血链球菌细菌素对白色念珠菌及热带念珠菌菌体形态影响的研究

目的:研究血链球菌细菌素对白色念珠菌(C.a)及热带念珠菌(C.t)的抑制作用及形态学影响。方法:通过低温高速离心,超声破碎等方法提取血链素,使血链素分别作用于单独及混合培养的C.a及C.t,于37℃下80r/min振荡培养。培养12h时,以平板菌落计数法测定不同浓度血链素的抑菌活性;每2h测1次各组菌悬液的A值,并绘制生长曲线,观察血链素对C.a及C.t生长曲线的影响。在血链素对C.a及C.t的作用过程中,利用光学显微镜及扫描电镜对菌体形态进行观察。结果:单独及混合培养的C.a及C.t在1g/L血链素作用后菌落数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血链素作用后,C.a及C.t的生长曲线在6～14h发生显著改变,对数生长期被推迟8h。血链素作用后,C.a及C.t的孢子及菌丝表面出现"盘状凹陷"形态。结论:血链素对单独及混合培养的C.a及C.t具有显著抑制作用。血链素使C.a及C.t的对数生长期推迟。血链素可导致念珠菌C.a及C.t的菌体形态发生改变。     

血链球菌细菌素对伴放线聚集杆菌和白色念珠菌生物膜作用的研究

目的:研究血链球菌细菌素分别对单独培养及混合培养的伴放线聚集杆菌(A.a)和白色念珠菌(C.a)生物膜的最小抑菌浓度(MIC)。利用激光共聚焦显微镜研究血链球菌细菌素对A.a及混合培养的A.a和C.a生物膜活性的影响。方法:通过低温高速离心,细胞破碎,盐析等方法提取血链球细菌素—血链素。采用二倍稀释法,测定血链素对单独和混合培养的A.a及C.a的MIC;血链素作用于A.a及混合培养的A.a和C.a后,利用激光共聚焦显微镜分别在2 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h观察生物膜活性的变化。结果:血链素对单独培养的A.a的MIC为0.25 g/L;血链素对单独培养的C.a的MIC为0.125 g/L;血链素对混合培养的A.a及C.a的MIC为0.5 g/L。通过激光共聚焦显微镜观察,血链素对A.a生物膜活性有较强的抑制作用,最显著的时间在72 h;血链素对混合培养的A.a及C.a生物膜活性同样具有较强的抑制作用,最显著的时间在48 h。结论:血链素对A.a及混合培养的A.a及C.a生物膜活性均有抑制作用。     

血链球菌细菌素对念珠菌菌体细胞膜通透性及超微结构的影响

目的：探讨血链素的抑菌动力学特点；2）检测3种念珠菌菌体细胞内无机磷和大分子物质泄漏情况；3）观察血链素作用3种念珠菌后，菌体细胞超微结构的变化。方法：采用液体培养抑菌法观察血链素分别对C．a、C．t及C．g的抑菌动力学特点；分别检测血链素对C．a、C．t及C．g菌体细胞内磷外泄量及紫外吸收物质渗透率；利用扫描电镜（SEM）和透射电镜（TEM）对血链素作用后的C．a、C．t及C．g菌体细胞超微结构进行观察。结果：血链素对C．a、C．t、C．g两两之间的抑菌动力学特点存在相似性，且血链素对3念珠菌的抑制作用均在24h达高峰。经血链素作用的C．a、C．t及C。g菌体细胞内无机磷及大分子物质发生泄漏。通过SEM观察：血链素对C．a、C．t及C．g作用24h时菌体细胞表面出现凹陷、缺损，菌体呈现不规则形态。通过TEM观察：血链素对C．a作用24h时，菌体细胞皱缩，细胞壁及细胞膜结构分界不清，细胞核消失，胞质不均匀；血链素对C．t作用24h时，菌体出现质壁分离，细胞质固缩，细胞壁及细胞膜连续性破坏或断裂，细胞核溶解；血链素对C．g作用24h时，菌体细胞膜及细胞壁呈现凹坑状缺损，胞核消失。结论：血链素对C．a、C．t及C．g具有相似的抑菌动力学特点。血链素可导致念珠菌菌体细胞膜通透性发生改变。血链素可导致念珠菌菌体细胞的超微结构发生改变。     

血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌生长曲线及细胞内钙离子浓度的影响

目的：研究血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis P．g）生长曲线的影响。探讨血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌细胞内钙离子浓度的影响。方法：通过低温高速离心，超声破碎等方法提取血链素，使血链素作用P．g，于37℃厌氧培养：采用微量液体对倍稀释法测定血链素对P．g的最小抑菌浓度（MIC）。选用不同浓度的血链素作用P．g，分别于0、4、8、12、16、20、24、48h时测定各组细菌悬液在590nm波长处的A值，并绘制生长曲线。用Fluo-3／AM负载P．g细胞内钙离子，在激光共聚焦显微镜下观察Ca抖荧光强度变化。结果：血链素对P．g有显著抑制作用，其MIC为0．0625g／L。血链素作用后，P．g的生长曲线在8～16h发生显著改变，对数生长期被延迟了8h。血链素作用后，P．g细胞内钙离子浓度显著降低，与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：血链球菌细菌素对牙龈卟啉单胞菌有明显的抑制作用，在本实验范围内，随着血链素浓度的升高其抑制作用逐渐增强。血链球菌细菌素可导致牙龈卟啉单胞菌细胞膜钙离子通透性增强。     

血链球菌胞内蛋白及膜蛋白分别对热带念珠菌生物膜作用的研究

目的：提取血链球菌标准株ATCC10556的胞内蛋白及膜蛋白,研究血链球菌胞内蛋白及血链球菌膜蛋白对热带念珠菌生物膜的生物学作用。方法：参照Fujimura方法分离血链球菌胞内蛋白有效成分,使之作用于热带念珠菌生物膜,并以激光共聚焦显微镜观察热带念珠菌生物膜厚度的变化。参照碳酸钠梯度离心法提取膜蛋白,观察其对热带念珠菌及其生物膜是否具有抑制作用。结果：在胞内蛋白作用下,24h内热带念珠菌生物膜厚度明显变薄与阴性对照组相比有显著差异,并且12h效果最为显著（P＜0．05）。膜蛋白作用下的热带念珠菌生物膜厚度与阴性对照组相比未见明显差异。结论：血链球菌胞内蛋白对热带念珠菌生物膜具有显著的抑制作用。血链球菌膜蛋白对热带念珠菌及其生物膜无抑制作用。     

氟康唑对HIV感染者口腔白色念珠茵抗真菌后效应的体外研究

目的评估氟康唑体外最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）和检测暴露于小剂量氟康唑后白色念珠菌口腔分离株的抗真菌后效应（post—antifungal effect,PAFE）。方法将白色念珠菌标准株和10株临床分离株分别暴露于4×MIC和6×MIC的氟康唑后,使用自动化的浊度分析测撮法检测白色念珠菌PAFE的存在。结果由4×MIC和6×MIC的氟康唑在RPMI1640液体培养基巾诱导的白色念珠菌标准株产生的PAFE平均持续时问分别为0．12h和3．14h;诱导的10株临床分离株产生的PAFE持续时间平均分别为（0．19±0．24）h和（2．08±0．25）h。其中6×MIC氟康哗的PAFE在临床菌株内差异有统计学意义（P=0．000）,而×MIC氟康唑的PAFE在临床菌株内差异没有统计学意义（P=0．529）。结论氟康唑能有效地抑制白色念珠菌的生长,在白色念珠菌中引起PAFE。     

HIV感染者口腔念珠菌负荷及生物型研究

目的调查人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染者口腔中念珠菌负荷状况、生物分型及与口腔念珠菌病临床表现的关系。方法采取漱口法对64例HIV感染者和42名健康对照者进行口腔念珠菌的定量分离培养，并综合利用革兰染色、厚壁孢子生成实验、CHROMagar显色培养和API 20C AUX酵母菌鉴定系统对分离株进行生物型鉴定。结果64例HIV感染者中，52例中可分离出念珠菌74株，阳性分离率为81．3％，而42名健康对照者口腔念珠菌阳性分离率仅为16．7％（P〈0．001）。通过对74株念珠菌的生物型进行鉴定，发现有39株白色念珠菌，15株热带念珠菌及其他6个生物型20株。健康对照组中，分离出5株白色念珠菌和其他裂2株。结论HIV感染者口腔念珠菌感染率明显增加，其口腔念珠菌的检出率和负荷量亦明显增加，白色念珠菌和热带念珠菌为其主要分离菌；与健康对照组相比，HIV感染者的口腔念珠菌分离株生物类型旱现多样化。     

白色念珠菌在义齿软衬表面滋生及检测

目的：探讨白色念珠菌在义齿软衬表面滋生情况并对4种白色念珠菌检查方法的阳性率进行比较。方法：对使用满1年的16副义齿软衬的34个部位标本分成3组（黏膜病变组、软衬组织面鳞屑样改变组和黏膜未见异常组）白色念珠菌培养，并与KOH消化法、革兰染色法、棉拭子培养结果相比较。结果：（1）义齿软衬垫对应黏膜病变组10个部位白色念珠菌全部阳性，与另2组差异有显著性（P〈0．05）。（2）另2组之间白色念珠菌阳性率（5／8及11／16）差异无显著性（P〉0．05）。（3）在4种白色念珠菌诊断方法中，以软衬材料培养阳性率（76．5％）最高，与棉拭子培养结果有显著差异（P〈0．05）。结论：（1）白色念珠菌能够在义齿软衬表面滋生；（2）义齿软衬鳞屑样改变与白色念珠菌滋生无关。（3）义齿性口炎的诊断应将实验室检查与临床表现相结合。     

口腔白色念珠菌胶体金免疫层析试纸条的研制

目的：采用胶体金免疫层析技术研制快速检测口腔白色念珠菌（ Candida albicans）的试纸条。方法：用胶体金标记白色念珠菌单抗制备金标垫,制备白色念珠菌多抗,将白色念珠菌多抗和羊抗鼠IgG分别包被于NC膜上作为检测线和质控线,优化制作条件,组装成白色念珠菌胶体金免疫层析试纸条,并测定其特异性和灵敏度。结果：制备的白色念珠菌检测试纸条有良好的特异性,与口腔中常见的变形链球菌（ Streptococcus mutans）、粘性放线菌（Actinomyces viscosus）、血链球菌（Streptococcus sanguis）、干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）、牙龈卟啉单胞菌（Porphy-romonas gingivalis）均无明显交叉反应,灵敏度为105 CFU／mL,检测耗时约5 min。结论：所制备的白色念珠菌胶体金检测试纸条具有特异性强、灵敏度高、操作简单、检测快速等优点,适用于临床上白色念珠菌的初步检测。     

HIV感染者口腔白色念珠菌磷脂酶活性的体外研究

目的探讨HIV感染者口腔白色念珠菌单一感染与混合感染时分离株的磷脂酶活性,及其与宿主机体免疫力（用CD4细胞计数表示）的关系。方法40株白色念珠菌按单一感染或是否与其他念珠菌混合感染及CD4细胞计数的高低进行分组,采用卵黄培养基法检测其磷脂酶活性（Pz值）,并进行析因方差分析。结果40株白色念珠菌体外磷脂酶活性均为阳性（100%）,白色念珠菌单一和混合感染的平均Pz值分别为0.6007和0.5142（P〈0.05）,CD4细胞多于200个/mm3和CD4细胞少于200个/mm3时白色念珠菌的平均Pz值分别为0.5460和0.5688（P〉0.05）。结论作为白色念珠菌的重要毒力因子,HIV感染者口腔白色念珠菌磷脂酶活性与是否有其他念珠菌混合感染有关,而与机体免疫力无关。     

血链球菌细菌素对白色念珠菌生物膜抑制作用的研究

目的:提取血链球菌标准株ATCC10556的有效抗菌物质细菌素,进一步研究血链球菌细菌素对白色念珠菌生物膜的作用机理.方法:通过超声破碎、盐析、sephadex G-25过柱脱盐、透析、浓缩的方法分离血链球菌细菌素,使之作用于白色念珠菌生物膜,并在2 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h观察白色念珠菌生物...     

Isolation and properties of the Capnocytophaga ochracea bacteriocin

A bacteriocin from a subgingival plaque isolate of Capnocytophaga ochracea was purified and characterized. It was isolated from cell extract and had a molecular weight of 100,000. Streptococcus sanguis, Streptococcus mitis, Streptococcus mutans and Propionibacterium acnes were susceptible to the bacteriocin.     

The establishment of a community of oral bacteria that controls the growth of Candida albicans in a chemostat

The purpose of this study was to establish and identify a community of oral bacteria that controls the growth of Candida albicans in the chemostat. The chemostat was operated under glucose-limiting conditions at a dilution rate of 0.05 h⁻¹ and inoculated with a yeast-free suspension of a tongue scraping. After a steady state had been reached, it was inoculated with C. albicans to establish the yeast and determine whether its growth could be contained. The steady-state community comprised the species Streptococcus sanguis, Streptococcus sobrinus, Streptococcus mitis, Lacto-bacillus casei, Eubacterium saburreum, Veillonella dispar and Fusobacterium nucleatum. Bacteroides gracilus and Haemophilus segnis were also detected but infrequently. Yeast growth was suppressed and yeast cells were lost at the same rate as the theoretical washout rate. It is concluded that this mixed community of oral bacteria can be used to identify the parameters that maintain the equilibrium between oral bacteria and C. albicans in the oral cavity.     

生物活性玻璃对致龋菌及龈上菌斑的抗菌效果研究

[摘要]目的 研究不同浓度生物活性玻璃对三种游离致龋菌,血链球菌菌斑及混合菌斑的抗菌效果。方法 测定生物活性玻璃对血链球菌、变形链球菌和粘性放线菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并测定pH值。37.5、75、150 mg/ml生物活性玻璃处理24 h血链球菌菌斑和48 h混合菌斑10min后,分别于场发射扫描电镜(FE-SEM)和激光共聚焦显微镜(CLSM)下摄片分析。结果 低浓度生物玻璃能够抑制细菌产酸,且pH值与空白组有显著性差异（P<0.001）。场发射扫描电镜和激光共聚焦均可见随生物活性玻璃浓度升高,细菌团块变小,层次变薄。结论 生物活性玻璃能够快速杀灭细菌,对早期的单菌种和多菌种菌斑均有一定抑制作用。在浓度较低的情况下仍能发挥一定抗菌和抗酸能力。     

Metabolism of 17B-estradiol by oral Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis, Bacillus cereus and Candida albicans

The ability of oral isolates of Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis, Bacillus cereus and Candida albicans to metabolize 17 beta-estradiol was analyzed by thin-layer chromatography using 4-14C-estradiol as the substrate. All test microorganisms metabolized 17 beta-estradiol. Estrone was the main metabolic product, except for B. cereus, which converted 17 beta-estradiol mainly to unidentified, more polar metabolites. S. sanguis and B. cereus had the most active metabolism but S. mutans and C. albicans were also active.