慢病毒载体介导的BDNF基因与电针对神经病理痛模型大鼠痛阈的影响

目的观察慢病毒载体介导的BDNF与电针对神经病理痛模型大鼠热辐射痛阈的影响差别,比较基因与电针的镇痛疗效,探讨BDNF对疼痛可能的作用机理。方法本研究采用坐骨神经结扎损伤的神经病理性疼痛大鼠CCI模型,运用荧光免疫标记法,观察慢病毒载体介导的BDNF与电针干预后大鼠不同时间点（3 d、7 d、21 d）BDNF在相应节段脊髓内表达的变化。另运用BME-410C热痛刺激仪记录大鼠术前（0 d）及术后1 d、3 d、5 d、7 d、9 d、14 d、21 d,各组的热辐射刺激缩足潜伏期痛阈的变化。结果大鼠热痛敏阈值的变化：各组大鼠CCI术前热痛敏阈值均无明显差异。模拟对照组大鼠各时点热痛敏阈值无明显差异。阴性对照组与空白对照组各时点相比无统计学差异。CCI术后一天各组热痛敏阈值低于模拟对照组（P〈0.05）。术后第5天,试验组、电针组热痛敏阈值上升,高于空白及阴性对照组（P〈0.05）,术后7天,实验组上升至最高点,试验组与电针组无明显差异（P〉0.05）。术后9天、14天、21天,实验组热痛敏阈值下降,术后7天、9天、14天电针组热痛敏阙值趋于稳定,均高于空白及阴性对照组（P〈0.05）,术后9天、14天实验组与电针组有明显差异（P〈0.05）,术后21天,试验组与电针组无明显差异（P〉0.05）。荧光免疫组化观察：空白对照组、阴性对照组及模拟对照组术后第3天、第7天、第21天时点大鼠L4/5段脊髓阳性神经元表达无明显变化（P〉0.05）,试验组三时点阳性神经元先增加后降低,术后第7天最高,与其他组相比阳性神经元表达明显升高（P〈0.05）,电针组阳性神经元有所增加,但与阴性对照组无明显差异（P〉0.05）。结论 BDNF参与了大鼠痛敏的过程。可能外源性BDNF表达有利于受损神经修复。     

构建高脂饮食肥胖大鼠模型体质量及代谢变化与天麻素的干预

背景:天麻素广泛应用于眩晕、头痛及高血压等的辅助治疗,其作为干预物质用于高脂肥胖大鼠的治疗有待评估.目的:构建不同浓度天麻素对高脂饮食性肥胖大鼠模型,观察其对体质量与血清代谢物水平的影响,分析其可能的作用机制.设计:随机对照动物实验.单位:兰州大学基础医学院生理与心理研究所.材料:实验于2007-06/2007-08在兰州大学基础医学院生理与心理研究所和甘肃省新药临床前研究重点实验室完成.选用44只生后1周雄性健康SD大鼠,体质量(99.57±2.13)g,由中科院上海斯莱克实验动物有限公司提供.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.基础饲料由苏州双狮实验动物饲料科技有限公司生产,高脂饲料由本实验室自行配制.每100克含基础饲料57.5 g、蛋黄粉11.79g、猪油10g、猪胆盐0.2g、酪蛋白7g、奶粉13g、食盐0.085g、酵母粉0.425g;其中含脂肪22.07g、蛋白质23.7g、碳水化合物39g、热量472.16千卡.纯度为98%的天麻素购自陕西旭煌植物科技开发公司.丙二醛和总抗氧化能力试剂盒均为南京建成生物工程研究所生产.方法:构建天麻素干预高脂饮食性肥胖大鼠模型:①采用基础饲料适应喂养大鼠1周,随机数字表法将大鼠分为正常对照组(n=10)、高脂组(n=10)、高脂 天麻素低、中、高剂量组(每剂量组各8只).②正常对照组喂基础饲料,其它各组均喂高脂饲料.正常对照组和高脂组每天灌胃0.9%生理盐水0.3 mL,高脂 天麻素低、中、高组灌胃同等容量浓度分别为15,30,60mg/(kg·d)的天麻素溶液.③各组大鼠自由进食和饮水,共8周.主要观察指标:①每周末检测各组大鼠体质量.②每日上午定时记录大鼠摄入热量.③高脂喂养结束后,于大鼠股动脉取血测血糖值,同时检测血清丙二醛、总抗氧化能力、胰岛素、游离脂肪酸,血脂、谷丙转氨酶及谷草转氨酶水平,并计算胰岛素敏感指数和抵抗指数.结果:大鼠44只均进入结果分析.①体质量:高脂喂养4～8周高脂组大鼠体质量明显高于正常对照组,差异有显著性意义(P＜0.001).天麻素各剂量组体质量均低于高脂组,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01),高脂 天麻素低、中、高剂量组组间比较,差异无显著性意义(P＞0.05),提示天麻素抑制大鼠高脂饮食肥胖无剂量相关性.②摄入热量:高脂组大鼠高于正常对照组,差异有显著性意义(P＜0.01).高脂饮食4周后天麻素各剂量组均低于高脂组,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01).③血清丙二醛、总抗氧化能力、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平:与正常对照组相比,高脂组的总抗氧化能力下降,丙二醛水平上升,谷丙转氨酶水平增加,差异均有显著性意义(P＜0.01).与高脂组相比,天麻素低剂量组的总抗氧化能力明显上升,丙二醛水平下降,差异均有显著性意义(P＜0.01).④胰岛素及血糖水平:与正常对照组比较,高脂组大鼠血糖浓度升高,胰岛素敏感指数下降,抵抗指数上升,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01).与高脂组比较,天麻素低剂量组血糖浓度降低,胰岛素敏感指数升高,胰岛素抵抗指数降低,差异均有显著性意义(P＜0.05～0.01).⑤游离脂肪酸及血脂水平:与正常对照组比较,高脂组大鼠的游离脂肪酸、低密度脂蛋白胆固醇升高,高密度脂蛋白胆固醇降低,差异有显著性(P＜0.05～0.01).结论:天麻素可抑制高脂饮食性肥胖大鼠体质量增加,作用机理可能与其调节葡萄糖和游离脂肪酸代谢、改善胰岛素抵抗和提高抗氧化能力有关.     

电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血模型大鼠侧脑室下区原位神经干细胞增殖的影响

目的:近来的研究认为,针刺任脉治疗脑卒中的机制在于针刺任脉可能产生与干细胞增殖分化有一些联系的生长因子.脑缺血损伤后调动内源性神经干细胞试图自我修复的途径应是多元化的,针刺及外源性生成因子的给予为其不同的途径.实验拟观察电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血模型大鼠缺血侧脑室下区5-溴-2'-脱氧尿苷和5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白阳性细胞的表达的影响.方法:实验于2004-09/2005-07在中山大学医学院解剖学实验室完成.①材料:选用成年健康雄性Wistar大鼠83只.将实验动物按随机抽签法分为5组:空白对照组6只、假手术组6只、模型组26只、电针任脉组23只、碱性成纤维细胞生长因子组22只.后3组又分为缺血后7,14和28 d 3个时间点进行观察.②干预:除空白对照组和假手术组外,其余大鼠采用线栓法制作局灶性脑缺血模型.再灌注后参考Longa神经病学评分标准,1～4分为造模成功.空白对照组不作任何处理;假手术组仅分离右侧颈总动脉并离断右颈外动脉,不予栓塞.电针任脉组大鼠于造模后第2天采用上海华谊医用仪器厂生产的G6805Ⅱ型电针仪针刺承浆、气海、关元3穴,针刺后加电,疏密波刺激(疏波30 Hz,密波100 Hz),强度6～15 V,以身体相应部位出现轻微颤动为准,持续时间为20 min.碱性成纤维细胞生长因子组:再灌后立即给药,肌注碱性成纤维细胞生长因子4 000 U/d,此后每天肌注碱性成纤维细胞生长因子,1次/d.模型组、假手术组大鼠于造模后第2天固定于针刺操作台上20 min,不予针刺.空白对照组大鼠不作任何处理.③观察指标:通过免疫荧光方法测定侧脑室下区5-溴-2'-脱氧尿苷和5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白阳性细胞的表达.用Olympus FV 500激光共聚焦显微镜系统,在200倍镜下,计数平均5个视野阳性细胞数.结果:造模成功大鼠54只及空白对照组和模型组各6只进入结果分析.侧脑室5-溴-2'-脱氧尿苷阳性细胞数和5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白双标细胞:空白对照组与假手术组比较,差异无显著性意义(P > 0.05).模型组与空白对照组相比,均有不同程度的增加,其中造模后7和14 d差异有显著性意义(P < 0.01).电针任脉组和碱性成纤维细胞生长因子组造模后3个时间点与模型组比较,均有较大程度的增加,差异有显著性意义(P < 0.05～0.01).碱性成纤维细胞生长因子组与电针任脉组相比,差异无显著性意义(P > 0.05).结论:电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子均可促进局灶性缺血模型大鼠原位神经干细胞增殖,且两者作用相当.     

8Hz次声对大鼠学习记忆能力和神经元再生的影响

目的：观察次声作用对大鼠学习记忆能力和脑内神经元再生的影响。方法：将36只SD大鼠随机分为对照组和8Hz130dB次声作用组。次声作用组大鼠暴露于8Hz130dB次声，分别作用1、2和4周：对照组大鼠除无次声作用外，余处理均同于次声作用组。各组大鼠实验结束后进行水迷宫测评后取脑．抗Ki一67免疫组化显示脑内脑室下带（subventricular zone，SVZ）和海马齿状回颗粒层下增生带（subgranular proliferative zone，SGZ）中神经细胞再生情况的变化。结果：8Hz 130dB次声作用从第2周开始增生的神经细胞数目开始减少．到第4周时增生期的神经细胞数目比对照组大鼠减少，同时大鼠表现出水迷宫测评中找到站台的潜伏期延长。结论：8Hz 130dB次声慢性作用后大鼠引起脑内尤其海马SGZ中增生的神经细胞数目减少，这可能是次声作用引起学习记忆功能障碍的原因之一。     

运动训练对大鼠缺血下肢血管新生的影响

目的：观察下肢缺血及运动训练对大鼠缺血下肢微血管生成的影响。方法：SD大鼠30只随机分为A、B、C3组各10只，A、B组建立大鼠下肢缺血模型，C组仅作皮肤切开缝合。建模1周后A组大鼠跑步训练（30min/d）。B、C组日常活动，运动训练4周后处死大鼠，取大腿内收肌组织块免疫组化检测微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达，比较3组差异。结果：肌组织MVD、VEGF、bFGF免疫组化均显示：A组高于B组（P〈0．01），B组高于C组（P〈0.01）；A、B、C组间差异均存在显著性。结论：下肢缺血刺激可以促进血管新生、成血管因子表达增加，运动训练可以增强该效应。     

番茄红素对去势大鼠骨量和骨生物力学的影响

目的:番茄红素作为自然界中的抗氧化剂,能够减低人类某些与年龄老化有关的疾病的发生.实验拟进一步验证番茄红素对实验性骨质疏松大鼠骨密度和骨生物力学的影响.方法:实验于2006-07/2007-11在青岛大学医学院附属医院动物实验基地完成.番茄红素油树脂由新疆智星科技投资开发有限公司提供,使用时玉米油稀释至所需浓度.选择6个月龄SPF级雌性wistar大鼠50只,按体质量随机分成5组,即假手术 玉米油组(2 mL/d)、卵巢切除 玉米油组(2 mL/d)、卵巢切除 苯甲酸雌二醇组(0.2 mg/kg,1次/周)、番茄红素低剂量组(10me/kg,1次/d)、番茄红素高剂量组(20 mg/kg,1次/d).每组10只,除假手术组外其余各组均切除双侧卵巢,建立骨质疏松动物模型,按组给予灌服给药,治疗12周.结果:术后2周内假手术组死亡1只,低剂量组死亡2只.47只大鼠进入统计学分析.①卵巢切除组大鼠腰椎及股骨的骨密度和最大应力均较假手术组降低,差异有显著性(P＜0.05).②摄取番茄红素和雌激素的大鼠,股骨及腰椎骨密度和最大应力比卵巢切除组明显升高,差异有显著性(P＜0.05).③番茄红素增加骨密度和提高最大应力作用不如雌激素明显;高剂量组作用强于低计量组.结论:番茄红素可提高骨质疏松大鼠的骨密度和骨生物力学特性,但其作用低于雌激素,是否与用药时间和样本例数不多有关尚需观察.     

内皮祖细胞移植对大鼠心肌梗死后缺血心肌血管再生及心功能的影响

背景:内皮祖细胞是一类能直接分化为血管内皮的前体细胞,不仅参与胚胎期血管发育,也在成体血管新生中起重要作用.目的:观察内皮祖细胞移植对心肌梗死大鼠心肌血管再生及心功能的影响.设计、时间及地点:随机对照,在体组织病理学观察,于2006-07/2007-07在华中科技大学同济医学院附属协和医院心研所完成.材料:清洁级Wistar雄性大鼠80只,65只大鼠建立心肌梗死模型,剩余15只作为假手术组,不结扎冠状动脉.细胞标记BrdU及其抗体为Sigma公司产品,EBM-2细胞培养液基质为Gibico公司产品.方法:抽取大鼠外周血,通过密度梯度离心获得单个核细胞,贴壁法分离培养内皮祖细胞,加入BrdU至终浓度为100mg/L予以标记,继续培养7 d移植备用.造模成功大鼠随机分为2组:内皮祖细胞移植组30只,将BrdU标记的内皮祖细胞悬液100 μL分5点注射到左室前壁梗死灶边缘;培养基对照组30只,以同样方式注射等量的EBM-2细胞培养液基质.主要观察指标:移植后4周对梗死区心肌组织进行病理学及免疫组化检测,测定新生毛细血管密度.心脏超声检查心功能变化.结果:造模过程5只大鼠死亡.内皮祖细胞移植组在心肌瘢痕区边缘发现植入的内皮祖细胞、新生毛细血管和少许淋巴细胞,且存在棕褐色的BrdU阳件细胞;培养基对照组在移植区仅见少许淋巴细胞,无内皮祖细胞成分及BrdU阳性细胞.内皮祖细胞移植组梗死心肌瘢痕边缘毛细血管密度明显高于培养皋对照组(P<0.01).与假手术组比较,内皮祖细胞移植组和培养基对照组的各项心功能指标均出现明显变化,差异有显著性意义(P<0.05).内皮祖细胞移植组的左室射血分数、缩短率均较培养基对照组明显提高(P<0.01).结论:同种异体内皮祖细胞移植到心肌梗死大鼠缺血心肌后能分化为毛细血管内皮细胞,促进梗死后心肌血管新生,改善心功能.     

西布曲明治疗肥胖高脂血症性脂肪性肝炎的实验性研究

目的:探讨减肥药西布曲明对肥胖高脂血症性脂肪性肝炎大鼠的作用。方法:40只SD大鼠持续10周高脂饮食后随机分为2组。模型组(n=20)恢复正常饮食;西布曲明组(n=20)恢复正常饮食,同时给予西布曲明2mg/(kg·d)。另设20只普通饮食大鼠作正常对照。4周后处死,分别测定血清肝功能、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA),血浆脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL),血清及肝组织丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNFα);观察肝脏病理变化。结果:与对照组比较,模型组血脂、ALT、AST,血清及肝组织MDA,TNFα明显升高,血浆LPL、HL明显下降,病理学检查示明显脂肪性肝炎;与模型组比较,西布曲明组血脂紊乱明显改善,血清ALT、血清及肝组织MDA明显降低,血清AST有下降趋势,血浆LPL、HL明显升高,病理学检查接近正常,但TNFα下降不明显。结论:西布曲明可通过减轻脂质过氧化促进肥胖高脂血症性脂肪肝性肝炎的痊愈。     

盐酸西布曲明对单纯性肥胖症的疗效及安全性

目的 评价盐酸西布曲明治疗单纯性肥胖症的疗效及安全性。方法 按双盲、平行、安慰剂对照的试验设计，观察60例单纯性肥胖患者，随机分为A、B两组，治疗24周。揭盲后示A组为安慰剂，B组为盐酸西布曲明。结果 治疗后，盐酸西布曲明组较安慰剂组体重明显下降，差别有统计学意义(-5．85kg比-2．32kg，P＜0．01)，临床疗效分别为63．33％、13．33％(P＜0．01)。盐酸西布曲明组BMI(下降了2．24kg／m^2)、腰围(下降了6．16cm)及臀围(下降了4．05cm)与安慰剂组比，差别具有统计学意义(P＜0．01)。治疗后不良反应发生率安慰剂组为10．00％，盐酸西布曲明组为16．67％，差别有统计学意义(P＜0．01)；治疗前后，除空腹血糖外，两组间的实验室各项指标均无统计学意义。结论 盐酸西布曲明可有效降低肥胖者的体重及腰围。不良反应发生率稍高于安慰剂，但耐受性较好，无严重不良反应。     

电针对单纯性肥胖大鼠下丘脑组织中瘦素和神经肽Y表达的影响

目的:观察电针对单纯性肥胖大鼠下丘脑瘦素和神经肽Y表达的影响,探索电针减肥的机制。方法:实验于2005-12/2006-06在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室完成。①取1月龄刚断乳SD雄性大鼠,随机取6只饲以普通饲料为正常对照组,其他大鼠饲以高脂饲料,喂养3个月后,选择体质量超过正常对照组20%的单纯性肥胖大鼠12只,随机分为模型组和电针组2组,每组6只。②电针组大鼠电针双侧足三里、天枢、三阴交穴,采用疏密波,电流强度0.3～0.6mA,留针20min,1次/d,共20次;其他2组不电针。实验期间均饲以普通饲料。③观察实验大鼠体质量、体长、Lee's指数及体脂,采用Western-blot技术检测下丘脑组织中瘦素、神经肽Y表达的变化。结果:18只大鼠进入结果分析。①模型组大鼠体质量和Lee’s指数高于正常对照组[(451.8±14.8),(323.6±6.8)g;324.25±1.4,305.14±1.5;P均<0.01];电针组电针后体质量和Lee’s指数低于电针前[(372.2±20.4),(454.7±19.7)g;307.71±1.5,323.56±1.6;P均<0.01]。②模型组大鼠心包、肾周和附睾脂肪量均高于正常对照组(P<0.01);电针组电针后心包、肾周和附睾脂肪量低于电针前(P<0.01)。③模型组下丘脑组织中瘦素蛋白表达低于正常对照组(0.62±0.11,0.88±0.15,P<0.01),电针组高于模型组(0.85±0.13,P<0.01);模型组下丘脑组织中神经肽蛋白表达高于正常对照组(2.42±0.27,1.75±0.24,P<0.01),电针组高于模型组(1.87±0.21,P<0.01)。结论:电针有良好的减肥效果,其作用可能与电针增强下丘脑组织瘦素蛋白的表达、同时抑制下丘脑组织中的神经肽Y蛋白表达有关。     

电针对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织Beclin-1蛋白及基因表达的影响

目的:观察电针(EA)对脑缺血再灌注认知障碍模型大鼠脑组织中Beclin-1的影响,探讨脑卒中后认知障碍的康复机制。方法:健康SD雄性大鼠105只,随机分为3组:电针组、模型组和假手术组,每组35只;大鼠缺血再灌注模型采用改良线栓法栓塞左侧大脑中动脉制备。电针"神庭穴"、"百会穴"各30min,1次/日,从术后第1天至第10天动物处死。采用Morris水迷宫实验观测模型大鼠的学习、记忆能力;采用Western blot和荧光定量PCR法检测大鼠脑组织Beclin-1蛋白和基因的表达。结果:造模后的第4到第8天,模型组大鼠的逃避潜伏期较假手术组长(P0.05),EA组大鼠的逃避潜伏期较模型组缩短(P0.05)。电针组大鼠海马及左侧大脑皮质中Beclin-1蛋白的电泳条带与假手术组相比,电针组条带灰度值较假手术组高(P0.05),与模型组相比,电针组Beclin-1蛋白电泳条带灰度较模型组高(P0.05)。模型组和电针组的Beclin-1基因表达的2~(-△△)Ct与假手术组相比差异明显,均升高(P0.05)。但电针组Beclin-1基因表达的2~(-△△)Ct明显较模型组高(P0.05)结论:(1)电针神庭、百会可以促进脑缺血再灌注后认知障碍模型大鼠的认知功能的恢复;(2)电针可以提高缺血再灌注模型大鼠脑组织中的Beclin-1表达。Beclin-1是一种自噬相关蛋白,直接执行自噬的过程,被作为自噬发生的标志物。对自噬网络系统的调控可能是电针能够改善脑卒中后认知障碍的生物学机制之一。     

电针对大鼠损伤坐骨神经再生的影响

目的:探讨电针对受损伤的周围神经功能恢复的影响。方法:Wistar大鼠60只切断左侧坐骨神经并缝合,随机分成电针组与模型组。电针组每天穴位电针20min。分别于术后2,4及8周动态观察髓纤维形态学变化、坐骨神经动作电位幅值的变化。模型组不作任何处理。结果:电针组坐骨神经动作电位幅值恢复率2,4及8周时分别为(11.98±4.12)%,(45.03±7.21)%,(82.41±15.97)%时优于模型组(9.46±4.17)%,(15.02±16.98)%,(33.97±7.46)%(P<0.05);有髓神经纤维数、有髓神经纤维直径及截面积在术后各观察点电针组明显多于模型组(P<0.01)。结论:穴位电针对损伤神经的再生和功能恢复有促进作用。     

The effects and mechanism of xenogeneic adipocyte vaccine for the prevention of obesity in rats

The objectives of this study were to observe the effects of immunization with mouse mature adipocytes for the prevention of obesity in rats and to investigate their mechanism of action. Mouse mature adipocytes (3T3-L1) were injected as a vaccine into the abdominal cavity of rats. Control rats were injected with fibroblast cell lines (MRC-5 or NIH/3T3) or with 0.9% saline. Rats were fed a high calorie diet and body weight changes were used to evaluate obesity prevention. Immunohistochemical and immunofluorescence assays were used to investigate the mechanism of action. Results showed that obesity in rats can be prevented by immunization with xenogeneic mature mouse adipocytes. Body weight gain was inhibited in rats in the treatment group but not in the control groups and was statistically significant between the groups over the 19-week observation period. The assays demonstrated the presence of autoantibodies in rat adipocytes. It was concluded that vaccines of xenogeneic adipocytes can effectively prevent obesity in rats.     

电针对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞活化的影响

目的:观察局灶性脑缺血再灌注对大鼠脑内小胶质细胞活化的影响以及电针刺激水沟、百会(的调节作用。方法:实验于2002-03在华中科技大学同济医学院组织胚胎学教研室完成。取80只Wistar大鼠随机分为8组,每组10只:①正常对照组:不干预,次日处死。②假手术组:仅分离动脉,不插线栓,次日处死。③再灌注6,12,24h组:线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血30min后分别再灌注6,12,24h处死。④再灌注6h+电针组:同前造模,在栓线插入大脑中动脉造模成功后立即进行针刺(水沟、百会),加电刺激(疏密波,频率4Hz/16Hz,刺激强度从1V起,每10min增加1V,终强度为3V,每次持续刺激30min),缺血30min后再灌注6h处死。⑤再灌注12h+电针组:造模后立即针刺,隔8h后再针刺1次,参数同前。缺血30min后再灌注12h处死。再灌注24h+电针组:造模后立即针刺1次,每隔8h针刺1次,缺血30min后再灌注24h处死。切片组织采用免疫组织化学法以蓖麻凝集素标记小胶质细胞,计算小胶质细胞数量。结果:67只大鼠进入结果分析。正常对照组和假手术组未见显色,再灌注6,12,24h组在缺血灶边缘可见大量小胶质细胞活化,数量增加,再灌注12h达高峰,分别为(35.38±1.77),(54.25±1.67),(49.29±2.21)个/200倍视野;经电针治疗后,再灌注6,12,24h+电针组均低于同时段模型组[(32.11±2.80),(50.88±2.64),(45.45±3.95)个/200倍视野,P<0.05]。结论:脑缺血再灌注后脑内小胶质细胞被活化,对神经元产生毒性作用。电针治疗可减少小胶质细胞活化,从而对神经元发挥保护作用。     

电针对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞活化的影响

目的：观察局灶性脑缺血再灌注对大鼠脑内小胶质细胞活化的影响以及电针刺激水沟、百会穴的调节作用。方法：实验于2002-03在华中科技大学同济医学院组织胚胎学教研室完成。取R0只Wistar大鼠随机分为8组，每组10只：①正常对照组：不干预，次日处死。②假手术组：仅分离动脉，不插线栓，次日处死。③再灌注6，12，24h组：线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型，缺血30min后分别再灌注6，12，24h处死。④再灌注6h＋电针组：同前造模，在栓线插人大脑中动脉造模成功后立即进行针刺（水沟、百会），加电刺激（疏密波，频率4Hz／16Hz，刺激强度从1V起，每10min增加1V，终强度为3V，每次持续刺激30min），缺血30min后再灌注6h处死。⑤再灌注12h＋电针组：造模后立即针刺，隔8h后再针刺1次，参数同前。缺血30min后再灌注12h处死。再灌注24h＋电针组：造模后立即针刺1次，每隔8h针刺1次，缺血30min后再灌注24h处死。切片组织采用免疫组织化学法以蓖麻凝集素标记小胶质细胞，计算小胶质细胞数量。结果：67只大鼠进入结果分析。正常对照组和假手术组未见显色，再灌注6，12，24h组在缺血灶边缘可见大量小胶质细胞活化，数量增加，再灌注12h达高峰，分别为（35．38&;#177;1．77），（54．25&;#177;1．67），（49．29&;#177;2．21）个／200倍视野；经电针治疗后，再灌注6，12，24h＋电针组均低于同时段模型组[（32．11&;#177;2．R0），（50．88&;#177;2．64），（45．45&;#177;3．95）个／200倍视野，P〈0．05]。结论：脑缺血再灌注后脑内小胶质细胞被活化，对神经元产生毒性作用。电针治疗可减少小胶质细胞活化，从而对神经元发挥保护作用。     

电针对脑缺血大鼠海马神经元凋亡的影响

目的：探讨电针对脑缺血大鼠海马神经元凋亡的作用及可能内在机制。方法：将90只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、电针+PKA抑制剂（H89）组和电针+生理盐水（NS）组,每组又分为7d、14d、21d 3个亚组。制备双侧颈总动脉永久性结扎（2VO）模型;电针百会穴（GV20）和大椎穴（GV14）;通过TUNEL法和免疫蛋白印迹法观测海马神经元凋亡及Bax蛋白、Bcl-2蛋白表达量。结果：各组大鼠组内3个时间点间的海马神经元凋亡率相比,模型组14d组、21d组较7d组显著增加（P<0.05）;其余各组各时间点差异均无统计学意义。凋亡相关蛋白表达量比较,电针组21d组较14d组Bcl-2蛋白量显著增多（P<0.05）。其余各组各个评价指标在3个时间点比较差异无统计学意义。同时间点各组大鼠间海马神经元凋亡率比较,模型组较假手术组均显著增加（P<0.05）;电针组较模型组均显著降低（P<0.05）;电针+H89组较电针+NS组均显著增多（P<0.05）。同时间点各组大鼠间的凋亡相关蛋白表达量比较,模型组较假手术组Bax蛋白量均显著增高（P<0.05）,而Bcl-2蛋白量均显著降低（P<0.05）;电针组较模型组Bax蛋白量均显著降低（P<0.05）,而Bcl-2蛋白量均显著增加（P<0.05）;电针+H89组较电针+NS组Bax蛋白量均明显增多（P<0.05）,而Bcl-2蛋白量明显降低（P<0.05）,但在14d时2组Bc-2蛋白表达差异无显著统计学意义。结论：电针百会穴和大椎穴可抑制Bax蛋白表达,促进Bcl-2蛋白表达而减轻脑缺血大鼠海马神经元凋亡,给予H89后电针的作用被抑制,说明电针抗凋亡作用的内在机制可能与激活PKA-CREB信号通路相关。