造血干细胞移植模拟放射性损伤各期的护理

战时的全身放射性损伤最突出的特点是骨髓造血功能衰竭，与我们平时的骨髓移植、外周血干细胞移植、脐血移植放疗后临床表现一致，所以，平时的造血干细胞移植护理对于战时的放射性损伤救治护理有指导意义及实用价值。全身放射性损伤分为四期，即初期、假愈期、极期、恢复期，其中极期外周血白细胞降为“零”，必须及时输注造血干细胞，否则患者将全身衰竭死亡。1997～2003年我科进行了273例骨髓移植，238例外周血干细胞移植，3例脐血移植，15例骨髓加外周血干细胞移植，对骨髓抑制期患者进行了系统护理研究，包括：预处理前后的护理；干细胞回输过程护理；骨髓抑制期的感染预防护理；骨髓抑制期出血的预防护理；移植心理护理与饮食护理；移植后其他并发症的观察及护理。下面分别叙述。     

基因修饰的骨髓基质细胞的研究现状

骨髓基质细胞是骨髓造血微环境的主要成分，为造血干细胞维持其自我更新及多向分化提供了适宜的调控微环境。以骨髓基质细胞为靶细胞的基因治疗，为遗传病、血液病、肿瘤等患者的治疗带来了新的希望。本文就近年来基因修饰骨髓基质细胞的可行性及其研究现状作一综述。     

大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化的超微结构变化

背景：目前对骨髓间充质干细胞成骨诱导分化的超微结构观察的报道甚少。目的：采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,成骨诱导并染色鉴定,利用电镜观察诱导前后细胞超微结构变化特点。方法：全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面标记物,成骨染色鉴定向成骨方向诱导分化,扫描电镜及透射电镜观察成骨诱导前后细胞超微结构变化。结果与结论：培养的第3代骨髓间充质干细胞纯度高、活力强,成骨诱导后的碱性磷酸酶活性染色、钙化结节染色均呈阳性扫描电镜及透射电镜观察显示,经向成骨细胞诱导分化后,细胞形态铺展,不规则,其线粒体、粗面内质网、空泡明显增多表明细胞功能活跃。     

不同类型异基因造血干细胞移植后的急性白血病患者骨髓形态学比较

目的观察单体型相合造血干细胞移植及全相合异基因造血干细胞移植后骨髓形态学差异及造血重建情况。方法在235名实施异基因造血干细胞移植患者中,单体型相合120名,采用外周血造血干细胞联合骨髓移植;115名全相合的患者,采用单纯的外周血造血干细胞移植。在造血干细胞移植成功出层流室+30 d行骨髓穿刺抽吸涂片观察骨髓形态学差异,并观察造血重建情况。结果 235名患者均成功重建造血。全相合患者白细胞及血小板重建的时间分别14.7 d(12～26 d)及20.6 d(13～32 d);单体型相合造血干细胞移植患者白细胞及血小板重建的时间分别12 d(10～21 d)及18 d(15～30 d);2者之间的差异具有统计学意义(P0.05)。2组患者造血干细胞移植后骨髓全部完全缓解。在骨髓增生程度、粒红比例和细胞形态等方面有差异,但差异无统计学意义(P0.05)。结论单体型相合造血干细胞移植较全相合移植造血重建早,移植后骨髓形态学有差异,但差异无统计学意义。     

同种异体颗粒骨对骨髓基质细胞影响的实验研究

目的 探讨同种异体颗粒骨对骨髓基质细胞粘附及分化的影响。方法 本实验取同种异体白兔皮质骨造成骨颗粒(直径100μ-500μ)，经低温冷冻(-70℃)一周后，与骨髓基质细胞(第二代)相结合进行体外培养(设为实验组)；另取未复合骨颗粒的骨髓基质细胞行体外培养(设为对照组)。两周后，倒置显微镜观察、光镜、四环素荧光标记、扫描电镜、透射电镜、碱性磷酸酶染色等方法观测骨髓基质细胞的粘附及分化情况。结果 实验：光镜及电镜观察，细胞紧密贴附于骨颗粒表面，细胞体积较大，胞浆丰富，内含丰富的核糖体、粗面内质网、高尔基复合体和线粒体，部分线粒体基质内有致密的颗粒状沉积：四环素荧光染色后，有金黄色荧光结节出现；碱性磷酸酶染色显示，阳性率大于百分之七十。对照组：电镜观察，细胞多呈长梭型，核大，可见核仁，胞浆内有核糖体、线粒体、内质网；四环素染色呈阴性；碱性磷酸酶染色率为百分之四十。结论 同种异体颗粒骨可诱导骨髓基质细胞向成骨细胞转化；同种异体颗粒骨与骨髓基质细胞之间有较强的粘附作用；同种异体颗粒骨可用作骨组织工程细胞外基质替代物。     

大剂量阿糖胞苷对人骨髓基质细胞合成蛋白聚糖的影响

大剂量阿糖胞苷对人骨髓基质细胞合成蛋白聚糖的影响顾小锋，马伴吟，吴外周血干细胞移植成功的关键之一是能采集到足够数量的外周血造血干细胞。应用大剂量阿糖胞苷（ＨＤＡｒａ－Ｃ）等可动员造血干细胞出髓，而使外周血造血干细胞升高达动员前的５０倍或更高。但ＨＤＡ...     

原因不明性髓样化生的发病机制

原因不明性髓样化生(AMM)，又名特发性骨髓纤维化，是一种造血干细胞恶性克隆性疾病。研究发现，造血干细胞、骨髓间充质干细胞(MPC)、骨髓微环境间相互作用，形成复杂的“效应网络”。在此网络的影响下，间质起源的骨髓纤维细胞、内皮细胞生成增多，成骨作用处于优势；局部骨髓间质中，细胞因子生成增多、细胞间及细胞一基质间的粘附分子和受体表达升高。这些骨髓微环境的改变与骨髓MPC密切相关。骨髓MPC参与间质微环境的形成，维持间质微环境的细胞间信息传递功能，影响间质及非间质细胞的生长发育。AMM的发病机理需要重新审视。     

非诱导条件下犬骨髓基质干细胞的生物特性

背景：种子细胞的研究是组织工程众多研究领域中最重要的基础环节，骨髓基质干细胞以其诸多优点。成为理想的骨组织工程的种子细胞。 目的：观察骨髓基质干细胞在体外培养的生长特点和非诱导条件下的成骨特性。 设计：单一样本实验。单位：福建医科大学附属口腔医院种植中心。 材料：实验于2003-05／12在福建医科大学附属口腔医院中心实验室完成。骨髓基质干细胞来自4只1岁龄的杂交犬的原代～第3代传代细胞。 方法：无菌条件下在杂交犬两侧股骨大转子部做骨髓穿刺，抽取5mL肝素抗凝的骨髓，加入到含有50mL含双抗Dulbeeco’s改良的Eagle＇s培养液的离心管中分离单个核细胞，进行首次提纯获取骨髓基质干细胞单细胞，置培养箱中培养传代，培养48h后，吸除培养液，以后每3天换液1次。继续传代。采用倒置相差显微镜及苏木精一伊红染色观察骨髓基质干细胞形态；每天进行细胞计数，测定倍增时间，绘生长曲线；用钙钴法检测碱性磷酸酶；用茜素红法染色观察钙化结节生长情况。 主要观察指标：①犬骨髓基质干细胞光镜结构。②犬骨髓基质干细胞生长曲线。③成骨分化指标碱性磷酸酶及钙化结节的观察。 结果：①形态学观察表明，骨髓基质干细胞贴壁细胞呈集落生长。有成纤维样细胞外观，未加入成骨诱导剂，细胞形态发生变化。②碱性磷酸酶表达原代细胞呈强阳性，第1代细胞呈阳性，第2，3代细胞呈弱阳性。③钙沉积出现，原代细胞染色强于传代细胞。 结论：①骨髓基质干细胞在体外培养能大量扩增，具有自然向成骨细胞分化的能力，是骨组织工程理想的种子细胞。②3代内扩增的骨髓基质干细胞有成骨活性，但原代细胞传代活性优于传代后细胞。     

慢性粒细胞白血病患者骨髓间充质干细胞的生物学特性及其造血调控

背景:由于慢性粒细胞白血病存在造血微环境异常和免疫异常,推测间充质干细胞可能在慢性粒细胞白血病的病理过程中扮演了一个重要角色.目的:观察慢性粒细胞白血病骨髓间充质干细胞的生物学特征和对造血调控的影响,比较其与正常人骨髓来源的间充质干细胞的异常.方法:分离正常人和慢性粒细胞白血病患者的骨髓间充质干细胞,分别检测它们的形态、表型、生长曲线和对T细胞活化的能力;将它们分别与脐带血干细胞共培养,检测共培养体系中对集落形成的影响和相关分子表达的差异.结果与结论:慢性粒细胞白血病患者和正常志愿者骨髓来源的间充质干细胞的细胞形态、表型和干细胞的倍增时间均没有差异,慢性粒细胞白血病患者的骨髓间充质干细胞抑制T细胞活化的能力减弱;共培养体系中,悬浮细胞簇增加,说明造血干细胞与间充质干细胞之间的黏附性减弱,同时蛋白和RNA水平显示慢粒组中基质金属蛋白酶9升高,同时使ICAM-1的KitL从膜形式转变为可溶性形式.结果提示,慢性粒细胞白血病骨髓间充质干细胞是细胞分化发育的微环境,其基础的机制在于基质金属蛋白酶9对细胞外基质的降解和黏附分子的裂解,改变骨髓微环境对造血干细胞黏附,增殖和分化的支持作用,导致造血干细胞异常增殖和动员,降低了恶变细胞对免疫细胞的敏感性导致免疫逃逸.     

大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导分化的超微结构变化

背景:目前对骨髓间充质干细胞成骨诱导分化的超微结构观察的报道甚少.目的:采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,成骨诱导并染色鉴定,利用电镜观察诱导前后细胞超微结构变化特点.方法:全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞表面标记物,成骨染色鉴定向成骨方向诱导分化,扫描电镜及透射电镜观察成骨诱导前后细胞超微结构变化.结果与结论:培养的第3代骨髓间充质干细胞纯度高、活力强,成骨诱导后的碱性磷酸酶活性染色、钙化结节染色均呈阳性.扫描电镜及透射电镜观察显示,经向成骨细胞诱导分化后,细胞形态铺展,不规则,其线粒体、粗面内质网、空泡明显增多,表明细胞功能活跃.