D-氨基葡萄糖衍生物对Eca-109细胞内活性氧、线粒体膜电位的影响

目的：探讨2-（3-羧基-1-丙酰氨基）-2-脱氧-D-葡萄糖（2-[（3-carboxy-1-oxoprogy1）amino]-2-deoxy-D-Glucose,COPADG）诱导Eca-109细胞凋亡的机制。方法：不同浓度COPADG作用于人食管癌Eca-109细胞24h,检测Eca-109细胞的抑制率、凋亡率、细胞内活性氧（ROS）、线粒体跨膜电位。结果：Eca-109细胞凋亡率与COPADG浓度呈正相关（rs=1.0,P〈0.01）;Eca-109细胞线粒体膜电位水平与Eca-109细胞凋亡率相关（rs=1.0,P〈0.01）;ROS水平与Eca-109细胞凋亡率呈正相关（rs=1.0,P〈0.01）;ROS水平与Eca-109细胞线粒体膜电位水平呈负相关（rs=1.0,P〈0.01）。结论：COPADG可促进Eca-109细胞凋亡,提高Eca-109细胞内ROS水平,并降低线粒体膜电位水平。实验结果提示COPADG提高ROS水平,降低Eca-109细胞线粒体膜电位水平,启动细胞凋亡通路,促使Eca-109细胞凋亡,并且线粒体膜电位的下降是通过提高ROS实现的。     

右美托咪定激活PI3K/Akt通路改善LPS诱导的大鼠急性肺损伤实验研究

目的 考察右美托咪定（Dex）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠急性肺损伤（ALI）的影响,并探讨可能与PI3K/Akt信号通路改变的相关机制。方法 将80只SD大鼠根据建模方法随机分为5组：对照组、模型组、Dex低剂量组、Dex高剂量组、Dex+LY294002组,建模24 h时处死并分离肺组织,观察组织病理切片,检查肺水肿程度及微血管通透性,采用Western blotting法检测Akt及其磷酸化蛋白以及线粒体凋亡信号相关蛋白的表达水平,检查线粒体细胞色素C、膜电位及ATP含量,并用电镜观察线粒体形态,采用流式细胞术检测肺组织细胞凋亡情况,采用DCFH-DA探针荧光显微镜法检测细胞内的活性氧（ROS）水平。结果 LPS滴注24 h后,病理切片表现有明显的ALI特征,Dex在50 μg/kg剂量时可明显改善LPS诱导的ALI病理特征;以对照组为参照,p-Akt（Thr308）与p-Akt（Ser473）的相对表达量模型组未发生明显变化,Dex组则均显著增高（P<0.001）,在Dex+LY294002组的表达水平较Dex组显著降低（P<0.001）;模型组的Bax与Bcl-2蛋白较对照组的相对表达量分别显著升高与降低（P<0.001）,Dex组分别降低与升高至接近对照组水平,Dex+LY294002组又分别回升与回降;对照组、模型组、Dex组、Dex+LY294002组的肺组织细胞凋亡率分别为2.4%、19.5%、6.7%、13.1%;各组的ROS水平变化与肺组织细胞凋亡情况一致性良好。结论 Dex可通过激活PI3K/Akt信号通路减轻LPS诱导的肺组织细胞凋亡及线粒体凋亡信号激活,继而改善ALI,发挥肺保护作用。     

茯苓酸调节Nrf2/Keap1/ARE信号通路改善脂多糖诱导肺泡上皮细胞氧化应激损伤研究

摘要：目的:研究茯苓酸（PA）对脂多糖（LPS）诱导的人肺泡上皮细胞氧化应激损伤的影响,以及核因子红细胞2相关因子2/Kelch样ECH关联蛋白1/抗氧化反应元件（Nrf2/Keap1/ARE）信号通路在此过程中的作用。方法:培养人肺泡上皮细胞HPAEpiC,使用CCK-8法筛选适合的PA处理浓度。将HPAEpiC细胞分为Control组、LPS组、LPS+PA组、LPS+PA+sh-NC组和LPS+PA+sh-Nrf2组。TUNEL染色法检测各组HPAEpiC细胞凋亡情况;检测各组HPAEpiC细胞中活性氧（ROS）的产生、丙二醛（MDA）水平以及总超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性;Western blot检测各组HPAEpiC细胞中p53、B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白（Bax）、Nrf2、Keap1和血红素氧化酶1（HO-1）蛋白表达情况。结果:根据CCK-8结果选用4μmol·L-1的PA用于后续研究。LPS诱导后HPAEpiC细胞中TUNEL阳性细胞率与p53和Bax蛋白水平均升高;ROS的产生、MDA水平均增高,SOD和GSH-Px活性降低;Nrf2、HO-1蛋白质水平减少,Keap1蛋白质水平增加（P＜0.05）。使用PA处理可以减轻LPS诱导对以上指标的影响（P＜0.05）。敲低Nrf2可部分逆转PA处理对LPS诱导的HPAEpiC细胞的影响（P＜0.05）。结论:PA可抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞氧化应激损伤和凋亡反应,其机制可能与激活Nrf2/Keap1/ARE信号通路有关。     

益气升清方调节HIF-1α/NLRP3信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的影响

目的 探究益气升清方调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经元焦亡的影响。方法 将SD大鼠随机分为假手术组（S组）,模型组（M组）,益气升清方低、中、高剂量组（3.465、6.930、13.860 g/kg）及益气升清方高剂量+HIF-1α激活剂DMOG组（13.860 g/kg益气升清方+40 mg/kg DMOG）,每组15只。采用线栓法构建脑卒中模型。造模成功后进行神经功能缺陷评估;TTC染色评估脑梗死体积;ELISA法检测血清白细胞介素（IL）-1β、IL-18水平;HE染色检测缺血皮质区病理变化;TUNEL染色检测神经元凋亡;Western blot检测焦亡及HIF-1α/NLRP3通路相关蛋白表达。结果 与S组比较,M组神经功能缺陷评分、梗死体积、IL-1β含量、IL-18含量、神经细胞凋亡率、胞膜穿孔蛋白D-N端（GSDMD-N）、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、HIF-1α、NLRP3蛋白水平均上升（P<0.05）;与M组比较,低、中、高剂量益气升清方组神经功能缺陷评分、梗死体积、I...     

牛磺酸对肺动脉平滑肌中活性氧及ERK1/2通路的影响

目的：探讨牛磺酸（Taurine,Tau）对缺氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）中活性氧（ROS）及ERK1/2通路的影响。方法：原代培养大鼠PASMCs,选用第2-5代用于实验。Tau给药浓度80 mmol·L-1,作用时间24 h。实验分组为：1、常氧组2、常氧＋Tau组3、缺氧组4、缺氧＋Tau组。DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS含量,Westernblot检测磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）的表达。结果：与常氧组比较,常氧＋Tau组中ROS含量没有显著性变化;缺氧组中ROS显著上升,Tau可逆转缺氧诱导的ROS上升。Tau可以逆转缺氧诱导的ERK1/2磷酸化。结论：Tau可维持正常的PASMCs中ROS水平,并且抑制缺氧诱导的ERK1/2磷酸化。     

比索洛尔预处理通过调控ERK1/2途径抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和纤维化

目的 探讨比索洛尔预处理对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和纤维化的影响,并分析分子机制。方法 构建缺氧/复氧细胞模型,将H9c2细胞分为对照组、模型组、比索洛尔组、细胞外信号调节激酶（ERK1/2）通路激活剂（LM22B-10）组。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞中乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,免疫印迹法（Western blotting）法检测凋亡蛋白、纤维化蛋白和ERK1/2信号通路蛋白表达。结果 与模型组比较,比索洛尔组H9c2细胞中LDH和CK-MB水平、细胞凋亡率,切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（cleaved Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bax）、I型胶原（Col I）、III型胶原（Col III）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白表达以及磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（p-ERK1/2）/（ERK1/2）比值显著降低;细胞活力,B淋巴细胞瘤2（Bcl2）、金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）蛋白表达显著升高（P<0.05）。与比索洛尔组比较,LM22B-10组H9c2细胞中LDH和CK-MB水平、细胞凋亡率,Cleaved Caspase-3、Bax、Col I、Col III、α-SMA、MMP-9蛋白表达以及（p-ERK1/2）/（ERK1/2）比值均显著升高,细胞活力,Bcl-2、TIMP-1蛋白表达均显著降低（P<0.05）。结论 比索洛尔预处理通过抑制ERK1/2信号通路活化减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和纤维化。     

瓜子金皂苷丙对MPP~+诱导PC12细胞凋亡的抑制作用

目的观察瓜子金皂苷丙对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的影响,并且探讨其作用机制。方法采用MTT法检测细胞存活率,碘化丙啶染色流式细胞术(FCM)检测PC12细胞凋亡,Western blotting检测Bax和Bcl-2蛋白的表达,罗丹明123染色FCM检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm),荧光酶标仪检测细胞内活性氧(R0S)的含量。结果不同浓度MPP+作用PC12细胞24 h后,细胞存活率显著下降(P<0.01),细胞凋亡明显,凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比之下降,线粒体膜电位降低,细胞内ROS显著增加。与MPP+处理组相比,瓜子金皂苷丙10μmol·L-1组,细胞存活率显著升高(P<0.01);细胞凋亡率下降(P<0.01);Bcl-2/Bax比率增加(P<0.01),线粒体膜电位上升(P<0.01),ROS含量减少。结论瓜子金皂苷丙可以抑制MPP+诱导的PC12细胞凋亡,其作用机理可能与上调Bcl-2和下调Bax蛋白的表达,维持线粒体正常膜电位,稳定线粒体功能,清除R0S有关。     

酞菁锌光动力治疗诱导大肠癌Lovo细胞产生活性氧 #br#

目的 探究 P38MAPK 介导四-a-（对羧基苯氧基）酞菁锌（TαPcZn）光动力治疗（PDT）诱导的人结肠癌 Lovo 细胞线粒体损伤的机制。方法 将细胞分别设立对照组、siRNA-阴性对照组、siRNA-P38MAPK 转染组、 TαPcZn-PDT组和 TαPcZn-PDT/siRNA-P38MAPK组,各组细胞处理后经红光照射 10 min,然后孵育 3 h。孵育结束后 RT-PCR 和 Western blot 检测 P38MAPK 沉默效果。采用 DCFH-DA 探针检测各组细胞活性氧（ROS）水平、JC-I/7- AAD 双标染色法检测线粒体膜电位（ΔΨm）的变化,AnnexinV-FLOUS/7-AAD 双标染色法检测细胞凋亡率。结果 siRNA干扰后 P38MAPK的 mRNA和蛋白表达水平明显下降。TαPcZn-PDT明显诱导 Lovo细胞 ROS增加,引起线粒 体 ΔΨm去极化,细胞凋亡率升高。siRNA沉默P38MAPK后,TαPcZn-PDT诱导 Lovo细胞产生的 ROS减少,发生 ΔΨm 去极化的细胞减少,凋亡率下降。结论 在 TαPcZn-PDT作用下,沉默 P38MAPK 基因可明显抑制 ROS的产生及释 放,减弱线粒体 ΔΨm的去极化,从而降低光激发 TαPcZn所诱导的细胞凋亡。     

D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞凋亡的机制

目的探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖{2-[(3-carboxy-1-oxoprogy1)amino]-2-deoxy-D-Glucose,CO-PADG}诱导Eca-109细胞凋亡的机制。方法不同浓度COPADG作用于人食管癌Eca-109细胞24h,检测Eca-109细胞的抑制率、凋亡率、细胞内活性氧(reactive oxygen spe-cies,ROS)、线粒体跨膜电位。结果Eca-109细胞凋亡率与COPADG浓度呈正相关,r=1.0,P<0.01;Eca-109细胞线粒体膜电位水平与Eca-109细胞凋亡率相关,r=1.0,P<0.01;ROS水平与Eca-109细胞凋亡率呈正相关,r=1.0,P<0.01;ROS水平与Eca-109细胞线粒体膜电位水平呈负相关,r=1.0,P<0.01。结论COPADG可促进Eca-109细胞凋亡,提高Eca-109细胞内ROS水平,并降低线粒体膜电位。实验结果提示COPADG提高ROS,降低Eca-109细胞线粒体膜电位启动细胞凋亡通路促使Eca-109细胞凋亡,并且线粒体膜电位的下降是通过提高ROS实现的。     

巴西苏木素通过ROS-JNK通路对皮肤鳞状细胞癌杀伤作用的机制

目的 探讨巴西苏木素（Brazilin）对皮肤鳞状细胞癌的杀伤作用及其机制。方法 使用Brazilin处理皮肤鳞癌细胞（SCC12）,运用MTT法检测细胞活性,Mito-Sox荧光法检测活性氧（ROS）含量。JC-1荧光标记法检测细胞线粒体膜电位。使用Western blot法检测c-Jun氨基末端激酶（JNK）及磷酸化-JNK(p-JNK)蛋白表达。再取32只裸鼠,构建移植瘤模型,分为：用Brazilin药物处理（Bra组）,用Brazilin+N-乙酰半胱氨酸（NAC）共处理（Bra+NAC组）,用Brazilin+JNK抑制剂（SP600125）处理（Bra+SP组）及Control组,药物处理后,观察病理组织学变化并进行免疫组化检测。结果 Bra 32μg/（ml·6 h）时,SCC12细胞活性约为50%;Bra组细胞凋亡高于Control组,Bra组ROS水平、JNK以及p-JNK蛋白表达高于Control组、Bra+NC组,Bra+NAC组ROS水平、JNK以及p-JNK蛋白表达高于Bra组,差异有统计学意义（P<0.05）。Bra组细胞线粒体膜电位低于Control...     

氧化苦参碱通过COX-2/PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬对MG63骨肉瘤细胞的促凋亡机制

目的 基于环氧合酶2(COX-2)/PTEN诱导激酶1(PINK1)/帕金森病蛋白2(Parkin)信号通路介导的线粒体自噬研究氧化苦参碱对人骨肉瘤MG63细胞的促凋亡机制。方法 取MG63细胞经2.0、4.0、8.0 mg/mL的氧化苦参碱和6μmol/L的5-氟尿嘧啶（5-FU）作用后,检测细胞凋亡率、凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）]表达水平、线粒体膜电位降低比例、线粒体自噬水平以及PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3-Ⅱ）蛋白表达水平。采用PINK1小干扰RNA(PINK1siRNA)干扰PINK1的表达,将细胞分为对照组、PINK1 siRNA组、氧化苦参碱组、PINK1 siRNA+氧化苦参碱组,检测细胞中PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白表达水平和线粒体膜电位降低比例以及细胞凋亡率。采用慢病毒感染使COX-2过表达,将细胞分为对照组、氧化苦参碱组、COX-2组、COX-2+氧化苦参碱组,检测细胞中COX-2、PINK1和Parkin蛋白表达水平以及线粒体膜电位降低比例。结果 经氧化苦参碱干预后,细胞凋亡率...     

HIF-1α在七氟烷预处理减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤中的作用

目的 研究低氧诱导因子1α(HIF-1α)在七氟烷预处理减轻离体大鼠心脏缺血再灌注(I-R)损伤中的作用.方法 84只雄性SD大鼠随机均分为七组:假手术组(Sham组)、I-R组、七氟烷预处理组(S组)、七氟烷预处理十二甲氧乙二酰甘氨酸(DMOG)组(S+D组)、七氟烷预处理+3-(5 '-羟基甲基-2’-呋喃基)-1-苯基吲哚(YC-1)组(S+Y组)、DMOG组(D组)和YC-1组(Y组).应用Langendorff离体心脏灌流装置建立大鼠心肌I-R损伤模型,连续测定心功能指标,并取心肌测HIF-1α及半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达水平及HIF-1α目的基因的表达水平.结果 与I-R组相比,S组、S+D组和S+Y组I-R损伤心功能的各项指标明显改善(P＜0.05),HIF-1α表达水平显著升高(P＜0.05),Caspase-3蛋白表达水平显著下降(P＜0.05).结论 HIF-1α促进七氟烷预处理对离体大鼠心脏I-R损伤的保护作用.     

高强度聚焦超声通过TRIF介导的ERK通路增强乳腺癌的顺铂化疗敏感性

目的　探究高强度聚焦超声（HIFU）通过β干扰素TIR结构域衔接蛋白（TRIF）介导的细胞外调节蛋白激酶（ERK）通路增强乳腺癌顺铂（DDP）化疗敏感性的作用机制。方法　依次增加DDP浓度间歇作用的方法诱导乳腺癌细胞（MDA-MB-231、MCF-7）/DDP耐药细胞;将MDA-MB-231/DDP、MCF-7/DDP细胞分为control组、HIFU组、HIFU+二甲基亚砜（DMSO）组、HIFU+漆黄素（fisetin）组。CCK-8检测细胞活力;集落形成实验检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况;Western blot检测细胞TRIF蛋白、耐药相关蛋白及ERK通路蛋白表达;体内成瘤实验检测肿瘤生长情况;免疫组化染色法检测肿瘤组织Ki-67的表达。结果　与亲本MDA-MB-231及MCF-7细胞相比,在相同浓度DDP处理下MDA-MB-231/DDP及MCF-7/DDP细胞活力更高,且半数抑制浓度（IC50）显著增加（P＜0.05）,成功建立了稳定的DPP耐药细胞系;与control组相比,HIFU组MDA-MB-231/DDP及MCF-7/DDP细胞IC50、OD450值、克隆细胞数、S期细胞百分比、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、TRIF、p-糖蛋白（p-gp）、多药耐药基因1（MDR1）、p-ERK1/2/ERK1/2表达水平显著降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、Bcl-2关联X蛋白（Bax）表达水平显著增加（P＜0.05）;与HIFU组相比,HIFU+fisetin组细胞IC50、OD450值、克隆细胞数、S期细胞百分比、Bcl-2、TRIF、p-gp、MDR1、p-ERK1/2/ERK1/2表达水平显著增加,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、Bax表达水平显著降低（P＜0.05）。与control组相比,HIFU组肿瘤体积、肿瘤质量、TRIF及p-ERK1/2/ERK1/2表达水平、Ki-67阳性表达显著降低（P＜0.05）;与HIFU组相比,HIFU+fisetin组肿瘤体积、肿瘤质量、TRIF及p-ERK1/2/ERK1/2表达水平、Ki-67阳性表达显著增加（P＜0.05）。结论　HIFU通过抑制TRIF表达来抑制其介导的ERK通路,从而增强乳腺癌DDP化疗敏感性。     

伊拉地平对 MPP＋损伤 PC12细胞保护作用的实验研究

目的：研究伊拉地平（ ISR ）对1-甲基-4-苯基吡啶离子（ MPP＋）损伤的PC12细胞的保护作用及可能机制。方法MPP ＋处理PC12细胞建立帕金森病细胞模型;4-甲基偶氮唑蓝（ MTT）比色法检测细胞存活率;双氯荧光黄乙酸乙酯（ DCFH-DA）染色流式细胞术检测细胞内活性氧（ ROS）的生成;JC-1染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位（ MMP）。结果1 mmol · L－1MPP＋处理PC12细胞24 h后能明显抑制细胞生长（P＜0．01）;降低线粒体膜电位;ROS含量增加。2μmol· L－1伊拉地平预处理后, PC12细胞存活率显著增加（ P＜0．01）;线粒体膜电位升高;ROS生成减少。结论伊拉地平对MPP＋损伤的PC12细胞具有保护作用,其作用机制可能与维持线粒体正常膜电位,稳定线粒体功能,阻止线粒体氧化应激发生有关。     

淫羊藿苷对高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的抑制作用

目的 研究淫羊藿苷(ICA)对高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2凋亡的抑制作用及其机制。方法 H9c2细胞分为细胞对照组、高糖模型组、高糖+ICA 2.5,5.0,10.0,20.0和40.0μmol·L^-1组，ICA培养1 h后更换含葡萄糖33 mmol·L^-1的培养基培养3 d。CCK-8法检测H9c2细胞存活率，Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率，生物化学法测定细胞培养基葡萄糖消耗量和乳酸水平，DCFH-DA荧光探针法测定细胞内活性氧(ROS)含量，Mito-Tracker Red CMXRos荧光探针法测定线粒体膜电位，Western印迹法检测动力素相关蛋白1(DRP1)、线粒体分裂蛋白1(FIS1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、视神经萎缩症蛋白1(OPA1)和活化胱天蛋白酶3/6/7蛋白表达水平。结果 与细胞对照组比较，高糖模型组H9c2细胞存活率、线粒体膜电位、MFN2和OPA1蛋白表达水平显著降低(P<0.01)，细胞凋亡率、培养基葡萄糖消耗量和乳酸水平及细胞内ROS含量、DRP1、FIS1和活化...     

脂质立方液晶设计制备与表征评价研究进展

目的：研究伊拉地平（ ISR ）对1-甲基-4-苯基吡啶离子（ MPP＋）损伤的PC12细胞的保护作用及可能机制。方法MPP ＋处理PC12细胞建立帕金森病细胞模型;4-甲基偶氮唑蓝（ MTT）比色法检测细胞存活率;双氯荧光黄乙酸乙酯（ DCFH-DA）染色流式细胞术检测细胞内活性氧（ ROS）的生成;JC-1染色流式细胞术检测细胞线粒体膜电位（ MMP）。结果1 mmol · L－1MPP＋处理PC12细胞24 h后能明显抑制细胞生长（P＜0．01）;降低线粒体膜电位;ROS含量增加。2μmol· L－1伊拉地平预处理后, PC12细胞存活率显著增加（ P＜0．01）;线粒体膜电位升高;ROS生成减少。结论伊拉地平对MPP＋损伤的PC12细胞具有保护作用,其作用机制可能与维持线粒体正常膜电位,稳定线粒体功能,阻止线粒体氧化应激发生有关。     

萝卜硫素抑制幽门螺杆菌诱导胃黏膜上皮细胞NLRP3炎症小体活化的研究

目的 研究萝卜硫素（sulforaphane，SFP）对幽门螺杆菌感染的胃黏膜上皮GES-1细胞线粒体和氧化应激损伤及NLRP3炎症小体活化的影响。方法 SFP （100 ng·mL^-1）预处理GES-1细胞12 h，然后10⁹CFU·mL^-1的幽门螺杆菌感染细胞6 h；CCK8检测细胞活力，qRT-PCR分析PGC1α、COX-4、NRF1、TFAM、SOD1和HO-1 mRNA表达水平，Western blotting检测NLRP3、CASP1 p20、CASP1 p10、pro-IL-1β和IL-1β蛋白表达水平，并对GES-1细胞线粒体膜电位、氧耗量和ROS水平进行检测。结果 幽门螺杆菌感染可明显诱导NLRP3、CASP1 p20、CASP1 p10、IL-1β蛋白和PGC1α、COX-4、NRF1 mRNA表达，促使氧消耗量和ROS水平增高，而细胞活力、SOD1、HO-1、TFAM mRNA表达和线粒体膜电位降低（P<0.05）；SFP处理后能明显抑制NLRP3、IL-1β蛋白和PGC1α、COX-4、NRF1 mRNA表达，降低氧消耗量和ROS水平，而细胞活力、SOD1、HO-1、TFAM mRNA表达和线粒体膜电位增高（P<0.05）；另外，ROS抑制剂NAC也能显著抑制NLRP3炎症小体和IL-1β表达水平。结论 SFP可通过降低线粒体损伤和ROS水平改善幽门螺杆菌感染诱导GES-1细胞炎症反应。     

高氧环境下ROS对肠上皮细胞表达TNF-α和HIF-1-α的影响

目的探讨长时间高氧治疗对机体造成严重不良反应的原因。方法用不同浓度的H_2O_2(100、200、400μM)和85%的高氧对肠上皮细胞干预24 h后,采用免疫组织化学方法检测高氧对TNF-α和HIF-1-α的影响。结果与对照组相比,高氧组和各H_2O_2组TNF-α和HIF-1-α表达水平显著增加(P<0.05),并且高氧组明显高于H_2O_2组。结论高氧环境中肠上皮细胞的损伤伴随着ROS的增加,因此认为在高氧环境中ROS对肠道损伤发挥着重要作用。     

胰岛素样生长因子-1对氯化钴诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对氯化钴（CoCl2）诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12细胞凋亡的作 用及机制。方法 取对数生长期的 PC12细胞,分别以 10、20、40、80 μmol/L的 CoCl2溶液和 100、200、400 μg/L的 IGF- 1溶液处理细胞,CCK-8法检测细胞活力,得出 CoCl2和 IGF-1最佳干预浓度。根据选定的实验条件,应用 CoCl2处理 PC12细胞建立 HIE细胞模型,实验分为对照组、CoCl2处理组、IGF-1+CoCl2处理组。分组处理 24 h后采用 CCK-8法 检测细胞存活率;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞 Bax、Bcl-2及 Caspase-3的蛋白的表达 水平。最后在上述实验的基础上,设 CoCl2处理组、CoCl2+IGF-1处理组、HIF-1α抑制剂 2-甲氧雌二醇（2-MeOE2）+ CoCl 2组和 CoCl2+2-MeOE2+IGF-1组,Western blot观察 IGF-1、2-MeOE2及两者共用对 PC12细胞 HIF-1α及 Bax的表 达水平的影响。结果 CCK-8检测结果显示,40 μmol/L CoCl2和 200 μg/L IGF-1为最佳干预浓度。利用以上浓度分 组干预细胞 24 h后,与 CoCl2组相比,IGF-1+CoCl2处理组细胞存活率明显提升,TUNEL阳性细胞数和细胞比例降低, 同时抗凋亡蛋白 Bcl-2表达上调,促凋亡蛋白 Bax、Caspase-3,HIF-1α表达下调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。 应用 2-MeOE2对细胞进行预处理后,CoCl2+2-MeOE2组与 2-MeOE2+IFG-1组 HIF-1α和 Bax蛋白表达差异无统计 学意义,但均较 CoCl2+IGF-1组明显下调（P＜0.01）。结论 IGF-1可抑制 CoCl2诱导的 PC12细胞凋亡,其保护作用 可能与 HIF-1α表达下调有关。     

右美托咪定对布比卡因所致神经细胞毒性的保护作用

摘要： 目的 探讨右美托咪定对布比卡因所致神经细胞毒性的保护作用。方法 体外培养小鼠神经母细胞瘤细胞株 N2a 细胞, 取对数期细胞分为 4 组： 对照组细胞培养液不加任何药物; 布比卡因组细胞中加入 1 000 µmol/L 布比卡因; 50、 200 µmol/L 右美托咪定浓度组细胞中加入 1 000 µmol/L 布比卡因后, 再分别加入 50、 200 µmol/L 右美托咪定。各组细胞加入药物后继续培养 24 h, 以 MTT 法检测细胞存活率; 流式细胞术检测细胞凋亡、 活性氧 （ROS）水平、 线粒体膜电位及 Caspase-3 的表达。结果 在 1 000 µmol/L 布比卡因作用下, 各药物组 N2a 细胞的存活率明显降低, 同时线粒体膜电位显著下降, 而细胞的凋亡率、 胞内 ROS 水平和 Caspase-3 表达则显著升高; 50、 200 µmol/L 右美托咪定可抑制布比卡因引起的 N2a 细胞毒性, 使细胞的存活率及线粒体膜电位均明显升高, 同时降低细胞的凋亡率、 胞内 ROS 水平和 Caspase-3 表达, 200 µmol/L 右美托咪定的变化较 50 µmol/L 更为明显。结论 右美托咪定可减轻布比卡因对 N2a 细胞的毒性作用, 其可能是通过抑制 ROS 的生成、 改变线粒体膜电位、 降低 Caspase-3 的表达, 从而抑制细胞的凋亡来实现的。