IL-1对肾小球系膜细胞p27和CDK2表达的影响

肾小球硬化是多种原因引起肾小球损伤后出现的共同转归 ,是肾功能衰竭的主要病理基础。而导致肾小球硬化最主要的原因就是系膜细胞增生和细胞外基质增多 ,其中细胞外基质的增多与系膜细胞增生又密切相关[1] 。因此 ,探讨肾小球系膜细胞增生的内部机制以及如何对其进行调控 ,已成为肾脏病领域的一个研究热点。研究表明 ,细胞周期调控在细胞增生过程中起重要作用 ,而细胞周期又受细胞周期调节蛋白的调控。细胞周期调节蛋白按其功能分为细胞周期正控蛋白和负控蛋白 ,其中细胞周期正控蛋白主要包括周期素 (ｃｙｃｌｉｎ)和周期素依赖激酶 (ｃｙ…     

脂多糖和细胞因子刺激肾小球系膜细胞合成PAF的研究

本研究首先建立了血小板活化因子（ＰＡＦ）生物活性检测法，并测定了体外培养的系膜细胞经ＩＬ－１β，ＩＬ－６和ＴＮＦα刺激后，其培养上清中ＰＡＦ的含量。结果发现，上述细胞因子均能刺激系膜细胞合成ＰＡＦ，并呈一定的剂量依赖关系，ＩＬ－１β，ＩＬ－６和ＴＮＦα通过这一途径而间接地发挥病理作用，加剧肾小球损害。     

肾小球系膜细胞白细胞介素—6基因表达与白细胞介？…

目的：探讨白细胞介素－１３（ＩＬ－１３）对于体外培养大鼠系膜细胞白细胞介素－６（ＩＬ－６）分泌及其基因表达的影响,以研究ＩＬ－３对肾小球疾病症状下肾脏系细胞炎症反应的抑制作用。方法：用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定系膜细胞ＩＬ－６分泌量,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测系膜细胞ＩＬ－６ ｍＲＮＡ表达。结果：正常培养条件上系膜细胞ＩＬ－６ ｍＲＮＡ表达及ＩＬ－６分泌水平较低,脂多糖（ＬＰＳ     

低密度脂蛋白对人肾小球系膜细胞产生炎性介质的影响

目的：探讨脂蛋白在肾小球损伤中的作用，观察人低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＧＭＣ）产生活性氧（ＲＯＳ）、血小板活化因子（ＰＡＦ）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的影响，并与经ＬＤＬ刺激后ＧＭＣ的增殖水平相比较。方法：将ＧＭＣ加或不加ＬＤＬ刺激，分别收集３０ｍｉｎ、１８ｈ或４８ｈ后的上清，测定其Ｈ２Ｏ２、Ｏ２＾、ＴＮＦ、ＰＡＦ和ＬＤＨ的水平，以四唑蓝（ＭＴＴ）摄入     

外源性同型半胱氨酸对肾小球系膜细胞的影响

目的：研究外源性同型半胱氨酸对体外培养的肾小球系膜细胞增殖，表型转化和产生细胞外基质的影响。方法：采用放射性同位素测定＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和细胞外信号调节激酶活性，流式细胞仪分析细胞周期，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法进行α－平滑肌肌动蛋白检测，ＥＬＩＳＡ方法检测细胞上清液中细胞外基质含量。结果：不同浓度的同型半胱氨酸（０．００５，０．０５，０．５和１．０ｍｍｏｌ／Ｌ）不同作用时间（８，１６和２４ｈ）     

高胰岛素对人类肾小球系膜细胞的影响

有报道胰岛素可以导致大鼠肾小球系膜中纤维连接蛋白 (Ｆｎ)堆积[1] ,提示高胰岛素血症可能在糖尿病肾病 (ＤＮ)发生发展中有其作用。本研究拟建立人类肾小球系膜细胞 (ＧＭＣ)培养 ,观察高胰岛素对人类ＧＭＣ增生及Ｆｎ生成 ,ＧＭＣ内游离Ｃａ2 ([Ｃａ2 ]ｉ)水平的影响 ,以探讨ＤＮ发病机制及其防治的实验依据。1　材料和方法[2 ]1.1　ＧＭＣ培养及鉴定　取人类肾移植废弃肾的肾皮质 ,筛网法分离肾小球 ;含 10 %灭活小牛血清的ＲＰＭＩ 16 4 0培养 ,消化传代及细胞鉴定。实验中使用第 4～ 8代细胞。1.2　实验分组　按培养液中胰岛素浓度…     

内毒素诱导肾小球系膜细胞白细胞介素—6的产生及基因表达

目的：观察体外培养的小鼠肾小球系膜细胞在内毒素（ＬＰＳ）诱导下ＩＬ－６的产生及其ｍＲＮＡ表达。方法：按经典方法培养肾小球系膜细胞（ＭＣ），转种培养后分为二组，诱导组加ＬＰＳ１０ｍｇ／Ｌ，对照组不加，用分子生物学和免疫学方法进行检测。结果：ＩＬ－６在正常ＭＣ中分泌量极微，其ｍＲＮＡ也为低水平表达，经ＬＰＳ诱导后二者均明显增加，ＩＬ－６蛋白的产生６～１２ｈ达高峰，比对照组增加３～５倍，ＩＬ－６ｍＲＮＡ     

高糖对人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质的影响

目的 观察不同浓度的葡萄糖对人肾小球系膜细胞增殖的影响及对细胞外基质纤维连接蛋白(Fn),Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响.方法 体外培养人肾小球系膜细胞株,分别加入葡萄糖终浓度为5.5、10、20、30、40 mmol/L进行处理,于不同时间段(12、24、48、72 h)用MTT法检测肾小球系膜细胞的增殖情况,ELISA法检测培养48 h后条件培养基中Fn及ColⅣ的含量.结果 高糖作用12、24、48、72 h均能促进细胞的增殖,且随着葡萄糖浓度升高作用时间的延长促进作用增强.检测细胞上清液的Fn和ColⅣ.与对照组相比,30 mmol/L D-葡萄糖作用48 h后,Fn和ColⅣ表达增高.结论 高浓度葡萄糖对系膜细胞增殖作用具有量效及时效关系,我们选择30 mmol/L浓度的葡萄糖作用48 h为最合适的细胞刺激条件.高浓度葡萄糖可促进系膜细胞细胞外基质的产生,而系膜细胞细胞外基质过度表达,可以直接导致细胞外基质的积聚,从而导致肾小球硬化的发生.     

高密度脂蛋白对肾小球系膜细胞损伤的保护作用

利用体外培养的人肾小球系膜细胞，观察了高密度脂蛋白对其生长、释放血小板活化因子和乳酸脱氢酶的影响，同时还研究了高密度脂蛋白对低密度脂蛋白所致系膜细胞增殖的影响。结果发现，高密度脂蛋白有轻度抑制系膜细胞增殖的作用，几乎不增加细胞血小板活化因子和乳酸脱氢酶的释放。低密度脂蛋白浓度为球系膜细胞的损伤有一定保护作用，至少不增加低这旨蛋白的肾毒性。     

肿瘤坏死因子与肾小球系膜细胞的关系

本文在体外培养的大鼠系膜细胞中，加入ｒＴＮＦα，观察培养的系膜细胞ＤＮＡ合成的变化，以及其合成和分泌ＴＮＦα及ＥＴ－１的变化；并通过一侧大鼠肾动脉内注射ｒＴＮＦα，观察肾脏的病变。结果证明，ＴＮＦα对系膜细胞有促进增生的作用，并使系膜细胞的自分泌功能增强。     

细胞间粘附分子对巨噬细胞促进肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨细胞间粘附分子－１对巨噬细胞促进系膜细胞增殖作用的影响。方法：利用体外系膜细胞与巨噬细胞共同培养的方法，通过加入不同剂量的有关抗体，采用Ｏｌｉｖｅｒ法观察细胞增殖的变化。结果：随着抗细胞间粘附分子－１抗体剂量的增加，巨噬细胞促进系膜细胞增殖的作用逐渐减弱，与正常对照组相比差异非常显著（Ｐ〈０．０１）。结论：细胞间粘附分子促进系膜细胞与巨噬细胞之间粘附加强，可能是肾小球系膜增生性炎症改变的     

胰淀素诱导人肾小球系膜细胞凋亡

目的:研究胰淀素（amylin) 对人系膜细胞的毒性作用。方法：采用电镜、TUNEL、DNA凝胶电泳和碘化丙啶染色（PI）流式细胞仪分析技术及免疫组化技术，观察amylin对人系膜细胞的作用。结果：光镜和电镜下见细胞体积缩小、梁色质浓梁、致密、边移和凋亡小体形成；TUNEL细胞染色阳性，DNA凝胶电泳出现DNA“梯形”片断；amylin处理48h后，均可见亚二倍体细胞凋亡峰。定量分析示：系膜细胞的凋亡数量与amylin浓度呈剂量依赖性（P＜0．01）。amylin治疗组和对照组乳酸脱氢酶活性细胞释放率无显著性差异（P＞0．05）。结论：amylin对人系膜细胞具有细胞毒性作用，并可诱导系膜细胞的凋亡。amylin诱导人肾小球系膜细胞的凋亡可能是糖尿病肾病患者进行性肾小球硬化和系膜细胞逐渐消失的机制之一。     

叔丁基过氧化氢体外诱导人肾小球系膜细胞的衰老

目的通过观察不同浓度叔丁基过氧化氢(t-BHP)作用不同时间后对人肾小球系膜细胞(HGMC)衰老指标的影响,探讨t-BHP在HGMC衰老过程中的作用。方法应用10、30、50、100μmol/L t BHP刺激细胞,每天刺激1 h,连续5 d,刺激结束后48 h检测细胞增殖情况、衰老相关β半乳糖苷酶(SAβ-gal)染色阳性细胞百分率、细胞周期变化及细胞形态改变确定t-BHP诱导HGMC衰老的最佳浓度。结果 30μmol/L t BHP刺激HGMC,每天1 h连续作用5次后可抑制HGMC增殖,且84%的HGMC SAβ-gal染色阳性,90%HGMC进入G0~G1期;光镜表现细胞体积增大、胞体扁平、胞质颗粒增多;电镜下细胞核膜内陷,染色质凝集、边集,细胞质空泡增多,出现髓样溶酶体。结论 30μmol/L t BHP刺激HGMC后每天1 h连续作用5次,可作为诱导HGMC发生衰老的刺激因素。     

内皮素对肾小球系膜细胞炎症效应的作用

本文从三个方面观察了内皮素-1(ET-1)对系膜细胞炎症效应的作用,结果表明:①可刺激系膜细胞收缩;②对系膜细胞合成DNA具有刺激作用,而且此作用具有剂量与时间依赖性;③可刺激系膜细胞分泌肿瘤坏死样因子。ET-1对系膜细胞的上述作用,提示它在肾炎发病中可能具有重要意义。     

血管紧张素Ⅱ诱导肾小球系膜细胞纤维连接蛋白产生？…

目的：观察不同浓度的血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）刺激后系膜细胞ＡｎｇⅡ受体基因表达和分泌纤维连接蛋白（ＦＮ）的情况，方法：从６日龄人胎肾培养系膜细胞，经ＡｎｇⅡ刺激后用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测胎肾系膜细胞ＡＴ１和ＡＴ２受体ｍＲＮＡ的表达情况，分别用ＥＬＩＳＡ和ＲＴ－ＰＣＲ方法检测系膜细胞产生的ＦＮ和基因表达。结果：（１）经１０＾－８，１０＾－７，１０＾－６和１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ的Ａ     

凝血酶通过内皮素介导刺激肾小球系膜细胞增生

研究内皮素－１在凝血酶刺激有肾小球系膜细胞增生中的作用。方法在培养肾小球系膜细胞中进行试验。（１）ＨＭＣ在凝血酶刺激下增生,呈剂量依赖并与刺激时间有关,当凝血酶１６Ｕ／ｍｌ刺激１６小时时ＨＭＣ增生达高峰;     

血小板活化因子刺激肾小球系膜细胞的自分泌作用

提出了纯金属电阻率的两个简化模型：一个统计模型，一个电子－声子耦合模型。由统计模型可得出；纯金属电阻率与声子深度及声子平均动量的平方成正比。由电子－声子耦合模型得出：电子的散射几率不仅正比于声子数，而且正比于电子－声子的耦合强度。由这两个模型皆能得出纯金属电阻率在高湿时与温度Ｔ成正比，低温时与Ｔ＾５成正比的结果。由电阻率－温度曲线的比较表明，两模型相当吻合。     

糖皮质激素受体对肾小球系膜细胞表达细胞间黏附分子-1的影响

近年来免疫病理学研究已经证实细胞间黏附分子１（ＩＣＡＭ１）作为细胞黏附分子中免疫球蛋白超家族成员之一,通过与炎性细胞表面同族型配体之间相互作用形成黏附,在免疫监督、炎症反应、吞噬过程、动脉粥样硬化等过程中起着重要的作用［１,２］。目前证实,肾小球系膜细胞（ＭＣ）表面低表达ＩＣＡＭ１,而细胞因子白细胞介素１β（ＩＬ１β）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、干扰素γ（ＩＦＮγ）等刺激并上调系膜细胞表达ＩＣＡＭ１。本研究目的是进一步探讨糖皮质激素（ＧＣ）,如氟美松（Ｄｅｘ）对ＴＮＦα诱…     

汉滩病毒感染人肾小球系膜细胞的实验研究

目的探讨汉滩病毒Ａ９株（ＨＴＮＶＡ９）对肾实质细胞的致病作用。方法采用免疫标记技术和电镜技术观察ＨＴＮＶＡ９株对人胚肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）的感染情况和病毒唑、磷甲酸钠对病毒感染的抑制作用。结果ＨＴＮＶＡ９株能感染ＭｓＣ并能在其中增殖，形成包涵体；病毒唑和磷甲酸钠能抑制ＨＴＮＶＡ９株对ＭｓＣ的感染，且加药时间愈早，抑制作用愈强。结论汉滩病毒感染是引起肾综合征出血热肾实质直接损伤的重要机制之一；为临床早期抗病毒药物治疗提供了实验依据。