三苯氧胺联合米非司酮药物流产对早孕绒毛VEGF、TGF-β_1表达的影响

目的:探讨三苯氧胺联合米非司酮药物流产缩短流产后出血时间的可能机制。方法:将非意愿妊娠49d内要求药物流产的宫内早孕妇女50例随机分成,米非司酮+三苯氧胺组(A组):给予三苯氧胺120mg联合米非司酮150mg配伍米索前列醇600μg;米非司酮组(B组):将三苯氧胺换成安慰剂余同A组。应用免疫组化Envision法检测内自然排出绒毛组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF-β1)的表达,用Image-Pro Plus4.5图像分析软件测定VEGF、TGF-β1蛋白表达积分光密度值,并以21例负压吸宫流产绒毛组织为对照组(C组)。结果:VEGF蛋白在全部合体滋养细胞、细胞滋养细胞和血管内皮细胞表达,间质细胞大部分表达;TGF-β1蛋白在大部分合体滋养细胞和细胞滋养细胞表达,间质细胞和血管内皮细胞少量表达。A、B、C组绒毛VEGF、TGF-β1蛋白表达积分光密度值依次升高,VEGFIOD值分别为:33452.49±10666.87、42436.74±12979.98和53954.56±15946.22,TGF-β1IOD值分别为:29823.02±12357.60、40880.01±18022.13和59915.28±19219.37,两两比较,其差异有统计学意义,P值均<0.05。结论:米非司酮抑制VEGF、TGF-β1在绒毛组织的表达可能是其抗早孕机理之一,而三苯氧胺可进一步加强米非司酮的这一作用,这可能是其缩短米非司酮药物流产后出血时间的机制之一。     

米非司酮药物流产后绒毛蜕膜细胞凋亡的相关研究

目的:探讨米非司酮对早孕绒毛蜕膜细胞凋亡、增殖的作用机制。方法:以20例药物流产患者为研究组,以20例非意愿妊娠要求行人工流产负压吸引刮宫术的患者为对照组,分别收集绒毛和蜕膜标本,应用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,并采用免疫组织化学方法检测bcl-2、bax、fas、fasL、增殖细胞核抗原(PCNA)5种蛋白在绒毛和蜕膜中的分布与表达强度,同时应用原位杂交法测定fas与fasLmRNA的分布与表达强度。结果:凋亡细胞在正常早孕绒毛合体滋养细胞中少量存在,蜕膜中偶见;绒毛、蜕膜中bcl-2、bax、fas、fasL、PCNA均有表达。采用米非司酮药物流产的绒毛合体滋养细胞及蜕膜间质及腺上皮细胞的凋亡显著增多,同时伴有促凋亡bax、fas、fasL蛋白及fasLmRNA含量的增加,而PCNA蛋白含量与C组比没有变化。结论:米非司酮不仅能促进早孕绒毛合体滋养细胞、蜕膜间质及腺上皮细胞的凋亡,而且主要通过Fas与FasL转录及翻译途径介导,bax表达增加也其也有一定的相关性,此可能为其抗早孕机制之一。     

正常与药物流产绒毛蜕膜组织细胞凋亡及相关基因的表达

目的：探讨米非司酮对早孕绒毛蜕膜细胞调亡、增殖及相关基因表达的影响。方法：对正常早孕绒毛与蜕膜、药物流产完全与不完全的绒毛、药物流产不完全蜕膜标本各10份（共50份标本）,应用原位末端标记法进行细胞凋亡的组织学检测,免疫组织化学方法测定bcl-2、bax、fas、增殖细胞核捩的（PCNA）5种蛋白在组织中的分布与含量,同时应用原位杂交法测定fas与fasL mRNA的分布与含量。结果：正常早孕绒毛中存在少量凋 细胞,主要分布于合体滋养细胞,蜕膜中凋亡细胞偶见;绒毛蜕膜中均可检测到上述5种蛋白。米非司酮药物流产的绒毛合体滋养细胞凋亡显著增,蜕膜凋亡细胞也增多,同时伴有促凋亡baz、fas、fasL蛋白及fas、fasL、mRNA含量的增加,而PCNA蛋白含量无减少。结论：米非司酮能促进早孕绒毛合体滋养细胞,蜕膜间质及腺上皮细胞的凋亡,且主要通过fas与fasL转录及翻译途径介导,bax表达增加也有一定相关性,此可能为其抗早孕机理之一。     

胎膜早破绒毛膜羊膜bFGF与Bax、Bcl-2的表达

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)与凋亡调控基因Bax、Bcl-2在胎膜上的表达及与胎膜早破(premature rupture of membranes,PROM)发生的关系。方法采用免疫组化染色方法检测30例PROM及30例正常妊娠者的绒毛膜羊膜上bFGF与Bax、Bcl-2的表达。结果bFGF和Bax在滋养细胞、上皮细胞、间充质细胞和成纤维细胞胞浆内有表达,Bcl-2在绒毛膜合体滋养细胞上有表达;PROM组bFGF阳性平均积分光密度值(0.051±0.012)与正常组(0.098±0.027)比较明显降低(P<0.01),PROM组Bax阳性平均积分光密度值(0.086±0.021)与正常组(0.046±0.018)比较明显增高(P<0.01),PROM组Bcl-2阳性平均积分光密度值(0.058±0.020)与正常组(0.050±0.014)比较差异无统计学意义(P>0.05);PROM组bFGF与Bax呈负相关(r=-0.616,P<0.01),正常组bFGF与Bax间无相关性(r=-0.302,P>0.05)。结论绒毛膜羊膜上bFGF的低水平表达及过度细胞凋亡对PROM的发生有重要促进作用。     

米非司酮对人早孕绒毛细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨米非司酮对人早孕绒毛滋养细胞增殖和凋亡的影响。方法对１５例正常早孕吸宫流产和１５例米非司酮流产病例的绒毛组织,应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在细胞中的染色（细胞增殖）情况,ＤＮＡ缺口原位末端标记法检测细胞凋亡。结果正常早孕绒毛细胞滋养细胞增殖指数为５３．７４％±１．３４％,且见细胞浆阳性染色,合体滋养细胞未见ＰＣＮＡ阳性染色;合体滋养细胞和细胞滋养细胞的凋亡指数分别为２．５２％±０．８６％和０．５２％±０．２６％;米非司酮流产绒毛细胞滋养细胞增殖指数降为５０．８６％±１．４４％,细胞浆阳性现象消失;细胞凋亡指数显著增加,合体滋养细胞和细胞滋养细胞分别达到２２．１６％±２．２６％和２０．１２％±１．７４％。结论米非司酮终止早孕可能是通过抑制滋养细胞增殖和促进滋养细胞凋亡来实现的     

正常妊娠中细胞增殖细胞凋亡情况的研究

目的　研究细胞增殖和细胞凋亡在正常妊娠不同孕期胎盘绒毛、蜕膜生长发育中的作用。方法　对 40例正常早孕吸宫流产病例和 40例正常晚孕分娩病例的胎盘绒毛和蜕膜进行分析 :免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化物酶法 (S -P法 )检测细胞增殖 ;用DNA缺口原位末端标记技术 (TUNEL法 )检测细胞凋亡。结果　正常早孕绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜中的增殖指数 (PI)分别为 (70 74± 1 34 ) %、0、(89 32± 1 75 ) % ,凋亡指数 (AI)分别为 (10 2 7± 0 35 ) %、(15 2 8± 2 43) %、(5 2 3± 1 35 ) %。正常晚孕胎盘细胞滋养细胞、合体滋养细胞和蜕膜中增殖指数 (PI)分别为 (2 10± 1 2 8) %、0、(2 0 4± 1 31) % ;凋亡指数 (AI)分别是 (1 0 6± 0 94) %、(41 79±1 48) %、(6 0 81± 1 41) %。即 :正常早、晚孕绒毛和蜕膜组织中都有一定量的细胞增殖和细胞凋亡发生 ,但早孕时以细胞增殖为主 (P <0 0 1) ,晚孕时以细胞凋亡为主 (P <0 0 1)。结论　细胞增殖和细胞凋亡都是细胞生长代谢的形式 ,随着妊娠进展 ,胎盘细胞增殖下降、细胞凋亡增加。提示 :细胞增殖和凋亡对胎盘绒毛的正常发育和老化起重要作用     

重度妊娠高血压综合征患者胎盘组织细胞凋亡及其调控基因 …

目的　研究细胞凋亡及其调控基因在重度妊娠高血压综合征 (妊高征 )发生、发展中的作用。方法　对 40例正常晚孕妇女 (对照组 )和 40例重度妊高征患者 (观察组 )的胎盘组织进行分析。用DNA缺口原位末端标记 (TUNEL)技术检测细胞凋亡 ;免疫组织化学方法检测促进和抑制凋亡基因 (bax/bcl 2 )的表达。结果　对照组胎盘细胞滋养细胞、合体滋养细胞中凋亡指数分别为 ( 1.1±0 .9) %、( 41.8± 1.5 ) % ;bax阳性率分别为 ( 1.0± 0 .9) %、( 2 8.9± 9.7) % ;bcl 2阳性率分别为 ( 2 .2±0 .8) %、( 2 2 .9± 0 .7) % ,总bax/bcl 2为 0 .7～ 1.7。观察组胎盘细胞滋养细胞、合体滋养细胞的凋亡指数分别为 ( 4.3± 1.2 ) %、( 45 .3± 1.4) % ;bax阳性率分别是 ( 2 .2± 0 .8) %、( 42 .5± 11.7) % ;bcl 2阳性率分别是 ( 3 .2± 0 .8) %、( 2 3 .3± 7.8) % ;总bax/bcl 2为 1.0～ 3.2。即 :对照组胎盘中有一定量的细胞凋亡、bax、bcl 2表达 ,bax/bcl 2表达间呈平衡趋势 ;观察组中细胞凋亡明显增高 (P <0 .0 1) ,bax表达也明显增强 (P <0 .0 1) ,bcl 2表达仅呈增高趋势 ,但差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,bax/bcl 2比值明显增高(P <0 .0 1)。结论　细胞凋亡及其调节基因的表达间具有一致性 ;细胞凋亡、bax/bcl 2表达     

妊娠肝内胆汁淤积症胎盘细胞凋亡与Fas、FasL的研究

目的　探讨妊娠肝内胆汁淤积症 (intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)胎盘组织Fas及 Fas L (Fasligand)表达在细胞凋亡中的作用。　方法　采用 d U TP缺口末端标记法 (TU NEL )和免疫组化技术对 31例 ICP患者胎盘组织中的细胞凋亡、Fas、Fas L的基因表达进行检测 ,并以正常妊娠胎盘组织 31例作为对照组。　结果　 ICP组胎盘组织中细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及绒毛间质细胞的凋亡指数 (AI)分别为 4 9.0 9± 9.13(t=13.4 1)、4 6 .6 4± 9.77(t=12 .16 )、35 .0 9±9.4 9(t=8.4 3)、38.74± 9.70 (t=11.2 8) ,明显高于对照组 (P<0 .0 0 5 )。 ICP组细胞滋养细胞和合体滋养细胞 Fas表达明显增强 (P<0 .0 0 5 ) ,Fas L在细胞滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞及绒毛间质细胞中的表达明显低于对照组 (P<0 .0 0 5 )。　结论　 ICP患者胎盘组织中 Fas表达增强 ,Fas L表达减弱 ,可导致母胎间免疫耐受的破坏 ,胎盘细胞凋亡增加 ,可能与 ICP患者胎盘功能减退有关。     

三苯氧胺联合米非司酮对ICAM-1、LIF在早孕绒毛中表达的影响

目的:检测3组早孕流产绒毛组织中的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白血病抑制因子(LIF)的表达,探讨三苯氧胺联合米非司酮缩短流产出血时间的可能作用机理,为临床预防和治疗药物流产后出血提供理论依据。方法:随机将非意愿妊娠7周内要求药物流产的宫内早孕妇女80例分成2组:三苯氧胺联合米非司酮+米索前列醇组(A组);米非司酮+米索前列醇组(B组)。40例人工流产手术为对照组(C组)。应用West-ern blot及实时定量PCR方法分别检测绒毛组织中ICAM-1、LIF的蛋白及mRNA的表达。结果:A组的平均出血时间较B组短,C组出血时间最短。A组绒毛组织中ICAM-1、LIF蛋白及mRNA的表达量最低,B组绒毛组织中ICAM-1、LIF蛋白及mRNA的表达量稍高,C组绒毛组织中ICAM-1、LIF蛋白及mRNA的表达量最高。结论:三苯氧胺可协同米非司酮加强ICAM-1和LIF的表达下调,推测三苯氧胺联合米非司酮缩短药物流产出血时间可能与ICAM-1和LIF的表达变化有关。     

米非司酮对人甲孕绒毛细胞增殖和凋亡的影响

探讨米非司酮对人早孕绒毛滋养细胞增殖和凋亡的影响。方法 对１５例正常早吸宫流产和１５例米非司酮流病例的绒毛组织，应用免疫组织化学，ＡＢＣ法检测增殖细胞核抗原在细胞中的染色情况，ＤＮＡ缺口原位末端标记法检测细胞凋亡。结果正常早孕绒毛细胞滋养细胞增殖指数为５３．７４％±１．３４％，且见细胞浆阳性染色，合体滋细胞未见ＰＣＮＡ阳性染色；