼠分别给予8 w最大负重30%、50%、60%的跑台训练。每周称量大鼠体重,8 w后取股直肌,常规制作冷冻切片,行苏木素-伊红(HE)染色,观察骨骼肌形态;同时检测股直肌匀浆脂褐质、钙含量水平;采用Western印迹检测MG29蛋白表达水平。结果训练8 w后,低、中、高负重组大鼠体重均明显低于训练前,以高负重组大鼠体重降低最为明显(P0.05)。对照组骨骼肌结构改变最为明显,高负重组次之,中、低负重组的排列紧密性明显高于对照组和低负重组;中、高负重组的部分肌细胞直径较大。对照组和高负重组脂褐质浓度无明显差异;低、中负重组大鼠亦无明显差异;对照组和高负重组脂褐质浓度明显高于低、中负重组(P0.05)。低、中、高负重组股直肌匀浆钙含量均高于对照组,以低负重组钙离含量升高最为明显。低、中负重组股直肌MG29蛋白水平之间无明显差异;对照组和高负重组MG29蛋白水平之间亦无明显差异;但低、中负重组明显高于对照组和高负重组(P0.05)。结论最大负重的30%、50%强度的间歇负重跑可有效提升骨骼肌中的MG29蛋白表达水平,缓解大鼠骨骼肌的衰老进程。     

菩人丹超微粉对肥胖型T2DM大血管损伤大鼠ET-1、NO、FFAs含量的影响

目的 观察菩人丹超微粉(PRD)对2型糖尿病(T2DM)大血管损伤大鼠血清一氧化氯(NO)、内皮素(ET-1)、游离脂肪酸(FFAs)含量的影响,探讨PRD对肥胖型T2DM大血管损伤的保护作用及其部分机制.方法 采用雄性Wistar大鼠灌胃脂肪乳,辅以尾静脉快速注射小剂量链脲佐菌素,制备以胰岛素抵抗为特征的T2DM合并大血管病变的动物模型.成模大鼠随机分为PRD低、中、高剂量组,马来酸罗格列酮组以及模型组,各组分别灌胃给予相应药物治疗4 w,测定给药前及给药4 w末血清NO、ET-1、FFAs的含量.结果 PRD中、高剂量组均能极显著降低血清ET-1的含量(P<0.01),PRD低、中、高剂量组均能极显著提高血清NO含量(P<0.01).PRD中、高剂量组均能显著降低血清FFAs的含量(P<0.01～0.05).结论 PRD具有调节脂代谢,调整血管舒缩功能,保护损伤的血管内皮细胞的作用.     

复方穿蛭透皮贴对家兔骨关节炎的作用机制

目的研究探讨复方穿蛭透皮贴对家兔实验性骨关节炎作用机理。方法健康清洁级新西兰白兔,随机分为空白组、模型组和治疗组。治疗组及模型组进行改良Hulth法造模。造模成功后,治疗组予复方穿蛭透皮贴右膝关节外敷,2d 1次,4 w后分别进行X线和HE染色检查,并抽取3组关节液,用ELISA法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和前列腺素(PG)E2的含量。结果治疗组经X线检查,股骨髁、胫骨平台关节缘呈现唇样骨质增生不同程度变小,关节间隙宽,软骨下骨质密度淡化;HE染色较均匀,关节软骨表面平滑,关节软骨表层细胞排列轻度变形;关节液中IL-1β、IL-6、TNF-α和PGE 2的含量的含量水平显著下降(P0.05)。结论复方穿蛭透皮贴对骨关节炎有一定的抑制作用。     

帕金森病小鼠黑质纹状体小胶质细胞活化表达的炎性因子与多巴胺含量的关系

目的探讨帕金森病(PD)模型小鼠中活化的小胶质细胞(MG)诱导表达肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素(IL)-1β、前列腺素E2(PGE2)及一氧化氮(NO)与黑质纹状体多巴胺含量的关系。方法 40只C57BL/6小鼠随机分为:模型组20只,腹腔注射百草枯;对照组20只,腹腔注射生理盐水。观察两组小鼠行为活动。分别于腹腔注药后3、6 w处死小鼠,高效液相法测定小鼠黑质纹状体多巴胺含量;免疫组织化学法检测黑质部位MG胞数、TNF-α、IL-1β、PGE2及NO表达。结果腹腔注药后3 w和6 w模型组小鼠脑内多巴胺含量均较对照组明显减少(P<0.05);6 w后模型组小鼠黑质致密部MG较对照组明显增加,TNF-α及IL-1β表达较对照组明显增加(P<0.05)。3 w和6 w后模型组与对照组PGE2及NO表达无明显变化。结论 MG增生、活化及其表达的炎症因子TNF-α和IL-1β,是导致PD发病的重要环节。     

复元胶囊对大鼠膝骨关节炎软骨iNOS及血清PGE2、NO的影响

目的 观察复元胶囊(FYJN)对实验性大鼠膝骨关节炎软骨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及血清一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)的影响.方法 Hulth法建立骨关节炎模型,随机分成正常组、模型组、塞来昔布(CE)组、FYJN低、中、高剂量组,各组分别予相应药物灌胃12 w.HE染色并光镜观察股骨内侧髁软骨病理形态,免疫组化检测软骨中iNOS表达,硝酸基还原酶法及酶联免疫吸附法分别测定血清NO、PGE2含量.结果 FYJN低、中、高剂量组软骨iNOS及血清NO、PGE2均低于模型组(P<0.05,P<0.01,P<0.001).结论 FYJN呈剂量依赖关系降低骨关节炎软骨中iNOS表达及血清中NO、PGE2含量,对减轻关节炎症有一定的作用.     

中药塌渍对膝骨关节炎兔MMP-3、MMP-13、BMP-2、cylinD1、c-myc表达的影响

目的探讨中药塌渍疗法对膝骨关节炎(KOA)兔模型骨节软骨基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、骨形态发生蛋白(BMP)-2、cylinD1、c-myc mRNA表达的影响。方法选择石膏管型固定法制作新西兰兔KOA模型,随机分为空白组、模型组、治疗组(扶他林组、42℃中药塌渍治疗组、37℃中药塌渍治疗组、32℃中药塌渍治疗组),给药4 w后处死动物解剖右膝关节软骨,切片,HE染色后行病理学Mankin评分,采用RT-PCR检测MMP-3、MMP-13、BMP-2、cylinD1、c-myc mRNA的表达量。结果病理结果显示空白组关节软骨表面光滑,未见裂痕,有光泽,模型组关节软骨表面不平,色泽暗淡,有细小骨赘生成等,治疗组关节软骨表面均好于模型组; Mankin评分模型组最高,空白组最低,治疗组评分均显著低于模型组高于空白组(均P<0. 05),治疗组从高到低依次是32℃中药塌渍治疗组、扶他林组、37℃中药塌渍治疗组、42℃中药塌渍治疗组。PCR检测结果显示模型组MMP-3、MMP-13、BMP-2、cylinD1、c-myc mRNA的表达水平均高于空白组,各治疗组表达量均显著低于模型组(均P<0. 05),治疗组从高到低依次是32℃中药塌渍治疗组、扶他林组、37℃中药塌渍治疗组、42℃中药塌渍治疗组。结论中药塌渍疗法能够降低KOA模型兔软骨MMP-3、MMP-13、BMP-2、cylinD1、c-myc mRNA的表达,改善关节软骨病理。     

T-2毒素致大鼠关节软骨损伤的分子机制研究（Ⅰ）——血清细胞因子检测及其意义

目的观察实验性大鼠关节软骨损伤时血清中炎性细胞因子-IL-1a、IL-6和TNF—a水平,探讨其在软骨损伤中的作用。方法利用T-2毒素,进行大鼠亚慢性毒性实验,通过透明软骨的组织病理改变来确定软骨的损伤程度,同时用ELISA夹心法检测大鼠血清中IL-1a、IL-6和TNF—a水平,观察血清细胞因子水平与关节软骨病理损伤间是否有关联。结果T-2毒素可致大鼠关节软骨细胞变性、坏死,出现大面积无细胞区,有的病例关节软骨损伤严重,负重区表面出现较大坏死、缺失;ELISA检测结果表明,T-2毒素组大鼠血清IL-1a和IL-6水平较对照组明显升高,差异具有统计学意义;TNF—a含量虽较对照组高,但差异无统计学意义。结论血清IL-1a和IL-6水平与关节软骨病理损伤呈正相关关系,细胞因子可能与关节疾病的发生有关。