针对染色体易位携带者的微阵列比较基因组杂交-植入前遗传学诊断技术的建立与应用

目的:应用微阵列比较基因组杂交技术(array-CGH)对染色体平衡易位携带者进行胚胎植入前遗传学诊断,探讨其临床应用价值。方法:应用荧光原位杂交技术(FISH)对染色体易位携带者D3胚胎进行检测,对结果为异常且发育到囊胚的15枚胚胎应用array-CGH再次检测,建立array-CGH技术平台,再将array-CGH技术应用于染色体平衡易位携带者胚胎植入前遗传学诊断。结果:对经过FISH检测为异常且发育到囊胚的15枚胚胎进行全基因组扩增(WGA)后采用array-CGH技术进行检测,发现array-CGH技术不仅能够检测到FISH结果对应的数目异常和结构异常,还可以发现除FISH诊断的染色体异常外其他染色体异常。其对于相互易位病例不平衡易位断裂点检测的结果与对易位携带者的核型分析结果一致。应用array-CGH技术对5对染色体易位携带者夫妇的31枚胚胎进行胚胎植入前遗传学诊断,30枚获得检测结果 ,1对夫妇移植1枚整倍体胚胎后获得妊娠,羊水染色体分析提示胎儿染色体核型正常。结论:通过全基因组扩增以及array-CGH技术,对染色体平衡易位携带者胚胎进行植入前遗传学诊断,能够全面评估胚胎染色体的情况,具有良好的临床应用前景。     

应用比较基因组杂交技术鉴定标记染色体的来源

目的:确定额外标记染色体来源,对染色体异常患者进行明确的遗传学诊断.方法:应用比较基因组杂交(comparative genomic hybridization, CGH)和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)技术对1例小标记染色体患者进行分子细胞遗传学检测.结果:显示13号染色体近着丝粒q11-q12区有一明显扩增,提示该额外小标记染色体来源于13号染色体pter→q12.结论: CGH结合FISH技术是鉴别标记染色体来源的又一快速便捷的方法.     

人类卵巢癌的遗传学研究新进展

卵巢癌是妇科第四位常见的肿瘤，其发病率占女性生殖器恶性肿瘤的20％，目前呈上升趋势。由于卵巢癌迄今仍无完善的早期诊断方法，晚期病例又疗效不佳，故其死亡率高居妇科恶性肿瘤之首，因此，基础与临床医学从不同角度展开了对卵巢癌的研究。近年来，卵巢癌的细胞遗传学和分子遗传学研究有了很大进展。     

微阵列比较基因组杂交技术在出生缺陷新生儿中的应用研究

目的:探讨微阵列比较基因组杂交技术在出生缺陷新生儿中的应用价值。方法:选取不明原因的出生缺陷新生儿20例为研究对象,采用微阵列比较基因组杂交技术评估出生缺陷发生的遗传病因。结果:20例患儿经常规染色体检测存在2例(10%)染色体拷贝数变异,但无法明确病因。另经微阵列比较基因组杂交技术检测后,有5例患儿(25%)存在染色体拷贝数变异,4例患儿明确病因,与常规染色体检测结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,1号患儿在chr22q13.31q13.33区域发生3.8 Mb片段缺失,为Phelan-McDermid综合征;2号患儿在chr15q11.2q13.1区域发生约6.2 Mb片段缺失,与Prader-Willi综合征相关;3号患儿在chr11q24.2q25区域发生10.3 Mb片段缺失,为Jacobsen综合征;4号患儿在chr5q32处存在约311 Kb缺失片段,该片段缺失可致Treacher Collins综合征;5号患儿多条染色体发生了大片段纯合子(>3Mb)现象,片段长度总和大约为171.0 Mb,占常染色体基因组片段总长度的6.0%,无明确临床意义。其余患儿染色体拷贝数为正常多态性改变。结论:在常规染色体检测无法确诊的情况下,采用微阵列比较基因组杂交技术进行全基因组的快速扫描可明确部分患儿病因,具有重要的临床意义。     

1例身材矮小患者的分子细胞遗传学分析

目的明确1例身材矮小患者的分子细胞遗传学特征。方法采用G带核型分析、Q带核型分析、荧光原位杂交（FISH）和比较基因组杂交（CGH）技术对患者染色体异常进行逐步细化分析。结果此患者最终诊断核型为46,X,der（X）。ish psu dic X t（X;Y）（p11.3;p11.1）（DXZ1＋,DYZ3＋,DYZ1＋,SRY-,PCPXYp-,PCPXYq＋＋）。ish cgh del（X）（p11.3pter）,dup（Y）（p11.2）。结论结合应用染色体显带核型分析技术,FISH和CGH技术可以精确诊断患者的染色体异常。     

比较基因组杂交技术在肿瘤研究中的新进展

比较基因组杂交（comparative genomic hybridizationc GH）是一种将消减杂交和荧光原位杂交相结合的分子细胞遗传学技术,可在全部染色体区带上检测基因组间DNA拷贝数的变化并定位。本文对CGH技术及其在肿瘤研究中的进展作一综述。     

分选卵巢癌腹水中癌细胞的实验研究

目的 探讨免疫荧光细胞化学法（ICC）联合荧光原位杂交法（FISH）分离卵巢癌腹水中癌细 胞的可行性。方法 复制卵巢癌腹水模型,分阴性对照组和4 个阳性组（A、B、C、D 组）,即4 ml 良性腹 腔冲洗液中分别有0、5、10、20 和40 个标记线粒体绿色荧光（Mito-Tracker Green）的卵巢癌SKOV3 细胞, 每组样本制备3 份。复制卵巢癌裸鼠原位移植模型,分阳性组和阴性对照组,每组6 只BALB/c 裸鼠,阳性组 裸鼠在卵巢接种SKOV3 细胞,各组分别在接种后4、6 和8 周取2 只裸鼠收集腹水。采用磁激活细胞分选法 富集癌细胞,用ICC-FISH 鉴别分离样本中的癌细胞,以8 号染色体探针（CEP8）信号>2 个为FISH 阳性标准, 规定DAPI+/EBA-1+/Mito-Tracker Green+/CEP8+ 细胞为检测癌细胞。结果 腹水模型：阴性对照组和阳 性组均可见EBA-1 阳性细胞,阳性组均有标记的SKOV3 细胞,癌细胞的回收率为20% ～ 50%,12 个阳性样 本中9 个样本的检测率为100%。裸鼠模型：在200 倍显微镜视野下,4、6 和8 周每个视野的SKOV3 细胞数 最多分别为3、8 和15 个。结论 将卵巢癌腹水磁富集后,ICC-FISH 可以准确地识别其中的癌细胞,该方法 为研究和治疗卵巢癌提供了新思路。     

植入前遗传学诊断技术研究的新进展

近二十余年来人类对自身生殖过程的认识有了巨大的进步.而同期发展起来的辅助生殖技术与分子遗传学技术的有机结合,使人们能够在种植之前的早期胚胎中取出部分细胞检测疾病,从而筛选出正常胚胎进行宫腔内移植,即植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD).     

传统的荧光原位杂交与单核苷酸多态性微阵列技术在植入前遗传学诊断中的比较

【目的】对染色体易位携带者的植入前遗传学诊断(PGD),随机的采用传统荧光原位杂交技术结合卵裂球活检并新鲜周期移植的策略,或单核苷酸多态性微阵列技术结合滋养外胚层活检并冷冻周期移植的策略,对两种策略的诊断结果及妊娠结局进行比较,以选择最佳的诊断策略。【方法】回顾性的分析了2012年4月至2014年6月,染色体易位携带者行PGD的183个周期资料,其中91个FISH-PGD周期采用D3卵裂球活检并新鲜周期移植的策略,记为FISH组、92个SNPPGD周期采用滋养外胚层活检并冷冻周期移植的策略,记为SNP组。将两组方法的诊断结果及妊娠结局进行比较。【结果】SNP组的无胚胎移植周期低于FISH组,差异有统计学意义;诊断正常率SNP组为33.8%,高于FISH组,两者间差异有统计学意义;移植周期临床妊娠率方面,SNP组高于FISH组而早期流产/胎停率则低于FISH组。【结论】SNP-PGD的滋养外胚层活检结合冷冻周期移植的策略有助于获得更好的临床妊娠结局。     

乳腺癌HER2基因荧光原位杂交与显色原位杂交检测对比研究

目的 对比研究荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和显色原位杂交(chromogenic in situ hybridization,CISH)在检测乳腺癌HER2基因扩增状态中的敏感性和准确性.方法 对32例经CISH法检测HER2基因状态的乳腺癌标本行回顾性...     

米非司酮在耐药性卵巢癌治疗中的研究进展

米非司酮(代号RU486)是一种作用于受体水平的孕激素拮抗剂,兼有抗糖皮质激素的作用,临床上主要用于终止早孕、紧急避孕和引产等。利用其抗孕激素活性治疗子宫肌瘤、子宫内膜异位症、异位妊娠等也获得成功。研究发现,米非司酮可抑制卵巢癌上皮细胞的生长,对于耐药性卵巢癌具有一定的疗效。现对米非司酮治疗耐药性卵巢癌的作用机制、体内体外的研究进展予以综述。     

基因芯片技术在卵巢癌研究中的应用

卵巢癌是一种预后较差的女性生殖道恶性肿瘤。对其发生发展中分子机制及相关基因的研究对于临床上寻找病因、早期诊断及病理分型方面都有重要价值。基因芯片技术以其高通量、高效率的特点在肿瘤研究方面有着无可比拟的优势。本文综述近年来基因芯片技术在卵巢癌中的研究进展,以期对其分子全貌有更深入的了解。     

卵巢癌早期诊断研究进展

随着医学技术的发展,使卵巢癌早期诊断有了新的进展,但大多学者认为,对卵巢癌早期诊断首先对高危人群定期进行病史询问、盆腔检查、超声检查、肿瘤标记物测定等可以达到早期诊断卵巢癌。     

铂类耐药卵巢癌治疗的研究进展

尽管手术及化疗技术在近30年有很大改进,但上皮性卵巢癌的病死率依然居妇科肿瘤之首。而铂类耐药卵巢癌由于对以铂类为基础的一线化疗药物耐受,预后更差。现有治疗包括以紫杉醇、托泊替康、多柔比星、吉西他滨为基础的标准化疗,主要针对血管内皮生长因子受体、表皮生长因子受体、血小板衍生生长因子受体、叶酸受体等的单克隆抗体和小分子酪氨酸激酶抑制剂及聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶抑制剂等。     

改良荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER2基因

目的探讨改良荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization,FISH）技术在检测乳腺癌HER2基因中的应用。方法对52例经免疫组化（immunohistochemistry,IHC）法检测HER2的乳腺癌标本行改良FISH法检测HER2基因扩增情况,Kappa检验法对两种检测结果的一致性进行统计分析。结果改良FISH法成功率高,与IHC法检测结果一致性好,两者实际一致率为88.5%（K=0.757,P=0.000）。结论改良FISH技术可作为最终确诊HER2基因状态的方法 。     

血管生成抑制剂治疗卵巢癌的研究进展

虽然在过去的几十年里卵巢癌的标准治疗得到了明显的改进,但细胞毒性化疗耐药问题导致了仍有较多女性死于卵巢癌。通过对卵巢癌生物性质的了解使人们在癌细胞中发现存在较多有潜力的分子靶点,并针对这些靶点提出了作用于细胞不同于传统化疗药位点的新颖因子。这些因子现正进行临床实验,以确定其应用价值,且已经显示了令人惊喜的抗肿瘤活性。在本文中,通过关注在卵巢癌生长过程中不可缺少的血管生成分子基础,了解其中常用的靶点治疗及其临床应用。     

卵巢癌早期诊断技术的研究进展

卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,病死率很高。由于早期诊断技术落后,发现时多为晚期,所以提高早期诊断水平取得好的治疗时机,对改善其预后有重要意义。卵巢癌的早期诊断技术包括免疫学、蛋白质组学技术、基因检测技术等。随着这些技术的不断成熟,深入的研究对卵巢癌的早期诊断起关键作用。尿激酶型纤溶酶原激活系统与卵巢癌的发生、发展有密切关系,本文就这些技术尤其是尿激酶型纤溶酶原激活系统在卵巢癌早期诊断中的研究进展做如下综述。     

卵巢癌干细胞研究进展

肿瘤干细胞是指肿瘤中存在的含量极少、具有无限增殖潜能的干细胞样肿瘤细胞,它们能自我更新、分化、迁徙,是肿瘤发生、复发、转移和治疗失败的根源。卵巢癌也可能是卵巢癌干细胞所致的疾病。寻找特异的卵巢癌分子标志是卵巢癌干细胞研究的关键,针对卵巢癌干细胞的靶向治疗可能在抗卵巢癌治疗中具有重要作用,为临床彻底治愈卵巢癌带来希望。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂治疗卵巢癌的研究进展

卵巢癌是致死率最高的妇科恶性肿瘤,其发病机制的探讨是肿瘤研究领域的难点,近年研究发现卵巢癌的发生与表观遗传学改变密切相关,针对影响表观遗传的重要分子靶标组蛋白去乙酰化酶的研究成为新热点。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDAC Is)可以明显地抑制卵巢癌细胞生长,诱导细胞周期阻滞、分化和凋亡,抑制卵巢癌相关致癌基因的表达,具有抗肿瘤活性且无明显不良反应,提示HDACIs为卵巢癌的治疗提供了一种新策略。