EGCG对大肠癌细胞系LoVo细胞增殖的影响及其机制

目的:探讨EGCG对大肠癌细胞系LoVo细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养的LoVo细胞,用不同浓度EGCG处理24、48、72 h,MTT法测定其对LoVo细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;EGCG(浓度分别为10、40、80μg/m L)处理LoVo细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡、分光光度计检测Casepase-3相对活性、RT-PCR和western blot法检测环氧合酶2(COX-2)基因表达情况。结果:EGCG(浓度10~80μg/m L)能显著抑制LoVo细胞增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;EGCG(浓度分别为10、40、80μg/m L)作用LoVo细胞48 h后,细胞凋亡率分别为12.5%、23.3%、35.4%,对照组凋亡率为3.4%;Casepase-3相对活性显著增加;COX-2的表达降低,呈剂量依赖性。结论:EGCG能抑制LoVo细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与增加细胞Casepase-3活性及下调COX-2基因的表达有关。EGCG有望成为代替NSAIDs或COX-2特异性抑制剂用于大肠癌防治。     

熊果酸对前列腺癌细胞凋亡影响及其机制

目的:探讨熊果酸对前列腺癌细胞系PC-3细胞凋亡的影响及其机制。方法:体外培养PC-3细胞,用不同浓度的熊果酸处理24、48、72 h,MTT法测定其对PC-3细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;熊果酸(浓度分别为20、40、80μmol/L)处理PC-3细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡,分光光度计检测Casepase-3、Casepase-9相对活性,western blot法检测COX-2、PTEN基因表达情况。结果:熊果酸(浓度10~100μmol/L)能抑制PC-3细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;熊果酸(浓度分别为20、40、80μmol/L)作用PC-3细胞48 h后,细胞凋亡率分别为12.5%、23.3%、35.4%,对照组凋亡率为3.4%;Casepase-3、Casepase-9的相对活性显著增加;COX-2的表达降低,而PTEN的表达升高,呈剂量依赖性。结论:熊果酸能抑制PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调COX-2基因的表达及上调PETN基因并增加细胞Caspase-3、Caspase-9激活线粒体凋亡途径有关。熊果酸是一种前景广阔的抗肿瘤药物。     

EGCG通过抑制COX-2表达及PGE2合成诱导胃癌细胞系HGC27凋亡

目的:探讨EGCG对胃癌细胞系HGC27细胞凋亡的影响及其机制。方法:体外培养的HGC27细胞,分为对照组和实验组,实验组用不同浓度EGCG处理24、48、72 h,对照组加入同等体积的培养基,MTT法测定其对HGC2细胞增殖的影响;EGCG(浓度分别为0、10、20、40μg/m L)处理HGC27细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡,分光光度计检测Casepase-3、Casepase-9相对活性,Rh123探针染色流式细胞仪检测线粒体膜电位变化,western blot法检测环氧合酶2(COX-2)基因表达,ELISA法检测PGE2含量。结果:EGCG(浓度10~80μg/m L)能显著抑制HGC27细胞增殖,呈剂量和时间依赖性;EGCG(浓度分别为10、40、80μg/m L)作用HGC27细胞48 h后,细胞凋亡率分别为14.8%、25.8%、37.7%,对照组凋亡率为0.6%;Casepase-3、Casepase-9相对活性显著增加,线粒体膜电位降低,COX-2的表达降低,PGE2合成减少。结论:EGCG可通过抑制HGC27细胞COX-2表达及PGE2合成,激活线粒体凋亡途径,抑制细胞增殖并促进其凋亡。EGCG可能是一种前景广阔的抗肿瘤药物。     

吗啡对胃癌细胞系HGC27细胞增殖的影响及其机制

目的探讨吗啡对人胃癌细胞系HGC27细胞增殖的影响及其机制。方法体外培养的HGC27细胞,用不同浓度吗啡处理24、48、72 h,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定其对HGC27细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;实验组用吗啡（浓度分别为0.05、0.1、0.2μmol/L）处理HGC27细胞48 h,对照组加入不含药物的培养基,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡、分光光度计检测细胞凋亡蛋白酶-3（Casepase-3）相对活性、western blot法检p16、bcl-2、bax基因表达情况。结果吗啡（浓度0.025～0.4μmol/L）能抑制HGC27细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;吗啡（浓度分别为0.05、0.1、0.2μmol/L）作用HGC27细胞48 h后,细胞凋亡率分别为9.4%、11.5%、21.4%,而对照组凋亡率仅为2.2%;Casepase-3相对活性显著增加,处理后Casepase-3相对活性分别为（1.32±0.08）、（1.85±0.06）和（2.45±0.07）,对照组为（0.92±0.07）;p16和bax蛋白表达量升高,而bcl-2蛋白表达量降低,呈剂量依赖性。结论吗啡能抑制HGC27细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与上调p16表达,进而引起bax蛋白表达量升高,而bcl-2蛋白表达量降低,并增加细胞Casepase-3活性有关。     

熊果酸对乳腺癌细胞凋亡影响及其机制

目的：探讨熊果酸对乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其机制。方法：体外培养MDAMB-231细胞,用不同浓度的熊果酸处理24、48、72 h,MTT法测定其对MDA-MB-231细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;熊果酸（浓度分别为20、40、80μmol/L）处理MDA-MB-231细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,分光光度计检测Casepase-3、Casepase-9相对活性,western blot法检测p16、p27基因表达情况。结果：熊果酸（浓度10~100μmol/L）能抑制MDA-MB-231细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;熊果酸（浓度分别为20、40、80μmol/L）作用MDA-MB-231细胞48 h后,细胞凋亡率分别为11.5%、21.4%、36.6%,对照组凋亡率仅为2.2%;细胞周期结果显示熊果酸能抑制细胞的G1期行进和G1/S转换,S期细胞比例降低;Casepase-3、Casepase-9的相对活性显著增加;p16、p27的表达升高,呈剂量依赖性。结论：熊果酸能抑制MDA-MB-231细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与上调p16、p27表达阻滞细胞周期并增加细胞Caspase-3、Caspase-9激活线粒体凋亡途径有关。熊果酸是一种前景广阔的抗肿瘤药物。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对人宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。方法 体外培养HeLa细胞,分为对照组和实验组,实验组用不同浓度的EGCG处理24、48、72 h,对照组加入等体积的培养基。采用MTT法测定EGCG对HeLa细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;EGCG(浓度分别为20、40、80μg/mL)处理HeLa细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期、分光光度计检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Casepase-3)相对活性、Western blot法检测bcl-2/bax蛋白表达情况。结果 EGCG(浓度10~100μg/mL)能抑制HeLa细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;浓度为20、40、80μg/mL的EGCG作用HeLa细胞48 h后,细胞凋亡率逐渐上升,分别为12.4%、23.4%、35.4%,明显高于对照组(3.3%);细胞周期结果显示EGCG能抑制细胞的G1期行进和G1/S转换,降低S期细胞比例;实验组HeLa细胞Caspase-3相对活性分别为(1.36±0.07)、(1.85±0.06)、(2.45±0.07),均高于对照组(0.93±0.06),差异均有统计学意义(P<0.05);bax蛋白表达量升高,而bcl-2蛋白表达量降低,呈剂量依赖性。结论EGCG能抑制HeLa细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与增加细胞Casepase-3活性、下调bcl-2基因的表达及上调bax基因有关。EGCG是一种前景广阔的抗肿瘤药物。     

青蒿琥酯对胃癌细胞系 HGC27 细胞增殖、凋亡的影响及其机 制简

目的 探讨青蒿琥酯对大胃癌细胞系HGC27细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法 体外培养HGC27细胞,采用不同浓度青蒿琥酯处理24、48、72 h,MTT法测定其对HGC27细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;青蒿琥酯（浓度分别为20、40、80 mg/L）处理HGC27细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡、分光光度计检测Casepase-3、Caspase-9相对活性、Western blot法检RUNX-3蛋白表达情况.结果 青蒿琥酯（浓度10～100 mg/L）能抑制HGC27细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态.青蒿琥酯（浓度分别为20、40、80 mg/L）作用HGC27细胞48 h后,细胞凋亡率分别为11.5％、21.4％、36.6％,而对照组凋亡率仅为2.2％;处理后Casepase-3相对活性分别为（0.19±0.02）、（0.25±0.04）和（0.31±0.03）,对照组为（0.11±0.02）,Casepase-9相对活性分别为（0.18±0.02）、（0.23±0.03）和（0.30±0.04）,对照组为（0.10±0.02）,与对照组比较,青蒿琥酯处理组Casepase-3、Caspase-9相对活性显著增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;RUNX-3蛋白表达上调,呈剂量依赖性.结论 青蒿琥酯能抑制HGC27细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与增加细胞Casepase-3、Caspase-9活性、上调RUNX-3蛋白的表达有关.青蒿琥酯是一种前景广阔的抗肿瘤药物.     

大蒜素对脑胶质瘤C6细胞增殖和凋亡的实验研究

[目的]探讨大蒜素对体外培养的脑胶质瘤C6细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用及其机制。[方法]培养脑胶质瘤C6细胞至对数生长期,不同浓度大蒜素作用下,于倒置显微镜及Hoechst33258荧光染色显微镜下观察C6细胞形态学变化;四甲基偶氮噻唑蓝法(tetrazolium salt colorimetry,MTT)检测不同浓度大蒜素对C6细胞增殖的影响并计算抑制率;钙依赖性磷脂结合蛋白-荧光素/碘化丙啶双染法(Annexin V-fluorescein/propidium iodide,Annexin V-FITC/PI)检测凋亡率;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期;蛋白质印迹法(western blotting,WB)检测Bax、Bcl-2基因的表达。[结果]大蒜素作用C6细胞24h后,于倒置显微镜观察可见C6细胞生长明显抑制,部分细胞皱缩变形,出现成泡现象;Hoechst33258荧光染色显微镜下观察发现凋亡的细胞,细胞的体积变大,核固缩、凝集,核染色质边集,出现浓染致密的颗粒块荧光信号,并随着大蒜素浓度增加表现越加明显。不同浓度(5、10、20、40、80μg·m L~(-1))大蒜素作用C6细胞(24h、48h、72h)后,细胞增殖受到抑制,与0μg·m L~(-1)大蒜素比较差异有统计学意义(P0.01);同一浓度大蒜素作用C6细胞48h、72h后,与24h比,差异有统计学意义(P0.01)。随着大蒜素浓度的增加,C6细胞凋亡率上升,与0μg·m L~(-1)大蒜素比较差异有统计学意义(P0.01);其中80μg·m L~(-1)大蒜素显著抑制C6细胞增殖、诱导其凋亡,与各浓度大蒜素比,差异有统计学意义(P0.01)。20μg·m L~(-1)大蒜素作用C6细胞24h后,与0μg·m L~(-1)大蒜素比G0/G1期细胞比例增加,S、G2/M期细胞比例降低,差异有统计学意义(P0.05)。随着大蒜素浓度的增加Bax表达水平上升、Bcl-2表达水平下降,Bcl-2/Bax比值逐渐上升,与0μg·m L~(-1)大蒜素比较差异有统计学意义(P0.01);其中80μg·m L~(-1)大蒜素与5、20μg·m L~(-1)大蒜素比,差异有统计学意义(P0.01)。[结论]大蒜素能体外抑制C6细胞的增殖,并诱导其凋亡,其中80μg·m L~(-1)大蒜素作用最强,分子机制涉及调控Bax、Bcl-2基因的表达。     

刺槐素通过下调NF-κB/COX-2表达抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖

目的:探讨刺槐素对卵巢细胞系SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,并分析可能的作用机制。方法:体外培养的SKOV3细胞,用不同浓度刺槐素(浓度0、4、8、16、32μmol/L)分别处理SKOV3细胞24、48、72 h,MTT法测定细胞增殖;刺槐素(浓度分别为0、8、16、32μmol/L)处理SKOV3细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法检测Bax、Bcl-2、COX-2、p-NF-κB的表达。结果:刺槐素对SKOV3细胞的活性具有显著抑制作用,且呈剂量、时间依赖性;SKOV3细胞经刺槐素作用48 h后,细胞凋亡率从16.7%增加到37.5%;促凋亡蛋白Bax表达量上调,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达量下调;刺槐素可抑制SKOV3细胞COX-2及其上游调控基因p-NF-κB的表达。结论:刺槐素对SKOV3细胞活力具有抑制作用,并可促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制p-NF-κB、下调COX-2表达,继而上调促凋亡蛋白Bax表达、下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达相关。     

牛磺酸通过线粒体凋亡途径诱导胃癌细胞凋亡

目的:探讨牛磺酸对人胃癌细胞系HGC27细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:体外培养的HGC27细胞,用不同浓度牛磺酸处理24、48、72 h,MTT法测定其对HGC27细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;牛磺酸(浓度分别为20、40、80 mmol/L)处理HGC27细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡,Rh123探针染色流式细胞仪检测线粒体膜电位变化,western blot法检Bcl-2、Bax、细胞色素C(cyt-c)、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达情况。结果:牛磺酸(浓度10~160 mmol/L)能抑制HGC27细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;牛磺酸(浓度分别为20、40、80 mmol/L)作用HGC27细胞48 h后,细胞凋亡率分别为15.2%、23.3%、35.4%,而对照组凋亡率仅为3.4%;线粒体膜电位降低,Bax、细胞色素C表达上调,而Bcl-2表达下调,Casepase-3、Caspase-9酶原均有活化,可见裂解后片段,呈剂量依赖性。结论:牛磺酸能抑制HGC27细胞的增殖并可能是通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。     

阿司匹林对大肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的 观察阿司匹林对人结肠癌细胞系LoVo细胞增殖、凋亡的影响及探讨可能的作用机制.方法 用不同浓度阿司匹林处理体外培养的LoVo细胞24、48、72h,MTT法检测其对结肠癌LoVo细胞增殖的影响,倒置显微镜下观察细胞的形态学变化,阿司匹林（浓度分别为2、4、8mmol/L）分别处理LoVo细胞48h,行流式细胞仪检测细胞凋亡,分光光度计检测easepase-3相对活性,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2＋浓度的变化,Western blot法检测bcl-2、bax基因表达情况.结果 阿司匹林（浓度1～10mmol/L）能显著抑制LoVo细胞增殖,呈剂量、时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;阿司匹林处理LoVo细胞48h后,细胞凋亡率分别为11.4％、22.3％、37.1％,对照组凋亡率为2.4％;阿司匹林处理细胞48h后,casepase-3相对活性显著增加;阿司匹林能上调bax的表达并下调bcl-2表达,呈剂量依赖性.结论 阿司匹林均能抑制LoVo细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能为增加细胞内Ca2含量、casepase-3活性及上调bax的表达并下调bcl-2表达.     

丹皮酚对结肠癌细胞系LoVo细胞增殖、凋亡的影响及其机制

目的观察丹皮酚对人结肠癌细胞系LoVo细胞增殖、凋亡的影响及探讨可能的作用机制。方法用不同浓度丹皮酚处理体外培养的LoVo细胞24、48、72、96 h,CCK-8比色法测定其对结肠癌LoVo细胞的活力的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;根据CCK-8结果分为丹皮酚组(浓度31.25、62.50、125 mg/L)和对照组,处理48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡;激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+浓度的变化;RT-PCR和Western blot法检测RUNX3基因表达情况。结果丹皮酚能显著降低LoVo细胞存活率,呈剂量、时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态;丹皮酚组(浓度31.25、62.50、125 mg/L)处理细胞48 h后,凋亡率分别为(12.3±1.3)%、(22.4±1.5)%、(36.2±2.1)%,与对照组[凋亡率(2.3±0.9)%]比较,差异均有统计学意义(P<0.05);丹皮酚组处理48 h后,细胞钙离子荧光强度分别为(41.36±4.62),(57.51±3.83)和(69.43±3.76),与对照组[荧光强度(24.45±3.74)]比较,差异均有统计学意义(P<0.05);丹皮酚能上调RUNX3基因的表达,呈剂量依赖性。结论丹皮酚能抑制LoVo细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与增加细胞内Ca2+含量和上调RUNX3基因的表达有关。     

大蒜素对肾细胞癌ketr-3细胞增殖影响

目的观察大蒜素对肾细胞癌ketr-3细胞生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法不同浓度的大蒜素作用于体外培养的ketr-3细胞。倒置显微镜下观察ketr-3细胞的形态学变化,采用四唑盐比色法(MTT)及流式细胞术(FCM)检测不同时期ketr-3细胞形态变化、增殖以及细胞凋亡的作用。结果大蒜素对肾细胞癌ketr-3细胞生长具有抑制作用,在作用24、48、72h点上不同浓度的大蒜素对ketr-3细胞的抑制率之间差异有统计学意义(P0.05)。大蒜素作用24 h即可检测到凋亡细胞,0.05 mg/m L、0.1 mg/m L、0.3mg/m L、0.5mg/m L药物组凋亡率分别为9.21%、27.43%、37.72%、46.52%,1mg/m L组的凋亡率最高,达到62.21%,而对照组仅为3.13%,差异有统计学意义(P0.05)。结论大蒜素能够诱导ketr-3细胞凋亡,阻滞细胞周期,抑制细胞增殖。     

大蒜素对人白血病HL-60细胞生长和凋亡的影响

目的: 探讨大蒜素对人白血病HL-60细胞生长抑制和诱导凋亡作用。方法: MTT比色分析法检测大蒜素对HL-60细胞生长的抑制作用,光镜观察细胞凋亡形态学变化,流式细胞术分析大蒜素对HL-60细胞凋亡的影响。结果: 20mg/L、40mg/L、60mg/L大蒜素均能抑制HL-60细胞生长,其抑制作用呈剂量-效应关系,40mg/L大蒜素能诱导HL-60细胞出现典型凋亡形态学变化。大蒜素诱导HL-60细胞有凋亡现象和阻滞细胞周期于G₂/M期。结论: 大蒜素对人白血病HL-60细胞生长有抑制作用,其抑制作用与诱导HL-60细胞凋亡和阻抑细胞周期有关。     

大蒜素对人胃癌SGC7901细胞生长的影响

目的探讨大蒜素（diallyl trisulfide,allicin）对人胃癌细胞株SGC7901体外生长的影响。方法大蒜素处理胃癌细胞株SGC7901,MTT法检测SGC7901的生长,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫细胞化学法检测Ki67的表达。结果大蒜素作用于SGC7901细胞后,对其增殖表现出了明显的抑制作用,且呈浓度依赖性;大蒜素作用于SGC7901细胞12、24和48 h后,细胞凋亡率分别为2.41%、7.30%和15.44%,明显高于对照组（P〈0.05）;大蒜素作用48h后,Ki67的阳性表达率下降（P〈0.05）。结论大蒜素可以抑制胃癌SGC7901细胞的增殖和诱导细胞凋亡。     

复方苦参方剂对大肠癌LoVo细胞体外增殖凋亡的影响

目的：探讨复方苦参方剂对大肠癌LoVo细胞体外增殖及凋亡的影响．方法：台盼蓝染色法和MTT法测定中药对LoVo细胞抑制作用与时间和剂量的关系,用荧光显微镜、流式细胞仪对细胞凋亡进行检测．结果：复方苦参方剂可抑制Lovo细胞的生长,实验范围内其抑制作用呈时间与剂量依赖关系．经中药作用48h后,LoVo细胞可检测细胞凋亡峰．中药组凋亡率为（7．3±1．5）％,与对照组（2．1±0．5）％相比有明显升高（P〈0．05）．结论：复方苦参方剂具有一定的抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡的作用．