隔药灸对子宫内膜异位症大鼠模型治疗作用及机制研究

目的:研究隔药灸治疗子宫内膜异位症大鼠模型的疗效及机制。方法:构建子宫内膜异位症大鼠模型并随机分为治疗组、孕三烯酮组、模型组和假手术组。经治疗后,采集大鼠病灶标本,观察隔药灸对大鼠异位子宫内膜体积的抑制作用,计算抑制率;RT-PCR法检测各组大鼠异位子宫内膜的KDR和PTGS2 m RNA表达。结果:经隔药灸治疗后大鼠模型的异位子宫内膜体积较模型组明显缩小;治疗组大鼠模型的异位子宫内膜PTGS2和KDRm RNA表达均明显低于模型组。结论:隔药灸能明显抑制大鼠模型异位子宫内膜的发展,并且这种治疗作用可能与抑制KDR和PTGS2表达,从而调控异位子宫内膜血管生成有关。     

阿拉瑞林对SD大鼠正位与异位子宫内膜雌孕激素受体的影响

【目的】观察阿拉瑞林对子宫内膜异位症大鼠异位病灶的抑制作用 ,研究其对正位与异位子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体 (PR)的影响。【方法】 2 7只采用外科诱导法建立的子宫内膜异位症大鼠随机分成模型对照组和阿拉瑞林(alarelin)治疗组 ,模型组在同等条件下观察 4周 ,阿拉瑞林组以alarelin 30 μg(kg·d) -1皮下注射 4周 ;治疗结束后 ,用链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶连接法 (SP)行正位与异位内膜ER、PR测定。【结果】阿拉瑞林组大鼠正位和异位子宫内膜生长活动受抑制 ,异位病灶体积较治疗前明显缩小 (P <0 0 1) ,异位内膜抑制率为 (6 8± 44 ) %;正位子宫内膜的ER较模型对照组明显下降 (P <0 0 5 ) ;正位子宫内膜上皮细胞的ER与异位内膜抑制率呈一定的负相关 (r =- 0 4 0 7,P <0 0 5 )。而对异位子宫内膜的ER、正位与异位子宫内膜PR的影响无显著性差异。【结论】阿拉瑞林对子宫内膜异位症大鼠有显著的治疗作用 ,其对正位子宫内膜的抑制作用可能通过ER介导 ,而对异位子宫内膜的抑制作用与异位内膜局部总的ER、PR可能无直接关系 ;检测正位子宫内膜上皮细胞的ER水平对阿拉瑞林的疗效有一定的预测作用。     

罗非昔布对大鼠子宫内膜异位症模型的作用

目的:观察罗非昔布对大鼠子宫内膜异位症模型的治疗作用,并初步探索其作用机制。方法:采用自体子宫移植方法建立大鼠子宫内膜异位症模型。4周后,将模型大鼠随机分成空白对照组、罗非昔布治疗组(30 mg/kg)和内美通治疗组(0.25 mg/kg)。治疗4周后,观察各组模型病灶的大小以及组织学观察子宫内膜的生长形态。免疫组化方法检测大鼠异位内膜组织的血管内皮生长因子(VEGF)、环氧化酶-2(COX-2)。结果:用药4周后,各组间病灶体积没有明显差异(P>0.05)。组织病理学显示用药组的异位内膜生长明显受抑制或变性坏死,病灶组织血供不足。VEGF和COX-2在对照组及用药组大鼠的移植组织中均有表达,各组之间无明显差异(P>0.05)。结论:罗非昔布能够抑制、破坏异位内膜的增长。罗非昔布治疗大鼠子宫内膜异位症可能并不影响异位病灶组织的VEGF和COX-2,其确切治疗机制目前尚不清楚。     

消异方对子宫内膜异位症模型大鼠NGF表达的影响

目的：观察消异方对子宫内膜异位症大鼠异位内膜NGF表达的影响,初步探讨消异方治疗子宫内膜异位症的机制。方法：采用自体手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为模型组、米非司酮组、散结镇痛胶囊组、消异方低、中、高剂量组。造模成功各组给药4周,免疫组化方法检测大鼠异位子宫内膜组织NGF的表达情况。结果：模型组异位内膜中NGF的表达水平明显高于米非司酮组、散结镇痛胶囊组和中药消异方各剂量组（P〈0.05）。结论：消异方能降低大鼠子宫内膜NGF的含量,抑制异位内膜生成,以达到预防和治疗子宫内膜异位症的作用。     

补肾祛瘀汤对子宫内膜异位症大鼠细胞凋亡的影响

目的:研究补肾祛瘀汤(BQT)对子宫内膜异位症(EMS)模型大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)及survivin蛋白的影响,探讨补肾祛瘀汤对EMS的疗效机理。方法:SD大鼠50只随机分为5组:正常组、模型组、补肾祛瘀汤组、孕三烯酮组、补肾祛瘀汤加孕三烯酮组,除正常组外其余均采用大鼠子宫内膜组织自体移植手术建立子宫内膜异位症模型,灌胃给药28 d后检测各组大鼠血清中和子宫内膜移植物局部TNF-α和survivin蛋白表达。结果:①与正常组相比,模型组大鼠血浆TNF-α显著升高,差异有统计学意义(P=0.004);与模型组相比,西药组、中药组大鼠血清中TNF-α下降,差异有统计学意义(P=0.035,P=0.037);中西结合组大鼠血清中TNF-α与正常组相比,差异有统计学意义(P=0.01);②与正常组相比,模型组大鼠异位内膜中survivin蛋白的表达是显著上调的(P=0.005),与模型组大鼠相比,各个治疗组大鼠异位内膜中survivin蛋白的表达明显下降(P<0.01),而西药组和中西结合组相比,EMS模型大鼠异位内膜当中survivin的含量差异有统计学意义(P=0.018,P<0.05)。结论:补肾祛瘀汤对大鼠子宫内膜异位症具有治疗作用,其作用机制可能与增强异位内膜细胞的凋亡有关,运用传统中药治疗子宫内膜异位症更具优势。     

青蒿素对大鼠子宫内膜异位症的抑制作用及机理探讨

目的 探讨青蒿素对大鼠子宫内膜异位症模型的异位内膜是否具有抑制作用,以及其抑制作用与细胞凋亡和血管生成之间的关系.方法 通过手术方法建立大鼠子宫内膜异位症模型,4周后测量异位内膜体积,将造模成功的大鼠(n=40)分为4组:青蒿素高剂量组[300mg/(kg·d)]、青蒿素低剂量组[150 mg/(kg·d)]、丹那唑组[160 mg/(kg·d)]和溶剂对照组.每日经灌胃给药,持续4周后处死大鼠,比较各组病灶体积及组织学变化,免疫组化法检测各样本的凋亡指数、Bcl-2和微血管密度.结果 与溶剂对照组相比,青蒿素高剂量组、青蒿素低剂量组和丹那唑组异位内膜的体积减少(P均＜0.05),但3个治疗组的异位内膜体积差异无统计学意义.与溶剂对照组相比,3个治疗组异位内膜组织的凋亡指数增高,Bcl-2表达和微血管密度降低(P均＜0.05);除微血管密度外,青蒿素组凋亡指数较丹那唑组更高,Bcl-2表达较丹那唑组更低(P均＜0.05),且呈剂量依赖关系.各组大鼠未见明显的毒副反应.结论 青蒿素对大鼠子宫内膜异位症模型中异位内膜的发生及发展有抑制作用,其抑制效应可能与促进细胞的凋亡和抑制血管生成有关.     

青蒿素治疗大鼠子宫内膜异位症的疗效

目的探讨青蒿素对大鼠子宫内膜异位症模型的异位内膜是否具有抑制作用,以及其抑制作用与细胞凋亡和血管生成表达之间的关系。方法构造大鼠内膜异位症模型,将建模成功的40只大鼠分为4组,分别为:青蒿素高剂量组[300 mg/(kg.d)]、青蒿素低剂量组[150 mg/(kg.d)]、丹那唑组[160 mg/(kg.d)]和安慰剂组。均用药4周后处死大鼠,比较其各组病灶体积及组织学的变化,用免疫组织化学(SP法)对样本进行染色,比较各组样本的细胞凋亡指数(AI)、Bcl-2、微血管密度(MVD)的表达。结果与安慰剂组比较,青蒿素高剂量组、青蒿素低剂量组和丹那唑组异位内膜的体积显著减少,安慰剂组异位内膜体积在给药后较给药前稍增大,用药组囊泡体积与同期安慰剂组比较差异有显著性(P<0.05)。与安慰剂组比较,3个治疗组异位内膜组织的AI显著增高,Bc l-2和MVD的表达显著降低,但3个治疗组中MVD的表达差异无统计学意义。各组大鼠未见明显的不良反应。结论青蒿素对大鼠子宫内膜异位症模型中异位内膜的发生及发展有抑制作用,并且其抑制效应可能与促进细胞的凋亡和抑制血管生成有关,且安全性较高。     

"消内异颗粒"对大鼠子宫内膜异位症的药效学研究

目的：研究新药“消内异颗粒”对大鼠子宫内膜异位症的药效学。方法：采用大鼠子宫内膜自体移植造成大鼠子宫内膜异位症模型，4周后用“消内异颗粒”灌胃给药8周，用滇虹妇康浸膏作为阳性对照，灌胃8周。结果：新药(中药)“消内异颗粒”使异位内膜包块体积缩小。结论：“消内异颗粒”有抑制子宫异位内膜生长的作用。     

定坤丹对子宫内膜异位症模型大鼠的作用

自体子宫内膜移植法建立子宫内膜异位症（EMS）模型大鼠,比较给药前后移植物体积、大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、异位内膜中血管内皮生长因子（VEGF）的表达。经定坤丹治疗后移植物体积、血清 TNF-α水平、异位内膜中 VEGF 的表达与疾病模型组相比均明显下降,差异有统计学意义（P ＜0．05）。定坤丹对 EMS 模型大鼠的异位内膜生长有一定的抑制作用,其作用机制可能与血清 TNF-α水平降低和 VEGF 的表达减少有关。     

活血化瘀法对子宫内膜异位症模型大鼠E2、P、VEGF的影响

目的:探讨活血化瘀法治疗子宫内膜异位症的作用机理。方法:采用大鼠自体子宫内膜移植建立实验性子宫内膜异位症模型,分别观察活血化瘀方药和达那唑对模型大鼠外周血清E2、P含量及VEGF在大鼠异位内膜组织中的表达的影响。结果:活血化瘀方药对上述指标均有不同的降调或抑制作用,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),活血化瘀法高剂量组与达那唑相比无显著性差异(P>0.05)。结论:活血化瘀法具有调节内分泌及血管内皮细胞生长因子作用,能够有效抑制异位子宫内膜的种植。     

消异汤联合达那唑对大鼠异位子宫内膜组织VEGF及MVD表达的影响

目的：探讨消异汤联合达那唑对大鼠异位子宫内膜组织血管内皮生长因子VEGF及微血管密度MVD表达的影响。方法：采用自体移植法改良建立Wistar大鼠子宫内膜异位症模型,4周后将建模成功的大鼠随机分为生理盐水对照组（U）,消异汤组（XYT）,达那唑组（D）,和联合用药小剂量组（SS）,联合用药常规剂量组（CS）,每组10只,灌药4周后,择动情期处死大鼠。采用免疫组化法测定血管内皮生长因子（VEGF）的表达,并通过CD31标记异位子宫内膜血管,测定其微血管密度（MVD）。结果：消异汤组、达那唑组及各联合用药组VEGF和MVD的表达均低于对照组（P〈0.05）,联合用药常规剂量组最低,其中达那唑组和联合用药小剂量组间比较差异无统计学意义。结论：消异汤可降低子宫内膜异位症模型大鼠的VEGF及MVD的表达水平,消异汤与达那唑合用,不仅可以提高疗效,而且可以适当降低达那唑的用药剂量。     

载紫杉醇PLGA微球在Skov3卵巢癌荷瘤小鼠体内的治疗效果

目的   应用乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载紫杉醇(PTX)PLGA微球,评价PTX-PLGA微球对荷瘤小鼠治疗效果。方法   采用4周龄雌性BALB/c-nu裸小鼠建模,将卵巢癌Skov3细胞株注射于裸鼠背部一侧,制备裸小鼠皮下移植瘤。设空白对照组、生理盐水组、PLGA微球悬液组、PTX注射液组和PTX-PLGA微球悬液组。分别对成瘤后荷瘤鼠进行治疗、观察记录、绘制肿瘤生长曲线。对Skov3移植瘤裸小鼠瘤内直接注射药物并应用免疫组化法检测移植瘤微血管密度(MVD)、相关死亡促进因子(Bad)。结果   给药6周后,PTX-PLGA微球组瘤内注射抑瘤效果明显大于其他各组(P＜0.05),肿瘤体积明显减小,癌细胞增殖受到抑制。结论   PTX-PLGA微球瘤内直接注射对卵巢癌的治疗有明显体内抑瘤效果。     

Effect of recombinant human endostatin on endometriosis in mice

Background Direct and indirect evidences have suggested that angiogenesis is a prerequisite for the development of endometriosis. Aiming at offering experimental evidences for anti-angiogenesis therapy, we transplanted the eutopic endometrium from patient with endometriosis into the severe combined immunodeficiency disease (SCID) mice, to evaluate the effect of the endostatin on the growth and angiogenesis of the established endometriosis lesions in SCID mice model.Methods Eutopic endometrium of women with endometriosis was transplanted into the SCID mice. The mice were randomized into treatment (n=10) and control groups (n=10). Two weeks after the implantation of endometrium fragment, the treatment group was injected with recombinant human endostatin YH-16 into the peritoneal cavity (2 mg·kg(-1)·d(-1)), whereas the control group received equivalent volume of PBS (200 &micro;l/d). The volume of endometriotic lesions in SCID mice was measured every three days, and all the treatment lasted for 14 days. Immunohistochemistry was used to determine microvessel density (MVD) and the expression of VEGF. The results were analyzed by t test and χ(2) test to value the treating effect. Results Compared with the control group, growth of endometriosis lesion was reduced in the mice treated with YH-16. Statistically significant differences in the volume and weight of the ectopic lesions were observed between the treatment and the control groups (P&lt;0.05). Microscopical examination showed that after being treated with YH-16, the volume of the endometrial tissues decreased, the glands depauperated, and the glandular epithelium partially degenerated. Necrotic debris was observed in the endometrial stroma. MVD and expression of VEGF in the treatment group were significantly lower than those in the control group (P&lt;0.05). Conclusions Recombinant human endostatin affects the maintenance and growth of endometriotic tissues by inhibiting angiogenesis and reducing the expression of VEGF in ectopic lesion. The angiostatic agent may be promising as a therapy for endometriosis.     

子宫内膜异位症大鼠内膜窗口期模型的建立?

目的：研究子宫内膜异位症(EMs)患者窗口期的子宫内膜容受性,构建 EMs大鼠内膜窗口期动物模型。方法取性成熟 SD 大鼠22只,通过手术将 SD 大鼠自体子宫内膜组织移植至同侧腹壁及对侧子宫系膜上,建立诱发型 EMs 大鼠动物模型。术后4周随机选取2只大鼠解剖观察异位内膜的生长情况,确定造模成功后,将 EMs 模型大鼠与雄鼠同笼交配,次日观察阴栓,妊娠第5天剖腹观察20只模型大鼠异位内膜的存活情况,并对在位子宫内膜及异位内膜进行组织形态学观察。结果20只妊娠第5天大鼠均有明显的异位病灶,在腹壁及系膜上均呈小包块样生长,且与周围组织有不同程度的粘连,光镜下见异位子宫内膜形态具有正常子宫内膜基本组织结构,EMs 大鼠造模成功;所有 EMs 模型大鼠与雄鼠同笼交配次日均见阴栓,妊娠第5天大鼠非手术侧子宫腔内不同程度积液,在位及异位内膜均处于分泌期。结论通过自体子宫内膜移植法成功建立了 EMs 大鼠模型;EMs 模型大鼠子宫内膜处于胚胎着床窗口期,为研究 EMs 子宫内膜容受性提供了动物模型。     

消癥注射液对实验性子宫内膜异位症异位内膜Fas、Survivin表达的影响

【目的】探讨消癥注射液治疗子宫内膜异位症的机制。【方法】采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法对SD雌性大鼠内膜异位内膜治疗前后进行子宫内膜组织中Fas和Survivin基因表达的测定.【结果】模型组中Fas基因表达的降低,survivin基因表达升高,使其无论在位还是异位内膜的促凋亡能力下降,异位的内膜在盆腔外存活的能力增强,而治疗后消癥注射液和无水乙醇均升高了Fas基因的表达,降低survivin基因表达,两治疗组之间比较差异无显著意义（P〉0．05）,但不同剂量消癥注射液之间有一定的差别（P〈0．05）。【结论】消癥注射液和无水乙醇均能升高了Fas基因的表达,降低survivin基因表达,从而诱导异位内膜细胞调亡的发生,达到治疗目的．     

红藤方对子宫内膜异位症大鼠间质-上皮转化的影响

目的:探讨中药红藤方对子宫内膜异位症大鼠异位内膜形成包囊过程中间质-上皮转化的影响。方法:采用自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,3周后取造模成功的大鼠18只随机分为模型组、红藤方组、孕三烯酮组,分别连续灌胃等容量0.9%Na Cl溶液、红藤方27.72 g·kg~(-1)·d~(-1)、孕三烯酮0.5 mg·kg~(-1)·d~(-1),均持续21 d,结束后取异位内膜组织。采用HE染色方法对异位内膜组织进行病理学观察,免疫组化方法观察上皮标志物上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物波形蛋白(Vimentin)在异位内膜包囊中的定位和表达情况,Western blot法检测异位内膜包囊形成组织中E-cadherin、Vimentin的蛋白表达。结果:HE染色结果显示,模型组异位内膜组织中腺体减少、间质较多,红藤方组异位内膜组织腔上皮变薄、间质细胞减少,孕三烯酮组异位内膜组织腔上皮完整。免疫组化结果显示,红藤方组和孕三烯酮组异位内膜包囊腔上皮E-cadherin、Vimentin阳性信号较模型组减弱。Western blot结果显示,红藤方组Vimentin和孕三烯酮组E-cadherin蛋白含量较模型组显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:红藤方可能通过上调间质-上皮转化,导致间质细胞减少,从而抑制子宫内膜异位症大鼠异位内膜包囊的生长。     

雌激素药物对大鼠子宫内膜异位症OPN、MMP-9表达的影响

目的探讨雌激素药物（丙氨瑞林、米非司酮、孕三烯酮）对大鼠子宫内膜异位症（EMS）OPN、MMP-9表达的影响。方法将建模成功的36例实验用大鼠随机性地均分为四组,各9例．分别给予丙氨瑞林、米非司酮、孕三烯酮三种雌激素类药物干预,另外使用酵母片进行干预,1个月后将大鼠杀死．将其在位与异位内膜取出,运用RT—PCR法对OPN与MMP-9蛋白及基因表达进行分析、测定。结果三组雌激素药物干预组干预后在位内膜与异位内膜中的OPN与MMP-9的表达均要明显低于干预前,且干预前后差异存在高度统计学意义（P〈0．01）;对照组干预后异位内膜中的OPN与MMP-9的表达要强于在位内膜;三组雌激素干预组干预后在位与异位内膜OPN表达无差异统计学意义（P〉0．05）,但干预后雌激素干预组异位内膜中MMP-9表达明显强于在位内膜（P〈0．01）;对照组干预后异位内膜中OPNmRNA的表达较干预前出现显著性降低（P〈0．01）,且在位与异位内膜的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论雌激素类药物能够降低大鼠在位及异位内膜中OPN与MMP-9的表达能力,且对异位内膜中的OPN表达能力的抑制作用要明显强于在位内膜,对在位内膜中的MMP-9表达能力的抑制性作用不亚于对异位内膜;雌激素类药物可能通过对局部病灶OPN及MMP-9表达能力的抑制作用进行抑制来减小细胞的侵袭及黏附性能。     

小柴胡汤对内异症大鼠异位内膜的作用

OBJECTIVE: To investigate the effects of Xiaochaihu Tang (XCHT), a traditional Chinese medicinal preparation, on ectopic endometrium in rats. METHODS: In rat models of endometriosis, the effect of XCHT of ultrastructure of the ectopic endometrium was observed by transmission electron microscopy. RESULTS: After treatment with XCHT at moderate (500 g/L) or high dose (750 g/L), ectopic endometrial growth was significantly inhibited (P<0.01); small-dose XCHT (250 g/L) was less effective (P<0.05). The volume of endometrium implant in the control group remained unchanged (P>0.05). The glandular cells in the endometrial implant after therapy with moderate- or high-dose XCHT showed characteristic features of apoptosis, presented by decreased cell size, karyopyknosis, cytoplasm and nuclear chromatin condensation, increased density and presence of apoptotic bodies. Some stromal cells displayed degenerative and necrotic changes. CONCLUSION: XCHT may inhibit the growth of ectopic endometrium by inducing cell death in the form of apoptosis and necrosis.     

益胃汤对子宫内膜异位症大鼠T细胞亚群的影响

目的：观察益胃汤（YWD）对子宫内膜异位症（EMs）大鼠T淋巴细胞亚群的影响,初步探讨YWD治疗EMs的作用机制。方法：采用大鼠自体子宫内膜移植建立子宫内膜异位症（内异症）大鼠模型。将造模成功大鼠随机分为模型对照组、达那唑对照组、YWD高、中、低剂量组,另设假手术对照组,连续给药4周后,测定异位内膜体积,采用流式细胞技术检测外周血T细胞CD4＋和CD8＋。结果：与模型对照组比较,YWD各剂量组异位内膜体积显著缩小（P〈0.05）,抑制率明显升高（P〈0.05）,CD4＋、CD4＋/CD8＋比值增高,CD8＋降低。结论：YWD对大鼠EMs有一定的治疗作用,调节外周T细胞亚群紊乱可能是其治疗子宫内膜异位症的作用机制之一。     

消癥注射液对实验性子宫内膜异位症异位内膜Fas、Survivin表达的影响*

[目的]探讨消癥注射液治疗子宫内膜异位症的机制.[方法]采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法对SD雌性大鼠内膜异位内膜治疗前后进行子宫内膜组织中Fas和Survivin基因表达的测定.[结果]模型组中Fas基因表达的降低,survivin基因表达升高,使其无论在位还是异位内膜的促凋亡能力下降,异位的内膜在盆腔外存活的能力增强,而治疗后消癥注射液和无水乙醇均升高了Fas基因的表达,降低survivin基因表达,两治疗组之间比较差异无显著意义(P>0.05),但不同剂量消癥注射液之间有一定的差别(P<0.05).[结论]消癥注射液和无水乙醇均能升高了Fas基因的表达,降低survivin基因表达,从而诱导异位内膜细胞调亡的发生,达到治疗目的.