补肾益气方及其拆方对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的影响

目的　观察比较补肾益气方及其拆方对氧化低密度脂蛋白 (OX -LDL)损伤血管内皮细胞的保护作用 ,以筛选有效单味药或最佳配伍方。方法　用体外法 ,以OX -LDL损伤血管内皮细胞为动脉粥样硬化 (AS)细胞病理模型 ,采用噻唑蓝 (MTT)法 ,通过测定细胞丙二醛 (MDA)含量及其培养液乳酸脱氢酶 (LDH)活力来评估各处理因素的药效。结果　补肾益气方与黄芪首乌配伍方具有明显抗OX -LDL损伤血管内皮细胞的作用 ,可提高OX -LDL损伤血管内皮细胞的活力 ,单味药黄芪具有提高OX -LDL损伤血管内皮细胞增殖能力 ,补骨脂黄芪配伍方能降低OX -LDL损伤血管内皮细胞的MDA含量 ,其他单味药和交叉配伍方均无明显作用。结论　补肾益气方抗OX -LDL对血管内皮细胞损伤作用主要是首乌黄芪协同作用的结果     

黑果枸杞花色苷对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

 目的 探讨黑果枸杞花色苷对体外氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用。方法 利用体外培养人脐静脉血管内皮细胞,建立了氧化低密度脂蛋白氧化损伤模型。将细胞分为6组：正常组、氧化低密度脂蛋白组、辛伐他汀组、花色苷低剂量+氧化低密度脂蛋白组,花色苷中剂量+氧化低密度脂蛋白组和花色苷高剂量+氧化低密度脂蛋白组。各剂量组经实验处理后进行细胞计数及形态观察,利用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖能力,运用流式细胞术（FCM）检测内皮细胞增殖周期及凋亡率,并对细胞代谢中的超氧化物歧化酶(SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -Px)、丙二醛（MDA）、过氧化物酶（POD）的活性进行检测。结果 中高浓度的花色苷可以有效的抑制氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的损伤,减缓被损伤细胞的G₀/G₁比率及凋亡率,增高S期细胞比率、G₂/M 比率;同时提高细胞代谢中超氧化物歧化酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化酶的活性,降低丙二醛的含量。结论 黑果枸杞花色苷对氧化低密度脂蛋白所损伤的人脐静脉内皮细胞具有保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的:研究补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤后的影响及可能的机制.方法:将经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞分为5组:补气化痰方药物血清低、中、高剂量组,模型组和正常对照组.用MTT法观察补气化痰方药物血清对经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞抑制作用的保护;采用west-ernblot检测法测定细胞VEGF蛋白水平探讨其可能的机制.结果:补气化痰方药物血清能减少经氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤生长的抑制,并通过上调VEGF蛋白途径达到抑制氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的损伤.结论:补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用,其可能的机制是上调VEGF蛋白表达实现.     

补气化痰方对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的抑制及凋亡保护作用

目的 研究补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤后的保护及可能的机制.方法 将经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞分为5组:补气化痰方药物血清低、中、高剂量组,模型组和正常对照组.用MTT法观察补气化痰方药物血清对经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞抑制作用的保护;采用westernblot检测法测定细胞Bax与Bcl-2蛋白水平探讨其可能的机制.结果 补气化痰方药物血清能减少经氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤生长的抑制,并通过上调Bax蛋白及下调Bcl-2蛋白途径达到抑制氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的损伤.结论 补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤具有一定的保护作用.     

软脉煎对氧化低密度脂蛋白造成血管内皮细胞损伤的影响

目的：为了探讨具有补肾益气作用的中药复方软脉煎干预动脉硬化(AS)的机制，主要是对氧化低密度脂蛋白(OX—LDL)造成血管内皮细胞(VEC)损伤的影响。方法：采用人脐静脉内皮细胞原代培养，加OX—LDL共同孵育造成血管内皮细胞损伤模型，用中药血清药理学方法将药物血清作用于细胞模型。用M1vr法测细胞生存率，并设舒降之(辛伐他汀)组进行对照。结果：OX—LDL组内皮细胞生存率明显降低(P＜0．01)：软脉煎组和舒降之组均能显著提高细胞生存率(软脉煎组P＜0．01，舒降之组P＜0．05)；软脉煎组细胞生存率高于舒降之组(P＜0．01)。结论：软脉煎能改善OX—LDL对内皮细胞的毒性作用，且优于舒降之组。     

泽泻对ox-LDL致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察泽泻含药血清对ox-LDL诱导损伤的血管内皮细胞活性、形态学、NO、NOS及SOD的影响,探讨泽泻含药血清保护血管内皮细胞的可能机理。方法 100μmol/L ox-LDL造成血管内皮细胞氧化应激损伤模型,cck-8法检测各组细胞增殖情况;试剂盒检测各组细胞上清液中SOD的活力和NOS、NO含量。结果 100μmol/L ox-LDL可抑制血管内皮细胞活性,降低SOD活力,降低NOS含量和NO的分泌,而泽泻则能改善100μmol/L ox-LDL对血管内皮细胞的损伤,对血管内皮细胞具有一定的保护作用。结论泽泻可以通过调控抗氧化损伤机制保护血管内皮细胞,这可能是泽泻抗氧化损伤机理所在。     

天麻素对氧化低密度脂蛋白诱导牛主动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的：研究天麻素对氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）所致牛主动脉内皮细胞损伤的保护作用。方法：本实验采用Cu^2＋体外介导人低密度脂蛋白（LDL）模型,利用Ox—LDL诱导新生牛主动脉内皮细胞损伤,观察天麻素对LDL的氧化修饰以及对Ox—LDL所致内皮细胞毒性和O2-产生的抑制作用。结果：Ox-LDL对血管内皮细胞的毒性作用得到有力证实：Ox-LDL可以剂量依赖性地降低内皮细胞存活率,并可损伤细胞膜,引起乳酸脱氢酶的泄露;同时观察到Ox-LDL损伤内皮细胞的形态变化。天麻素能够显著抑制LDL氧化过程中的脂褐素和维生素E含量,并从生化和形态学方面显著减轻Ox-LDL对内皮细胞的细胞毒性;其作用可能与降低O2-的产生量有关。结论：天麻素在保护人血浆中LDL、抑制LDL的过氧化修饰并减少Ox-LDL对细胞损伤方面具有重要作用。     

软脉煎对氧化低密度脂蛋白造成血管内皮细胞损伤的影响

目的:为了探讨具有补肾益气作用的中药复方软脉煎干预动脉硬化(AS)的机制,主要是对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)造成血管内皮细胞(VEC)损伤的影响.方法:采用人脐静脉内皮细胞原代培养,加ox-LDL共同孵育造成血管内皮细胞损伤模型,用中药血清药理学方法将药物血清作用于细胞模型,用MTT法测细胞生存率,并设舒降之(辛伐他汀)组进行对照.结果:ox-LDL组内皮细胞生存率明显降低(P＜0.01);软脉煎组和舒降之组均能显著提高细胞生存率(软脉煎组P＜0.01,舒降之组P＜0.05);软脉煎组细胞生存率高于舒降之组(P＜0.01).结论:软脉煎能改善ox-LDL对内皮细胞的毒性作用,且优于舒降之组.     

六味地黄方含药血清对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的：观察六味地黄方大鼠含药血清对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）损伤血管内皮细胞（VEC）的保护作用。方法：以MTT法观察人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的活力和流式细胞仪测定内皮细胞凋亡率,并通过测定胞内丙二醛（MDA）含量及细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）含量与超氧化物歧化酶（SOD）活力,探讨六味地黄方对血管内皮细胞损伤的保护作用及机制。结果：六味地黄方含药血清能促进ox LDL损伤的血管内皮细胞增殖、抑制ox LDL造成的内皮细胞凋亡、降低胞内MDA含量、减少细胞LDH释放量,提高SOD活力及NO含量。结论：六味地黄方对氧化低密度脂蛋白损伤的血管内皮细胞有一定的保护作用。     

加味补阳还五汤对氧化型低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:观察加味补阳还五汤(BHT)含药血清和含药血浆对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤血管内皮细胞(VEC)的保护作用及机制,同时比较加味BHT含药血清和含药血浆对VEC生成影响的差异。方法:制备加味BHT含药血清和含药血浆,体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),采用ox-LDL造模,通过噻唑蓝(MTT)法观察细胞活力和Hoechst33258染色法、流式细胞术观察细胞凋亡率,并通过测定一氧化氮(NO),丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力,探讨加味BHT含药血清和含药血浆对ox-LDL损伤VEC的保护作用及含药血清和含药血浆之间的差异。结果:与空白组比较,模型组细胞死亡和凋亡率明显升高(P0.05),和模型组比较,加味BHT含药血清组和含药血浆组能显著降低ox-LDL造成的HUVECs的凋亡和死亡率(P0.05),细胞活性显著增强(P0.05),NO含量,SOD和GPx活力显著提高,MDA含量均显著下降(P0.05)。此外,含药血清组与含药血浆组比较细胞凋亡和死亡率更低(P0.05),含药血浆组与含药血清组比较产生NO含量明显增加(P0.05)。结论:加味BHT含药血清和含药血浆对于oxLDL损伤的VEC具有一定保护作用,其机制可能与改善内皮细胞功能、抗氧化损伤、抑制细胞凋亡有关。在一定条件下对于加味BHT含药血浆保护VEC的作用强于含药血清。     

小檗碱对氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨小檗碱是否具有保护内皮细胞的作用。方法用不同浓度的小檗碱预处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs),再用400mg/L的氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导HUVECs损伤,通过评价细胞增殖、上清液中一氧化氮(NO)及内皮素(ET-1)含量来评价小檗碱对内皮细胞的保护作用。结果 400mg/LOX-LDL能明显抑制HUVECs增殖,下调细胞分泌NO含量,上调ET-1含量;而与模型组相比,小檗碱预处理组细胞增殖活性明显增加,NO含量增加,ET-1含量降低,但随着小檗碱浓度的增加,这种保护作用逐渐减弱。结论小檗碱能够减轻OX-LDL对HUVECs的损伤,对HUVECS具有一定的保护作用。     

两头尖总皂苷对血管内皮细胞损伤的保护作用

两头尖（Anemone raddeana Regel.）系毛茛科银莲花属多年生植物。该属植物约有150种左右,世界各大洲均有分布,我国有54种,除海南省外,其它各省均有分布,其中两头尖在我国有广泛的分布。现代药理研究表明,两头尖和同属其他数种植物皂苷类成分主要生物活性有抗炎、解热镇痛、抗肝纤维化、镇静、抗惊厥等等。     

益气化瘀法对冠心病患者血管内皮细胞的保护作用

用敢化瘀法治疗28例冠心病患者，并与20例对照组进行比较。结果表明：治疗组治疗后循环内皮细胞（CEC）和内皮素（ET）明显降低（P＜0．05）；对照组治疗后CEC和ET均无明显变化（P＞0．05），提示益气化瘀法对冠心病患者内皮细胞损伤具有保护作用。     

绞股蓝总苷对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用研究

目的:探讨绞股蓝总苷对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用的研究。方法:采用ox-LDL对血管内皮细胞造成损伤模型,并将HUVEC分为空白对照组、模型组、绞股蓝高、中、低剂量组,空白对照组给予常规DMEM液+5%血清,模型组除与空白对照组相同常规DMEM液+5%血清外,予加入100mg/L ox-LDL干预,绞股蓝低、中、高剂量组在分别给予10、50、100 mg/L绞股蓝提取物24 h后,加入100mg/L ox-LDL。观察各组细胞生存活性、线粒体膜电位、iNOS、MMP-9、NF-κB p65、NO、SOD水平等指标变化,其结果应用统计学软件SPSS 19.0进行数据分析。结果:与空白对照组相比,模型组细胞生存活性、线粒体膜电位、NO、SOD等指标水平明显低于空白对照组,iNOS、MMP-9、NF-κB p65等指标水平明显高于空白对照组;对模型组相比,绞股蓝低、中、高剂量组细胞生存活性、线粒体膜电位、NO、SOD等指标水平明显高于模型组,iNOS、MMP-9、NF-κB p65等明显低于模型组。以上结果差异均有统计学意义(P0.05)。结论:绞股蓝总苷具有保护血管内皮细胞活性,维持线粒体膜电位水平,提高血管内皮细胞抗氧化活性等药理作用,并通过以上作用机制起到对氧化低密度脂蛋白损伤的血管内皮细胞的保护作用。     

滋阴活血解毒中药对血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察滋阴活血解毒中药对葡萄糖（Glu）、胰岛素（Ins）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的干预作用及其保护机制。方法以人脐静脉内皮细胞株ECV-304为受试对象，以一定浓度的Glu、Ins、OX—LDL诱导体外血管内皮细胞损伤，同时观察滋阴活血解毒中药对该细胞损伤的保护作用。各实验组细胞继续培养48h后，分别检测细胞活性及细胞培养液中组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制物（PAI）、细胞粘附分子（ICAM-1）的含量。结果细胞培养48h后，模型组较正常组细胞活力明显下降（P〈0．01），PAI及ICAM-1含量明显升高（P〈0．01），而不同剂量的滋阴活血解毒中药能显著改善细胞活力（P〈0．05），降低PAI及ICAM-1含量（P〈0．01），对t—PA的影响无显著性意义。结论滋阴活血解毒中药对Glu、Ins、ox—LDL诱导损伤的血管内皮细胞有保护作用，而这一作用可能是通过促进内皮细胞的纤溶功能、抑制与炎症反应相关的细胞粘附过程等途径实现的。     

葛根素对oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡的防护作用

目的:研究中药葛根素抑制氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞凋亡及其介导机制。方法:应用大鼠模型,低密度脂蛋白(LDL)体内诱导血管内皮细胞凋亡,葛根素进行干预,观察其对LDL诱导血管内皮细胞凋亡的影响。原位末端标记技术(TUNEL)法检测凋亡细胞,比色法测半胱天冬蛋白酶3(Caspase-3)酶的活性。结果:LDL组与氯化钠对照组比较血管内皮细胞凋亡数显着增加,caspase-3酶活性显着增高,葛根素干预组与LDL组比较凋亡细胞数显着减少,caspase-3酶活性下降。结论:LDL可能通过激活caspase-3使大鼠血管内皮细胞凋亡;中药葛根素可通过抑制caspase-3酶活性抑制LDL诱导细胞凋亡。     

木贼总黄酮对ox-LDL损伤内皮细胞保护作用的形态学观察

目的观察木贼药理活性部位对氧化低密度脂蛋白致人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用。方法提取木贼中的有效部位总黄酮和总酚酸,作用于氧化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞,相差倒置显微镜及扫描电镜下观察脐静脉内皮细胞的形态学变化。结果木贼干预氧化损伤的内皮细胞后,细胞形态、胞核及胞膜的完整性、胞膜表面微绒毛的长度及数目均较氧化低密度脂蛋白损伤的内皮细胞有明显改善。结论木贼大孔树脂提取总黄酮和酚酸类化合物对氧化低密度脂蛋白致人脐静脉内皮细胞损伤具有明显的保护作用,是木贼抗动脉粥样的药理活性部位。     

3'-大豆苷元磺酸钠对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用研究

目的 研究3'-大豆苷元磺酸钠(DSS)对氧化低密度脂蛋白诱导脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制.方法 体外培养脐静脉内皮细胞,将细胞分为空白对照组、氧化损伤对照组(ox-LDL)、氧化损伤加入维生素E对照组(VE+ox-LDL)、氧化损伤加入DSS低、中、高浓度组(DSS-L、DSS-M及DSS-H组).将ox-LDL作用于预先加入VE及不同浓度DSS预处理24 h的内皮细胞,继续培养24h,MTT法检测细胞活力,比色法检测丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)的含量,检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性.结果 预先加入VE、中高浓度的DSS可提升损伤的内皮细胞的活力,可显著降低损伤内皮细胞的MDA及NO的释放,可显著提升损伤细胞的LDH、NOS、SOD和GSH-Px的活性,但低浓度的DSS对上述指标影响不大.结论 DSS可减轻ox-LDL对血管皮细胞的氧化损伤,起到一定的抗氧化保护作用.     

血管内皮细胞损伤模型及中药保护作用研究进展

血管内皮细胞损伤参与了多种心脑血管疾病发生发展的病理过程。合适的内皮损伤模型是探讨内皮细胞损伤的分子机制、筛选相关保护作用药物的重要工具。引起内皮损伤的因素众多,机制与病理意义各异。氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、末端晚期糖基化终末产物(AGEs)、过氧化氢(H2O2)、同型半胱氨酸(Hcy)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)等已被成功应用于建立内皮细胞损伤模型。总结了目前最为常用的内皮细胞损伤模型。同时,对这些模型具有保护作用的中药进行概述,以期为靶向内皮细胞的药物筛选以及相关中药的研究和开发提供参考。     

异龙脑对过氧化氢所致内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨异龙脑是否对内皮细胞氧化损伤具有保护作用。方法:以过氧化氢(H2O2)为氧化剂构建内皮细胞损伤模型,细胞分正常组,照射模型组,异龙脑加药组(3,6,12μM)5个组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,观察异龙脑对细胞氧化损伤的影响。结果:异龙脑可以提高过氧化氢损伤的ECV-304细胞的存活率,减少受损细胞凋亡率,恢复细胞增殖。与正常组细胞相比,ROS、MDA水平明显上升,GSH、SOD水平明显降低,随着异龙脑给药浓度的变化,加药组细胞中ROS、MDA水平逐渐降低,GSH、SOD水平逐渐升高。结论:异龙脑具有一定的抗氧化能力,其机制可能与增强抗氧化成分活性和减少氧自由基相关。