CD147在激光诱导的大鼠脉络膜新生血管中的表达

背景 脉络膜新生血管(CNV)是眼底多种疾病的共有病理改变,是造成中心视力严重损害的主要原因之一.基质金属蛋白酶(MMPs)诱导因子CD147能通过旁分泌作用刺激多种细胞MMPs表达,降解细胞间质和基底膜成分,具有促进血管新生作用. 目的 通过建立激光诱导的棕色挪威(BN)大鼠CNV动物模型,观察CD147和血管内皮生长因子(VEGF)在CNV形成过程中的动态表达. 方法 将30只清洁级BN大鼠按照随机数字表法分为正常对照组6只和激光光凝组24只,于光凝后1、7、14和21d通过荧光素眼底血管造影(FFA)观察CNV形成;采用Western blot法分别检测正常对照组和激光光凝后1、7、14和21 d组大鼠视网膜色素上皮(RPE)-脉络膜-巩膜复合物中CD147蛋白相对表达水平的变化;采用ELISA法检测各组大鼠玻璃体腔内VEGF质量浓度变化. 结果 FFA检查显示,激光光凝后7d开始出现盘状荧光素渗漏,激光光凝后14d形成CNV.正常对照组激光光凝前,光凝后1、7、14和21d,大鼠RPE-脉络膜-巩膜复合物中CD147蛋白的相对表达量分别为1.00±0.43、0.97±0.53、0.99±0.45、1.56±0.67和2.27±0.54,玻璃体腔内VEGF质量浓度分别为(72.96±29.95)、(79.36±10.46)、(103.82±32.94)、(166.05±21.54)和(195.64±39.90) pg/ml,总体比较差异均有统计学意义(CD147:F=10.95,P＜0.01;VEGF:F=304.50,P＜0.01);激光光凝后14 d和21 d,大鼠CD147蛋白和VEGF的相对表达量均较正常对照组明显升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 CD147在激光诱导的大鼠CNV中进行性升高,与VEGF的表达趋势一致,CD147可能参与CNV的早期形成,在眼部血管新生中发挥重要作用.     

蛴螬提取物对兔脉络膜新生血管VEGF和bFGF表达的影响

目的:评价蛴螬提取物对有色家兔脉络膜新生血管(cho-roidal neovascularization,CNV)血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的抑制作用。方法:有色家兔40只,实验组32只,空白对照组8只。实验组兔通过倍频Nd:YAG激光(波长为532nm)眼底光凝方式建立CNV模型。光凝后立即随机分为4组,每组8只(16眼),分别为实验对照组、维生素E治疗组、驻景丸加减方治疗组、蛴螬提取物治疗组。激光光凝后7,14,21,28d各组兔均行眼底照相观察、荧光素眼底血管造影(FFA)和光学相干断层扫描(OCT)检查。分别于光凝后14、28d两次处死,每次随机选取动物4只(8眼),检查完后空气注射处死动物摘取眼球后节行组织病理学检查,行VEGF和bFGF免疫组织化学分析,并行透射电镜观察,以评估蛴螬提取物对CNV的抑制效果。结果:光凝后14d,实验组CNV的生成率分别为47.9%、41.7%、43.3%和28.6%,经χ2检验,CNV生成率治疗组较对照组均降低(P<0.05),且蛴螬提取物组最低,与另外3组比较有统计学意义(P<0.05)。光凝后28d,光凝区纤维血管组织增生(FVP)厚度治疗组较对照组显著变薄(P<0.05)。且视网膜脉络膜巩膜切片新生血管定量分析及组织学切片,透射电镜观察结果显示实验治疗组CNV的生成与对照组相比均减少,差异有统计学意义(P<0.05);且蛴螬提取物治疗组表达低于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:蛴螬提取物可以抑制实验性CNV中VEGF和bFGF的表达,从而可以抑制实验性CNV的形成。     

重组补体因子B-小干扰RNA抑制大鼠脉络膜新生血管形成的作用及其机制

背景 脉络膜新生血管(CNV)是眼内新生血管的重要表现形式.研究发现补体旁路途径的激活在激光诱导的CNV发展中起关键作用,旁路途径中的补体因子B(CFB)可以作为一个重要的靶点来阻断补体活化的旁路途径. 目的 探讨不同浓度重组CFB-siRNA(CFB-siRNA)抑制激光诱导大鼠CNV的效果及其作用机制.方法 取棕色挪威(BN)大鼠60只120只眼,采用随机数字表法将其分为空白对照组、实验对照组和25、50、75 μg CFB-siRNA组,每组12只鼠24只眼.实验对照组和CFB-siRNA组大鼠用激光光凝法建立CNV模型,不同剂量CFB-siRNA组于激光光凝后第1、3、5天分别经鼠尾静脉注射相应剂量的CFB-siRNA;实验对照组大鼠以同样方法注射生理盐水,空白对照组大鼠不给予任何干预措施.各组大鼠分别于光凝后第3、7、14、21、28天进行荧光素眼底血管造影( FFA),根据荧光素渗漏程度对各光凝斑评分并检测CNV的生长情况;采用免疫组织化学法检测各组大鼠脉络膜内血管内皮生长因子(VEGF)、Ⅷ因子的表达情况.分别于第7、14、21、28天用免疫组织化学法检测脉络膜中CFB、VEGF、转化生长因子p2(TGF-β2)蛋白的表达,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察CFB与VEGFmRNA、TGF-β2mRNA表达的关系. 结果 不同剂量CFB-siRNA组的CNV发生率明显低于实验对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);75 μg CFB-siRNA治疗组CNV发生率明显低于25 μg CFB-siRNA组(P＜0 05).免疫组织化学检测结果显示,不同剂量CFB-siRNA组VEGF、Ⅷ因子在大鼠脉络膜中的表达较2个对照组均减弱,且75 μg CFB-siRNA组减弱程度高于25 μg CFB-siRNA组.光凝后14 ～ 21 d,各剂量CFB-siRNA组VEGF蛋白、Ⅷ因子和TGF-β2在脉络膜中的表达均低于空白对照组,各组总体比较差异有统计学意义(P＜0.05).光凝后7～21 d,不同剂量CFB-siRNA组的CFB在脉络膜中的表达明显低于空白对照组,各组总体比较差异均有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR检测结果显示,实验对照组CFB表达持续增加,VEGF、TGF-β2呈曲线变化,21 d时为表达高峰;不同剂量CFB-siRNA组中CFB、VEGF、TGF-β2表达显著减少,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 尾静脉注射CFB-siRNA能够有效抑制激光诱导的大鼠CNV生成,其抑制效果随着注射剂量的增加而增强.补体激活旁路途径在CNV生成中扮演着重要角色,抑制CFB可减少CNV生成中VEGF和TGF-β2的表达.     

坎地沙坦酯对脉络膜新生血管VEGF表达的影响

目的评价坎地沙坦酯对实验性有色家兔脉络膜新生血管（CNV）血管内皮生长因子（VEGF）表达的抑制作用。方法24只健康有色家兔，实验眼通过氩激光破坏性光凝诱导脉络膜新生血管模型，然后随机分成两组，给予不同处置。A组为对照组；B组为坎地沙坦酯组。分别于处置后24h，7、14、28d散瞳并麻醉后行光学相干断层扫描（OCT）、荧光素眼底血管造影（FFA）检查后，过量麻醉处死动物取眼球后节行组织病理学检查，并行血管内皮生长因子（VEGF）免疫组织化学分析。结果两组实验眼随处置时间的不同，各项检查有不同的变化，7d时表达最高，与24h，14d、28d比较差异有统计学意义（P〈0．05）；且治疗组表达低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论坎地沙坦酯抑制实验性CNV中VEGF的表达。     

骨髓来源细胞在脉络膜新生血管生成中的作用

目的 探讨骨髓来源细胞(BMCs)在脉络膜新生血管(CNV)生成中的作用。 方法 将绿色荧光蛋白(GFP)转基因小鼠骨髓细胞移植给野生型C57BL/6J小鼠建立嵌合体,应用532 nm倍频激光诱发嵌合体小鼠(处理组)和野生型小鼠(对照组)CNV。利用脉络膜铺片观察由GFP阳性细胞形成的新生血管;免疫荧光染色观察CNV中GFP 阳性细胞是否表达血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。结果 激光光凝后第29天,脉络膜铺片显示CNV中有大量绿色的骨髓来源细胞,由其组成的血管面积约占CNV表面积的16.22%;免疫荧光染色结果显示,CNV区域的一些BMCs表达VEGF和bFGF。结论 BMCs通过参与新生血管组成及分泌促血管生成因子的方式,可能在CNV发生过程中发挥着重要作用。     

激光诱导小鼠脉络膜新生血管中膜攻击物与血管生长因子的表达

目的 观察激光诱导小鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)中膜攻击物与血管生长因子的表达.方法 雄性C57BL/6小鼠66只,随机分为对照组与眼镜蛇毒因子(cobra venom factor,cw)预处理组,每组各33只.用氪红激光诱导小鼠CNV动物模型;免疫组织化学检测激光诱导后24h视网膜色素上皮-脉络膜-巩膜复合体补体膜攻击复合物(membrane attack complex,MAC)的表达;RT-PCR分析激光诱导后1d、3d、5d、7d血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF) mRNA表达;Western blot检测激光诱导后3 d VEGF蛋白的表达.结果 CVF预处理组:激光诱导后24 h,未见MAC阳性染色;激光诱导后3d、5d、7d与激光诱导后1d相比未见VEGF mRNA表达增加;激光7d未见CNV形成.对照组:激光诱导后24 h MAC呈阳性染色;激光诱导后3d、5d、7d与激光诱导后1d相比VEGF mRNA分别增加380％、276％、98％(均为P＜0.01);激光后3d,对照组较CVF预处理VEGF蛋白高表达.结论 CNV形成与补体MAC形成、VEGF表达上调相关联;MAC沉积导致VEGF表达增加;VEGF表达上调是CNV形成的主要原因.     

Notch-Dll4在激光诱导的大鼠脉络膜新生血管生成中的作用

目的探讨Notch信号通路中Delta样配体4(Delta-like ligand4,Dll4)在激光诱导的大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)生成中的作用机制。方法将雄性棕色挪威(brown-Norway,BN)大鼠分为正常组、光凝组、实验组和对照组。光凝组、实验组、对照组利用532nm激光诱导建立双眼CNV模型。实验组在建立CNV模型后立刻玻璃体内注射25g.L-1Avastin10μL,对照组注射0.01mmol.L-1PBS10μL。采用免疫荧光染色检测Dll4和血管内皮生长因子(vascular endo-thelial growth factor,VEGF)在正常组和光凝组光凝后7d中的表达;采用Western-blotting和RT-PCR检测正常组和光凝组(光凝后1d、3d、7d、14d)实验组、对照组(注射后7d)Dll4和VEGF的蛋白和mRNA表达;通过HE染色和视网膜色素上皮-脉络膜-巩膜铺片检测实验组和对照组(注射后14d)CNV生成的厚度和面积。结果Dll4和VEGF在CNV区域有共表达。Dll4和VEGF蛋白及其mRNA的表达趋势...     

内皮抑素抑制脉络膜新生血管的实验研究

目的　探讨内皮抑素蛋白抑制激光诱导的大鼠脉络膜新生血管 (CNV)的效果。方法采用基因重组方法获得内皮抑素蛋白 ,取BrownNorway大鼠 30只 (6 0只眼 ) ,用激光光凝方式建立CNV模型 ,随机分为内皮抑素组、生理盐水组及对照组 ,每组 10只 ,分别给予内皮抑素 2 0 μl(5g/L) ,生理盐水 2 0 μl视网膜下注射 ,对照组光凝后不做处理 ,观察期为 14d。应用激光共焦显微镜下脉络膜血管平铺法测量各组CNV面积 ,以荧光素眼底血管造影后荧光素渗漏程度、光镜下观察结果、CD10 5及因子Ⅷ免疫组化染色结果作为观察指标。结果　内皮抑素组CNV面积小于生理盐水组及对照组 (F=30 7 35 1,P <0 0 0 1) ;内皮抑素组各光凝斑荧光渗漏程度评分与生理盐水组及对照组间比较 ,差异有显著意义 (χ2 =13 711,P <0 0 0 1) ;光凝后 14d ,生理盐水组和对照组光凝区脉络膜层增厚 ,脉络膜毛细血管层内皮细胞增殖 ,新生血管增生 ,内皮抑素组内皮细胞增生数量及新生血管明显少于前两组 ;CD10 5、因子Ⅷ的阳性表达量明显降低 ;各组视网膜内核层及神经纤维层内皮细胞均无CD10 5阳性表达。结论　内皮抑素可以有效抑制CNV的形成 ,脉络膜血管平铺及CD10 5检测对于CNV的定性、定量评估具有一定意义。     

小鼠的脉络膜新生血管模型

目的建立激光诱导的小鼠的脉络膜新生血管模型,观察其自然演变过程.方法通过氩激光光凝诱导C57BL/6J小鼠产生脉络膜新生血管,光凝后1 wk、2wk、4wk、2 mo、3 mo、4mo、5mo、6 mo行荧光素眼底血管造影检查,并且在光凝后1 wk、2wk、4wk、2mo、3 mo、6 mo处死小鼠(n=2),摘除眼球,行组织学检查.结果光凝后1 wk、2 wk、4 wk、2 mo、3 mo、4mo、5mo、6 mo荧光素眼底血管造影显示有荧光渗漏的光凝斑的百分率分别为59.0%(46/78)、62.1%(41/66)、44.4%(24/54)、42.9%(18/42)、46.7%(14/30)、44.5%(8/18)、38.9%(7/18)、22.2%(4/18),组织学检查显示光凝斑内有新生血管形成,随着时间的延长,视网膜色素上皮细胞呈不同程度增生,可完全包绕脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV).结论氩激光光凝可成功诱导小鼠的CNV模型,CNV在光凝后2wk达到高峰.     

G蛋白信号转导调节子5参与实验性脉络膜新生血管生成的可能机制

目的 探讨G蛋白信号转导调节子5(RGS5)参与实验性脉络膜新生血管(CNV)生成的可能机制.方法 对照实验研究.采用532 nm激光,对88只(176只眼)雄性棕色挪威(BN)大鼠诱导实验性CNV.其中40只大鼠按光凝后时间分组:光凝后1 d、3 d组各6只大鼠,光凝后7 d组7只大鼠,光凝后14 d组21只大鼠;48只大鼠在光凝后两个时间段按处理因素分组:光凝后7 d的生理盐水组和Avastin注射组各6只大鼠;光凝后14 d的生理盐水组和Avastin注射组各18只大鼠.另选择未进行任何干预的19只大鼠作为正常对照组.分别采用免疫荧光染色法、免疫印迹法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠视网膜和脉络膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)和RGS5蛋白及其mRNA表达灰度值;组织病理学切片和脉络膜铺片观察CNV厚度和面积.组间RGS5蛋白和mRNA表达、VEGF蛋白和mRNA表达灰度值比较,均采用Student's t检验.结果 (1)RGS5和VEGF蛋白表达水平:光凝后14 d组大鼠RGS5蛋白表达水平达到高峰,灰度值为0.899±0.057,但与正常对照组(0.820±0.032)差异无统计学意义(t=2.079,P＞0.05);光凝后7 d组大鼠VEGF蛋白表达水平最高,灰度值为0.600±0.031,较正常对照组(0.382±0.036)明显升高(t=7.959,P＜0.01).(2)RGS5和VEGF的mRNA表达水平:光凝后1 d和3 d组大鼠RGS5 mRNA表达灰度值分别为0.763±0.035、0.725±0.054,较正常对照组(0.886±0.047)明显下降(t=3.646,3.888;均P＜0.05),光凝后14 d组达到高峰,但与正常对照组差异无统计学意义(t=2.194,P＞0.05);光凝后7 d组大鼠VEGF mRNA表达水平达到高峰,灰度值为0.855±0.029,较正常对照组(0.274±0.039)明显升高(t=20.709,P＜0.01).提示在大鼠CNV形成过程中,RGS5蛋白和mRNA表达高峰期均晚于VEGF蛋白和mRNA表达高峰期.(3)CNV厚度和面积变化:光凝后14 d大鼠CNV形成,CNV厚度为(81.513±10.091)μm,CNV面积为(35 867.167±3159.007)μm2;玻璃体腔注射Avastin后,CNV厚度为(70.967±8.867)μm,CNV面积为(12 397.50±1308.559)μm2;注射Avastin前后的CNV厚度和面积差异有统计学意义(t=2.616,15.179;P＜0.05,0.01).结论 光凝后RGS5与VEGF共同表达于大鼠的CNV区域,RGS5表达高峰期晚于VEGF表达高峰期.玻璃体腔注射Avastin后,在抑制CNV形成过程中,可下调RGS5表达水平.RGS5可能参与了VEGF调控CNV生成的机制.     

可溶性Tie2融合蛋白抑制小鼠实验性脉络膜血管新生

目的:观察可溶性Tie2融合蛋白(soluble Tie2fusion pro-tein,sTie-Fc)对小鼠脉络膜血管新生(choroidal neovascu-larization,CNV)的抑制作用。方法:采用激光击射的方法诱导成年C57BL/6小鼠CNV模型,术前及术后3,6,9d选取1眼玻璃体腔注入人sTie-Fc0.67μg,对侧眼在相同时点注入人IgG作为对照。激光术后10d处死小鼠,行脉络膜灌流铺片及组织病理学检查观察CNV的发展,定量评价sTie-Fc对于实验性CNV的抑制作用。结果:术后10d所有激光光斑均发展为实验性CNV,脉络膜灌流铺片(16.7±4.0)×10-3mm2vs(30.2±5.1)×10-3mm2,P<0.01)及组织病理学检查(1.70±0.56vs3.07±0.91,P<0.01)结果一致表明sTie-Fc明显抑制了小鼠CNV的发展。结论:sTie-Fc可以抑制实验性CNV的发展。     

粉防己碱抑制激光诱导鼠脉络膜新生血管

目的 观察玻璃体腔注射粉防己碱对实验性鼠脉络膜新生血管的抑制作用及其对视网膜结构和功能的影响。 方法 应用半导体激光（波长810 nm，曝光时间0.1 s，光斑直径100 μm，能量120 mW）光凝诱导20只Brown Norway (BN) 大鼠20只眼的脉络膜新生血管(CNV)模型。将大鼠随机分为实验组和对照组，每组各10只大鼠20只眼，实验组大鼠激光光凝后0、3 d玻璃体注射0.05 ml浓度为3.21 μmol/L的粉防己碱药液，对照组玻璃体内注射同体积的生理盐水；两组均在激光光凝14 d后行荧光素眼底血管造影，观察其新生血管的发生率。另有5只健康BN大鼠，每只鼠右眼玻璃体内注射入0.05 ml浓度为3.21 μmol/L的粉防己碱药液，左眼注射同体积生理盐水，第一次注药前及注药后1 h、1 d和第二次注药后1 h、1、7、14 d行视网膜电图（ERG）检查，第二次注药后14 d行光学、电子显微镜检查。 结果 实验组大鼠CNV发生率为23.26%，明显低于对照组63.33%（P<0.01）。3.21 μmol/L的粉防己碱玻璃体内注射b波波幅比率与注药前相比差异无统计学意义(P>0.05)。光学、电子显微镜检查未见明显细胞异常。 结论 粉防己碱能抑制鼠CNV形成；3.21 μmol/L浓度的粉防己碱玻璃体内注射对视网膜无毒性作用。 (中华眼底病杂志, 2006, 22, 242-244)     

塞来昔布对实验性脉络膜新生血管的抑制作用

目的　观察选择性环氧化酶-2 (COX-2)抑制剂塞来昔布（celecoxib）对实验性脉络膜新生血管（CNV）的抑制作用。方法　鼠龄8~10周的健康雄性棕色挪威（BN）大鼠30只,随机分为空白对照组、实验对照组和塞来昔布治疗组,每组10只。塞来昔布治疗组采用灌胃法给药,剂量50 mg/kg,2次/d。给药后7 d,采用氪激光建立大鼠CNV模型,分别于激光光凝后3、7、14、21、30 d对实验对照组和塞来昔布治疗组所有大鼠行荧光素眼底血管造影(FFA)检查。激光光凝后21 d,每组随机处死5只大鼠,摘除眼球,制作空白对照组球后段组织切片、实验对照组和治疗组CNV膜切片。常规苏木精-伊红（HE）染色,计算实验对照组和塞来昔布治疗组的CNV膜相对厚度;采用免疫组织化学方法检测COX-2、血管内皮生长因子（VEGF）及基质金属蛋白酶-2（MMP-2)的表达。结果　激光光凝后21 d,塞来昔布治疗组 CNV发生率明显低于实验对照组（χ2=7.106 8,P=0.007 7）,CNV相对厚度较实验对照组明显减少（t=16.760 0,P=0.000 0）,COX-2、VEGF和MMP-2在CNV膜上的阳性表达均明显低于实验对照组（t=5.710 0,5.840 0,8.020 0;P=0.000 0）;空白对照组大鼠COX-2、VEGF和MMP-2在视网膜和脉络膜中的表达非常弱。结论　预防性服用塞来昔布能抑制激光诱导CNV的发生;通过抑制COX-2可减少CNV中VEGF和MMP-2的表达。     

FLK-1单克隆抗体抑制实验性脉络膜血管新生

目的：探讨FLK-1单克隆抗体对小鼠脉络膜新生血管（choroidal neovascularization,CNV）的治疗作用。 方法：采用激光击射的方法诱导成年C57BL/6小鼠CNV模型,术前及术后3,6,9d利用腹腔注射的方法给与实验组小鼠FLK-1单克隆抗体500μg,激光术后10d处死小鼠,行脉络膜灌流铺片及组织病理学检查观察CNV的发展,定量评价FLK-1单克隆抗体对于实验性CNV的治疗作用。 结果：术后10d所有激光光斑均发展为实验性CNV,脉络膜灌流铺片及组织病理学检查结果一致表明实验组小鼠CNV的发展受到明显抑制（P〈0.001）。 结论：FLK-1单克隆抗体可以抑制实验性CNV的发展,提示拮抗FLK-1可能成为治疗CNV有效的生物学方法之一。     

激光诱导小鼠脉络膜新生血管中C9的表达及眼镜蛇毒因子的抑制作用

目的 观察激光诱导小鼠脉络膜新生血管(CNV)中C9的表达及眼镜蛇毒因子(CVF)对CNV的抑制作用.方法 C57BL/6J小鼠36只随机分为对照组、单纯激光光凝组、CVF干预组,每组12只.后两组用激光光凝方式建立CNV模型.CVF干预组在激光光凝前2d和激光光凝后每天以0.1 μg/g的剂量腹腔注射CVF;激光光凝后6d,采用荧光素眼底血管造影检查确定单纯激光光凝组小鼠CNV形成.其后1、3、5、7d,断颈处死各组小鼠后摘除眼球作冰冻切片.采用苏木精-伊红(HE)和链霉亲和素生物素过氧化物酶复合物-荧光素异硫氰酸盐(SABC-FITC)免疫荧光组织化学染色法观察膜攻击复合物(MAC)中C9的表达.连续冠状切片后,选取免疫荧光SABC-FITC染色切片组织像,采用Image-Pro Plus 6.0图像处理分析软件测量平均累积吸光度[A,旧称光密度(OD)]值.结果 单纯激光光凝组CNV形成后7d,单纯激光光凝组仍可见CNV,CVF干预组未见CNV形成.单纯激光光凝组CNV形成后1、3、5、7d,单纯激光光凝组均可见C9表达,CVF干预组均未见C9表达.对照组、单纯激光光凝组及CVF干预组3组间平均累积A值比较,差异有统计学意义(F=146.045,P=0.000).各组组内在单纯激光光凝组CNV形成后1、3、5、7d各时间点平均累积A值比较,差异也有统计学意义(F=9.725,P=0.000).结论 激光诱导小鼠CNV中存在C9表达;CVF诱导补体消耗可抑制CNV形成.     

银杏叶提取物对激光诱导的大鼠脉络膜新生血管的疗效

目的:观察银杏叶提取物对激光诱导的大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)的疗效。方法:选取60只大鼠,随机分为4组,分别为正常组、模型组、实验组、生理盐水组,每组15只大鼠。除正常组外其余各组均行氪激光光凝制作CNV模型,模型组不做任何处理,实验组均在光凝后每日行腹腔注射银杏叶提取物(Extract of Ginkgo Biloba,EGb761),生理盐水组在光凝后每日腹腔注射生理盐水。于光凝后7,14,21d后对各组大鼠行眼底造影检查,观察CNV的渗漏情况,然后立即处死各组动物,行脉络膜视网膜切片,HE染色后观察各组视网膜及脉络膜的结构和CNV的情况。结果:荧光造影结果显示正常大鼠脉络膜无渗漏,7d时各组大鼠脉络膜渗漏均较轻微,14,21d时模型组和生理盐水组大鼠脉络膜渗漏明显,实验组大鼠脉络膜荧光素渗漏点数明显要少于对应的模型组和生理盐水组差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组大鼠的视网膜、脉络膜结构保存比模型组更好。结论:腹腔注射EGb761可以明显减少大鼠CNV的形成,用药时间越长,疗效越好。     

AAV介导的EPO基因下调对CNV的抑制作用

研究腺相关病毒（AAV）介导的促红细胞生成素（EPO）shRNA靶向视网膜色素上皮（RPE）的EPO表达水平下调对脉络膜新生血管（CNV）进展的影响，以期发现潜在的湿性年龄相关性黄斑变性（nAMD）的治疗靶点。方法：实验研究。在HEK293T细胞内对包含EPOshRNA片段的AAV质粒进行验证（采用Student's t检验）。选用2个月龄C57/B6J小鼠10只，右眼作为实验组，视网膜下注射AAV1-sCBA-GFP-EPO-shRNA；左眼作为对照组，视网膜下注射AAV1-sCBA-GFP。注射后3周，进行激光诱导的CNV造模，造模后拍摄眼底照片确认病毒转染及造模情况，造模后15 d RPE铺片以 测算CNV面积大小，并用Student's t检验方法进行组间比较。结果：EPO shRNA在HEK293T细胞内对EPO表达的下调效率为69.6%，且与对照组相比差异具有统计学意义（t=6.080，P=0.022）。眼底照片显示，注射了AAV的小鼠造模成功；视网膜有点状的绿色荧光蛋白表达，证实病毒转染成功。造模后15 d，RPE铺片显示实验组的平均CNV面积与对照组相比小44.7%（t=4.279，P=0.001）。结论：AAV介导的EPO shRNA对CNV的发生和发展起到显著的抑制作用，在未来可能作为nAMD的新治疗方法。