荔枝核总黄酮抗二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的实验研究

目的 观察荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)抗肝纤维化的作用并探讨其可能机制.方法 大鼠随机分为正常组,模型组,TFL高剂量组,TFL低剂量组.模型组、TFL高剂量组、TFL低剂量组以二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射4周制作大鼠肝纤维化模型；造模与给药同时,TFL高、低剂量组分别以TFL[200,100mg/(kg·d)]灌胃给药,正常组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,6周后处死大鼠,检测血清ALT、AST、TIMP-1水平,检测肝组织MDA、SOD及Hyp含量,取肝组织做HE、Masson染色观察大鼠肝纤维化程度,采用免疫组化检测各组肝组织MMP-2的表达.结果 与模型组比较,TFL高、低剂量组血清ALT、AST均明显降低,具有显著性差异(P＜0.05),肝组织MDA、Hyp水平均明显降低(P＜0.05),SOD水平明显升高(P＜0.05)；与模型组比较,TFL高、低剂量组可明显抑制血清TIMP-1含量及肝组织MMP-2的表达(P＜0.05),同时能改善大鼠肝纤维化程度(P＜0.05).结论 TFL具有抗实验性大鼠肝纤维化的作用,抗脂质过氧化反应、降低TIMP-1活性、抑制MMP-2的表达可能参与了其抗肝纤维化作用的机制.     

丹芍化纤胶囊对博来霉素肺纤维化大鼠肺组织结缔组织生长因子表达的影响

目的 观察丹芍化纤胶囊对肺纤维化大鼠肺组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其治疗肺纤维化的作用及机制.方法 将48只Wistar大鼠随机分为对照组、肺纤维化组、丹芍化纤高剂量预防组和丹芍化纤低剂量预防组,每组12只.肺纤维化组、丹芍化纤高剂量预防组和丹芍化纤低剂量预防组以气管内滴入博来霉素(5mg/kg)建立肺纤维化模型,丹芍化纤高剂量预防组和丹芍化纤低剂量预防组分别经胃管注入丹芍化纤胶囊0.6,0.3 g/kg,1次/d.HE染色检测肺组织肺泡炎及肺纤维化程度;测定血清羟脯氨酸(HYP)的含量;免疫组化染色检测CTGF的表达.结果 与对照组比较,肺纤维化组CTGF的表达显著增高.丹芍化纤高剂量预防组和丹芍化纤低剂量预防组与肺纤维化组比较,CTGF的表达均显著降低.结论 丹芍化纤胶囊可能通过抑制大鼠肺组织CTGF的表达,从而具有抗肺纤维化的作用.     

雄芍汤对免疫性肝纤维化大鼠MMP-9和TIMP-1的影响

目的:研究雄芍汤对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的影响.方法:大鼠分为正常组、模型组、扶正化瘀胶囊对照组(0.525 g·kg-1)、雄芍汤预防组(7.9 g·kg-1)和高、低剂量组(15.8,7.9g·kg-1).采用猪血清腹腔注射法复制大鼠肝纤维化模型.酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清MMP-9含量,实时荧光定量PCR技术检测肝组织中TIMP-1 mRNA的表达.结果:雄芍汤7.9 g·kg-1剂量预防组MMP-9含量显著高于模型组(P＜0.01).雄芍汤15.8 g·kg-1剂量组TIMP-1 mRNA表达显著低于模型组(P＜0.01).结论:雄芍汤可以促进免疫性肝纤维化大鼠血清MMP-9生成,抑制大鼠肝组织TIMP-1 mRNA表达.调节MMP与TIMP的协调平衡可能是雄芍汤抗肝纤维化的机制之一.     

丹芍化纤胶囊对大鼠肝纤维化的预防作用及对HSCs增殖和活化的影响

目的：探讨中药复方制剂丹芍化纤胶囊对大鼠免疫性肝纤维化的预防作用及其对肝星状细胞增殖、活化的影响。方法：Wistar雄性大鼠分为正常组、病理模型组、丹芍化纤胶囊低剂量组（0．3g／kg）、中剂量组（0．6g／kg）、高剂量组（0．9g／kg）及秋水仙碱组（0．15mg／kg）。除正常组外，各组均腹腔内注射猪血清（0．5mL／只，2次／周，持续12周）诱导大鼠免疫性肝纤维化模型，并同时灌胃给予相应药物，持续12周。实验第8、10周检测尿羟脯氨酸排出情况。大鼠肝脏常规病理切片行Masson三色法观察纤维化程度。肝脏免疫组织化学SABC法染色结蛋白（desmin）及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）观察肝星状细胞（HSCs）的增殖、活化。结果：丹芍化纤胶囊中、高剂量给药能增加大鼠尿羟脯氨酸的排出量（P〈0．01），抑制HSCs的增殖（P〈0．01）。减少活化HSCs的数量（P〈0．01），减轻肝纤维化程度。结论：丹芍化纤胶囊能减轻肝脏损伤，增加胶原降解，抑制HSCs的增殖和活化，具有预防大鼠肝纤维化的作用。     

丹芍化纤胶囊加食苹果对大鼠肝纤维化tsp-1及TGF-β1的影响

目的:探讨应用丹芍化纤胶囊加食苹果对大鼠肝纤维化tsp-1、TGF-β1的影响。方法:雄性健康SD大鼠46只,采用四氯化碳(CCl4)、高脂饮食加乙醇混合因素造模成功,随机分3组,分别给予相应药物及苹果汁灌胃观察8周。实验结束后RT-PCR检测血小板反应蛋白(thrombospondin-1,tsp-1)mRNA的表达,免疫组织化学技术检测肝组织转化生长因子β1(transforming growth factor,TGF-β1)的表达。结果:RT-PCR检测在正常对照组中tsp-1 mRNA有极少量表达,与正常对照组比较,肝纤维化模型组、自然恢复组tsp-1 mRNA表达显著升高(P<0.01),治疗8周后,丹芍组tsp-1 mRNA表达下降(P<0.05),丹苹组下降更显著(P<0.01)。免疫组化结果示正常肝脏组织只见很少量TGF-β1表达,治疗8周后与自然恢复组比较,丹芍组TGF-β1表达明显下降(P<0.05),丹苹组与下降更显著(P<0.01)。结论:应用丹芍化纤胶囊加食苹果能明显改善大鼠肝功能,降低肝组织tsp-1 mRNA和TGF-β1的表达,具有明显的辅助抗肝纤维化作用。     

甘草甜素联合苦参碱对TAA引致大鼠肝纤维化的抑制作用

目的:研究甘草甜素-苦参碱合剂对TAA引致大鼠肝纤维化的抑制作用。方法:大鼠采用TAA诱导肝纤维化模型,模型组给予生理盐水,治疗组给予低、中、高剂量甘草甜素-苦参碱合剂,阳性对照组给予秋水仙碱。测定肝组织羟脯氨酸(Hyp)、血清透明质酸(HA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)和总蛋白(TP)含量及肝组织病理学形态分析评价肝纤维化程度。结果:治疗组肝纤维化程度显著低于模型组(P0.01)。与模型组比较,治疗组Hyp、HA、ALT和AST显著降低(P0.05),ALB和TP显著升高(P0.05)。结论:甘草甜素-苦参碱合剂对TAA引起的大鼠肝纤维化有抑制作用。     

芪芍抗纤方联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎肝硬化患者肝功能、肝纤维化指标及TGF-β、TIMP-1的影响

目的:探讨芪芍抗纤方联合恩替卡韦对慢性乙型肝炎肝硬化患者肝功能、肝纤维化指标及TGF-β1(转化生长因子β1)、TIMP-1(基质金属蛋白酶抑制因子-1)的影响。方法:90例慢性乙型肝炎肝硬化患者随机分2组,对照组45例口服恩替卡韦分散片,观察组45例加服中药芪芍抗纤方,服药3个月。治疗前和治疗3个月后检测肝功能指标(ALT、AST、TBil)、肝纤四项(HA、PCIII、LN、IV-C)及血清TGF-β、TIMP-1水平。结果:治疗3个月后,2组患者血清ALT、AST、TBil、HA、PCIII、LN、IV-C及TGF-β、TIMP-1均显著下降(P<0.05或P<0.01),观察组ALT、AST、TBil、HA、PCIII、LN、IV-C及TGF-β、TIMP-1下降较对照组显著(均P<0.05)。结论:芪芍抗纤方联合恩替卡韦可改善乙肝肝硬化患的肝功能,减轻肝纤维化,降低TGF-β1和TIMP水平。     

中药治疗肝纤维化大鼠对ALR基因表达的影响

目的：从分子水平探测中药治疗肝纤维化的作用及机制。方法：利用CCL4复合因素建立SD大鼠肝纤雏化模型。实验动物分成正常对照、模型、中药治疗三组，分别检测各组生化、肝纤维化指标和肝组织中ALR mRNA表达变业。结果：1．ALT、AST、A／G、HA、PCⅢ、LN、PLD各指标：模型组均高于对照组（P〈0．01），中药治疗组低于模型组（P〈0．01），并且，HA、PCⅢ、LN、PLD的降低与病理组织反应肝纤维化的好转程度一致；2．肝组织中ALR mRNA的相对表达量：中药治疗组、模型组明显高于对照组（P〈0．01），中药治疗组高于模型组（P〈0．01）。结论：联联合检测生化、肝纤维化指标可提高肝纤维化早期诊断；肝纤维化时肝组织ALR mRNA的高表达可逆转肝纤维化。     

春和丹治疗肝纤维化大鼠的实验研究

目的探讨春和丹对肝纤维化大鼠的治疗作用。方法将SD大鼠40只随机分为正常组、模型组、春和丹低剂量组(20g/kg)、春和丹高剂量组(40g/kg)及护肝片组(1.5g/kg),每组8只。除正常组外,其余各组以四氯化碳(CCl4)皮下注射制备大鼠肝纤维化模型。除正常组和模型组外,于实验第5周开始分别给予春和丹和护肝片灌胃给药,连续5周。观察各组肝纤维化指标、肝功能指标及肝组织病理的变化。结果春和丹可明显降低肝纤维化大鼠血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及肝组织羟脯氨酸定量(Hyp);明显升高血清白蛋白(Alb);光镜观察肝组织病理明显改善(P<0.05);春和丹低剂量组和春和丹高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论春和丹抗肝纤维化作用确切,同时够修复肝脏炎症损伤,纠正蛋白质代谢,且不同剂量春和丹与护肝片比较差异无统计学意义(P>0.05)。     

归芍颗粒对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用

目的:观察归芍颗粒(Guishao granules,GG)对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的SD大鼠肝纤维化的作用。方法:90只雄性SD大鼠,除正常组15只不造模外,其余大鼠背部ih CCl4(1 m L·kg-1),每周2次,共13周制备肝纤维化模型,随机分为5组,分别为模型组,GG低、中、高剂量组(3.5,7.0,14 g·kg-1)和秋水仙碱组(0.1 mg·kg-1),每组15只。13周后,测定大鼠肝脏指数;取部分肝组织做苏木素-伊红(HE)和马松三色(Masson)染色;取血测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性;放射免疫法检测血清中透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)的水平;分光光度法检测大鼠肝脏中羟脯氨酸(Hyp)含量;免疫组化法检测肝脏中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝损伤,肝纤维化程度明显,肝纤维化大鼠血清中ALT,AST和HA,LN水平明显升高,肝组织中Hyp的含量明显升高,肝组织中α-SMA蛋白的表达明显升高(P0.05,P0.01);GG能明显改善大鼠肝损伤,减轻肝纤维化程度,同时显著降低肝纤维化大鼠血清中ALT,AST和HA,LN水平,GG能降低肝组织中Hyp的含量,抑制肝组织中α-SMA蛋白的表达(P0.05,P0.01)。结论:GG可以明显改善CCl4诱导的大鼠肝纤维化,其作用机制可能与GG抑制肝星状细胞活化有关。     

复方黄芪颗粒对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤的保护作用

目的：观察复方黄芪颗粒对四氯化碳（CCl4）慢性肝损伤的保护作用。方法：制备大鼠的CCl4慢性肝损伤模型，观察复方黄芪颗粒对慢性肝损伤大鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、以及对肝组织羟脯氨酸含量等的影响。结果：复方黄芪颗粒在给药3个月后，低、中、高剂量组（1．9，3．8，7．6g／kg）均能降低血清ALT、AST的活力和肝组织羟脯氨酸的含量（P〈0．05或P〈0．001）。结论：复方黄芪颗粒能保肝降酶，对慢性肝损伤有明显的保护作用。     

护肝解毒冲剂对实验性肝纤维化的防治作用

目的观察护肝解毒冲剂(HGCJ)的抗肝纤维化作用。方法将SD雄性大鼠随机分成正常对照组、模型组、HGCJ大剂量组、HGCJ小剂量组,除正常对照组外,其余3组采用四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型。于造模第2个月起,HGCJ大小剂量组分别灌胃HGCJ 44g/(kg.d)和11 g/(kg.d),正常对照组和模型组灌胃等容量的生理盐水。实验持续3个月后将大鼠处死,取血测ALT、AST、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白/球比例(A/G)、透明质酸(HA),同时取肝组织做病理检查。结果HGCJ大、小剂量组ALT、AST和HA均明显降低,TP、ALB和A/G升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。病理检查见HGCJ大、小剂量组肝细胞变性明显减轻,纤维组织增生减少。结论HGCJ对CCl4所致大鼠肝纤维化有明显防治作用。     

肝康Ⅱ号抗肝纤维化的实验研究

目的探讨肝康Ⅱ号对四氯化碳(CCl_4)诱导的实验性肝纤维化大鼠抗肝纤维的作用。方法用CCl_4诱导大鼠肝实质损伤性纤维化模型。56只SD大鼠被随机分为正常对照组、模型组及治疗组(高、低剂量组)4组,每组14只。除正常对照组外所有大鼠皮下注射40%CCl_4(橄榄油配制,每3日1次,共8周)。正常对照组注射等体积精制的橄榄油。治疗组同时给予肝康Ⅱ号灌胃。每日2次,共8周。实验结束用2%戊巴比妥钠(45mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,收集血清标本并取肝左叶。利用VG染色对肝脏胶原表达及纤维化程度进行评价。血清学检查包括肝功能,层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)(放射免疫法)。结果与模型组比较,治疗组肝功能明显改善(P＜0．05,P＜0．01),肝康Ⅱ号可显著降低肝纤维化大鼠血清LN、HA、PCⅢ及Ⅳ-C水平(P＜0．05,P＜0．01)。肝脏组织病理检查显示高剂量组肝纤维化程度明显下降。结论肝康Ⅱ号对CCl_4诱导的肝纤维化有良好的防治作用。     

Effect of Yajieshaba,a preparation of Dai indigenous medicine,on enhanced liver detoxification

OBJECTIVE:To explore the mechanistic effects of Yajieshaba(YJSB) on enhanced liver detoxification.METHODS:The effects of YJSB on alanine aminotransferase(ALT) and aspartate aminotransferase(AST) were assayed in five acute chemical liver injury models[carbon tetrachloride(CCU),D-galactosamine(D-Glan),4-acetamidophenol(AAP),thioacetamide(TAA) and 1-naphthyl isothiocyanate(ANIT)].Sleep latency and sleep time of pentobarbital sodium were tested in control mice and CCL model miceafter oral YJSB administration.The effects of YJSB on drug metabolism enzymes of liver microsomes were tested in control rats and CCI_4model rats.The levels of cytochrome P450(CYP450) and Cyt b5 in liver microsomes were assayed using the method by Omura and Sato,and activities of erythromycin N-demethylase(ERD)and aminopyrine N-demethyl(ADM) were evaluated by Nash colorimetry.Probe substrate-based high performance liquid chromatography(HPLC)methods were established for CYP3A4 and CYP1A2.RESULTS:The level of serum ALT was reduced by YJSB at 3.51 g/kg in the five models as follows:CCl_4 D-Glan,AAP,ANIT TAA.YJSB treatment did not reduce the level of serum AST.YJSB at 3.51 g/kg prolonged the sleep latency in control mice and shortened the sleep time of control mice and CCl_4 model mice.For control rats,YJSB at 2.43 g/kg increased the levels of CYP450 and Cyt b5 and induced the activities of ERD and ADM;for liver injuries induced by CCI_4 in rats,YJSB at 2.43 g/kg increasedthe levels of CYP450 and Cyt b5.These results suggest that YJSB at 2.43 g/kg induces CYP3A4 and CYP1A2.CONCLUSION:These results suggest that YJSB enhanced liver detoxification and the mechanisms may be partially related to CYP3A4 and CYP1A2 induction.     

人参皂苷CK对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤的影响

目的研究人参皂苷CK对CC l4致慢性肝损伤的影响。方法用CC l4致大鼠慢性肝损伤模型,观察人参皂苷CK(0.3,1,3 mg/kg)对大鼠血清天冬氨酸转氨酶(aspartate transam inase,ALT)、丙氨酸转氨酶(alan ine transam inase,AST)、超氧化物歧化酶(superoxide d ismutase,SOD)、丙二醛(m alond ialdehyde,MDA)及透明质酸(hyaluron ic ac id,HA)、Ⅲ型前胶原(pre-collagenⅢ,PCⅢ)的影响,并对肝脏组织进行病理学观察。结果人参皂苷CK小剂量(0.3 mg/kg)能降低血清转氨酶ALT,AST水平,增加血清SOD的含量,降低MDA含量;CK中、高剂量无明显作用。CK各剂量组血清HA、PCⅢ和肝组织病理未见明显改变。结论CK低剂量对CC l4致慢性肝损伤具有一定的保护作用,其作用可能与抗氧化有关。     

龙胆泻肝汤对四氯化碳肝损伤大鼠肝脏转运功能的影响

目的:研究龙胆泻肝汤对四氯化碳(CC l4)所致急性肝损伤大鼠的靛氰绿(ICG)肝清除率的影响。方法:将32只大鼠随机分为空白对照组、模型组和龙胆泻肝汤高、低剂量组,每组8只。用CC l4制作大鼠急性肝损伤模型,测定下列变化:(1)大鼠血清天冬氨酸转氨酶(ALT)、丙氨酸转氨酶(AST);(2)肝脏形态学的改变;(3)肝血流量和靛氰绿肝清除率的改变;观察龙胆泻肝汤对CC l4大鼠急性肝损伤的影响。结果:龙胆泻肝汤能明显抑制CC l4所致大鼠血清中ALT及AST含量的升高(P<0.05或P<0.01),改善肝脏组织病理,对抗CC l4所致肝血流量和肝清除率下降(P<0.05)。结论:龙胆泻肝汤可保护肝脏,对抗CC l4所致肝清除率和肝血流量下降。     

中华补血草根提取物抗四氯化碳急性肝损伤的实验研究

目的研究中华补血草根提取物(the Limonium sinense Ktze root extract,LSE)对小鼠急性肝损伤的防护作用及药理机制。方法建立小鼠四氯化碳(CCl_4)肝损伤模型,检测LSE对血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性的影响;观察肝细胞超微结构的变化;测定肝线粒体膜电位以及线粒体对高钙诱发肿胀的敏感性的变化。结果一定剂量(100～400 mg/kg)LSE能有效抑制CCl_4引起的小鼠血清AST及ALT活性的显著上升;明显减轻肝损伤引起的小鼠肝脏线粒体形态结构的破坏:抑制线粒体膜电位的降低以及线粒体对外加高钙诱发肿胀敏感性的下降。结论LSE对CCl_4诱导的急性肝损伤具显著的防护作用,其机理可能与保护肝脏线粒体有关。     

痛风颗粒浸膏粉对大鼠痛风性关节炎和佐剂性关节炎的影响

目的:研究痛风颗粒浸膏粉对大鼠急性痛风性关节炎(Acute Gouty Arthritis)和佐剂性关节炎(Adjuvant Arthritis,AA)的影响。方法:将大鼠分为正常对照组、模型对照组、痛风颗粒浸膏粉高剂量组(8.75g/kg)、低剂量组(4.375 g/kg),观察痛风颗粒浸膏粉灌胃给药对大鼠尿酸钠致急性痛风性关节炎模型的足肿胀率的影响,并观察其对佐剂性关节炎模型踝关节肿胀度及其病理改变的影响。结果:对急性痛风性关节炎,痛风颗粒浸膏粉8.75g/kg对足肿胀有明显的改善(P<0.01),4.375g/kg较之于模型组有改善但无统计学意义,起效剂量为8.75g/kg。对佐剂性关节炎,痛风颗粒浸膏粉高剂组、低剂量组对大鼠右足踝关节肿胀程度以及继发的对侧足踝关节肿胀程度均有改善,并抑制踝关节组织病理学改变(P<0.01或P<0.05),起效剂量为4.375 g/kg,在4.375g/kg～8.75g/kg剂量范围,受试物对佐剂性关节炎具剂量依赖性的抑制作用。结论:痛风颗粒浸膏粉不仅对实验性大鼠痛风性关节炎有较好的治疗作用,其对佐剂关节炎也作用明显。     

地锦草总黄酮预防四氯化碳所致急性肝损伤的实验研究

目的研究地锦草总黄酮(total flavonoids ofEuphorbiae hum ifusae,TFEH)对四氯化碳造成的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法四氯化碳造成小鼠急性肝损伤模型,测定血清谷丙转氨酶(serum glutam ic pyruvic transam inase,SGPT)、肝组织谷丙转氨酶(liver glutam ic pyruvic transam inase,GPT)、超氧化物歧化酶(superoxidase d ismutase,SOD)活性及丙二醛(m alonaldehyde,MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量,采用光镜观察肝脏组织学变化。结果与四氯化碳模型组比较,经TFEH预防性治疗后,GPT、LGPT活性和MDA含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),而GSH含量和SOD活力明显增高(P<0.05)。通过病理学切片观察,TFEH明显改善肝组织的病理变化。结论TFEH对四氯化碳造成的小鼠急性肝损伤具有保护作用。     

强心益气汤对多柔比星所致急性心衰大鼠心功能的保护作用

目的:观察强心益气汤对多柔比星致急性心衰大鼠心功能的影响及机制。方法:一次性腹腔注射多柔比星10mg/kg,复制急性心衰大鼠模型。强心益气汤灌胃6d后,观察心室内压变化、血清中超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响以及观察心肌病理形态学的改变。结果:强心益气汤各组均能不同程度改善血流动力学并能明显升高血清SOD、降低MDA含量;HE染色结果显示,强心益气汤各组心肌细胞变性坏死明显减轻。结论:强心益气汤能够明显改善多柔比星心肌毒性导致的急性心衰,该作用可能与调节大鼠体内自由基代谢及增强心脏泵血功能有关。