新疆石河子女性乳腺癌患者BRCA1与BRCA2基因突变的研究

目的探讨BRCA1和BRCA2基因突变情况。方法通过PCR及DHPLC方法检测60例乳腺癌患者中BRCA1和BRCA2基因所有外显子及外显子内含子拼接区域基因的突变情况。结果发现BRCA1突变包括3个疾病相关性突变,5种错义突变,4种核苷酸多态性,而BRCA2突变包括4个疾病相关性突变,8种错义突变,5种核苷酸多态性。结论新疆石河子地区家族性乳腺癌的BRCA1基因突变率为6.12%,低于国外和国内其他地区;BRCA1基因致病性突变更多见于ER/PR(+)的乳腺癌患者。     

BRCA基因检测进展

研究表明,BRCA1/2基因突变是遗传性乳腺癌/卵巢癌综合征的主要致病因素,可导致乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、胰腺癌及前列腺癌等风险显著增加。BRCA基因检测可帮助临床进行准确的治疗和判断预后、评估家属遗传风险,有助于采取预防性手术等。目前国内BRCA基因检测的有三代测序技术,每一代又有许多检测平台,有各自的优缺点。国内外的BRCA1/2基因检测应用因为患病人群特征、仪器设备、医疗水平等因素而有所差异。本文综述BRCA基因检测的研究进展及临床应用。     

BRCA1基因突变及启动子甲基化与乳腺癌

乳腺癌是女性最常见的癌症,乳腺癌易感基因1(BRCA1)是研究比较深入的乳腺癌的抑癌基因。BRCA1基因失活,将会促进乳腺癌的发生。目前的研究成果比较倾向于认为:BRCA1基因突变与遗传性乳腺癌关系比较密切,基因突变位点多种多样,不同种族间各异;而在散发性乳腺癌中,启动子甲基化是BRCA1基因失活的主要方式,并且与散发性乳腺癌的病理学、免疫学及临床特征等参数间存在相关性。     

卵巢上皮性癌患者BRCA1/2和KRAS基因突变与预后的相关性研究

目的 探讨卵巢上皮性癌患者BRCA1/2和KRAS基因突变与预后的关系.方法 运用基因测序分析2007年1月-2009年12月收治的术后采用顺铂、紫杉醇化疗的卵巢上皮性癌95例的BRCA1/2和KRAS基因突变情况,并根据检测结果分为突变组和未突变组,随访5年生存情况;采用Kaplan-Meier法分析BRCA1/2和KRAS基因突变状态及其与术后化疗预后的关系,Cox比例风险回归模型分析卵巢上皮性癌患者预后的影响因素.结果 BRCA1/2基因突变率为35.8％,KRAS基因突变率为7.4％.BRCA1/2基因突变组5年生存率高于未突变组(P＜0.05);KRAS基因突变组和未突变组的5年生存率比较差异无统计学意义(P＞0.05).肿瘤分级、对化疗敏感与否、BRCA1/2基因突变与否以及组织学状况为预后影响因素,BRCA1/2基因突变的患者其死亡风险低于未突变者(P＜0.05).结论 BRCA1/2基因突变患者对顺铂、紫杉醇化疗敏感性好,患者预后生存时间相对较长,该基因可作为指导卵巢癌患者临床个性化化疗的生物标记物.     

乳腺瘤易感基因BRCA1、BRCA2在浸润性导管癌中的表达及意义

目的 探讨乳腺癌易感基因BRCA1、BRCA2蛋白的异常表达在乳腺浸润性导管癌发生、发展中的作用及其意义.方法 应用免疫组织化学S-P法检测BRCA1、BRCA2蛋白在121例乳腺浸润性导管癌标本和30例乳腺良性增生性病变中的表达;并将检测结果与临床病理指标的关系进行相关性分析.结果 BRCA1、BRCA2基因蛋白在乳腺癌组与乳腺良性病变组中的异常表达差异有统计学意义,其失表达率随乳腺癌组织学分级的增高而增高,在低年龄组、雌激素受体(ER)阴性组BRCA1基因蛋白失表达率增高,BRCA1和BRCA2在乳腺癌中的表表这具有一致性.结论 BRCA1、BRCA2蛋白在乳腺良性病变中有很高的表达,在乳腺癌中其表达率下降,且均与乳腺瘸组织学分级县有不同程度的关系,表明其肿瘤抑制功能丧失,促进细胞的肿瘤性转化,对遗传性和散发性乳腺癌的发生发展具有相似的作用.     

散发性乳腺癌组织中BRCA1、BRCA2及P21^waf表达及临床意义

目的检测散发性乳腺癌组织中BRCA1、BRCA2及P21^waf的表达,探讨BRCA1、BRCAZ及P21^waf在乳腺癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化Envision法检测90例散发性乳腺癌组织及35例乳腺腺病组织中BRCA1、BRCA2及P21耐蛋白的表达。结果BRCA1在乳腺腺病及散发性乳腺癌组织中的表达率分别为97．14％（34／35）、71．11％（64／90）。BRCA1与组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移情况及患者年龄无相关性。BRCA2在二者中的表达率为91．43％（32／35）、73．33％（66／90）。BRCA2与患者年龄有相关性,与组织学分级、肿瘤大小和淋巴结转移情况无相关性。乳腺腺病组织中不表达P21^waf,在散发性乳腺癌组织中P21^waf表达率为57．78％（52／90）。BRCA1与P21^waf蛋白的表达无相关性（P〉0．05）。结论BRCA1、BRCA2及P21^waf蛋白异常表达可能在散发性乳腺癌的发生发展过程中起作用。     

宁波地区乳腺癌BRCA1基因突变检测的研究

目的通过对宁波地区60例乳腺癌BRCA1基因突变检测,了解宁波地区乳腺癌患者BRCA1基因突变位点及携带分布情况。方法选择2014~2015年宁波市第七医院甲乳外科收治的无血缘关系原发性乳腺癌患者共60例。全部为女性,年龄22~69岁,平均43岁,静脉采血提取DNA,对BRCA1基因进行全长测序。BRCA1基因的突变通过DNA扩增并送交测序,结果经测序证实。统计分析BRCA1基因突变情况。结果 60例遗传性乳腺癌,共发现14例(23.33%)BRCA1基因突变,其中185 del AG(2例)、4956 AG(2例),1100del A(1T例),IVS17-1GT(1例),3449 ins A(1例),其余突变在BIC数据库中未见报道。在三阴性乳腺癌中BRCA1突变组织分期较晚,发病年龄偏早。结论宁波地区乳腺癌BRCA1基因突变率较高,多为移码突变;三阴性乳腺癌BRCA1突变的组织分期较高;在宁波地区BRCA1基因的185 del AG、4956 AG为BRCA1基因突变热点。     

在不同亚群的散发性乳腺癌组织中BRCA1蛋白的表达

目的通过本研究分析影响BRCA1蛋白表达的因素;BRCA1蛋白表达与临床相关指标的相关性。方法检测121例散发性乳腺癌和20例乳腺良性组织石蜡标本的BRCA1蛋白表达,结合ER、HER-2的表达情况和患者的年龄、原发肿瘤的病理类型和腋淋巴结转移状况,进行统计学分析。结果20例乳腺良性组织BRCA1蛋白均在细胞核阳性表达;121例散发性乳腺癌组织按ER和HER-2的表达情况分组后,在ER(+)HER-2(+)、ER(-)HER-2(+)、ER(+)HER-2(-)、ER(-)HER-2(-)各组中,BRCA1蛋白在细胞核阳性表达率分别为37.0%(10/27)、37.5%(6/16)、74.4%(32/43)、65.7%(23/35),乳腺癌ER(-)HER-2(+)与ER(+)HER-2(-)和ER(-)HER-2(-)组间的BRCA1蛋白表达有显著性差异(P<0.05);ER(+)HER-2(+)与ER(+)HER-2(-)组间的BRCA1蛋白表达也有显著性差异(P<0.05)。结果表明,乳腺癌组织中HER-2阳性表达的,BRCA1阳性表达率降低;BRCA1蛋白低表达、HER-2高表达的乳腺癌组织,腋淋巴结转移的比例增高;BRCA1蛋白表达在不同病理类型的乳腺癌中未见差异。结论BRCA1蛋白表达检测,结合ER、HER-2的表达水平,对临床判断预后有指导意义。     

BRCA1和BRCA2表达与乳腺浸润性导管癌临床特征相关性分析

目的探讨乳腺上皮中乳腺癌易感基因1、2(BRCA1、2)的表达与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的相关性。方法应用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP法)检测BRCA1、2在33例乳腺浸润性导管癌和31例乳腺良性病变组织中的表达情况,并联合检测雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体-2(CerbB-2)的表达情况,分析其与乳腺浸润性导管癌患者年龄、肿块大小、分化程度、是否绝经、淋巴结转移等特征的关系。结果 BRCA1的阳性表达与乳腺浸润性导管癌患者年龄、肿瘤分化程度、是否绝经均显著相关(P<0.05),与淋巴结转移和肿瘤大小无关(P>0.05);BRCA2的阳性表达与乳腺浸润性导管癌患者年龄、淋巴结转移、肿块大小、是否绝经均显著相关(P<0.05),与分化程度无关(P>0.05)。BRCA1、2的表达与CerbB-2的表达均呈负相关(r=-0.355、-0.517,P<0.05)。BRCA1的表达与ER的表达呈负相关(r=-0.394,P<0.05),与PR的表达无关(r=0.243,P>0.05)。BRCA2的表达与ER、PR的表达无关(r=0.201、0.245,P>0.05)。结论 BRCA1、2的表达与乳腺浸润性导管癌的发生、发展密切相关,在乳腺癌治疗及预后中有着重要的参考意义。     

BRCA1和相关蛋白在乳腺癌中的表达与相关分析

目的分析乳腺癌易感基因(BRCA1)和相关凋亡调控蛋白C-myc、Bcl-2和p53在乳腺浸润性导管癌中表达的相关性,与临床病理指标的关系,探讨BRCA1等蛋白表达检测对乳腺癌诊断和治疗的指导意义。方法免疫组织化学SP法,检测20例乳腺良性病变和120例乳腺浸润性导管癌中BRCA1、C-myc、Bcl-2和p53的表达,收集患者临床资料,通过校正的Pearsonχ2检验进行统计分析。结果在良性乳腺病变,BRCA1、C-myc和p53蛋白在细胞核的阳性表达率分别为95.0%(19/20)、10.0%(2/20)和5.0%(1/20),Bcl-2在细胞质/膜阳性表达率为85.0%(17/20);在浸润性导管癌,BR-CA1、C-myc和p53蛋白阳性表达率分别为60.0%(72/120)、38.3%(46/120)和36.7(44/120),Bcl-2阳性表达率为50.8%(61/120);与良性乳腺病变比较,浸润性导管癌中BRCA1、Bcl-2阳性表达率明显降低,C-myc和p53表达增加,均有显著性差异(P<0.05)。BRCA1表达与C-myc和p53过表达相关;C-myc表达与p53表达相关;BRCA1、p53、C-myc表达与Bcl-2表达均无显著相关性。BRCA1、C-myc和Bcl-2表达与组织分级和腋淋巴结转移相关。结论乳腺浸润性导管癌中,BRCA1失表达与C-myc和p53过表达、组织学分级和腋淋巴结转移相关,凋亡调控基因的异常表达参与乳腺浸润性导管癌的发生。     

PARP-1抑制剂和BRCA基因在乳腺癌治疗中的研究进展

多腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerases-1,PARP-1]和BRCA在DNA单链和双链修复途径中起着至关重要的作用。研究表明,根据"合成致死"机制,通过抑制PARP-1活性,可以导致BRCA-1/2缺陷细胞DNA损伤修复的障碍,最终增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性,因此以PARP-1和BRCA为靶点联合用药,或者在BRCA1和BRCA2基因突变的乳腺癌中使用PARP-1抑制剂,选择性杀死DNA修复缺陷的癌细胞,均显示出惊人的抗肿瘤效果。综述了联合PARP-1抑制剂和BRCA基因在乳腺癌放射治疗中的作用机制和临床研究结果,提出了临床策略中可能存在的问题以及未来发展方向。     

BRCA1基因与乳腺癌的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤。BRCA1是重要的乳腺癌易感基因,亦是一种抑癌基因。它参与了细胞周期的调节,DNA损伤修复,基因的转录调控等功能。BRCAl基因的突变与家族性乳腺癌的发生密切相关,而BRCA1蛋白在散发性乳腺癌中的表达水平降低,提示其在散发性乳腺癌中也有重要作用。该文将对BRCA1的基因突变,甲基化和多态性等遗传学改变与乳腺癌的易感性,治疗和预后作了综述。了解BRCA1与乳腺癌的发生、发展及预后,对于最终发现治疗乳腺癌的新方法有着重要价值     

FAMOUS研究：法莫替丁对阿司匹林所致胃肠粘膜损害的预防作用

背景及目的：抑制聚腺苷二磷酸酯核糖聚合酶（PARP）可致某些肿瘤细胞DNA修复障碍,促进肿瘤细胞凋亡,是治疗肿瘤的潜在方法,特别是对于BRCA1或BRCA2基因突变患者。Olaparib（AZD2281）为一种新型的口服PARP抑制剂,本研究对olaparib的有效性及安全性进行了临床评价。     

首个高度个性化治疗抗癌药物问世

有研究早期试验成果显示,一种量身定制的药物,可攻击肿瘤细胞的致命弱点,从而缩小或稳定某些较难根治的遗传性癌症患者身上的肿瘤。这种被称为Olaparib的药物是目前世界上首个可达到高度个性化治疗的新型抗癌药物。在一小部分乳腺癌、卵巢癌和前列腺癌中,BRCA1或BRCA2基因的一个副本具有缺陷,BRCA基因可对在复制过程中负责校正基因组的蛋白进行编码。如果BRCA基因突变的细胞突然失去一个功能性基因副本,其校对功能受损,在细胞分裂时这种基因突变就会开始累积。     

BRCA2在卵巢癌中的表达及其与临床病理的相关性

目的比较乳腺癌易感基因2(breast cancer suscepbility gene 2,BRCA2)在卵巢癌组织中的表达及其与临床病理因素的相关性,分析其作为早期卵巢癌诊断基因的可行性。方法采用荧光定量PCR的方法研究BRCA2 RNA在卵巢上皮癌、正常卵巢组织中的表达差异,并进一步应用western-blotting的方法检测BRCA2蛋白的表达。结果其BRCA2 RNA在卵巢癌组织中的表达量低于正常卵巢组织(P<0.05);BRCA2 RNA在临床Ⅲ~Ⅳ期的表达量低于临床Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05)。BRCA2 RNA与CA125在卵巢癌中的表达无相关性(P<0.05)。BRCA2蛋白在卵巢癌中的表达量同样低于正常卵巢组织(P<0.05)。结论 BRCA2在卵巢癌的发生发展中起着一定作用,其与CA125的联合监测有望提高卵巢癌的阳性诊断率。     

不同散发性乳腺癌群体的BRCA1和CEP17基因拷贝数

目的检测BRCA1和CEP17在BRCA1启动子甲基化和非甲基化的散发性乳腺癌中的基因拷贝数。方法按照BRCA1启动子甲基化状态将46例散发性乳腺癌分成甲基化组和非甲基化组。在由冰冻病理组织制作的组织印片上,应用双色荧光原位杂交(FISH)技术检测BRCA1和CEP17的基因拷贝数。本实验室自行PCR扩增BRCA1探针并标记生物素(Biotin ULS Labeling Kit,Fermentas Company);PCR扩增CEP17探针并标记CyTM3(Label IT Cy3TMLabelingKit,Mirus Bio Corporation)。探针的杂交效率通过对正常白细胞进行BRCA1/CEP17FISH来检测。结果在BRCA1启动子甲基化的乳腺癌组织中BRCA1和CEP17的平均基因拷贝数分别为1.70和1.77,而在非甲基化的组织中分别为2.25和2.33。两组间的BRCA1(P<0.001)和CEP17(P<0.005)基因平均拷贝数存在明显差异。但总体的BRCA1/CEP17比率没有显著不同(甲基化组平均为0.96,非甲基化组为0.97,P=0.32)。结论我们在中国乳腺癌群体中建立了FISH检测方法,并发现BRCA1基因拷贝数与启动子甲基化相关。     

不同膳食脂肪酸构成对乳腺癌大鼠BRCA1表达的影响

目的探讨不同比例n-6/n-3多不饱和脂肪酸(PUFA)对甲基亚硝基脲(MNU)诱导的乳腺癌大鼠乳腺癌易感基因(BRCA1)表达的影响。方法雌性SD大鼠65只随机分为5组,即n-6PUFA组、10:1n-6/n-3组、5:1n-6/n-3组、1:1n-6/n-3组和正常对照组,前四组以50mg/kg体重MNU单次腹腔注射诱导大鼠乳腺肿瘤发生,正常对照组注射等体积无菌生理盐水。给药后立即分组喂养不同饲料,并在8周和18周时处死动物剪取乳腺组织,利用RT-PCR和Westernblot技术检测组织中BRCA1mRNA和蛋白表达状况。结果四组乳腺癌大鼠BRCA1表达较正常对照组均有所下降,四组中BRCA1的表达以1:1n-6/n-3组最强,并随n-6/n-3比值增大而下降。结论不同膳食脂肪酸构成对MNU诱导的乳腺癌大鼠BRCA1的表达具有不同影响,1:1n-6/n-3膳食脂肪酸构成能有效抑制乳腺癌大鼠BRCA1表达的下降。     

非小细胞肺癌患者肿瘤组织与外周血中BRCA1表达的相关性研究

目的检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织和外周血中BRCA1 mRNA的表达及相关性,探讨其临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测35例未经化疗的非小细胞肺癌患者肿瘤组织与外周血中BRCA1 mRNA的表达水平。并以表达水平的中位值作为截断值,将BRCA1的表达程度划分为高表达、低表达。结果肿瘤组织中BRCA1 mRNA的相对表达量为4.00±4.05,中位值为2.3;外周血中相对表达量为2.40±2.33,中位值为1.7。肿瘤组织的相对表达量明显高于外周血,具有统计学意义(P=0.047)。肿瘤组织与外周血中BRCA1 mRNA相对表达量具有相关性(相关系数r=0.245,P=0.041),同时高表达或同时低表达的表达程度相符率达到80%。结论未经化疗的非小细胞肺癌患者外周血在一定程度上可以替代肿瘤组织进行BRCA1表达检测。     

人肺癌细胞、组织中BRCA1蛋白的表达及与顺铂化疗的相关性研究

目的研究肿瘤抑制基因BRCA1在肺癌中的作用,其蛋白在肺癌组织中的分布特征和肿瘤发生中的蛋白特性。BRCA1蛋白在肺癌肿瘤组织的低、高水平表达。回顾性分析BRCA1表达水平与顺铂-化疗的相关性。方法以乳腺癌的细胞株作为阳性对照组,对肺癌组织中的BRCA1亚细胞分布做了免疫荧光双重染色,免疫组织化学等实验并进行量化。病例资料回顾性分析采用SPSS统计学系统。结果 BRCA1蛋白在肺癌的组织中呈一定比例分布,这点在不同的非小细胞肺癌细胞系、非小细胞肺癌患者组织标本中均得到证实。免疫荧光双重染色法证实BRCA1蛋白在肺癌细胞胞浆和胞核间互动,24%BRCA1蛋白在细胞核分布,40.3%胞核、胞浆同时存在,35.7%只在胞浆中存在BRCA1蛋白。肺癌组织呈BRCA1低表达(占患者总人数40%)和高表达(占患者总人数30%)的患者其预后与顺铂治疗有相关性。结论我们的多病例研究结果都证实BRCA1的胞浆胞核有明确比例分布,提示其可能参与肺癌组织中蛋白功能调节机制,并可能具有与肺癌发生相关的蛋白特性,BRCA1表达与顺铂化疗预后的相关性得到证实。在肺癌细胞其亚细胞分布现象预示着将有更好的肺癌临床治疗的生物靶点。研究也提示预测BRCA1蛋白表达水平(低表达)预示以顺铂化疗有更好的预后。     

散发性乳腺癌组织中BRCA1蛋白表达及其意义

目的探讨散发性乳腺癌患者癌组织中BRCA1蛋白表达及其临床意义。方法根据患者年龄将乳腺癌分为≤40岁及〉40岁两组,各取50例作为研究对象,病理诊断均为浸润性导管癌;术前未经任何治疗。同时选取乳腺腺病20例对照。构建组织芯片,采用免疫组化（S-P法）检测癌组织中BRCA1蛋白表达情况。结果BRCA1蛋白在腺病中表达于腺泡及导管上皮细胞核（阳性率90％）;在乳腺癌中表达于癌细胞胞质或细胞核（阳性率64％）,差异具有统计学意义（P〈0．05）。乳腺癌患者年龄≤40岁BRCAl蛋白阳性表达率（52．0％）低于年龄〉40岁组（76．0％）;同时无淋巴结转移组其BRCA1蛋白阳性表达率（80．6％）高于伴有淋巴结转移组（54．7％）,其差异具有统计学意义（P〈0．05）。而BRCA1蛋白表达与乳腺癌患者的肿瘤临床分期以及病理组织分级无关（P〉0．05）。结论散发性乳腺癌组织中BRCA1蛋白表达缺失与患者发病年龄及有无淋巴结转移显著相关,通过对BRCAl蛋白的检测,有助于筛选乳腺癌的高危人群及其患者。